董真　金鐸　林家琪　展天松　顧敏　焦庫(kù)華　王彥紅　劉文博

摘要：從揚(yáng)州大學(xué)轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)兔中分離到一株革蘭氏陰性桿菌，經(jīng)鑒別培養(yǎng)和生化特性鑒定，確定為大腸桿菌，并進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，該菌株對(duì)氯霉素和卡那霉素等抗生素高度敏感，對(duì)復(fù)方新諾明和諾氟沙星等抗生素不敏感。

關(guān)鍵詞：大腸桿菌；分離；鑒定；防治

中圖分類號(hào)：S858.291文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1007-273X（2014）05-0005-02

兔大腸桿菌是大腸桿菌中某些致病性菌株引起的兔感染性疾病的總稱。近年來(lái)，隨著養(yǎng)兔業(yè)的發(fā)展，兔大腸桿菌病已成為危害養(yǎng)兔業(yè)的主要傳染病之一。該病是由致病性大腸桿菌及其毒素引起的一種暴發(fā)性、死亡率很高的仔兔腸道性傳染病[1]。該病一年四季均可發(fā)生，陰雨潮濕和秋末春初等氣候多變季節(jié)多發(fā)，多侵害斷奶前后幼兔，發(fā)病率和死亡率較高，成年兔也有發(fā)生[2]。而轉(zhuǎn)基因動(dòng)物由于飼養(yǎng)條件好，該類疾病未見(jiàn)報(bào)道，本文報(bào)道揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院就診的一例轉(zhuǎn)基因兔的大腸桿菌感染，并進(jìn)行了大腸桿菌分離和鑒定。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1病料來(lái)源2014年3月，揚(yáng)州大學(xué)某實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)了一只轉(zhuǎn)基因兔異常死亡，死亡前2～3 d表現(xiàn)為腹部臌脹，精神沉郁，食欲減退，糞便細(xì)小且兩頭較尖或成串狀，外包透明膠凍狀黏液。隨后表現(xiàn)為劇烈腹瀉，糞便呈稀水樣。剖檢后發(fā)現(xiàn)其喉部和氣管有出血點(diǎn)，肺水腫，脾腫大，腸系膜淋巴結(jié)水腫，腎臟有點(diǎn)狀出血，腸道充氣，內(nèi)有出血點(diǎn)，并伴有水樣、膠凍樣液體。臨床診斷疑為大腸桿菌感染，需進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.1.2培養(yǎng)基普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血液瓊脂平板、麥康凱平板。

1.1.3生化發(fā)酵管葡萄糖、麥芽糖、乳糖、木糖、果糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、硫化氫、尿素。

1.1.4藥敏紙片藥敏紙片有強(qiáng)力霉素（300 μg/片），慶大霉素（10 μg/片），氯霉素（30 μg/片），鏈霉素（10 μg/片），痢特靈（300 μg/片），丁胺卡那霉素（30 μg/片），諾氟沙星（10 μg/片），卡那霉素（30 μg/片），復(fù)方新諾明（23.75 μg/片）。藥敏紙片均購(gòu)于杭州微生物試劑有限公司，操作方法和判定標(biāo)準(zhǔn)參照公司操作方法與標(biāo)準(zhǔn)。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1分離培養(yǎng)取死亡病兔的心、肝、脾、肺及腎臟內(nèi)容物，分別劃線接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血液瓊脂平板、麥康凱平板，37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h觀察并記錄結(jié)果。將純化后的細(xì)菌涂片，革蘭氏染色后鏡檢。

1.2.2生化鑒定試驗(yàn)將純化后的菌落接種于各生化發(fā)酵管中，37 ℃培養(yǎng) 5～7 d，觀察并記錄結(jié)果。同時(shí)按常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行IMVIC試驗(yàn)。

1.2.3藥敏試驗(yàn)采用紙片瓊脂擴(kuò)散法，將純化后的細(xì)菌以劃線方式均勻致密涂布于普通平皿培養(yǎng)基上，取藥敏片貼到平皿培養(yǎng)基表面（為了使能準(zhǔn)確的觀察結(jié)果，要將藥敏片能有規(guī)律的分布于平皿培養(yǎng)基上），將平皿培養(yǎng)基置于37 ℃溫箱中培養(yǎng)24 h后，觀察并記錄結(jié)果。

2結(jié)果與分析

2.1細(xì)菌分離及培養(yǎng)特性

該菌呈短桿狀，兩端鈍圓，革蘭氏染色呈陰性。兼性厭氧，在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上表現(xiàn)為乳白色且表面光滑的圓形菌落，菌落邊緣整齊，表面和背面一致。在血平板中呈灰白色，表面光滑。在麥康凱平板中呈粉紅色。

摘要：從揚(yáng)州大學(xué)轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)兔中分離到一株革蘭氏陰性桿菌，經(jīng)鑒別培養(yǎng)和生化特性鑒定，確定為大腸桿菌，并進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，該菌株對(duì)氯霉素和卡那霉素等抗生素高度敏感，對(duì)復(fù)方新諾明和諾氟沙星等抗生素不敏感。

關(guān)鍵詞：大腸桿菌；分離；鑒定；防治

中圖分類號(hào)：S858.291文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1007-273X（2014）05-0005-02

兔大腸桿菌是大腸桿菌中某些致病性菌株引起的兔感染性疾病的總稱。近年來(lái)，隨著養(yǎng)兔業(yè)的發(fā)展，兔大腸桿菌病已成為危害養(yǎng)兔業(yè)的主要傳染病之一。該病是由致病性大腸桿菌及其毒素引起的一種暴發(fā)性、死亡率很高的仔兔腸道性傳染病[1]。該病一年四季均可發(fā)生，陰雨潮濕和秋末春初等氣候多變季節(jié)多發(fā)，多侵害斷奶前后幼兔，發(fā)病率和死亡率較高，成年兔也有發(fā)生[2]。而轉(zhuǎn)基因動(dòng)物由于飼養(yǎng)條件好，該類疾病未見(jiàn)報(bào)道，本文報(bào)道揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院就診的一例轉(zhuǎn)基因兔的大腸桿菌感染，并進(jìn)行了大腸桿菌分離和鑒定。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1病料來(lái)源2014年3月，揚(yáng)州大學(xué)某實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)了一只轉(zhuǎn)基因兔異常死亡，死亡前2～3 d表現(xiàn)為腹部臌脹，精神沉郁，食欲減退，糞便細(xì)小且兩頭較尖或成串狀，外包透明膠凍狀黏液。隨后表現(xiàn)為劇烈腹瀉，糞便呈稀水樣。剖檢后發(fā)現(xiàn)其喉部和氣管有出血點(diǎn)，肺水腫，脾腫大，腸系膜淋巴結(jié)水腫，腎臟有點(diǎn)狀出血，腸道充氣，內(nèi)有出血點(diǎn)，并伴有水樣、膠凍樣液體。臨床診斷疑為大腸桿菌感染，需進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.1.2培養(yǎng)基普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血液瓊脂平板、麥康凱平板。

1.1.3生化發(fā)酵管葡萄糖、麥芽糖、乳糖、木糖、果糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、硫化氫、尿素。

1.1.4藥敏紙片藥敏紙片有強(qiáng)力霉素（300 μg/片），慶大霉素（10 μg/片），氯霉素（30 μg/片），鏈霉素（10 μg/片），痢特靈（300 μg/片），丁胺卡那霉素（30 μg/片），諾氟沙星（10 μg/片），卡那霉素（30 μg/片），復(fù)方新諾明（23.75 μg/片）。藥敏紙片均購(gòu)于杭州微生物試劑有限公司，操作方法和判定標(biāo)準(zhǔn)參照公司操作方法與標(biāo)準(zhǔn)。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1分離培養(yǎng)取死亡病兔的心、肝、脾、肺及腎臟內(nèi)容物，分別劃線接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血液瓊脂平板、麥康凱平板，37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h觀察并記錄結(jié)果。將純化后的細(xì)菌涂片，革蘭氏染色后鏡檢。

1.2.2生化鑒定試驗(yàn)將純化后的菌落接種于各生化發(fā)酵管中，37 ℃培養(yǎng) 5～7 d，觀察并記錄結(jié)果。同時(shí)按常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行IMVIC試驗(yàn)。

1.2.3藥敏試驗(yàn)采用紙片瓊脂擴(kuò)散法，將純化后的細(xì)菌以劃線方式均勻致密涂布于普通平皿培養(yǎng)基上，取藥敏片貼到平皿培養(yǎng)基表面（為了使能準(zhǔn)確的觀察結(jié)果，要將藥敏片能有規(guī)律的分布于平皿培養(yǎng)基上），將平皿培養(yǎng)基置于37 ℃溫箱中培養(yǎng)24 h后，觀察并記錄結(jié)果。

2結(jié)果與分析

2.1細(xì)菌分離及培養(yǎng)特性

該菌呈短桿狀，兩端鈍圓，革蘭氏染色呈陰性。兼性厭氧，在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上表現(xiàn)為乳白色且表面光滑的圓形菌落，菌落邊緣整齊，表面和背面一致。在血平板中呈灰白色，表面光滑。在麥康凱平板中呈粉紅色。

摘要：從揚(yáng)州大學(xué)轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)兔中分離到一株革蘭氏陰性桿菌，經(jīng)鑒別培養(yǎng)和生化特性鑒定，確定為大腸桿菌，并進(jìn)行了藥敏試驗(yàn)。藥敏試驗(yàn)結(jié)果表明，該菌株對(duì)氯霉素和卡那霉素等抗生素高度敏感，對(duì)復(fù)方新諾明和諾氟沙星等抗生素不敏感。

關(guān)鍵詞：大腸桿菌；分離；鑒定；防治

中圖分類號(hào)：S858.291文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：B文章編號(hào)：1007-273X（2014）05-0005-02

兔大腸桿菌是大腸桿菌中某些致病性菌株引起的兔感染性疾病的總稱。近年來(lái)，隨著養(yǎng)兔業(yè)的發(fā)展，兔大腸桿菌病已成為危害養(yǎng)兔業(yè)的主要傳染病之一。該病是由致病性大腸桿菌及其毒素引起的一種暴發(fā)性、死亡率很高的仔兔腸道性傳染病[1]。該病一年四季均可發(fā)生，陰雨潮濕和秋末春初等氣候多變季節(jié)多發(fā)，多侵害斷奶前后幼兔，發(fā)病率和死亡率較高，成年兔也有發(fā)生[2]。而轉(zhuǎn)基因動(dòng)物由于飼養(yǎng)條件好，該類疾病未見(jiàn)報(bào)道，本文報(bào)道揚(yáng)州大學(xué)動(dòng)物醫(yī)院就診的一例轉(zhuǎn)基因兔的大腸桿菌感染，并進(jìn)行了大腸桿菌分離和鑒定。

1材料與方法

1.1試驗(yàn)材料

1.1.1病料來(lái)源2014年3月，揚(yáng)州大學(xué)某實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)了一只轉(zhuǎn)基因兔異常死亡，死亡前2～3 d表現(xiàn)為腹部臌脹，精神沉郁，食欲減退，糞便細(xì)小且兩頭較尖或成串狀，外包透明膠凍狀黏液。隨后表現(xiàn)為劇烈腹瀉，糞便呈稀水樣。剖檢后發(fā)現(xiàn)其喉部和氣管有出血點(diǎn)，肺水腫，脾腫大，腸系膜淋巴結(jié)水腫，腎臟有點(diǎn)狀出血，腸道充氣，內(nèi)有出血點(diǎn)，并伴有水樣、膠凍樣液體。臨床診斷疑為大腸桿菌感染，需進(jìn)一步進(jìn)行實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)。

1.1.2培養(yǎng)基普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血液瓊脂平板、麥康凱平板。

1.1.3生化發(fā)酵管葡萄糖、麥芽糖、乳糖、木糖、果糖、蔗糖、山梨醇、甘露醇、硫化氫、尿素。

1.1.4藥敏紙片藥敏紙片有強(qiáng)力霉素（300 μg/片），慶大霉素（10 μg/片），氯霉素（30 μg/片），鏈霉素（10 μg/片），痢特靈（300 μg/片），丁胺卡那霉素（30 μg/片），諾氟沙星（10 μg/片），卡那霉素（30 μg/片），復(fù)方新諾明（23.75 μg/片）。藥敏紙片均購(gòu)于杭州微生物試劑有限公司，操作方法和判定標(biāo)準(zhǔn)參照公司操作方法與標(biāo)準(zhǔn)。

1.2試驗(yàn)方法

1.2.1分離培養(yǎng)取死亡病兔的心、肝、脾、肺及腎臟內(nèi)容物，分別劃線接種于普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板、血液瓊脂平板、麥康凱平板，37 ℃恒溫培養(yǎng)24 h觀察并記錄結(jié)果。將純化后的細(xì)菌涂片，革蘭氏染色后鏡檢。

1.2.2生化鑒定試驗(yàn)將純化后的菌落接種于各生化發(fā)酵管中，37 ℃培養(yǎng) 5～7 d，觀察并記錄結(jié)果。同時(shí)按常規(guī)實(shí)驗(yàn)方法進(jìn)行IMVIC試驗(yàn)。

1.2.3藥敏試驗(yàn)采用紙片瓊脂擴(kuò)散法，將純化后的細(xì)菌以劃線方式均勻致密涂布于普通平皿培養(yǎng)基上，取藥敏片貼到平皿培養(yǎng)基表面（為了使能準(zhǔn)確的觀察結(jié)果，要將藥敏片能有規(guī)律的分布于平皿培養(yǎng)基上），將平皿培養(yǎng)基置于37 ℃溫箱中培養(yǎng)24 h后，觀察并記錄結(jié)果。

2結(jié)果與分析

2.1細(xì)菌分離及培養(yǎng)特性

該菌呈短桿狀，兩端鈍圓，革蘭氏染色呈陰性。兼性厭氧，在普通營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上表現(xiàn)為乳白色且表面光滑的圓形菌落，菌落邊緣整齊，表面和背面一致。在血平板中呈灰白色，表面光滑。在麥康凱平板中呈粉紅色。