徐冰鈺

摘要：目的建立貫黃感冒顆粒中5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮甙含量測定方法。方法采用高效液相色譜法，色譜柱為Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流動相為水-乙腈（65∶35），檢測波長為330nm，流速1 mL·min-1。結(jié)果5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷進樣量在81.6ng～1020ng范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999954），平均回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。結(jié)論本法準確可靠，對提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞：貫黃感冒顆粒；含量測定；方法

中圖分類號：R284.2文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）03-0054-02

貫黃感冒顆粒是由貫眾、黃皮葉、路邊青、三叉苦、生姜、馬來酸氯苯那敏加工制成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱解表，宣肺止咳的功效。臨床上常用于治療風(fēng)熱感冒所致的發(fā)熱惡風(fēng)，頭痛鼻塞，咳嗽痰多。貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準過去為海南省地方標準[1]，曾有關(guān)于對其處方中中藥材路邊青進行薄層色譜鑒別和對其處方中馬來酸氯苯那敏進行含量測定的報道[2]。現(xiàn)行的標準中也將這兩者列入了貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準中，但未見對其處方中其他中藥材成分進行含量測定的研究報道。5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷為本公司從其處方中藥材路邊青中提取分離純化所得的單一成分，采用HPLC法對貫黃感冒顆粒中的該成分進行含量測定研究，為提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準提供了參考依據(jù)。

1儀器、試驗材料、對照品、樣品

儀器：美國Waters高效液相色譜儀（600泵；2487雙波長紫外檢測器；7725i手動進樣器）；TU-1901普析雙光束紫外可見分光光度計；賽多利斯BP221S萬分之一電子天平；賽多利斯MC210S十萬分之一電子天平。

試驗材料：乙腈、甲醇為色譜純（美國Fisher公司）；其余均為分析純試劑；水為超純水。

對照品：5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷（歸一化法測得含量為98.64%，批號：20070101），由昆明圣火藥業(yè)（集團）有限公司技術(shù)開發(fā)中心提供。

樣品：貫黃感冒顆粒，由昆明圣火藥業(yè)（集團）有限公司提供。

2色譜條件

色譜柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動相：水-乙腈（65∶35）；檢測波長：330 nm；流速：1 mL/min；進樣量：10 μL；柱溫：25℃。

3溶液的配制

3.1對照品配制精密稱取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷適量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供試品溶液制備取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，研細，取約10 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

4方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系考察取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷對照品溶液，分別進樣2、5、10、15、20、25 μL。記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標（Y），以進樣量（ng）為橫坐標（X），進行線性回歸，得回歸方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷在81.6 ng～1020 ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

4.2精密度試驗制備1份供試品溶液，精密吸取10 μL，連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖，峰面積平均值為2211543，RSD為0.78%。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量精密度好。

4.3重現(xiàn)性試驗制備6份供試品（批號：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分別進樣測定，記錄色譜圖，計算含量，平均值為4.30 mg/袋，RSD為0.86%，表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量重現(xiàn)性好。

4.4穩(wěn)定性試驗制備一份供試品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同時間按樣品測定的方法進行測定，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)峰面積無明顯變化，表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定性良好。

4.5回收率試驗采用加樣回收法，取貫黃感冒顆粒樣品適量，精密加入高濃度（2.5 mg/mL）、中濃度（2.2 mg/mL）、低濃度（1.7 mg/mL）3個濃度的對照品溶液，按供試品溶液的方法制備高、中、低三個濃度供試品溶液，每個濃度分別制備3份，分別測定，結(jié)果回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。

4.6專屬性試驗取處方中除路邊青外的其他藥材按處方工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液；取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷、貫黃感冒顆粒適量，用甲醇制備對照品溶液和供試品溶液；取上述3種溶液各10μl注入液相色譜儀，發(fā)現(xiàn)陰性溶液無干擾。見圖1

4.7含量測定取對照品溶液、供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以外標法計算含量即得，結(jié)果見表1：

參考文獻：

[1]海南省標準[S].瓊Q/WS-166-94.

[2]張艷秋.貫黃感冒顆粒（無糖型）質(zhì)量標準研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2004，21（6）：502.endprint

摘要：目的建立貫黃感冒顆粒中5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮甙含量測定方法。方法采用高效液相色譜法，色譜柱為Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流動相為水-乙腈（65∶35），檢測波長為330nm，流速1 mL·min-1。結(jié)果5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷進樣量在81.6ng～1020ng范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999954），平均回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。結(jié)論本法準確可靠，對提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞：貫黃感冒顆粒；含量測定；方法

中圖分類號：R284.2文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）03-0054-02

貫黃感冒顆粒是由貫眾、黃皮葉、路邊青、三叉苦、生姜、馬來酸氯苯那敏加工制成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱解表，宣肺止咳的功效。臨床上常用于治療風(fēng)熱感冒所致的發(fā)熱惡風(fēng)，頭痛鼻塞，咳嗽痰多。貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準過去為海南省地方標準[1]，曾有關(guān)于對其處方中中藥材路邊青進行薄層色譜鑒別和對其處方中馬來酸氯苯那敏進行含量測定的報道[2]。現(xiàn)行的標準中也將這兩者列入了貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準中，但未見對其處方中其他中藥材成分進行含量測定的研究報道。5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷為本公司從其處方中藥材路邊青中提取分離純化所得的單一成分，采用HPLC法對貫黃感冒顆粒中的該成分進行含量測定研究，為提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準提供了參考依據(jù)。

1儀器、試驗材料、對照品、樣品

儀器：美國Waters高效液相色譜儀（600泵；2487雙波長紫外檢測器；7725i手動進樣器）；TU-1901普析雙光束紫外可見分光光度計；賽多利斯BP221S萬分之一電子天平；賽多利斯MC210S十萬分之一電子天平。

試驗材料：乙腈、甲醇為色譜純（美國Fisher公司）；其余均為分析純試劑；水為超純水。

對照品：5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷（歸一化法測得含量為98.64%，批號：20070101），由昆明圣火藥業(yè)（集團）有限公司技術(shù)開發(fā)中心提供。

樣品：貫黃感冒顆粒，由昆明圣火藥業(yè)（集團）有限公司提供。

2色譜條件

色譜柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動相：水-乙腈（65∶35）；檢測波長：330 nm；流速：1 mL/min；進樣量：10 μL；柱溫：25℃。

3溶液的配制

3.1對照品配制精密稱取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷適量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供試品溶液制備取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，研細，取約10 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

4方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系考察取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷對照品溶液，分別進樣2、5、10、15、20、25 μL。記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標（Y），以進樣量（ng）為橫坐標（X），進行線性回歸，得回歸方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷在81.6 ng～1020 ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

4.2精密度試驗制備1份供試品溶液，精密吸取10 μL，連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖，峰面積平均值為2211543，RSD為0.78%。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量精密度好。

4.3重現(xiàn)性試驗制備6份供試品（批號：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分別進樣測定，記錄色譜圖，計算含量，平均值為4.30 mg/袋，RSD為0.86%，表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量重現(xiàn)性好。

4.4穩(wěn)定性試驗制備一份供試品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同時間按樣品測定的方法進行測定，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)峰面積無明顯變化，表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定性良好。

4.5回收率試驗采用加樣回收法，取貫黃感冒顆粒樣品適量，精密加入高濃度（2.5 mg/mL）、中濃度（2.2 mg/mL）、低濃度（1.7 mg/mL）3個濃度的對照品溶液，按供試品溶液的方法制備高、中、低三個濃度供試品溶液，每個濃度分別制備3份，分別測定，結(jié)果回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。

4.6專屬性試驗取處方中除路邊青外的其他藥材按處方工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液；取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷、貫黃感冒顆粒適量，用甲醇制備對照品溶液和供試品溶液；取上述3種溶液各10μl注入液相色譜儀，發(fā)現(xiàn)陰性溶液無干擾。見圖1

4.7含量測定取對照品溶液、供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以外標法計算含量即得，結(jié)果見表1：

參考文獻：

[1]海南省標準[S].瓊Q/WS-166-94.

[2]張艷秋.貫黃感冒顆粒（無糖型）質(zhì)量標準研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2004，21（6）：502.endprint

摘要：目的建立貫黃感冒顆粒中5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮甙含量測定方法。方法采用高效液相色譜法，色譜柱為Agilent Zorbax SB C18（4.6×250mm，5μm），流動相為水-乙腈（65∶35），檢測波長為330nm，流速1 mL·min-1。結(jié)果5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷進樣量在81.6ng～1020ng范圍內(nèi)與峰面積呈良好的線性關(guān)系（r=0.999954），平均回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。結(jié)論本法準確可靠，對提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準提供了依據(jù)。

關(guān)鍵詞：貫黃感冒顆粒；含量測定；方法

中圖分類號：R284.2文獻標志碼：A文章編號：1007-2349（2014）03-0054-02

貫黃感冒顆粒是由貫眾、黃皮葉、路邊青、三叉苦、生姜、馬來酸氯苯那敏加工制成的中藥復(fù)方制劑，具有清熱解表，宣肺止咳的功效。臨床上常用于治療風(fēng)熱感冒所致的發(fā)熱惡風(fēng)，頭痛鼻塞，咳嗽痰多。貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準過去為海南省地方標準[1]，曾有關(guān)于對其處方中中藥材路邊青進行薄層色譜鑒別和對其處方中馬來酸氯苯那敏進行含量測定的報道[2]。現(xiàn)行的標準中也將這兩者列入了貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準中，但未見對其處方中其他中藥材成分進行含量測定的研究報道。5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷為本公司從其處方中藥材路邊青中提取分離純化所得的單一成分，采用HPLC法對貫黃感冒顆粒中的該成分進行含量測定研究，為提高貫黃感冒顆粒質(zhì)量標準提供了參考依據(jù)。

1儀器、試驗材料、對照品、樣品

儀器：美國Waters高效液相色譜儀（600泵；2487雙波長紫外檢測器；7725i手動進樣器）；TU-1901普析雙光束紫外可見分光光度計；賽多利斯BP221S萬分之一電子天平；賽多利斯MC210S十萬分之一電子天平。

試驗材料：乙腈、甲醇為色譜純（美國Fisher公司）；其余均為分析純試劑；水為超純水。

對照品：5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷（歸一化法測得含量為98.64%，批號：20070101），由昆明圣火藥業(yè)（集團）有限公司技術(shù)開發(fā)中心提供。

樣品：貫黃感冒顆粒，由昆明圣火藥業(yè)（集團）有限公司提供。

2色譜條件

色譜柱：Agilent Zorbax SB C18（4.6×250 mm，5 μm）；流動相：水-乙腈（65∶35）；檢測波長：330 nm；流速：1 mL/min；進樣量：10 μL；柱溫：25℃。

3溶液的配制

3.1對照品配制精密稱取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷適量，加甲醇使溶解，制成每1 mL含40 μg的溶液，即得。

3.2供試品溶液制備取裝量差異項下的本品內(nèi)容物，研細，取約10 g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，密塞，稱定重量，超聲處理30 min，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

4方法與結(jié)果

4.1線性關(guān)系考察取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷對照品溶液，分別進樣2、5、10、15、20、25 μL。記錄色譜圖，以峰面積為縱坐標（Y），以進樣量（ng）為橫坐標（X），進行線性回歸，得回歸方程：Y=2.78×106X+8.21×103，r=0.999954。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷在81.6 ng～1020 ng范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

4.2精密度試驗制備1份供試品溶液，精密吸取10 μL，連續(xù)進樣6次，記錄色譜圖，峰面積平均值為2211543，RSD為0.78%。表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量精密度好。

4.3重現(xiàn)性試驗制備6份供試品（批號：20070301）溶液，精密吸取10 μL，分別進樣測定，記錄色譜圖，計算含量，平均值為4.30 mg/袋，RSD為0.86%，表明5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷含量重現(xiàn)性好。

4.4穩(wěn)定性試驗制備一份供試品溶液，于0、0.5、1、2、4、6、24 h不同時間按樣品測定的方法進行測定，結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)峰面積無明顯變化，表明供試品溶液在24 h穩(wěn)定性良好。

4.5回收率試驗采用加樣回收法，取貫黃感冒顆粒樣品適量，精密加入高濃度（2.5 mg/mL）、中濃度（2.2 mg/mL）、低濃度（1.7 mg/mL）3個濃度的對照品溶液，按供試品溶液的方法制備高、中、低三個濃度供試品溶液，每個濃度分別制備3份，分別測定，結(jié)果回收率為99.16%，RSD為1.39%（n=9）。

4.6專屬性試驗取處方中除路邊青外的其他藥材按處方工藝和供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液；取5-羥基-3，7，3-三甲氧基-4-β-D吡喃葡萄糖基黃酮苷、貫黃感冒顆粒適量，用甲醇制備對照品溶液和供試品溶液；取上述3種溶液各10μl注入液相色譜儀，發(fā)現(xiàn)陰性溶液無干擾。見圖1

4.7含量測定取對照品溶液、供試品溶液各10 μL，分別注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以外標法計算含量即得，結(jié)果見表1：

參考文獻：

[1]海南省標準[S].瓊Q/WS-166-94.

[2]張艷秋.貫黃感冒顆粒（無糖型）質(zhì)量標準研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志，2004，21（6）：502.endprint