黃成鋼，閻新佳，鄒曉祺，劉 影，李 鈞，辛國(guó)松，李 博，季宇彬

(1.哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥物所博士后科研工作站，哈爾濱 150076；2.哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥學(xué)院，哈爾濱 150076；3. 哈爾濱商業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與環(huán)境科學(xué)研究中心，哈爾濱 150076)

青龍衣為胡桃科植物核桃(Juglansi regia L.)和胡桃楸(J.mandshurica Maxim).的未成熟果皮，味辛、苦，性澀、平，在中國(guó)作為中草藥應(yīng)用已有千年的歷史，中醫(yī)多以其清熱解毒、祛風(fēng)療癬、止痛止痢功效入藥.現(xiàn)代藥理研究表明青龍衣具有較強(qiáng)的鎮(zhèn)痛和抗腫瘤作用，其乙醇粗提物具有較好的細(xì)胞毒活性[1-3].研究表明核桃屬植物普遍含有二苯庚烷、萘醌、黃酮及苯丙素類化合物[4-7]，為明確青龍衣的抗癌活性物質(zhì)基礎(chǔ)，對(duì)青龍衣乙醇提取物進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，從中分離得到11個(gè)單體化合物，通過1H-NMR、EI-MS等技術(shù)以及與文獻(xiàn)化合物數(shù)據(jù)對(duì)照等方法確定這些化合物分別為正二十九烷醇(nonacosanol)，[1-(4'-甲氧基苯基)-7-(3''-甲氧基,2''-羥基苯基)-3',4''-環(huán)氧-3-庚酮[3',4''-epoxy-1-(4'-methoxylphenyl)-7-(3''-methoxyl-2''-hydroxyphenyl)-heptane-3-one]，正三十一烷醇(hentriacontanal)，1-(4'-羥基苯基)-7-(3''-甲氧基-4''-羥基苯基)-庚烷-3-醇1-(4'-hydorxyphenyl)-7-(3''-methoxy-4''-hydorxyphenyl)hepta-3-ol)，4,8-二羥基-3,4-二氫-1-萘酮(4,8-dihydroxy-3,4-dihydro-naphthalenone)，胡桃醌(5-hydroxy-1,4-naphthoquinone)，β-谷甾醇(beta-sitosterol)，齊墩果酸(oleanolic acid)，香草酸(vanillic acid)，槲皮素(quercetin)，香草醛(vanillin).11個(gè)化合物均為已知化合物.本文采用MTT法對(duì)從中藥青龍衣中分離得到的11個(gè)化合物進(jìn)行了抗腫瘤活性篩選，為今后抗腫瘤作用機(jī)制以及作用靶點(diǎn)的進(jìn)一步研究提供理論依據(jù).

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

EYELA SB-2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海愛朗儀器有限公司)；Bruker-500MHz型核磁共振儀(德國(guó)Bruker公司)；G1956A型質(zhì)譜儀(美國(guó)Agilent公司)；CO-150型二氧化碳培養(yǎng)箱(美國(guó)NBS公司)；CKX-41-32型倒置顯微鏡(日本OLYMPUS公司)；Model 680 酶標(biāo)儀(美國(guó)BIO RAD公司)；AR2140分析天平(美國(guó)OHAUS公司)；DL-CJ-IND型醫(yī)用潔凈工作臺(tái)(北京東聯(lián)哈爾儀器制造有限公司)；反相硅膠C18(北京綠百草科技發(fā)展有限公司)；柱色譜硅膠、薄層色譜硅膠(GF254)(青島海洋化工廠)；注射用羥基喜樹堿(HCPT，哈爾濱圣泰藥業(yè)，20070430)；MTT(Sigma公司)；RPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)基、胰蛋白酶(Invitrogen 公司)；胎牛血清(FCS，杭州四季青生物工程材料有限公司)；二甲基亞砜(DMSO，天津市博迪化工有限公司).所用試劑均為分析純.

青龍衣藥材采于黑龍江伊春，經(jīng)哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥學(xué)院張德連教授鑒定為胡桃科胡桃樹屬植物胡桃楸(Juglands mandshurica Maxim.)未成熟果實(shí)的干燥肉質(zhì)果皮.人胃癌細(xì)胞株(SGC7901)，人肝癌細(xì)胞株(HepG-2)，人肺腺癌細(xì)胞株(A549)，人腸癌細(xì)胞株(LoVo)，乳腺癌細(xì)胞株(MCF7)，由哈爾濱商業(yè)大學(xué)生命科學(xué)與環(huán)境科學(xué)研究中心提供.

1.2 提取與分離

取青龍衣藥材8.0 kg粉碎至20～30目，加10倍量95%乙醇浸泡12 h再超聲提取30 min(40kHz)，過濾，藥渣繼續(xù)加10倍量95%乙醇熱回流1 h.過濾，藥渣棄掉，合并藥液減壓濃縮(溫度不超過40 ℃)藥膏揮至無醇味.得浸膏880.1 g.加水適量使其混懸，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別濃縮回收萃取液.得石油醚萃取層95.0 g、氯仿萃取層120.1 g、乙酸乙酯萃取層15.5 g、正丁醇萃取層80.0 g和水層.對(duì)石油醚萃取物(95.0 g)經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，以石油醚-丙酮梯度洗脫，TLC跟蹤檢查合并相同流分.合并石油醚-丙酮(50∶1)流分，再上硅膠柱層析，石油醚-丙酮(100∶1)洗脫，經(jīng)丙酮重結(jié)晶得到化合物1(25.0 mg).對(duì)氯仿萃取物(20.0 g)經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，TLC跟蹤檢查合并相同組分，氯仿流分用硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯(10∶1)洗脫得到化合物2(2.0 mg)，氯仿-甲醇(200∶1)流分用硅膠柱層析，經(jīng)氯仿-甲醇(300∶1)洗脫，洗脫流份再經(jīng)硅膠柱色譜石油醚-丙酮(100∶1)洗脫得化合物3(5.0 mg).氯仿-甲醇(100∶1)流份繼續(xù)硅膠柱層析，所得主要流分經(jīng)反相C18處理40%～50%甲醇梯度洗脫得到化合物4(10.0 mg).氯仿-甲醇(50∶1)流份繼續(xù)硅膠柱層析，石油醚-乙酸乙酯(10∶1)洗脫，再經(jīng)硅膠柱色譜甲醇梯度洗脫得到化合物5(5.0 mg).對(duì)乙酸乙酯萃取物(15.0 g)反復(fù)硅膠柱層析，以氯仿-甲醇梯度洗脫，氯仿-甲醇(200∶1)流份經(jīng)硅膠柱層析，石油醚-丙酮(200∶1)洗脫得到較純的Ⅰ和Ⅱ，Ⅰ經(jīng)石油醚反復(fù)重結(jié)晶得到化合物6(20.0 mg)，Ⅱ經(jīng)丙酮反復(fù)重結(jié)晶得到化合物7(40.0 mg).氯仿-甲醇(150∶1)主要流份繼續(xù)硅膠柱層析，氯仿-甲醇(200∶1)洗脫首先得到黃色物質(zhì)，繼續(xù)上硅膠柱氯仿洗脫，所得的流份經(jīng)甲醇反復(fù)重結(jié)晶得到化合物8(10.0 mg).氯仿-甲醇(100∶1)洗脫得到化合物11(10.0 mg).氯仿-甲醇(50∶1)得到的流份經(jīng)硅膠柱層析，氯仿-甲醇(150∶1)洗脫，所得主要流份在再次經(jīng)硅膠柱層析氯仿-甲醇(100∶1-50∶1)梯度洗脫，氯仿-甲醇(100∶1)主要流份經(jīng)ODS柱色譜處理50%～70%甲醇梯度洗脫得到化合物9(10.0 mg)和化合物10(5.0 mg).

1.3 細(xì)胞培養(yǎng)

細(xì)胞生長(zhǎng)至高密度(90%融合)時(shí)，吸去原培養(yǎng)液，用PBS洗滌細(xì)胞2次，加1 mL胰酶(0.25%)后，在倒置顯微鏡下觀察，當(dāng)細(xì)胞中呈現(xiàn)圓粒狀達(dá)到50%以上時(shí)，吸出胰酶，加入2 mL含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液，用滴管將生長(zhǎng)于培養(yǎng)瓶壁的細(xì)胞吹下，并混合均勻，按1∶4至1∶6的比例轉(zhuǎn)移至新培養(yǎng)瓶后，加適量含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液，置于5%、37 ℃、二氧化碳培養(yǎng)箱中培養(yǎng).

1.4 MTT法篩選化合物的抗腫瘤活性

將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的5株細(xì)胞分別用0.25%胰酶消化后，用含10%胎牛血清的RPMI 1640培養(yǎng)液稀釋成濃度為5×104個(gè)/mL的細(xì)胞懸液，以每孔100 μL 接種于96孔培養(yǎng)板中，在37 ℃、CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng).培養(yǎng)24 h后，給藥組加入不同濃度的藥品，每孔加100 μL的藥液，每孔總液體量為200 μL，每個(gè)藥物濃度設(shè)5個(gè)濃度、4個(gè)平行孔，空白對(duì)照組每孔加100 μL的RPMI 1640培養(yǎng)液，置于37 ℃、5 % CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng).72 h后，棄上清，在培養(yǎng)板中加入MTT(100 μL/孔)，置于37 ℃繼續(xù)培養(yǎng)4 h后，小心棄去上清液，每孔加入200 μL的DMSO，在微型振蕩器上振蕩5 min后，用酶標(biāo)儀測(cè)定OD570nm值，并計(jì)算IC50.

生長(zhǎng)抑制率% =

× 100 %

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

化合物(1)為白色無定型粉末，溶于CHCl3、石油醚中，難溶于水，10%硫酸乙醇溶液顯色呈紫紅色.ESI-MS (m/z)：425.6 [M+H]+，447.3 [M+Na]+，表明分子質(zhì)量應(yīng)為424，結(jié)合1H-NMR (CDCl3-d, 500 MHz)，推測(cè)該化合物呈現(xiàn)典型的長(zhǎng)鏈脂肪烷醇特征，給出了末端甲基、羥甲基、以及鏈中(CH2)n質(zhì)子，δH 0.96 (3H, t, J = 6.8 Hz)為末端甲基質(zhì)子信號(hào).δH 1.29 (52H, brs)提示該化合物存在 (CH2)26的片段.δH 3.53 (2H, t, J = 6.8 Hz), 1.48(2H,m)分別為羥甲基和相鄰的亞甲基質(zhì)子信號(hào)，將化合物1的1H-NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8-9]中的正二十九烷醇對(duì)照，波譜數(shù)據(jù)基本一致，故鑒定化合物1為正二十九烷醇(nonacosanol).

化合物(2)為白色針狀結(jié)晶(甲醇)，易溶于有機(jī)溶劑，難溶于水.三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，提示結(jié)構(gòu)中有酚羥基存在.ESI-MS給出356 [M]+，表明分子質(zhì)量應(yīng)為356.在1H-NMR(DMSO-d6,500 MHz)中，存在一組ABX偶合芳香質(zhì)子信號(hào)：δH 6.68 (1H, d, J = 8.0 Hz), 6.92 (1H, dd, J = 8.0, 2.0 Hz) 和4.14 (1H, d, J = 2.0 Hz)；一組AB偶合系統(tǒng)的芳香質(zhì)子信號(hào)：δH 6.42 (1H, d, J = 8.0 Hz)，6.68 (1H ,d , J = 8.0 Hz) 提示該化合物中純?cè)趦蓚€(gè)苯環(huán).高場(chǎng)區(qū)根據(jù)偶合常數(shù)也可以觀察到共有6組氫信號(hào)，每組均為兩個(gè)偕偶?xì)?；除以上信?hào)外，3.66 (3H, s)，3.82 (3H, s) 有兩個(gè)甲氧基信號(hào).5.44 (1H, brs)處為一個(gè)寬單峰，提示為羥基信號(hào)峰.以上數(shù)據(jù)與已知文獻(xiàn)[10]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物2為[1-(4'-甲氧基苯基)-7-(3''-甲氧基,2''-羥基苯基)-3',4''-環(huán)氧-3-庚酮[3',4''-epoxy-1-(4'-methoxylphenyl)-7-(3''-methoxyl-2''-hydroxyphenyl)-heptane-3-one].

化合物(3)為白色固體粉末，溶于石油醚，氯仿，難溶幾乎不溶于水；ESI-MS (m/z)：453.6 [M+H]+，475.3 [M+Na]+，表明分子質(zhì)量為452，1H-NMR (CDCl3-d, 500 MHz) 譜呈現(xiàn)出典型的脂肪烷醇特征，給出了末端甲基、羥甲基、以及鏈中(CH2)n質(zhì)子，δH 0.86 (3H, t, J = 6.4Hz) 為末端甲基質(zhì)子.從δH1.27 (56H, brs) 處為一多個(gè)亞甲基集合在一起給出的寬峰，應(yīng)為鏈中(CH2)28片段.δH1.57 (2H, m)為羥甲基相連亞甲基.δH3.66 (2H, t, J = 6.8 Hz) 為羥甲基上的2個(gè)質(zhì)子，與文獻(xiàn)[11-12]對(duì)照基本一致，因此鑒定化合物3為正三十一烷醇(hentriacontanal).

化合物(4)為黃色油狀物，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，示存在酚羥基.ESI-MS (m/z)：331.0 [M+H]+，353.2 [M+Na]+，所以推測(cè)分子質(zhì)量為330.1H-NMR (CDCl3-d, 500 MHz) 譜中，δH 6.71 (1H, d, J = l.7 Hz), 6.54 (1H, d, J = 7.1 Hz), 6.54 (1H, dd, J = 7.1, 1.7 Hz) 提示存在一個(gè)ABX耦合系統(tǒng)的苯環(huán)，δH 6.94(2H, d, J = 8.3 Hz) 和6.64 (2H, d, J = 8.3 Hz) 提示存在一個(gè)AA'BB'耦合系統(tǒng)的苯環(huán).高場(chǎng)區(qū)除了給出了一個(gè)甲氧基取代基δH 3.72 (3H,s) 之外，還給出了若干脂肪鏈上質(zhì)子.與文獻(xiàn)[13-14]對(duì)照基本一致，因此鑒定化合物4為1-(4'-羥基苯基)-7-(3''-甲氧基-4''-羥基苯基)-庚烷-3-醇[1-(4'-hydorxyphenyl)-7-(3''-methoxy-4''- hydorxyphenyl)-hepta -3-ol].

化合物(5)為黃色油狀物，難溶于水，易溶于有機(jī)溶劑.鹽酸鎂粉反應(yīng)顯色呈橙紅色，推斷可能為酮類化合物.根據(jù)GC-MS所得數(shù)據(jù)，推測(cè)分子質(zhì)量為160.在1H-NMR(DMSO-d6,500 MHz)中，δH 7.07 (1H, dd, J = 8.0, 2.0 Hz),δH7.25 (1H, dd, J = 8.0 Hz),δH7.32 (1H, dd, J = 2.0 Hz)提示存在一個(gè)1,3,4取代的苯環(huán)；在δH 9.89有一個(gè)活潑氫信號(hào)，判斷為苯環(huán)上的酚羥基；δH 2.12～2.15(2H, m)，判斷其為3位上的兩個(gè)質(zhì)子；在δH 5.10(1H, dd, J = 8.7, 4.0 Hz)，為B環(huán)上的4位上的質(zhì)子；在δH 5.29有一個(gè)活潑氫，為B環(huán)上連接的酚羥基；在δH 2.43與δH 2.91各有一個(gè)氫信號(hào)，確定其為B環(huán)上的2位上的氫信號(hào).查閱相關(guān)文獻(xiàn)[15]，綜合以上信息推斷化合物5為4,6-二羥基-3,4-二氫-1-萘酮(4,6-dihydroxy-3,4-dihydro-naphthalenone).

化合物(6)為橙黃色針狀晶體，mp158～159 ℃，不溶于冷水，微溶于熱水，溶于乙醇、乙醚，與氯仿、苯混溶.無色亞甲藍(lán)溶液薄層顯色呈藍(lán)色，示可能為醌類化合物.產(chǎn)生的1H-NMR數(shù)據(jù)δH 11.9的單峰為羥基中質(zhì)子的吸收，δH 7.65～7.68附近的組峰為萘醌環(huán)C7-H、C8-H兩個(gè)質(zhì)子的吸收，δH 7.28～7.32附近的組峰是萘醌環(huán)上C6-H質(zhì)子的吸收，δH 6.96-6.99附近的組峰是萘醌環(huán)上C2-H、C3-H兩個(gè)質(zhì)子的吸收，與文獻(xiàn)值中胡桃醌一致[16]，薄層色譜與胡桃醌標(biāo)準(zhǔn)品的Rf值一致，HPLC檢視與胡桃醌對(duì)照品的保留時(shí)間一致.綜合以上信息推斷化合物6為5-羥基-1,4-萘醌(5-hydroxy-1,4-naphthoquinone)即胡桃醌.

化合物(7)為白色針狀晶體，易溶于有機(jī)溶劑.薄層色譜用硫酸乙醇顯色劑顯色為紫紅色.Liberman-Burchard反應(yīng)呈陽性，表明此化合物是甾體或三萜.mp139-141 ℃.ESI-MS(m/z)；415.4[M+H]+，437. 7[M+Na]+，推測(cè)分子質(zhì)量為414，1H-NMR(CDCl3-d,500 MHz)，在δH 0.6-1.2之間有6個(gè)甲基氫信號(hào)，符合β-谷甾醇中甲基峰數(shù).δH 0.67(3H, s)，1.02 (3H, s)，分別對(duì)應(yīng)18、19位的角甲基質(zhì)子.δH 0.83 (3H, d, J = 6.8 Hz)，0.84(3H, t, J = 7.3 Hz)，0.87 (3H, d，J=6.8 Hz)，0.92 (3H, d, J = 6.3 Hz)，分別對(duì)應(yīng)27、29、26、21位的甲基質(zhì)子信號(hào)，δH 3.53 (1H, m) 處可見一連氧碳?xì)湫盘?hào)，應(yīng)為3-H信號(hào).δH 5.35 (IH, d, J = 5.2 Hz)為一雙鍵上質(zhì)子信號(hào)，證明結(jié)構(gòu)中有1個(gè)雙鍵，同時(shí)說明雙鍵另一端碳應(yīng)為季碳，化合物的理化性質(zhì)和光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[8,17-19]報(bào)道基本一致.因此鑒定化合物7為β-谷甾醇(beta-sitosterol).

化合物(8)為白色針晶(乙醇中重結(jié)晶)；Liebermann-Burchard反應(yīng)顯紫紅色，表明為三萜或甾體類，可溶于有機(jī)溶劑，難溶于水.ESI-MS(m/z)；456.8 [M+]，481.1[M+Na+H]+，表明分子質(zhì)量為456.1H-NMR譜中 (CDCl3-d,500 MHz) 譜中δH 1.14 (3H,s)，0.97 (3H,s)，0.93 (3H,s)，0.91 (3H,s)，0.87 (3H,s)，0.79 (3H,s)，0.75 (3H,s)這7個(gè)單峰對(duì)應(yīng)骨架上的7個(gè)角甲基.δH 4.30 (1H, d, J = 4.6 Hz, OH-3)， 5.29 (1H, t, J = 3.0 Hz, 12-H), 3.21 (1H, dd, J = 11.0, 4.4 Hz, 3-H), 2.83 (1H, dd, J = 9.6, 2.5 Hz, 18-H) 分別對(duì)應(yīng)C12-H、C3-H和C18-H.光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[20-21]報(bào)道一致，確定化合物8為齊墩果酸(oleanolic acid).

化合物(9)為白色晶體，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，表明有酚羥基的存在，溴酚藍(lán)反應(yīng)陽性，表明有羧基的存在ESI-MS(m/z)：169.0[M+H]+，191.1[M+Na]+，215.8[M+2Na+H]，表明分子質(zhì)量為168.在1H-NMR譜中(CDCl3-d,500 MHz)在芳香區(qū)可見一組耦合系統(tǒng)，三個(gè)質(zhì)子δH 6.87 (1H, d, J = 8.6 Hz)，7.09 (1H, d, J = 8.6 Hz)，7.95 (1H, s, H-2)說明存在ABX耦合的三取代苯環(huán)系統(tǒng)，δH 12.11 (1H,s)為羧基質(zhì)子，δH 3.98 (1H,s) 處為一個(gè)甲氧基質(zhì)子，δH 9.89 (1H,s) 為酚羥基質(zhì)子，Emerson反應(yīng)陰性提示羥基的對(duì)位有取代基，其波譜數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)中香草酸的數(shù)據(jù)[22]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物9為3-甲氧基-4-羥基苯甲酸，即香草酸(vanillic acid).

化合物(10)為黃色針狀結(jié)晶(氯仿-甲醇)，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)呈陽性，HCl-Mg反應(yīng)呈陽性，顯示該化合物為多羥基取代黃酮類化合物.ESI-MS(m/z)：303.1[M+H]+，325.1[M+Na]+，348.4[M+2Na]，表明分子質(zhì)量為302.1H-NMR (DMSO-d6, 500 MHz) 譜中：δH 6.25 (1H, d, J = 1.6 Hz), 6.40 (1H, d, J = 1.6 Hz)為典型的5，7-二氧取代黃酮A環(huán)6、8位的質(zhì)子信號(hào)；δH 7.67 (1H,s), 7.54(1H, d, J = 8.5 Hz), 6.88 (1H, d, J = 8.5 Hz)為黃酮B環(huán)2'位、6'位、5'位的質(zhì)子信號(hào)，表示B環(huán)為3',4'-二氧取代，低場(chǎng)區(qū)δH 12.47、9.35、9.35為3個(gè)活潑質(zhì)子信號(hào)，結(jié)合化學(xué)位移分別歸屬為5位、3'位和4'位羥基.δH 10.7 (1H,s) 為A環(huán)7位羥基質(zhì)子信號(hào)，9.33 (1H, s) A環(huán)3位羥基質(zhì)子信號(hào)，1H-NMR譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)[23]報(bào)道的槲皮素相符.經(jīng)與己知槲皮素對(duì)照品進(jìn)行共薄層檢測(cè)，以3種溶劑系統(tǒng)展開Rf值均一致，且顯色過程完全相同，故鑒定該化合物為槲皮素(quercetin).

化合物(11)為無色晶體，三氯化鐵-鐵氰化鉀反應(yīng)陽性，表明有酚羥基的存在，ESI-MS(m/z)：153.1[M+H]+，176.3[M+Na]+，199.0[M+2Na]，表明分子質(zhì)量為152.在1H-NMR譜中(CDCl3-d,500 MHz)在芳香區(qū)可見一組耦合系統(tǒng)，三個(gè)質(zhì)子δH 7.11 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-5), 7.31 (1H, d, J = 8.0 Hz, H-6)，7.61 (1H, s, H-2) 說明存在ABX耦合的三取代苯環(huán)系統(tǒng)，δH 3.61 (1H, s)處為一個(gè)甲氧基質(zhì)子，δH 9.71 (1H, s) 為一醛基質(zhì)子，Emerson反應(yīng)陰性提示羥基的對(duì)位有取代基，其波譜數(shù)據(jù)信息與文獻(xiàn)中香草醛的數(shù)據(jù)[24-25]對(duì)照基本一致，故鑒定化合物11為3-甲氧基-4-羥基苯甲醛，即香草醛(vanillin).

青龍衣中提取的11種化合物對(duì)5株腫瘤細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)見表1.化合物(5)和化合物(6)的抗腫瘤活性較強(qiáng)，對(duì)腫瘤細(xì)胞有很強(qiáng)的生長(zhǎng)抑制作用.化合物(10)對(duì)腫瘤細(xì)胞有較強(qiáng)的生長(zhǎng)抑制作用.化合物(4)對(duì)A549和MCF7的生長(zhǎng)抑制作用較明顯；化合物(2)對(duì)SGC7901，HepG-2，MCF7有較為顯著的生長(zhǎng)抑制作用；化合物(8)對(duì)MCF7細(xì)胞有一定的生長(zhǎng)抑制作用；化合物(9)對(duì)A549細(xì)胞有一定的生長(zhǎng)抑制作用，但是對(duì)其它細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用不明顯.化合物(1)、化合物(3)、化合物(7)和化合物(11)對(duì)腫瘤細(xì)胞沒有生長(zhǎng)抑制作用.

表1MTT實(shí)驗(yàn)中化合物1-11的IC50

No.IC50/(μmol·L-1)SGC7901HepG-2 A549MCF7LoVo12.30×106±0.78×1043.88×109±1.29×1072.53×104±×1021.27×102±2.36266.12±0.5980.90±0.8229.74±0.131.25×107±2.26×10532.49×105±0.54×1032.26×107±0.83×1052.09×1010±4.51×1085.70×104±3.49×10242.49×102±4.281.49×102±3.8156.05±2.4133.82±1.79528.14±0.8123.89±0.4322.42±0.7720.51±0.98621.20±0.5634.70±0.9124.80±0.6525.47±0.6777.48×1021±3.56×10201.50×109±3.95×1071.25×108±3.28×1061.12×107±2.94×1053.29×105±1.66×1038114.44±3.02117.60±3.10154.52±4.0794.89±2.5092.00×103±10.501.43×103±13.9093.5±0.641.16×102±0.761053.61±1.4147.81±1.2657.16±1.5154.56±1.44114.68×105±3.24×1031.94×106±1.30×1041.36×108±1.19×10612.54×104±10.47×1028.23×104±10.64HCPT50.74±1.3450.25±1.3239.42±1.0440.34±1.0644.12±1.51

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