李春曉 董言德 鄧 兵 趙彤言*
(1. 軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院微生物流行病研究所,病原微生物生物安全國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,北京 100071; 2. 北京軍區(qū)疾病預(yù)防控制中心,北京 100042)
登革熱和登革出血熱是全球范圍內(nèi)的重要傳染病之一,主要由埃及伊蚊Aedesaegypti和白紋伊蚊Ae.albopictus傳播,由于目前沒有預(yù)防登革熱有效的疫苗,對這種傳染病的控制還是主要依賴于對其傳播媒介的控制。多年來,研究者們不斷研究對其的防治方法。
埃及伊蚊和白紋伊蚊都是容器型孳生的蚊蟲類型,人們利用其行為特點(diǎn),研制出誘卵杯,引誘其產(chǎn)卵,并作為種群監(jiān)測的方法之一(林立豐等,2005)。隨后,研究人員在誘卵杯中加入殺蟲劑,研制出致死性誘卵杯,殺滅接觸殺蟲劑的待產(chǎn)卵雌蚊,同時抑制蚊蟲產(chǎn)卵和孵化。通過在不同國家和地區(qū)的現(xiàn)場實(shí)驗(yàn),已證實(shí)將多種類型的擬除蟲菊酯類殺蟲劑應(yīng)用于致死性誘卵杯中,對于防治埃及伊蚊都有很好的作用(Zeichneretal.,1999;Perichetal.,2003;Sithiprasasnaetal.,2003;Williamsetal.,2007;Rapleyetal.,2009;Ritchieetal.,2009)。
在全球范圍內(nèi),埃及伊蚊是登革熱和登革出血熱的主要傳播媒介,然而,在中國,尤其是在內(nèi)陸地區(qū),白紋伊蚊才是登革熱的重點(diǎn)防控對象(龔道方等,2009)。致死性誘卵杯應(yīng)用于防治埃及伊蚊取得了很好的結(jié)果,但是對于白紋伊蚊,尤其是中國地區(qū)的白紋伊蚊防治效果目前還沒有相關(guān)研究。本研究研制成緩釋型溴氰菊酯致死性誘卵杯,將其應(yīng)用于白紋伊蚊孳生地,通過觀察白紋伊蚊產(chǎn)卵率、幼蟲孵化率和成蚊密度降低率,證明了致死性誘卵杯對白紋伊蚊的防控效果。
選擇北京西山腳下兩個環(huán)境相似的居民院,院中植被豐富,多為低矮灌木和草地,兩個居民院相距500 m以上。一個居民院作為實(shí)驗(yàn)區(qū),在院中不同地點(diǎn)放置75個致死性誘卵杯,放置位置都是隱蔽的角落,每個地點(diǎn)相隔10 m以上;一個居民院作為對照區(qū),不進(jìn)行任何防治措施。
居民院院內(nèi)及周圍孳生和植被中棲息的白紋伊蚊,觀察對象包括卵、幼蟲、蛹和成蟲各個蟲態(tài)。
溴氰菊酯(>99.0%,Sigma)、吸水性樹脂(200目,巴斯夫)、純凈水、誘卵杯、壓舌棒。
將溴氰菊酯、吸水性樹脂和純凈水按照1.25%、2.00%和96.75%的質(zhì)量百分比混合在一起,待其充分?jǐn)嚢杈鶆蚝?,分別稱取1 g,用紗布包好,放置于黑色陶瓷誘卵杯的底部,誘卵杯杯高12 cm,杯口直徑8 cm。加水至離杯口2 cm處,每個誘卵杯中放入一支壓舌棒作為卵卡。每次觀察時,誘卵杯中水位位于杯中一半以上為判斷為有效數(shù)據(jù),如果誘卵杯中水被打翻,或者誘卵杯破壞等情況,則視為無效數(shù)據(jù)。
分別于使用致死性誘卵杯前7 d、使用后10、17、24、30和45 d時觀察誘卵杯中是否有幼蟲孳生并收集卵卡。將卵卡收集帶回實(shí)驗(yàn)室后,首先在解剖鏡下觀察卵卡上的產(chǎn)卵數(shù);然后將帶回的卵卡放入純凈水中觀察卵是否可孵化,根據(jù)所有孵出的幼蟲數(shù),計算幼蟲孵化率。計算公式為:幼蟲孵化率(%)=(收集卵卡時誘卵杯中幼蟲數(shù)+卵卡在實(shí)驗(yàn)室孵化的幼蟲數(shù))×100%/卵卡上的卵數(shù)量。
分別于使用致死性誘卵杯前7 d、使用后10、30和45 d時,應(yīng)用人誘法對實(shí)驗(yàn)區(qū)和對照區(qū)的白紋伊蚊進(jìn)行成蚊密度監(jiān)測。實(shí)驗(yàn)區(qū)和對照區(qū)分別設(shè)置3個人,監(jiān)測時間為傍晚17:00~17:30。監(jiān)測時,監(jiān)測人裸露右腿小腿,使用電動吸蚊器,捕獲監(jiān)測時間段內(nèi)停落在腳踝和膝蓋之間部位上的白紋伊蚊雌蚊。
將采集的蚊蟲取平均值后,根據(jù)對照區(qū)的數(shù)據(jù)換算實(shí)驗(yàn)區(qū)使用致死性誘卵杯后的蚊蟲的相對密度指數(shù)和密度下降率。相關(guān)計算公式如下:相對密度指數(shù)(RPI)=(對照區(qū)處理前密度×實(shí)驗(yàn)區(qū)處理后密度)/(對照區(qū)處理后密度×實(shí)驗(yàn)區(qū)處理前密度);密度下降率(%)=(1-RPI)×100%。
實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)用SPSS 13.0軟件包處理,用實(shí)驗(yàn)分析數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析,用Duncan進(jìn)行兩兩比較。
由表1可以看出,使用致死性誘卵杯后,白紋伊蚊在誘卵杯中的產(chǎn)卵數(shù)降低了約3/4的數(shù)量,而且在45 d內(nèi)杯中都沒有孳生幼蟲,即便是將卵卡帶回實(shí)驗(yàn)室,放入純凈水中進(jìn)行飼養(yǎng),幼蟲的孵化率仍然低于60%,說明致死性誘卵杯中的殺蟲劑在45 d的過程中不斷緩慢釋放,抑制了白紋伊蚊的產(chǎn)卵和孵化。
由表2可以看出,使用致死性誘卵杯后,雖然實(shí)驗(yàn)區(qū)的白紋伊蚊成蚊密度在絕對值上沒有明顯下降,但是對比對照區(qū)不斷上升的成蚊密度,實(shí)驗(yàn)區(qū)的成蚊密度下降率顯著升高(P<0.05),10 d后下降率達(dá)到了42.6%,30 d后超過了50%,45 d后達(dá)到了66.6%的下降率。
由本研究可以看出,使用致死性誘卵杯對白紋伊蚊進(jìn)行防治可以取得一定的效果,在使用45 d后,仍然可以抑制蚊蟲在其中產(chǎn)卵,而且沒有幼蟲在誘卵杯中孵化,即使將卵卡帶回實(shí)驗(yàn)室,孵化率仍然很低,說明致死性誘卵杯對白紋伊蚊的產(chǎn)卵具有非常好的抑制作用。同時,通過對實(shí)驗(yàn)區(qū)和對照區(qū)的成蚊密度進(jìn)行監(jiān)測,結(jié)果顯示,對比對照區(qū),實(shí)驗(yàn)區(qū)的成蚊密度下降率在誘卵杯的使用過程中逐漸上升,在使用45 d后,實(shí)驗(yàn)區(qū)的成蚊密度下降率已達(dá)到66.6%,說明致死性誘卵杯的使用對于成蚊密度的上升是有一定的抑制作用的,本次實(shí)驗(yàn)是在白紋伊蚊密度上升期間開始,如果致死性誘卵杯在更早時間使用,白紋伊蚊種群密度尚未上升,應(yīng)該有更好的防控效果。
以往的研究發(fā)現(xiàn),使用溴氰菊酯等擬除蟲菊酯類殺蟲劑制成致死性誘卵杯,在對埃及伊蚊的現(xiàn)場防控中有很好的作用,一般使用的都是乳油、懸浮劑、可濕性粉劑、可濕性粒劑等商品化的殺蟲劑劑型(Zeichneretal.,1999;Perichetal.,2003),具有使用方便、快捷的優(yōu)點(diǎn),但是效果難以持久,在使用過程中往往要再次添加。本實(shí)驗(yàn)首次嘗試配置緩釋型溴氰菊酯制劑,利用高吸水性樹脂的吸水性和緩釋效果,制成顆粒劑,置于誘卵杯底部,在一定時間內(nèi)緩慢釋放溴氰菊酯殺蟲劑,在實(shí)驗(yàn)的45 d內(nèi)沒有進(jìn)行殺蟲劑的更換,仍然對白紋伊蚊孳生有很好的防控效果,不僅抑制了白紋伊蚊幼蟲在誘卵杯中的孳生,而且在使用后可有效降低成蚊的密度。說明這種殺蟲劑劑型適用于制成致死性誘卵杯用于白紋伊蚊的防控,這是一次有益的嘗試,為未來白紋伊蚊致死性誘卵杯的研究設(shè)計提供了思路。
表1 致死性誘卵杯使用前后白紋伊蚊產(chǎn)卵數(shù)和幼蟲孵化率Tab.1 Number of egg laying and hatching before and after treatment
注:同行數(shù)據(jù)后標(biāo)有不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05),相同字母表示差異無顯著性(P>0.05)。以下表中字母意義相同。Within each line, values followed by the different letter are significantly different (P<0.05). The same below.
*有效杯數(shù):誘卵杯中水位位于杯中一半以上為判斷為有效數(shù)據(jù),如果誘卵杯中水被打翻,或者誘卵杯破壞等情況,則視為無效數(shù)據(jù)。No. of the positive ovitrap: The ovitrap containing 1/2 cup of water was positive. Whereas, if the ovitrap was spilled out or broken, the data was negative.
**孵化幼蟲總數(shù)=杯中孳生幼蟲數(shù)+帶回實(shí)驗(yàn)室后放入純凈水中孵化的幼蟲數(shù)。No. of the larva hatching: the number of larva laying in ovitrap + the number of larva hatching in the lab.
表2 致死性誘卵杯使用前后實(shí)驗(yàn)區(qū)和實(shí)驗(yàn)區(qū)的白紋伊蚊成蚊密度Tab.2 Adult density of Ae. albopictus in the experimental site and control site before and after treatment
注:成蚊相對密度指數(shù)(RPI)=(對照區(qū)處理前密度×實(shí)驗(yàn)區(qū)處理后密度)/(對照區(qū)處理后密度×實(shí)驗(yàn)區(qū)處理前密度);成蚊密度下降率(%)=(1-RPI)×100%。RP I=(Adult density of the control site before treatment ×Adult density of the experimental site after treatment) / (Adult density of the control site after treatment ×Adult density of the experimental site before treatment); Decreasing rate of adult (%)=(1-RPI) ×100%.
從本次實(shí)驗(yàn)的現(xiàn)場結(jié)果來看,雖然單獨(dú)使用致死性誘卵杯對白紋伊蚊進(jìn)行防治見效比較慢,不及孳生地處理和超低容量噴灑的防治效果快速,但是致死性誘卵杯是主要針對白紋伊蚊待產(chǎn)卵雌蚊進(jìn)行治理,通過人為的增加白紋伊蚊產(chǎn)卵的容器,減少白紋伊蚊在其他容器中產(chǎn)卵的可能性,是一種長期防控的可行措施。從獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果來看,致死性誘卵杯對白紋伊蚊的產(chǎn)卵抑制的效果是比較明顯的。因此,在完成孳生地處理和超低容量噴灑殺蟲劑處理成蚊等防治措施之后,使用該方法來進(jìn)一步鞏固防治效果,仍然可以作為白紋伊蚊綜合防治中的重要措施。