范曉東 張鵬霞 王茉琳 王偉群

(吉林醫(yī)藥學(xué)院附屬醫(yī)院普外科，吉林 吉林 132013)

甲狀腺癌是最常見(jiàn)的內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤，其發(fā)生、發(fā)展與多種癌基因、抑癌基因密切相關(guān),而癌基因的激活和抑癌基因的失活可引起細(xì)胞周期紊亂,致腫瘤性增生、演進(jìn)和癌變。近年來(lái)的研究證明，細(xì)胞周期的調(diào)控與腫瘤的發(fā)生、分展有著密切的關(guān)系,一些學(xué)者甚至提出“癌癥是一類(lèi)細(xì)胞周期疾病”的觀(guān)點(diǎn)〔1〕。 細(xì)胞周期素(Cyclin)E與細(xì)胞周期素依賴(lài)激酶(CDK)2結(jié)合，在細(xì)胞周期 G1/S晚期起作用〔2〕，其過(guò)度表達(dá)能加速 G1/S轉(zhuǎn)化,促進(jìn)細(xì)胞增生,在多種腫瘤發(fā)生過(guò)程中起作用〔3,4〕。本文研究CyclinE在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)及其與臨床病理特征的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1對(duì)象 60例甲狀腺乳頭狀癌標(biāo)本均來(lái)自本院2004～2014年手術(shù)切除的甲狀腺乳頭狀癌標(biāo)本，年齡19～68歲,平均45.6歲。男16例，女44例；Ⅰ～Ⅱ期23例，Ⅲ～Ⅳ期37例；有周?chē)M織浸潤(rùn)39例,有頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移38例。另取甲狀腺腺瘤30例；瘤旁正常甲狀腺組織30例。

病例的納入與排除標(biāo)準(zhǔn)：所有病例的組織切片經(jīng)過(guò)病理醫(yī)師再次確認(rèn)診斷，并且符合以下條件:①術(shù)前均未進(jìn)行放療、化療及其他生物學(xué)治療。②術(shù)前均未進(jìn)行內(nèi)分泌治療(包括性激素及其拮抗劑治療)。③排除伴出血、壞死嚴(yán)重而影響免疫組化結(jié)果者。④排除微小癌及蠟塊偏小者。

1.2主要試劑 由福州邁新生物技術(shù)開(kāi)發(fā)有限公司提供的免疫組化試劑盒，鼠抗人CyclinE單克隆抗體。

1.3方法 采用免疫組化SP法。結(jié)果判斷：染色結(jié)果判定參照1996年全國(guó)免疫組化技術(shù)與診斷標(biāo)準(zhǔn)化專(zhuān)題研討會(huì)意見(jiàn): 高倍鏡下，每張切片任意上、下、左、右及中五個(gè)高倍鏡視野,陰性(-),<25%的細(xì)胞著色;弱陽(yáng)性(+)，25%～50%的細(xì)胞著色;中度陽(yáng)性(),51%～70%的細(xì)胞著色;強(qiáng)陽(yáng)性(),>70%的細(xì)胞著色。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS13.0軟件行χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié) 果

2.1CyclinE在不同甲狀腺組織中的表達(dá) CyclinE陽(yáng)性表達(dá)率在正常甲狀腺組織、甲狀腺腺瘤、甲狀腺乳頭狀癌中呈遞增趨勢(shì)(P<0.01)。見(jiàn)表1，圖1。

表1 CyclinE在不同甲狀腺組織中的表達(dá)(n)

2.2CyclinE在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)與臨床病理參數(shù)的關(guān)系 CyclinE在甲狀腺乳頭狀癌中的表達(dá)與臨床分期、周?chē)M織浸潤(rùn)及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有關(guān)(P<0.01)，與年齡、性別、腫瘤大小無(wú)顯著相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表2。

甲狀腺乳頭狀癌(×200)

正常甲狀腺組織(×100)

表2 CyclinE在甲狀腺乳頭狀癌組織中的表達(dá)〔n(%)〕

3 討 論

正常情況下，細(xì)胞在周期時(shí)相的變遷中進(jìn)入增殖、分化、衰老和死亡等生理狀態(tài)。如果細(xì)胞周期調(diào)控異常，細(xì)胞將進(jìn)入病理狀態(tài)，導(dǎo)致細(xì)胞異常轉(zhuǎn)化、癌變等。參與細(xì)胞周期調(diào)控的因子主要有Cyclin、CDK、 細(xì)胞周期蛋白依賴(lài)性激酶抑制因子(CKIs)。在高等的真核細(xì)胞中，目前發(fā)現(xiàn)Cyclin家族有8個(gè)成員，分別命名為Cyclin A、B、C、D、E、F、G、H。

CyclinE是1991年由Koff等〔5〕發(fā)現(xiàn)的一種核蛋白， 分子量約5×104,最初是從釀酒酵母菌中提取出來(lái)的。Che等〔6〕應(yīng)用免疫組化方法在胃癌的研究發(fā)現(xiàn)，CyclinE在惡性腫瘤組織中有高水平的表達(dá)，并且CyclinE表達(dá)與組織類(lèi)型、腫瘤大小及大體類(lèi)型有關(guān)。肖暉等〔7，8〕在非霍奇金淋巴瘤及膽囊癌中的研究均發(fā)現(xiàn)惡性腫瘤中CyclinE高表達(dá)；在其他惡性腫瘤如:結(jié)腸癌、宮內(nèi)膜癌、前列腺癌中都有CyclinE高表達(dá)的現(xiàn)象，表明CyclinE在腫瘤發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中起一定作用，認(rèn)為CyclinE是有用的預(yù)后指標(biāo)。

本研究結(jié)果也表明CyclinE可能參與甲狀腺乳頭狀癌的發(fā)生，并可用于良惡性甲狀腺疾病的鑒別，并且CyclinE可能是一個(gè)很好的腫瘤細(xì)胞的標(biāo)志物或預(yù)測(cè)因子。

4 參考文獻(xiàn)

1曾益新.腫瘤學(xué)〔M〕.北京：人民衛(wèi)生出版社，2000:6.

2楊曉東,王 杉,梁 斌,等.細(xì)胞周期素 E 及細(xì)胞周期素依賴(lài)激酶2在胃癌組織中的表達(dá)及意義〔J〕.中華普通外科雜志,2001;16(5):301-5.

3Donnelan R,Kleinschmidt I,Chetty R,etal.CyclinE immunoexpression in breast ductal carcinoma : pathologic correlations and prognostic implications〔J〕.Hum Pathol,2001;32(1):89-94.

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5Koff A,Cross F,Fisher A,etal.Human cyclin E,a new cyclin that interactsw ith two members of the CDC2gene family〔J〕.Cell,1991;66(6):1217-8.

6Che XM,Shoji N,Sonshin T.The cooperative role of P27 with cyclinE in the prognosis of advanced gastric carcinoma〔J〕.Cancer,2000;16:1214-20.

7肖 暉，曾憲章，張克儉.非霍奇金淋巴瘤P27，P21及CyclinE表達(dá)的意義〔J〕.臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2000;4:117-20.

8Matsuoka S,Edwards MC,Bai C,etal.p57KIP2,a structurally distinct member of the p21CIP1Cdk inhibitor family,is a candidate tumor suppressor gene〔J〕.Genes Dev,1995;9(6):650-62.