孫響波，于妮娜，張法榮

(1.山東中醫(yī)藥大學，濟南 250011；2.山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院，濟南 250011)

慢性腎衰竭(CRF)患者存在著嚴重的血液流變異常，由于腎衰時紅細胞減少,導致全血黏度下降，血漿黏度與血BUN、Scr呈正相關，高脂血癥可致血漿黏度增高，血漿黏度的增高可致血液流動減慢、腎血流減少，加速腎功能惡化，可見血液流變學異?？蓪е履I功能衰竭進一步加劇，突出的臨床特點是呈低全血黏度、高血漿黏度綜合征。張法榮等[1]黑地黃丸治療慢性腎衰竭的臨床觀察中發(fā)現(xiàn)，黑地黃丸治療慢性腎衰竭總有效率為80.56%，黑地黃丸可降低Scr水平，升高Ccr水平。在臨床工作中，筆者也觀察到古方黑地黃丸能具有有效改善CRF患者臨床癥狀，延緩病情發(fā)展，保護腎臟功能的作用。因此建立5/6腎切除腎衰大鼠模型，通過血液流變學相關指標進一步探討該方對CRF腎功能的保護機制。

1 實驗材料

黑地黃丸以熟地黃、蒼術、干姜、大棗為原料用泛制法制成水丸(300丸/瓶)，由本院藥劑科制得；尿毒清(5g/袋，批號：20120314，廣州康臣藥業(yè)有限責任公司)；洛丁新(10 mg/片，批號:x0264，北京諾華制藥有限公司)；全自動血液流變快測儀(FASCO系列-3010D，重大維多科技有限公司)；水合氯醛(50 mL/瓶，批號：20120304，山東大學齊魯醫(yī)院)。SPF級Wistar雄性大鼠[許可證號：SCXK(魯)20090001]，體質量(200±20)g，由山東大學實驗動物中心提供。

2 實驗方法

2.1 分組與給藥 參照文獻[2]建立模型。隨機將造模成功的大鼠分為模型組,尿毒清組,洛丁新組，黑地黃丸高、中、低劑量組，正常組共7組，每組大鼠10只。黑地黃丸高、中、低劑量組分別給予黑地黃丸(0.648、0.324、0.162 g/100 g·d),尿毒清組給予尿毒清顆粒(0.225 g/100 g·d)，洛丁新組灌胃給予洛丁新片(0.09 mg/100 g·d)，于造模成功后溫水溶解灌胃給藥(1 mL/100 g)，正常組與模型組給予等量生理鹽水灌胃，1次/d,共12周。

2.2 取材與檢測方法 實驗從第12周的最后一天21：00禁食不禁水12 h，次日全部大鼠稱體質量，用水合氯醛腹腔注射麻醉1 mL/100 g，打開腹腔，經腹主動脈采血，取血置于肝素抗凝管中，緩慢搖勻后快速送檢,采用FASCO系列-3010D型全自動血液流變快測儀測定HS、LS、PV、FIB、PCV、ESR的變化，檢測工作由山東中醫(yī)藥大學附屬醫(yī)院檢驗科完成。

3 實驗結果

3.1 黑地黃丸對腎衰模型大鼠HS、LS、PV、FIB的影響 與模型組比,尿毒清組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠HS顯著升高；與尿毒清組比，洛丁新組、黑地黃丸低劑量組大鼠HS明顯降低，黑地黃丸高劑量組大鼠HS顯著升高；與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠HS顯著升高。與模型組比，尿毒清組、洛丁新組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠LS顯著升高；與尿毒清組比，黑地黃丸高劑量組大鼠LS明顯升高，洛丁新組、黑地黃丸中、低劑量組大鼠LS顯著降低，與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠LS顯著升高。與模型組比，尿毒清組、洛丁新組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠PV顯著降低；與尿毒清組比，洛丁新組、黑地黃丸中、低劑量組大鼠PV顯著升高，黑地黃丸高劑量組大鼠PV明顯升高；與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠PV顯著降低，黑地黃丸低劑量組大鼠PV明顯升高。與模型組比，尿毒清組、洛丁新組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠FIB含量顯著降低;與尿毒清組比，洛丁新組、黑地黃丸中、低劑量組大鼠FIB含量明顯升高；黑地黃丸高劑量組大鼠FIB含量顯著降低；與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠FIB含量顯著降低，黑地黃丸中、低劑量組大鼠FIB含量明顯升高。見表1。

表1 黑地黃丸對腎衰模型大鼠全血黏度、PV、FIB的影響

注：與模型組比較，##P<0.01；與尿毒清組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01;與洛丁新組比較，△P<0.05，△△P<0.01。

3.2 黑地黃丸對腎衰模型大鼠PCV、ESR的影響 與模型組比，尿毒清組(P<0.01)、洛丁新組(P<0.01)、黑地黃丸高劑量組(P<0.01)、黑地黃丸中劑量組(P<0.05)大鼠PCV明顯升高；與尿毒清組比，洛丁新組、黑地黃丸高劑量組大鼠PCV顯著升高(P<0.01)，黑地黃丸低劑量組大鼠PCV明顯降低(P<0.05);與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠PCV明顯升高(P<0.05)，黑地黃丸中、低劑量組大鼠PCV顯著降低(P<0.01)。與模型組比,尿毒清組、洛丁新組、黑地黃丸高、中、低劑量組大鼠ESR顯著降低(P<0.01)；與尿毒清組比,洛丁新組、黑地黃丸中、低劑量組大鼠ESR顯著升高(P<0.01)，黑地黃丸高劑量組大鼠ESR明顯降低(P<0.05)；與洛丁新組比,黑地黃丸高劑量組大鼠ESR顯著降低(P<0.01)，黑地黃丸低劑量組大鼠ESR顯著升高(P<0.01)。見表2。

表2 黑地黃丸對腎衰模型大鼠PCV、ESR的影響

注：與模型組比較，#P<0.05，##P<0.01；與尿毒清組比較，▲P<0.05，▲▲P<0.01；與洛丁新組比較，△P<0.05，△△P<0.01。

4 討論

黑地黃丸出自《素問病機氣宜保命集》。全方由蒼術一斤(米泔浸)，熟地黃一斤，川姜冬一兩、夏五錢，春七錢組成。喻嘉言曰：“治脾腎兩臟之虛，而去脾濕，除腎燥，兩擅其長，超超元箸。”功用補脾益腎，主治脾腎不足，房室虛損，形瘦無力，面多青黃而無常色，舌質淡胖，脈虛細弱及血虛久痔。黃仁發(fā)等[3]觀察了以黑地黃湯為基礎的怡腎湯對慢性腎衰竭患者的臨床療效及對免疫功能的影響，證明怡腎湯能有效減少蛋白尿、改善腎功能、提高機體免疫功能，從而延緩腎衰竭進程。CRF時,由于毒素對紅細胞膜的損害，使紅細胞的變形能力降低，紅細胞聚集性增強，難以通過微血管，造成腎臟微循環(huán)障礙，腎組織缺血缺氧，加速腎功能惡化。吳開慧等[4]在血流變學的測定中,發(fā)現(xiàn)慢性腎衰患者其紅細胞壓積和全血黏度均明顯減低，患者群的血漿黏度大致正常，紅細胞指數(shù)下降，血漿黏度與血漿成分有關，慢性腎衰患者的代謝產物潴留，導致了血漿成份的變化，紅細胞免疫功能與之呈高度的負相關，說明了血漿中的某些成份可能對紅細胞免疫功能有抑制作用。CRF時血液流變學的異常主要表現(xiàn)為紅細胞壓積及全血黏度降低,血漿黏度及血液還原黏度增高，突出特點是呈低全血黏度、高血漿黏度綜合征，血液流變學異常是多種因素相互作用的結果[5]。王吉永[6]研究發(fā)現(xiàn)CRF患者由于血液黏滯促使腎小球內高壓,從而造成基底膜破裂，致使腎小球受損。同時，紅細胞蛋白糖基化，其形態(tài)發(fā)生改變，易在狹窄的血管內聚集，從而加重血液瘀滯，隨著腎功能的逐漸衰退形成惡性循環(huán)，致使血液流變學指標變化更加異常。纖維蛋白原沉積是腎臟疾病進展的重要原因，纖維蛋白原刺激上皮細胞增殖，是形成新月體病變的基礎，易導致腎小球硬化,進而失去功能[7]。王勇[8]認為脾腎陽衰，氣化不利、尿毒內停，氣血瘀滯生化失常,臟腑功能失養(yǎng)而衰竭，尿毒不能排出體外聚積體內而發(fā)病。臨床以脾腎陽衰，毒積血瘀較為常見，血瘀證占標證之首。黑地黃丸治脾腎兩臟之虛，燥脾濕，復脾之統(tǒng)攝、胃之化源；除腎燥，令腎之開合，使?jié)穸净?，瘀濁消，全方集補、潤、溫、養(yǎng)于一方，且“丸者緩也”，吸收慢，作用持久。通過實驗發(fā)現(xiàn)，與尿毒清組比，黑地黃丸高劑量組大鼠HS、LS明顯升高(P>0.05)黑地黃丸高劑量組大鼠PV明顯升高(P>0.05),黑地黃丸高(P<0.01)、中(P<0.05)劑量組大鼠PCV明顯升高，黑地黃丸高劑量組大鼠FIB(P<0.01)、ESR(P<0.05)明顯降低；與洛丁新組比，黑地黃丸高劑量組大鼠HS(P<0.01)、LS(P<0.01)、PCV(P<0.05)明顯升高，且大鼠PV、FIB、ESR顯著降低(P<0.01),由此可見黑地黃丸高劑量組效果最佳，其對腎功能的保護機制可能與調節(jié)HS、LS、PVC，下調PV，抑制FIB合成，降低ESR水平，從而改善腎衰大鼠血液流變學相關。

[1]張法榮,王芳,付海霞,等.黑地黃丸治療慢性腎衰竭的臨床觀察[J].中國中西醫(yī)結合腎病雜志,2009,2(10):156.

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[8]王勇.補陽活血法治療慢性腎功能衰竭的體會[J].現(xiàn)代中醫(yī)藥,2009,29(6):21-22.