李小霞， 陳 鋒， 潘 慶， 陳翠英， 譚玉文， 雷小婷， 曹俊明

(1 華南農(nóng)業(yè)大學 動物科學學院，廣東 廣州 510642；2 廣東省農(nóng)業(yè)科學院 畜牧研究所，廣東 廣州 510640)

酵母硒對凡納濱對蝦生長和抗氧化性能的影響

李小霞1， 陳 鋒1， 潘 慶1， 陳翠英1， 譚玉文1， 雷小婷1， 曹俊明2

(1 華南農(nóng)業(yè)大學 動物科學學院，廣東 廣州 510642；2 廣東省農(nóng)業(yè)科學院 畜牧研究所，廣東 廣州 510640)

【目的】研究飼料中添加不同水平酵母硒對凡納濱對蝦生長和抗氧化性能的影響.【方法】選取初始體質(zhì)量為(0.41±0.01) g的凡納濱對蝦Litopenaeusvannamei720尾，隨機分為6個試驗組，每組3個重復，每個重復40尾蝦，在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)(容積250 L)中進行為期56 d的生長試驗.在基礎(chǔ)飼料中分別添加硒(酵母硒)0、0.15、0.30、0.45、0.60、1.00 mg·kg-1，制成6種不同硒水平的半純化飼料，實測飼料硒質(zhì)量分數(shù)分別為0.25、0.41、0.56、0.68、0.84、1.20 mg·kg-1.【結(jié)果和結(jié)論】結(jié)果表明，添加酵母硒對凡納濱對蝦增質(zhì)量率、特定生長率、飼料系數(shù)、成活率均無顯著影響(P>0.05)，隨著飼料硒水平的增加，凡納濱對蝦的增質(zhì)量率和特定生長率不斷升高，在0.84 mg·kg-1硒組達到最大值.各試驗組對蝦肝胰腺超氧化物歧化酶和總抗氧化能力均高于對照組，而丙二醛含量均低于對照組，但差異不顯著(P>0.05).以增質(zhì)量率和特定生長率為評價指標，通過二次線性回歸分析表明，在該試驗條件下凡納濱對蝦飼料中硒含量為0.98 mg·kg-1時其生長性能最高.

凡納濱對蝦； 酵母硒； 生長性能； 抗氧化能力

凡納濱對蝦Litopenaeusvannamei是世界養(yǎng)殖產(chǎn)量最高的三大優(yōu)良品種之一 ，隨著對蝦養(yǎng)殖業(yè)的迅速發(fā)展，大規(guī)模和高密度的人工養(yǎng)殖使養(yǎng)殖環(huán)境日趨惡化，對蝦營養(yǎng)代謝失衡，病害頻頻發(fā)生.研究發(fā)現(xiàn)，硒是維持人和動物正常生長及生理功能的必需微量營養(yǎng)素之一，是谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)和含硒轉(zhuǎn)移核糖核酸(tRNA)的組成成分，對動物的生長發(fā)育、免疫機能和抗氧化發(fā)揮著重要作用，在動物營養(yǎng)中已逐步得到廣泛的研究和應用[1].研究表明，魚類硒缺乏會導致肌營養(yǎng)不良、貧血甚至死亡[2]，但硒含量過高亦會產(chǎn)生毒害作用[3-4]；在飼料中添加適量的硒源，能顯著提高養(yǎng)殖動物的生長速度、成活率和抗氧化酶活性，增強免疫力[5-6].本試驗擬在飼料中添加不同水平酵母硒，研究其對凡納濱對蝦生長和抗氧化能力的影響，旨在豐富凡納濱對蝦硒營養(yǎng)的相關(guān)知識，為合理利用酵母硒，科學配制凡納濱對蝦飼料提供理論依據(jù).

1 材料與方法

1.1 試驗蝦與酵母硒

試驗用凡納濱對蝦購自正大集團珠海蝦苗廠，為當年蝦苗，酵母硒由廣東海大集團股份有限公司提供，測定硒質(zhì)量分數(shù)為1 600 mg·kg-1.

1.2 試驗飼料

根據(jù)凡納濱對蝦的營養(yǎng)需求[7]，以魚粉、酪蛋白和明膠為主要蛋白源，魚油和大豆磷脂為脂肪源，玉米淀粉和豌豆蛋白粉為糖源配制基礎(chǔ)飼料.飼料配方及營養(yǎng)組成見表1.以酵母硒為硒源，采用單因素試驗設計，在基礎(chǔ)飼料中分別添加硒(酵母硒)0、0.15、0.30、0.45、0.60和1.00 mg·kg-1，配制成6種試驗飼料，實測飼料硒質(zhì)量分數(shù)分別為0.25、0.41、0.56、0.68、0.84、1.20 mg·kg-1.飼料原料經(jīng)粉碎過60目篩后混合均勻，用SLX-80型雙螺桿擠壓機制成直徑為1.0 mm的顆粒飼料，在50 ℃烘箱中烘干，冷卻后放入密封袋中，-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆?

1.3 試驗條件及飼養(yǎng)管理

養(yǎng)殖試驗于2012年7—9月在室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進行(約250 L).試驗開始前將對蝦在室外水泥池中暫養(yǎng)2周，期間投喂基礎(chǔ)飼料.試驗開始時，選取初始體質(zhì)量為(0.41±0.01) g幼蝦720尾，隨機分為6個處理組，每組3個重復，每重復40尾蝦.養(yǎng)殖周期為56 d，每天飽食投喂3次(08:30、14:30、20:00)，并在投喂0.5～1 h后，吸取殘餌，同時根據(jù)攝食情況及時調(diào)整投喂量，計算攝食量和飼料系數(shù).試驗水源為經(jīng)沙濾、消毒后的淡化海水，鹽度3.5‰～5.5‰.試驗期間，水溫25～32 ℃，溶解氧>5.00 mg·L-1，氨氮<0.20 mg·L-1, 亞硝酸氮<0.10 mg·L-1，pH 7.6～8.0，每3 d排污1次，每7 d換水1/4～1/3.

1.4 樣品采集與測定

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后禁食24 h，計數(shù)、稱質(zhì)量.計算其成活率、飼料系數(shù)、增質(zhì)量率以及特定生長率.每桶隨機取15尾蝦做全蝦樣品，采用國際標準方法AOAC(1993)[8]進行體成分測定，水分用105 ℃常壓干燥法測定；蛋白質(zhì)含量用凱氏定氮法測定；脂肪含量用索氏石油醚抽提法測定；粗灰分用550 ℃高溫爐灼燒法測定.另每桶隨機取15尾蝦，稱質(zhì)量，剝離肝胰腺，勻漿后，在4 ℃條件下以3 500～4 000 r/min離心10 min，取上清液分裝，-80 ℃條件保存?zhèn)溆?對蝦肝胰腺中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛 (MDA)含量及勻漿液中總蛋白含量的測定計算方法參照南京建成生物工程研究所試劑盒說明書.

相關(guān)生長指標計算公式如下：

增質(zhì)量率=(mt-m0)/m0×100%,

成活率=終末尾數(shù)/初始尾數(shù)×100%,

特定生長率= (lnmt-lnm0)/t×100%,

攝食量=總投喂量-殘餌量,

飼料系數(shù)=攝食量 /(mt+m1-m0),

肝胰指數(shù)=mh/mb×100%,

式中：m0—試驗開始時蝦尾均質(zhì)量(g),m1—試驗中死亡蝦體質(zhì)量,mt—試驗結(jié)束時蝦尾均質(zhì)量(g),mh—蝦肝胰腺質(zhì)量,mb—蝦體質(zhì)量,t—養(yǎng)殖時間(d).

1.5 數(shù)據(jù)分析

試驗數(shù)據(jù)用平均值±標準誤表示，采用SPSS 20.0版軟件進行分析和統(tǒng)計，先對數(shù)據(jù)作單因素方差分析(ANOVA)，若處理組間差異顯著，再采用Duncan’s多重比較.

表1 飼料配方及營養(yǎng)組成Tab.1 Composition and nutrient levels of the experimental diets

1) 復合礦物鹽原料由廣州海因特水產(chǎn)科技有限公司提供，每千克復合礦物鹽預混料中含有：NaCl 59.34 g、KCl 114.54 g、MgSO4·7H20 146.08 g、CuSO4·5H2O 0.84 g、FeSO4·5H2O 4.95 g、ZnSO4·7H2O 3.67 g、MnSO4·H2O 19.35 g、Ca(IO3)20.04 g、CoSO4·7H2O 0.50 g、沸石粉 397.76、Ca(H2PO4)2·H2O 252.93 g；2) 維生素預混料由廣州飛禧特水產(chǎn)科技有限公司提供：每千克多維預混料中含有:VA4×106IU、VE30 g 、VD2.0×106IU、VK310 g、VB15 g、VB215 g、VB68 g、VB1220 mg、煙酸40 g、泛酸鈣25 g、葉酸2.5 g、肌醇150 g、生物素80 mg、水分10%.

2 結(jié)果

2.1 酵母硒水平對凡納濱對蝦生長性能的影響

飼料中添加不同水平的酵母硒對表2中所列凡納濱對蝦各項生長性能指標均無顯著影響(P>0.05)，但對蝦末均質(zhì)量、增質(zhì)量率、特定生長率和成活率均高于對照組，且增質(zhì)量率和特定生長率均以0.60 mg·kg-1硒組最高(分別提高了15.79%和7.78%)；添加酵母硒組飼料系數(shù)均較對照組下降，降低了8.08%～11.45%.采用多項式分析飼料酵母硒水平與凡納濱對蝦增質(zhì)量率、特定生長率之間的相關(guān)關(guān)系.結(jié)果表明，凡納濱對蝦獲得最大增質(zhì)量率和最大特定生長率時飼料中硒的最低質(zhì)量分數(shù)為0.98 mg·kg-1.

表2 飼料酵母硒水平對凡納濱對蝦生長性能的影響1)

1) 同列數(shù)據(jù)后無標注字母者表示差異不顯著(P>0.05，Duncan’s法) .

2.2 酵母硒水平對凡納濱對蝦體成分和肝胰腺抗氧化指標的影響

由表3可以看出，試驗組全蝦體脂肪含量與對照組差異不顯著(P>0.05)；0.60 mg·kg-1硒添加組全蝦體蛋白含量顯著高于對照組(P<0.05)，其他試驗組與對照組均無顯著性差異(P>0.05).全蝦水分含量在0.60 mg·kg-1硒添加組呈現(xiàn)最高值，但各組間差異不顯著(P>0.05).飼料中添加酵母硒可提高凡納濱對蝦肝胰腺T-AOC活性，降低MDA含量， GSH-Px活性隨添加量的增加表現(xiàn)出先上升后下降的趨勢，但均未達到顯著水平(P>0.05).添加酵母硒對肝胰腺SOD活性有一定的影響，0.15、0.60 mg·kg-1硒添加組SOD活性均顯著高于對照組(P<0.05)，其余各試驗組間差異不顯著(P>0.05).

表3飼料酵母硒水平對凡納濱對蝦體成分(濕質(zhì)量)和肝胰腺抗氧化指標的影響1)

Tab.3Effectsofdietaryyeastseleniumlevelsonbodycomposition(wetmassbasis)andantioxidantindexesofhepatopancreasinLitopenaeusvannamei

w(酵母硒)/(mg·kg-1)w(水分)/%w(粗蛋白)/%w(粗脂肪)/%T-AOC活性/(U·mg-1)GSH-Px活性/(μmol·mg-1)SOD活性/(U·mg-1)b(MDA)/(nmol·mg-1)0.0077.08±0.46a15.68±0.00b0.68±0.04a0.66±0.40a529.23±78.64a43.80±4.50b5.49±1.10a0.1577.12±0.98a15.74±0.07b0.71±0.07a1.58±0.14a617.76±187.89a49.57±1.55a4.59±0.24a0.3077.35±0.52a15.45±0.06b0.64±0.02a1.44±0.62a612.94±108.06a48.08±3.14ab4.52±1.19a0.4577.47±0.66a15.68±0.15b0.85±0.00a1.60±1.13a423.69±28.55a43.22±2.56ab4.92±0.67a0.6077.89±0.52a16.17±0.03a0.76±0.05a1.38±0.06a450.11±45.05a49.29±0.86a4.72±0.17a1.0077.45±0.33a15.65±0.12b0.88±0.04a1.72±0.88a502.94±80.52a44.39±4.25ab4.49±1.67a

1) 同列數(shù)據(jù)后凡有一個相同小寫字母者，表示差異不顯著(P>0.05，Duncan’s法) .

3 討論

硒是動物生長所必需的微量元素，對水產(chǎn)動物有促生長作用，研究證明，硒可促進生長激素合成與分泌，從而加快動物的生長和蛋白質(zhì)合成[9].本試驗結(jié)果表明，飼料中硒質(zhì)量分數(shù)為0.98 mg·kg-1時凡納濱對蝦的生長性能最佳，特定生長率和增質(zhì)量率均達到最大值，飼料系數(shù)最低.類似結(jié)論已有報道[10-11].研究發(fā)現(xiàn)，在異育銀鯽飼料中添加硒酵母可不同程度促進異育銀鯽的生長，提高飼料利用率[12].另外，在中國對蝦[13]試驗中發(fā)現(xiàn)，添加外源硒可顯著提高其增質(zhì)量率和飼料效率.這些研究結(jié)果均與本試驗的結(jié)果有所不同，原因可能是試驗對象、飼料原料、養(yǎng)殖條件、硒源等與本試驗存在差異； 或者可能與飼料中魚粉量有關(guān).有學者指出，魚粉是飼料硒的重要來源[11].本試驗飼料配方中含有10%的魚粉，可能使飼料中硒含量已經(jīng)達到凡納濱對蝦對硒的最小需求量，故再添加硒對其生長和抗氧化性能無顯著影響.另外，Alam等[14]認為影響營養(yǎng)素作用效果的關(guān)鍵因素是吸收，不同動物對不同來源的硒在腸道內(nèi)的吸收率是不同的.

飼料中硒水平對凡納濱對蝦體成分的影響表明，硒攝入的增加，增加了蝦體對飼料蛋白利用率，提高了蛋白質(zhì)效率.有研究表明，適量添加硒可提高草魚魚體和肌肉中的粗蛋白質(zhì)含量，降低粗脂肪含量[10].梁萌青等[4]研究發(fā)現(xiàn)，在鱸魚飼料中添加0.4 mg·kg-1硒可以提高魚體蛋白含量，但對脂肪、粗灰分和水分含量無顯著影響.儲霞玲等[15]在凡納濱對蝦飼料中聯(lián)合添加蛋氨酸硒和谷胱甘肽的試驗中發(fā)現(xiàn)，添加量0.1 mg·kg-1硒+120 mg·kg-1谷胱甘肽可顯著提高蝦體蛋白含量.本試驗結(jié)果表明，添加適量酵母硒可顯著提高全蝦體蛋白含量，對體脂肪含量的影響不顯著.與前人在添加硒可提高體蛋白上的研究結(jié)果類似，可能是硒的添加影響了機體對蛋白的代謝，具體原因需做進一步的研究.

硒的主要生物學功能是清除生物體內(nèi)過多的活性氧自由基，保護細胞膜的正常功能，防止細胞和亞細胞膜受到過氧化物的破壞.研究表明動物體通過抗氧化或自由基防御系統(tǒng)能有效地清除脂質(zhì)過氧化物等活性氧，并終止自由基鏈式反應，從而對脂質(zhì)過氧化作用的損傷進行防御.肝胰腺GSH-Px、T-AOC、 SOD 活性和 MDA 含量是反映機體抗氧化能力的重要指標.本試驗結(jié)果表明，飼料中添加適量酵母硒可提高凡納濱對蝦機體抗氧化能力，但未達到顯著水平，這與趙吉偉等[11]在虹鱒上研究結(jié)論相似.有學者發(fā)現(xiàn)在飼料中添加適量有機硒對動物的生長和抗氧化性能有顯著影響[16-17]，這些添加硒對養(yǎng)殖動物抗氧化能力的研究結(jié)果均與本試驗的結(jié)果有所不同.表明不同養(yǎng)殖對象對硒源的吸收和機體抗氧化能力方面存在很大的差異.本試驗結(jié)果說明，在凡納濱對蝦飼料中補充添加適量的硒對機體抗氧化能力的改善有一定的促進作用.

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【責任編輯柴 焰】

EffectsofyeastseleniumonthegrowthandantioxidativeperformanceinLitopenaeusvannamei

LI Xiaoxia1, CHEN Feng1, PAN Qing1, CHEN Cuiying1, TAN Yuwen1, LEI Xiaoting1, CAO Junming2

(1 College of Animal Science, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China;2 Institute of Animal Science, Guangdong Academy of Agricultural Sciences, Guangzhou 510640, China)

【Objective】 The effects of dietary yeast selenium on the growth and antioxidant performance were studied inLitopenaeusvannamei.【Method】 Seven hundred and twenty healthyLitopenaeusvannameiwith an initial average body mass of (0.41±0.01) g were randomly stocked into 6 groups with 3 replicates per group and 40 shrimps per replicate in re-circulated water system.The basal diet was supplemented with 0, 0.15, 0.30, 0.45, 0.60 and 1.00 mg·kg-1selenium (yeast selenium) respectively and these shrimps were fed with 6 semi-purified diets containing graded levels of 0.25, 0.41, 0.56, 0.68,0.84,1.20 mg·kg-1of selenium, respectively for 56 d.【Result and conclusion】 The results showed that mass gain rate (MGR), specific growth rate (SGR), feed conversion rate (FCR), survival rate (SR) had no significant difference among all groups (P>0.05), but with the increase of yeast selenium levels, MGR and SGR increased and the highest value was found in the 0.84 mg·kg-1group.The total antioxidative capacity (T-AOC) and superoxide dismutase (SOD) of shrimp in hepstopsncreas were higher than those of the control group, while the malondialdehyde (MDA) content was lower than that of the control group.But there were no significant differences (P>0.05).A quadratic linear regression analysis showed that using MGR and SGR as response criteria in cultured condition, the optimum dietary selenium content for the highest growth inLitopenaeusvannameiwas 0.98 mg·kg-1of dietary mass.

Litopenaeusvannamei; yeast selenium; growth; antioxidative performance

2013- 09- 04優(yōu)先出版時間2014- 09- 30

優(yōu)先出版網(wǎng)址：http:∥www.cnki.net/kcms/detail/44.1110.S.20141003.1249.022.html

李小霞(1985—)，女，博士研究生，E-mail：852551793@qq.com ；通信作者：潘 慶(1969—)，女，教授，博士，E-mail：qpan@scau.edu.cn

廣東省自然科學基金團隊項目(10351064001000000)

李小霞， 陳 鋒， 潘 慶，等.酵母硒對凡納濱對蝦生長和抗氧化性能的影響[J].華南農(nóng)業(yè)大學學報，2014,35(6):108- 112.

S963.73

A

1001- 411X(2014)06- 0108- 05