邵 鳳，許 楊，陶保平，陶春蕾，

(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽 合肥 230012；2.安徽萬邦醫(yī)藥有限責(zé)任公司，安徽 合肥 230031)

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定復(fù)方氨酚烷胺膠囊人體生物等效性

邵 鳳1，許 楊2，陶保平2，陶春蕾1，2

(1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，安徽 合肥 230012；2.安徽萬邦醫(yī)藥有限責(zé)任公司，安徽 合肥 230031)

目的研究復(fù)方氨酚烷胺膠囊的人體生物等效性。方法采用雙周期交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，22名健康男性受試者隨機(jī)交叉單劑量口服復(fù)方氨酚烷胺膠囊試驗(yàn)制劑和參比制劑各1粒。采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法測定血漿中對(duì)乙酰氨基酚(paracetamol, PAR)、金剛烷胺(amantadine, AMA)、馬來酸氯苯那敏(chlorphenamine, CHL)和咖啡因(caffenine, CAF)的濃度，采用DAS3.2.5軟件計(jì)算藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)，并采用雙側(cè)t檢驗(yàn)法和90%置信區(qū)間比較主要藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)(cmax，tmax，t1/2和AUC0-t)。結(jié)果受試制劑和參比制劑中PAR、AMA、CAF和CHL的AUC0→t、AUC0→∞、cmax和tmax比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。結(jié)論本實(shí)驗(yàn)方法準(zhǔn)確、靈敏、簡便，兩種制劑具有生物等效性。

液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法；對(duì)乙酰氨基酚；鹽酸金剛烷胺；馬來酸氯苯那敏；咖啡因

復(fù)方氨酚烷胺是一種新型抗病毒感冒藥，所含主要成分為對(duì)乙酰氨基酚(paracetamol，PAR)，鹽酸金剛烷胺(amantadine hydrochloride，AMA)，馬來酸氯苯那敏(chlorpheniramine maleate，CHL)和咖啡因(caffeine，CAF)等，可緩解普通感冒或流行感冒引起的發(fā)熱、頭痛、咽痛和打噴嚏等。肖雪等[1]對(duì)AMA和PAR的濃度進(jìn)行了測定，同時(shí)楊小萍等[2]對(duì)CAF的檢測進(jìn)行了有關(guān)報(bào)道。與之前的檢測方法不同的是，液相色譜(liquid chromatography, LC)-質(zhì)譜(mass spectrometry, MS)/MS法靈活、高效、快速，并且靈敏度高。所以本實(shí)驗(yàn)在優(yōu)化的實(shí)驗(yàn)條件下，同時(shí)測定復(fù)方中4種成分，以國產(chǎn)已上市的復(fù)方氨酚烷胺膠囊為參比制劑，研究另一種國產(chǎn)復(fù)方氨酚烷胺膠囊的相對(duì)生物利用度和生物等效性，為臨床合理用藥提供參考。

1 材料與對(duì)象

1.1 藥品與試劑 ①受試制劑：復(fù)方氨酚烷胺膠囊，每粒含PAR 250 mg、AMA 100 mg、CHL 2 mg、人工牛黃10 mg、CAF 15 mg，陜西東泰制藥有限公司生產(chǎn)，批號(hào) 130501。②參比制劑：復(fù)方氨酚烷胺膠囊(商品名：快克)，每粒含PAR 250 mg、AMA 100 mg、CHL 2 mg、人工牛黃10 mg、CAF 15 mg，浙江亞峰藥廠有限公司生產(chǎn)，批號(hào) 1205041。③對(duì)照品：PAR(批號(hào) 100018-200408)、AMA(批號(hào) 100426-201002)、CAF(含量為99.9%，批號(hào)171215-201211)、鹽酸克倫特羅(clenbuterol hydrochloride，CLE)(批號(hào) 100072-200402)、CHL(含量為99.7%，批號(hào) 100047-200606)、地西泮(含量為99.9%，批號(hào) 171225-200903)均購自中國藥品生物制品檢定所。

1.2 儀器 AB API 3000型質(zhì)譜儀：美國AB公司生產(chǎn)；液相色譜儀：Agilent 1100，美國安捷倫公司生產(chǎn)；自動(dòng)進(jìn)樣器：瑞士CTC ANALYTICS公司生產(chǎn)；GL-16G-Ⅱ型高速冷凍離心機(jī)：湖南省長沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司；SZ-1型快速混勻器：上海滬西儀器分析廠；AB135-S型電子分析天平；GZX-9140MBE型數(shù)顯鼓風(fēng)干燥箱。

1.3 受試者的選擇 健康男性志愿者22例，體質(zhì)量52～75 kg，平均體質(zhì)量(64.27±7.08)kg；年齡19～29歲，平均年齡(22.61±2.39)歲，均無藥物過敏史，無肝、腎疾病史，精神狀態(tài)良好，試驗(yàn)前后經(jīng)全面體格檢查均未發(fā)現(xiàn)異常。根據(jù)赫爾辛基宣言、國際協(xié)調(diào)會(huì)議的GCP原則，中華人民共和國國家食品藥品監(jiān)督管理局頒布的GCP原則和中華人民共和國藥品管理法，在試驗(yàn)開始之前，研究人員向志愿受試者詳細(xì)說明試驗(yàn)藥物的性質(zhì)，試驗(yàn)的目的、方法，試驗(yàn)的風(fēng)險(xiǎn)和自愿參加的原則，并獲得所有志愿受試者的知情同意書。

1.4 給藥方案及血樣采集 采用開放隨機(jī)的交叉實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，洗脫期為2周。志愿受試者應(yīng)按照隨機(jī)表在每個(gè)周期的第一天接受兩種研究藥物(試驗(yàn)制劑和參比制劑)之一，即在禁食過夜至少10 h后，次日早晨空腹以250 mL溫水送服1粒復(fù)方氨酚烷胺膠囊或參比制劑，注意確保全部藥物被服用。2周后交叉服藥。于給藥前及給藥后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0、4.0、6.0、8.0、12.0、24.0、36.0、48.0、72.0、96.0 h采集靜脈血，每一階段總計(jì)采集18個(gè)點(diǎn)，每點(diǎn)采血8 mL，嚴(yán)格避光。

1.5 數(shù)據(jù)處理 采用DAS3.2.5數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)不同時(shí)點(diǎn)的血藥濃度進(jìn)行處理，計(jì)算有關(guān)的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)。其中，達(dá)峰時(shí)間(tmax)及峰濃度(cmax)為實(shí)測值，藥-時(shí)曲線下面積(area under curve, AUC)采用梯形法計(jì)算。半衰期(tl/2)按末端相血藥濃度對(duì)數(shù)值和時(shí)間進(jìn)行線性回歸，以求得斜率。以復(fù)方氨酚烷胺膠囊為參比制劑，計(jì)算相對(duì)生物利用度。對(duì)兩種制劑的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)進(jìn)行配對(duì)t檢驗(yàn)，等效性采用雙側(cè)t檢驗(yàn)。

2 樣本測定及方法學(xué)考察

2.1 色譜、質(zhì)譜條件

2.1.1 PAR、AMA、CAF

1)色譜條件 色譜柱：Welchrom C18(4.6 mm×150 mm×5 μm，月旭)；流動(dòng)相：甲醇∶0.05%甲酸=90∶10；流速：0.7 mL/min；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：10 μL。

2)質(zhì)譜條件 離子源：電噴霧電離(electrospray ionization，ESI)；離子檢測方式：質(zhì)譜多反應(yīng)監(jiān)測(multiple reaction monitoring，MRM)；離子極性：正離子；離子電壓(ionspray voltage，IS)：5 000 V；溫度：450 ℃；噴霧氣(nebulizer, NEB)：8；氣簾氣(curtain，CUR)：8；碰撞氣(collision，CAD)：10。

3)用于定量的離子 ①PAR：[M+H]+m/z：152.000/110.000；錐孔電壓(declustering，potential, DP):37 V；碰撞能(collision energy, CE)：25 V。②AMA：[M+H]+m/z：152.100/135.000；DP:40；CE：30；掃描時(shí)間為0.15 s。③CAF：[M+H]+m/z：195.200/138.000；DP:35；CE：30。④內(nèi)標(biāo)CLE：[M+H]+m/z：277.000/203.100；DP:30；CE：30；掃描時(shí)間為0.15 s。

2.1.2 CHL

1)色譜條件 色譜柱： Luna NH2(2.0 mm×100 mm×5 μm，菲羅門)；流動(dòng)相：乙腈∶甲醇∶0.1%甲酸=20∶70∶10；流速：0.2 mL/min；柱溫：40 ℃；進(jìn)樣量：20 μL。

2)質(zhì)譜條件 離子源：ESI；離子檢測方式：MRM；離子極性：正離子；IS：5 500 V；溫度：500 ℃；NEB：12；CUR：12；CAD：8。

3)用于定量的離子 ①CHL：[M+H]+m/z：275.000/229.700；DP：23；CE：30。②內(nèi)標(biāo)地西泮：[M+H]+m/z：285.100/154.100；DP：45；CE：40；掃描時(shí)間為0.10 s。

2.2 血漿樣品處理方法

2.2.1 PAR與AMA：精密量取200 μL血漿，精密加入20 μL內(nèi)標(biāo)CLE對(duì)照溶液(500 ng/mL)，渦旋30 s，加入4 mL乙酸乙酯，震蕩渦旋2 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液3 mL于試管中，40 ℃氮?dú)獯蹈桑?00 μL甲醇復(fù)溶，震蕩渦旋1 min，取100 μL于試管中，加400 μL甲醇-水(甲醇∶水=3∶1)震蕩渦旋30 s，12 000 r/min離心5 min后，取上清液200 μL于進(jìn)樣管中，10 μL進(jìn)樣分析。

2.2.2 CAF：精密量取200 μL血漿，精密加入20 μL內(nèi)標(biāo)CLE對(duì)照溶液(1 500 ng/mL)，渦旋30 s，加入4 mL乙酸乙酯，震蕩渦旋2 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液3 mL于試管中，40 ℃氮?dú)獯蹈桑? 000 μL甲醇復(fù)溶，震蕩渦旋1 min，取500 μL于試管中，加500 μL甲醇震蕩渦旋30 s，12 000 r/min離心5 min后，取上清液200 μL于進(jìn)樣管中，20 μL進(jìn)樣分析。

2.2.3 CHL：精密量取200 μL血漿，精密加入20 μL內(nèi)標(biāo)地西泮對(duì)照溶液(50 ng/mL)，渦旋30 s，加入4 mL提取劑(正己烷∶二氯甲烷=3∶1)，震蕩渦旋2 min，3 000 r/min離心10 min，取上清液3 mL于試管中，40 ℃氮?dú)獯蹈?，?00 μL流動(dòng)相復(fù)溶，震蕩渦旋1 min，12 000 r/min離心5 min后，取上清液150 μL于進(jìn)樣管中，20 μL進(jìn)樣分析。

2.3 方法學(xué)建立

2.3.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算

1)PAR與AMA 取PAR、AMA儲(chǔ)備液，依次配制成相當(dāng)于PAR血漿濃度為100、200、500、1 000、2 000、3 000、5 000、7 000 ng/mL和相當(dāng)于AMA血漿濃度為2、5、10、20、50、100、200、400 ng/mL的樣品，按“2.2”項(xiàng)下方法操作，并以上述色譜、質(zhì)譜條件進(jìn)行測定，建立PAR、AMA的標(biāo)準(zhǔn)曲線。PAR標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.001 07x+0.039 1 (r=0.996 4，權(quán)重：1/x2)；AMA標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.028 1x+0.012(r=0.998 9，權(quán)重：1/x2)。結(jié)果表明PAR在100～7 000 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，定量下限為100 ng/mL(S/N>10)；AMA在2～400 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，定量下限為2 ng/mL(S/N>10)。

2)CAF 取CAF儲(chǔ)備液，依次配制成相當(dāng)于CAF血漿濃度為10、20、50、100、200、500、1 000、1 500 ng/mL的樣品，按“2.2”項(xiàng)下方法操作，得標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=0.001 81x+0.004 12(r=0.995 6，權(quán)重：1/x2)，結(jié)果表明CAF在10～1 500 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，定量下限為10 ng/mL(S/N>10)。

3)CHL 取CHL儲(chǔ)備液，依次配制成相當(dāng)于CHL血漿濃度為0.05、0.1、0.2、0.5、1、2、5、10 ng/mL的樣品，按“2.2”項(xiàng)下方法操作，得標(biāo)準(zhǔn)曲線為y=1.04x+0.035(r=0.998 0，權(quán)重：1/x2)，結(jié)果表明CHL在0.05～10 ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，定量下限為0.05 ng/mL(S/N>10)。

2.3.2 專屬性測定

1)PAR與AMA專屬性 空白血漿、空白血漿加入對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)CLE以及受試者服藥后血漿樣品，測定結(jié)果見圖1。PAR、AMA和內(nèi)標(biāo)的保留時(shí)間分別為2.45、1.75、1.71 min左右。結(jié)果顯示峰形良好，基線平穩(wěn)，表明內(nèi)源性雜質(zhì)不干擾PAR、AMA和內(nèi)標(biāo)的測定。

圖1空白血漿(A)、空白血漿加入對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)(B)以及服藥1.5 h后血漿樣品(C)的LC-MS/MS圖譜

2)CAF專屬性 空白血漿、受試者血漿樣品測定結(jié)果見圖2。CAF和內(nèi)標(biāo)CLE的保留時(shí)間分別為2.64、1.70 min左右，表明內(nèi)源性雜質(zhì)不干擾CAF和內(nèi)標(biāo)的測定。

圖2空白血漿(A)、空白血漿加入對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)(B)及服藥1.5 h后血漿樣品(C)的LC-MS/MS圖譜

3)CHL專屬性 空白血漿、受試者血漿樣品測定結(jié)果見圖3。CHL和內(nèi)標(biāo)地西泮的保留時(shí)間分別為0.99、1.42 min左右，表明內(nèi)源性雜質(zhì)不干擾CHL和內(nèi)標(biāo)的測定。

圖3空白血漿(A)、空白血漿加入對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)(B)及服藥1.5 h后血漿樣品(C)的LC-MS/MS圖譜

2.3.3 精密度與準(zhǔn)確度測定：取各組分的低、中、高質(zhì)控(quality control, QC)濃度，按“2.2”項(xiàng)下方法操作，每一濃度進(jìn)行6個(gè)樣本分析，連續(xù)測定3 d，根據(jù)當(dāng)日的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算QC樣品的測得濃度。根據(jù)QC樣品結(jié)果計(jì)算本法的精密度和準(zhǔn)確度，結(jié)果見表1。

2.3.4 回收率和基質(zhì)效應(yīng)

1)PAR與AMA 分別量取2.5、15、60 μg/mL PAR，40、800、3 200 ng/mL AMA，500 ng/mL內(nèi)標(biāo)CLE對(duì)照溶液各20 μL于試管中，加入800 μL甲醇，混勻后100 μL加入400 μL甲醇-水(甲醇∶水=3∶1)混勻，取10 μL進(jìn)樣分析，得到PAR、AMA和CLE的峰面積值A(chǔ)PAR、AAMA和ACLE。按“2.2.1”方法操作，得到PAR、AMA和CLE的峰面積值BPAR、BAMA和BCLE。量取空白血漿，按“2.2.1”方法操作，得到PAR、AMA和CLE的峰面積值CPAR、CAMA和CCLE。按下式計(jì)算：提取回收率=B/C×100%；基質(zhì)效應(yīng)=C/A×100%。得出PAR的提取回收率為97.2%～100.0%，AMA的提取回收率為95.6%～98.9%，CLE的平均提取回收率為97.5%。PAR的基質(zhì)效應(yīng)范圍為95.2%～100.2%，AMA的基質(zhì)效應(yīng)范圍為99.3～100.6%，CLE的平均基質(zhì)效應(yīng)為98.7%。

2)CAF和CHL 分別按照上述PAR和AMA回收率和基質(zhì)效應(yīng)測定的步驟，依法操作。結(jié)果CAF的提取回收率為96.98%～99.34%，CLE的平均提取回收率為99.54%；CAF的基質(zhì)效應(yīng)范圍為91.09%～95.57%，CLE的平均基質(zhì)效應(yīng)為96.63%；CHL的提取回收率為84.18%～102.67%，內(nèi)標(biāo)地西泮為105.66%，CHL的基質(zhì)效應(yīng)范圍為86.02%～93.17%，內(nèi)標(biāo)地西泮的基質(zhì)效應(yīng)為88.75%。

2.3.5 樣品穩(wěn)定性測定：為考察血樣在采集后和貯存中的穩(wěn)定性，分別測定了其在常溫和冷凍條件下的穩(wěn)定性。結(jié)果見表2、表3、表4和表5。

3 結(jié)果

3.1 血藥濃度-時(shí)間曲線 22例受試者口服受試制劑復(fù)方氨酚烷胺膠囊和參比制劑復(fù)方氨酚烷胺膠囊后PAR、AMA、CAF、CHL的血藥濃度-時(shí)間曲線見圖4。

3.2 藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù) 采用DAS3.2.5數(shù)據(jù)分析軟件計(jì)算4種組分的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果見表6。將表6中參數(shù)經(jīng)過自然對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換，tmax采用非參數(shù)檢驗(yàn)法，生物等效性評(píng)價(jià)是通過計(jì)算受試制劑和參比制劑cmax、AUC0-t和AUC0-∞的對(duì)數(shù)比值的90%置信區(qū)間進(jìn)行的。AUC的對(duì)數(shù)比值的90%置信區(qū)間為80%～125%，cmax的對(duì)數(shù)比值的90%置信區(qū)間為80%～125%，則可判定兩種制劑具有生物等效性。

表1 復(fù)方氨酚烷胺膠囊各組分的精密度和準(zhǔn)確度

表2 PAR在血漿中穩(wěn)定性考察

注：穩(wěn)定性=(考察項(xiàng)各濃度樣品實(shí)測濃度的平均值/室溫放置0 h各濃度樣品實(shí)測濃度的平均值)×100%。

表3 AMA在血漿中穩(wěn)定性考察

注：穩(wěn)定性=(考察項(xiàng)各濃度樣品實(shí)測濃度的平均值/室溫放置0 h各濃度樣品實(shí)測濃度的平均值)×100%。

3.3 相對(duì)生物利用度 以參比制劑作對(duì)照，PAR的相對(duì)生物利用度的F(AUC0-t相對(duì)生物利用度)和F1(AUC0-∞相對(duì)生物利用度)分別為(99.7±1.9)%和(100±3.3)%，AMA的相對(duì)生物利用度的F和F1分別為(99.9±3.1)%和(99.8±3)%，CAF的相對(duì)生物利用度的F和F1分別為(100.4±2)%和(100.5±2)%，CHL的相對(duì)生物利用度的F和F1分別為(100.3±3.9)%和(100±4.1)%，F(xiàn)和F1的均值均在80%～125%內(nèi)，符合相對(duì)生物利用度的要求。

3.4 生物等效性評(píng)價(jià) 復(fù)方氨酚烷胺膠囊受試制劑和參比制劑中PAR、AMA、CAF和CHL的AUC0→t、AUC0→∞和cmax經(jīng)對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換后進(jìn)行方差分析，并進(jìn)一步采用雙側(cè)t檢驗(yàn)和90%置信區(qū)間法進(jìn)行生物等效性評(píng)價(jià)，tmax采用非參數(shù)檢驗(yàn)法。統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明，受試制劑和參比制劑中PAR、AMA、CAF和CHL的AUC0→t、AUC0→∞和cmax比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。非參數(shù)檢驗(yàn)結(jié)果顯示，兩制劑中PAR、AMA、CAF和CHL的tmax比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。根據(jù)以上結(jié)果，判定兩制劑生物等效。90%置信區(qū)間見表7。

表4 CAF在血漿中穩(wěn)定性考察

注：穩(wěn)定性=(考察項(xiàng)各濃度樣品實(shí)測濃度的平均值/室溫放置0 h各濃度樣品實(shí)測濃度的平均值)×100%。

表5 CHL在血漿中穩(wěn)定性考察

注：穩(wěn)定性=(考察項(xiàng)各濃度樣品實(shí)測濃度的平均值/室溫放置0 h各濃度樣品實(shí)測濃度的平均值)×100%。

圖4 PAR、AMA、CAF和CHL的平均血藥濃度-時(shí)間曲線

4 討論

在檢測條件的確立上，首先采用將4種成分放在一起檢測，但是在摸索過程中發(fā)現(xiàn)PAR和AMA放在一起從儀器響應(yīng)和濃度上都比較合適，而CHL由于檢測限要求非常低，與其余3種成分放在一起檢測均不合適，所以將其單獨(dú)用一種方法檢測。CAF在儀器響應(yīng)上與其他3種也不相同，所以也采用單獨(dú)的方法檢測。

在提取劑的選擇方面，比較了乙醚、二氯甲烷、叔丁基甲醚、乙醚-二氯甲烷(2∶1)、乙酸乙酯、正己烷-二氯甲烷(3∶1)，發(fā)現(xiàn)PAR、AMA、CAF用乙酸乙酯的提取效率最好，而CHL用正己烷-二氯甲烷(3∶1)的提取效率最好。

試驗(yàn)中22例受試者在服用試驗(yàn)制劑和參比制劑復(fù)方后，測定其血漿中4種成分的濃度，并計(jì)算了其主要的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)，所得結(jié)果均與文獻(xiàn)[1，6]的報(bào)道相近。經(jīng)過方差分析和雙側(cè)t檢驗(yàn)，證明兩制劑的體內(nèi)過程基本相似，繼而判斷復(fù)方氨酚烷胺膠囊受試制劑和參比制劑具有生物等效性。

表6 口服復(fù)方氨酚烷胺膠囊受試制劑和參比制劑后的藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)(n=22)

注：cmax指血藥濃度峰值；tmax指達(dá)到血藥濃度峰值的時(shí)間；t1/2指半衰期；AUC0→t指在t時(shí)間下的藥-時(shí)曲線下的面積；AUC0→∞指時(shí)間為無窮大時(shí)的藥-時(shí)曲線下面積。

表7 PAR、AMA、CAF和CHL的90%置信區(qū)間

整個(gè)研究期間，22例健康志愿者中無一例因不良反應(yīng)而終止試驗(yàn)，其血常規(guī)、血液生化、尿常規(guī)以及心電圖檢查在試驗(yàn)前后均未見異常，說明本品在試驗(yàn)劑量下具有良好的安全性。

[1]肖雪，張丹，趙婷，等. LC-MS法同時(shí)測定人血漿中對(duì)乙酰氨基酚和金剛烷胺的濃度及其制劑的人體生物等效性研究[J].中國藥房,2012,23(18)：1671-1673.

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EvaluationofBioequivalenceofCompoundParacetamolandAmantadineHydrochlorideCapsulesandReferenceCapsulesbyLiquidChromatography-MassSpectrometry

SHAOFeng1,XUYang2,TAOBao-ping2,TAOChun-lei1,2

(1.CollegeofPharmacy,AnhuiUniversityofChineseMedicine,AnhuiHefei230012,China; 2.AnhuiWanbangMedicalTechnologyCo.,Ltd.,AnhuiHefei230031,China)

ObjectiveTo study the bioequivalence of compound paracetamol and amantadine hydrochloride capsules and reference capsules in healthy volunteers.MethodsThis study was conducted in 22 healthy male volunteers using an open, randomized, two-period crossover design. Each subject was orally administered a compound paracetamol and amantadine hydrochloride capsule and a reference capsule. Liquid chromatography-mass spectrometry was used to determine the concentrations of paracetamol (PAR), amantadine (AMA), chlorphenamine (CHL), and caffeine (CAF) in plasma. The pharmacokinetic parameters (cmax,tmax,t1/2, and AUC0-t) of the four components were calculated by DAS3.2.5 program, and two-sidedttest and 90% confidence interval were used to compare the four parameters between test capsules and reference capsules.ResultsThere were no significant differences in AUC0-t, AUC0→∞,cmax,andtmaxof PAR, AMA, CAF, and CHL between test capsules and reference capsules (P>0.05).ConclusionThis method is accurate, sensitive, and simple, and the test capsules and reference capsules have bioequivalence.

liquid chromatography-mass spectrometry; paracetamol; amantadine hydrochloride; chlorpheniramine; caffeine

邵鳳 (1989-)，女，碩士研究生

陶春蕾，1225433686@qq.com

R969.1

A

10.3969/j.issn.2095-7246.2014.06.024

2014-02-27)