賈振軍  苗新東  臧學(xué)良  郭雪潔

[摘要] 目的 分析胃炎組織、不典型增生組織和癌組織中Ki67和p16的表達(dá)情況，探討其與胃組織癌變的關(guān)系及作為早期癌變生物學(xué)標(biāo)志的可能性。 方法 應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法對22例胃炎組織、80例不典型增生組織及6O例胃癌組織中的Ki67和pl6的表達(dá)情況進(jìn)行檢測。 結(jié)果 在胃炎組織、不典型增生組織及胃癌組織中Ki67則呈遞增趨勢，而pl6的表達(dá)陽性率呈遞減趨勢；結(jié)果顯示Ki67和pl6表達(dá)陽性率與胃黏膜組織從胃炎至不典型增生再至癌變這一過程均相關(guān)（P＜0.05）。Ki67的表達(dá)與胃癌的Lauren分型、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)，與分化程度無關(guān)。Pl6的表達(dá)與胃癌的Lauren分型、分化程度、浸潤深度無關(guān)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。Ki67和pl6的表達(dá)在胃癌組織中呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05）。 結(jié)論Ki67和pl6的表達(dá)異常與胃癌的癌變過程相關(guān)，兩者有可能成為胃組織早期癌變的分子標(biāo)記物。

[關(guān)鍵詞] 胃炎；不典型增生；胃癌；Ki67；p16

[中圖分類號] R735.2???[文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A???[文章編號] 2095-0616（2014）09-32-05

Exploration of expression of Ki67 and pl6 in gastric cancer and their correlation

JIA?Zhenjun??MIAO?Xindong??ZANG?Xueliang??GUO?Xuejie

Department of Pathology,Shandong Aluminum Company Hospital,Zibo 255069,China

[Abstract] Objective To analyze the expression situation of Ki67 and p16 in gastritis tissue, dysplasia tissue and cancer tissue and explore their relationship to gastric tissue canceration and their possibility of being biological markers of early canceration. Methods The immunohistochemical SP method was used to detect the expression situation of Ki67 and p16 in 22 cases of gastritis tissue,80 cases of dysplasia tissue and 60 cases of cancer tissue. Results In gastritis tissue, dysplasia tissue and cancer tissue,Ki67 presented an ascending trend and the positive expression rate of p16 presented a descending trend.The results showed that the positive expression rates of Ki67 and p16 and the gastric mucosal tissue were correlated to each other from gastric cancer to dysplasia and from dysplasia to canceration(P＜0.05).The expression of Ki67 was correlated to the Lauren typing,invasion depth and lymphatic metastasis of gastric cancer,but not correlated to the differentiation degree.The expression of p16 was correlated to the Lauren typing, differentiation degree and invasion depth of gastric cancer,but not correlated to the lymphatic metastasis. The expression of Ki67 and p16 in gastric cancer tissue were negatively correlated(P＜0.05). Conclusion The abnormal expression of Ki67 and p16 relates to the canceration process of gastric cancer and both may become the molecular markers of the early canceration of gastric tissue.

[Key words] Gastritis;Dysplasia;Gastric cancer;Ki67;p16

胃癌的發(fā)生和發(fā)展涉及許多腫瘤抑制基因和腫瘤相關(guān)基因[1]，增殖核抗原Ki67是與細(xì)胞周期密切相關(guān)的細(xì)胞增殖標(biāo)記物，其增殖指數(shù)與許多腫瘤的分化程度、浸潤轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)。p16既是正常細(xì)胞周期的有效調(diào)控者，又是抑制腫瘤生長的關(guān)鍵因子，該蛋白通過阻止Rb蛋白的磷酸化，而抑制細(xì)胞分裂、增殖。當(dāng)p16蛋白不能正常表達(dá)時(shí)，可能是p16基因發(fā)生純合缺失、DNA異常甲基化、點(diǎn)突變、雜合缺失，使細(xì)胞分裂、增殖失控而發(fā)生癌變。我們承擔(dān)了慢性胃炎與胃癌及鄰癌黏膜的對比研

究項(xiàng)目，目前正在大量搜集資料，本研究采用免疫組化SP法對22例胃炎、80例不典型增生及60例胃癌組織中的增殖核抗原Ki67和抑癌基因p16蛋白進(jìn)行了回顧性檢測，旨在探討Ki67與p16蛋白在胃炎、不典型增生及胃癌中的表達(dá)變化并探討其意義。

1?資料與方法

1.1?一般資料

選用山東鋁業(yè)公司醫(yī)院病理科2010年12月～2013年12月的胃鏡活檢組織102例，胃癌手術(shù)切除標(biāo)本60例。男103例，女59例；平均年齡53.4歲。標(biāo)本分為：（1）胃炎組織22例；（2）胃不典型增生組織80例；（3）胃癌組織60例；組織類型包括腸型（高分化腺癌、中分化腺癌）20例和彌漫型（低分化腺癌、黏液腺癌、印戒細(xì)胞癌、未分化癌）40例。

1.2?方法

所有標(biāo)本均經(jīng)10%中性福爾馬林液固定，3μm連續(xù)切片，分別作HE和免疫組織化學(xué)染色。常規(guī)HE染色，觀察胃癌的病理形態(tài)、浸潤深度、脈管浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移等。單克隆抗體Ki67、p16及PV9000檢測試劑盒均購自北京中杉金橋生物技術(shù)有限公司，免疫組織化學(xué)染色采用SP法。切片脫蠟至水，檸檬酸（pH6.0）高壓蒸汽修復(fù)100℃、5min，PBS沖洗2min×3次；3%H2O2去離子水孵育室溫15min，PBS沖洗2min×3次；滴加一抗Ki67和p16室溫或37℃孵育1~2h或4℃冰箱過夜，PBS沖洗2min×3次；滴加通用型IgG抗體-HRP多聚體，室溫或37℃孵育15min，PBS沖洗2min×3次；DAB顯色，在顯微鏡下觀察終止顯色；復(fù)染，中性樹膠封片，光學(xué)顯微鏡下觀察。每批染色均設(shè)立陽性、陰性對照，用已知陽性切片作為陽性對照，以PBS代替一抗作為陰性對照。

endprint

1.3?免疫組化結(jié)果判讀

Ki67細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。p16蛋白陽性定位主要在細(xì)胞核，也可在細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性細(xì)胞。取3個(gè)高倍鏡視野中陽性細(xì)胞所占的細(xì)胞百分比的平均值，根據(jù)陽性腫瘤細(xì)胞占全部腫瘤細(xì)胞的比例將其分為：（１）陽性細(xì)胞數(shù)＜10%為陰性（—）；（２）陽性細(xì)胞數(shù)占10%～25%為（+）；（３）陽性細(xì)胞占25%～50%為（++）；（４）陽性細(xì)胞＞50%為（+++）。

圖1??Ki67在胃炎組織的表達(dá)（40×10）

圖2??Ki67 在胃不典型增生組織的表達(dá)（40×10）

圖3??Ki67 在胃癌組織的表達(dá)（40×10）

圖4??p16在胃炎組織的表達(dá)（40×10）

圖5??p16 在胃腸化生組織的表達(dá)（40×10）

表1??胃炎組織、不典型增生組織和癌組織中Ki67與pl6的表達(dá)

組別 n Ki67表達(dá)強(qiáng)度（例） Ki67表達(dá)陽性率

（%） p16表達(dá)強(qiáng)度（例） p16表達(dá)陽性率

（%）

（-） （+） （++） （+++） （-） （+） （++） （+++）

胃炎組織 22 16 4 2 0 27.27 2 14 4 2 90.90

不典型增生 80 49 15 12 4 38.75 10 47 20 2 86.25

輕 26 18 4 4 0 30.77 2 14 8 1 88.46

中 30 20 5 4 1 33.33 4 17 8 1 86.67

重 24 11 6 4 3 54.17 4 16 4 0 83.33

胃癌組 60 17 27 9 5 71.67 32 22 6 0 46.67

表2??p16和Ki67表達(dá)與胃癌病理特征的關(guān)系

病理特征 n p16 ki67

缺失率[%（n）] x2 P 陽性率[%（n）] x2 P

Lauren分型 0.134 0.714＞0.05 10.506 0.001＜0.05

腸型 20 50.00（10） 45.00（9）

彌漫性 40 55.00（22） 85.00（34）

分化程度 3.839 0.147＞0.05 68.18（15） 1.037 0.595＞0.05

高 18 38.89（7） 66.67（12）

中 22 50.00（11） 68.18（15）

低 20 70.00（14） 80.00（16）

浸潤深度 0.834 0.361＞0.05 17.709 0.000＜0.05

漿膜內(nèi) 25 48.00（25） 68.00（17）

漿膜及漿膜外 35 57.14（20） 74.28（26）

淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移 5.757 0.016＜0.05 5.180 0.023＜0.05

無 25 44.00（11） 56.00（14）

有 35 60.00（21） 82.86（29）

圖6??p16 在胃癌組織的表達(dá)（40×10）

1.4?統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，行x2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2?結(jié)果

2.1?胃炎組織、不典型增生組織和癌組織中Ki67與pl6的表達(dá)情況

在胃炎中p16主要表達(dá)在固有腺體的細(xì)胞核和胞漿中，而Ki67則以腺體頸細(xì)胞核為主，從不典型增生開始分布失去規(guī)律。胃炎組織→胃不典型增生組織→胃癌組織中p16表達(dá)陽性率呈遞減趨勢（x2=19.840，P=0.000＜0.05），Ki67的表達(dá)陽性率則呈遞增趨勢（x2=27.054，P=0.000＜0.05）。見表1。

2.2?p16和Ki67表達(dá)與胃癌病理特征的關(guān)系

p16在胃癌組織中的總?cè)笔蕿?3.33%，與淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異顯著（P＜0.05），與胃癌的Lauren分型、分化程度及浸潤深度無顯著相關(guān)性。Ki67在胃癌組織中的總陽性表達(dá)率為71.67%，這與張艷紅等[2-3]，檢測Ki67在胃癌組織中的總陽性表達(dá)率分別為73.40%和73.53%相一致，與胃癌的Lauren分型、浸潤深度及淋巴結(jié)有無轉(zhuǎn)移在統(tǒng)計(jì)學(xué)上差異顯著（P＜0.05），和分化程度無顯著相關(guān)性。見表2。

2.3?p16和Ki67蛋白表達(dá)在胃癌組織中的相關(guān)性

在胃癌組織中p16和Ki67的表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性（P＜0.05）。見表3。

3?討論

胃癌是一類惡性上皮腫瘤，胃癌在生物學(xué)和遺

表3??p16和Ki67蛋白表達(dá)在胃癌組織中的相關(guān)性

Ki67表達(dá)強(qiáng)度 n p16表達(dá)強(qiáng)度（n） x2 P

（-） （+） （++） （+++）

（-） 17 5 9 3 0 60.000 0.000＜0.05

（+） 29 16 11 2 0

（++） 9 6 2 1 0

（+++） 5 5 0 0 0

傳學(xué)上具有多樣性，且病因?qū)W上也存在多種因素的改變，胃癌發(fā)生發(fā)展的特征是因?yàn)橄忍旌秃筇斓淖兓绊懥税┗颉⒛[瘤抑制基因和DNA的錯(cuò)配修復(fù)（MMR）是多階段綜合作用的復(fù)雜過程，而癌基因的激活和抑癌基因的失活在胃癌的發(fā)生中發(fā)揮了重用[4]。p16基因定位于人第9號染色體21區(qū)域，該蛋白由148個(gè)氨基酸構(gòu)成，分子量為15.8kDa，作用在細(xì)胞周期過程中，使細(xì)胞周期運(yùn)行與環(huán)境和發(fā)育相一致，編碼一種細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶4（CDK4）的抑制蛋白，其表達(dá)產(chǎn)物p16蛋白為細(xì)胞周期負(fù)調(diào)控蛋白，通過抑制細(xì)胞素Dl與CDK4結(jié)合，從而阻止Rb蛋白磷酸化，最終使細(xì)胞停滯于G0期或G1期，而抑制細(xì)胞分裂、增殖。p16基因變異主要有純合缺失、DNA異常甲基化、點(diǎn)突變、雜合缺失等。這些變化均可引起p16轉(zhuǎn)錄失活。p16基因表達(dá)減低有可能使癌細(xì)胞獲得某種生長優(yōu)勢，這與各種腫瘤細(xì)胞系中存在p16基因表達(dá)減低而具有生長優(yōu)勢的結(jié)果一致[5]。也與近年研究一致[6-7]。

本研究發(fā)現(xiàn)，p16蛋白在胃癌中的表達(dá)減低，表明p16基因可能參與了胃癌的發(fā)生發(fā)展[8]。應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法對胃組織中p16蛋白表達(dá)情況進(jìn)行研究，結(jié)果顯示其胃炎組織中陽性表達(dá)率為90.90%，這與部分學(xué)者檢測胃正常黏膜p16陽性表達(dá)分別為90.48%[9]、85.00%[10]相一致，在輕度不典型增生組織中表達(dá)陽性率88.46%、中度不典型增生組織中表達(dá)陽性率86.67%及重度不典型增生組織中表達(dá)陽性率83.33%依次減弱，胃癌組織表達(dá)陽性率46.67%最低，這與孫桂彬等[9]檢測胃癌組織中的p16結(jié)果相似，可見從胃炎黏膜上皮—不典型增生—胃癌的發(fā)展過程中p16的表達(dá)丟失逐漸積累（P＜0.01），說明p16蛋白表達(dá)異常降低主要開始于癌前病變和胃癌早期，不典型增生中已經(jīng)存在p16蛋白的表達(dá)異常，不典型增生可能是胃黏膜組織癌變的中間階段，p16陰性表達(dá)在胃癌惡性轉(zhuǎn)化和癌變過程中發(fā)揮重要作用。本研究結(jié)果顯示，p16的表達(dá)與胃癌的Lauren分型、浸潤深度及分化程度無關(guān)（P＞0.05），與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05），這與異常甲基化是p16基因失活的主要原因，p16基因甲基化狀態(tài)改變通常在組織惡變之前發(fā)生，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌組織中p16基因甲基化陽性率與無轉(zhuǎn)移組的有顯著性差異[11]相一致，這也與張修穩(wěn)等[12]研究的胃癌中p16在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移對比中有顯著差異相一致。因此，用免疫組化法檢測p16蛋白表達(dá)的異常是診斷胃癌及其癌前病變的可靠生物學(xué)標(biāo)志，也是判斷胃癌患者預(yù)后的指標(biāo)。Ki67在胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中起到了重要的作用[13]，Ki67是一種細(xì)胞周期相關(guān)蛋白，不與CDK結(jié)合，而作為DNA聚合酶的附屬蛋白，促進(jìn)DNA聚合酶延伸DNA，在S期濃度最高，常作為S期標(biāo)志物之一。

endprint

本研究結(jié)果顯示，從胃炎黏膜上皮—不典型增生—胃癌的發(fā)展過程中Ki67陽性表達(dá)分別為27.27%、38.75%、71.67%，呈逐漸增加趨勢（P＜0.01），Ki67在彌漫型胃癌中的表達(dá)陽性率顯著高于腸型胃癌，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌Ki67表達(dá)陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，提示Ki67標(biāo)記指數(shù)的增高暗示胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)性增高，癌的分化程度減低、浸潤深大增加。這與有些學(xué)者研究指出：癌細(xì)胞分化程度越低，以及伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Ki67表達(dá)越強(qiáng)[14]，Ki67表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[3]相一致。Ki67表達(dá)在胃癌及胃重度不典型增生時(shí)的表達(dá)均顯著高于胃良性組織，因而檢測表達(dá)有助于胃癌的早期診斷[15]，可作為胃癌患者一個(gè)獨(dú)立的預(yù)后因素[16]，有研究顯示ki67陽性表達(dá)率越高，胃癌分化類型越差，因而其預(yù)后越差[17]，Ki67高表達(dá)的胃癌患者存活率較低，Ki67被認(rèn)為是較可靠地全面反映細(xì)胞群體增殖活性的客觀指標(biāo)[18]，Ki67可以較好地反映胃癌細(xì)胞的增殖能力[19]，這與張艷紅等[2]研究Ki67陽性表達(dá)和胃癌是否轉(zhuǎn)移之間有顯著相關(guān)性，Ki67在低分化組的表達(dá)高于中高分化組相一致。

本實(shí)驗(yàn)表明，細(xì)胞增殖活性的改變在不典型增生階段就已經(jīng)發(fā)生，且增殖活性的改變與癌變過程相關(guān)，在腫瘤組織中Ki67表達(dá)越高，表明腫瘤細(xì)胞增殖越活躍，提示腫瘤生長越快[20]，表明惡性腫瘤中Ki67的表達(dá)遠(yuǎn)高于正常組織[21]。因此，檢測Ki67對鑒別一些交界性病變，具有重要的參考價(jià)值。從本實(shí)驗(yàn)對比結(jié)果表明胃癌中p16與Ki67兩者表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），利用免疫組化法檢測胃組織中p16與Ki67蛋白的異常表達(dá)，有助于癌及其癌前病變的早期發(fā)現(xiàn)。推測異常增殖的細(xì)胞中可能有p16抑癌基因的功能異常，Ki67基因的表達(dá)活躍，正常細(xì)胞增殖周期分為四個(gè)連續(xù)階段，即G1期（first gap phase，DNA合成前期）、S期（synthtic phase，DNA合成期）、G2期（second gap pjase，DNA合成后期）和M期（mitotic phase，有絲分裂期），p16主要作用于DNA合成前期至DNA合成期的過程中，Ki67則作用于DNA合成期，CDK受p16調(diào)控而不受Ki67的調(diào)控，兩方面對細(xì)胞惡變可能有不同途徑的協(xié)同促進(jìn)作用，說明胃癌是多基因異常的結(jié)果，具體作用機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：2014-03-10）

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本研究結(jié)果顯示，從胃炎黏膜上皮—不典型增生—胃癌的發(fā)展過程中Ki67陽性表達(dá)分別為27.27%、38.75%、71.67%，呈逐漸增加趨勢（P＜0.01），Ki67在彌漫型胃癌中的表達(dá)陽性率顯著高于腸型胃癌，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌Ki67表達(dá)陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，提示Ki67標(biāo)記指數(shù)的增高暗示胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)性增高，癌的分化程度減低、浸潤深大增加。這與有些學(xué)者研究指出：癌細(xì)胞分化程度越低，以及伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Ki67表達(dá)越強(qiáng)[14]，Ki67表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[3]相一致。Ki67表達(dá)在胃癌及胃重度不典型增生時(shí)的表達(dá)均顯著高于胃良性組織，因而檢測表達(dá)有助于胃癌的早期診斷[15]，可作為胃癌患者一個(gè)獨(dú)立的預(yù)后因素[16]，有研究顯示ki67陽性表達(dá)率越高，胃癌分化類型越差，因而其預(yù)后越差[17]，Ki67高表達(dá)的胃癌患者存活率較低，Ki67被認(rèn)為是較可靠地全面反映細(xì)胞群體增殖活性的客觀指標(biāo)[18]，Ki67可以較好地反映胃癌細(xì)胞的增殖能力[19]，這與張艷紅等[2]研究Ki67陽性表達(dá)和胃癌是否轉(zhuǎn)移之間有顯著相關(guān)性，Ki67在低分化組的表達(dá)高于中高分化組相一致。

本實(shí)驗(yàn)表明，細(xì)胞增殖活性的改變在不典型增生階段就已經(jīng)發(fā)生，且增殖活性的改變與癌變過程相關(guān)，在腫瘤組織中Ki67表達(dá)越高，表明腫瘤細(xì)胞增殖越活躍，提示腫瘤生長越快[20]，表明惡性腫瘤中Ki67的表達(dá)遠(yuǎn)高于正常組織[21]。因此，檢測Ki67對鑒別一些交界性病變，具有重要的參考價(jià)值。從本實(shí)驗(yàn)對比結(jié)果表明胃癌中p16與Ki67兩者表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），利用免疫組化法檢測胃組織中p16與Ki67蛋白的異常表達(dá)，有助于癌及其癌前病變的早期發(fā)現(xiàn)。推測異常增殖的細(xì)胞中可能有p16抑癌基因的功能異常，Ki67基因的表達(dá)活躍，正常細(xì)胞增殖周期分為四個(gè)連續(xù)階段，即G1期（first gap phase，DNA合成前期）、S期（synthtic phase，DNA合成期）、G2期（second gap pjase，DNA合成后期）和M期（mitotic phase，有絲分裂期），p16主要作用于DNA合成前期至DNA合成期的過程中，Ki67則作用于DNA合成期，CDK受p16調(diào)控而不受Ki67的調(diào)控，兩方面對細(xì)胞惡變可能有不同途徑的協(xié)同促進(jìn)作用，說明胃癌是多基因異常的結(jié)果，具體作用機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。

[參考文獻(xiàn)]

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[16] 葉斌，王西川，雷蕾,等.p53和Ki67在胃癌中的表達(dá)及其臨床意義[J].中國醫(yī)藥指南，2013，11（20）：69-71.

[17] 黃利，彭瓊，甘惠中，等.p53蛋白、ki-67抗原和表皮生長因子受體在胃癌組織的表達(dá)及意義[J].中國臨床保健雜志，2012，15（2）：153-156.

[18] 葛少華，劉寶瑞，錢曉萍.順鉑與熱療聯(lián)合對胃癌細(xì)胞系體外增殖抑制作用的研究[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志，2006，10（3）：4-7．

[19] 韓偉，楊迷玲，翟麗麗，等.胃癌中SPARC、TGFβ1和Ki-67的表達(dá)及意義[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志，2011，27（6）：594-597.

[20] 東方，何慶泗，孫國瑞，等.胃癌組織中Ki-67及CD34的表達(dá)及其臨床意義[J].中國現(xiàn)代普通外科進(jìn)展，2012，15（6）：451-454.

[21] 栗一帆，王曉娟，馬晉峰.胃腺癌組織中NET-1、FHIT及Ki-67的表達(dá)及其臨床意義[J].中國腫瘤外科雜志，2013，5（1）：26-29.

（收稿日期：2014-03-10）

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本研究結(jié)果顯示，從胃炎黏膜上皮—不典型增生—胃癌的發(fā)展過程中Ki67陽性表達(dá)分別為27.27%、38.75%、71.67%，呈逐漸增加趨勢（P＜0.01），Ki67在彌漫型胃癌中的表達(dá)陽性率顯著高于腸型胃癌，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃癌Ki67表達(dá)陽性率高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者，提示Ki67標(biāo)記指數(shù)的增高暗示胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的危險(xiǎn)性增高，癌的分化程度減低、浸潤深大增加。這與有些學(xué)者研究指出：癌細(xì)胞分化程度越低，以及伴有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者Ki67表達(dá)越強(qiáng)[14]，Ki67表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[3]相一致。Ki67表達(dá)在胃癌及胃重度不典型增生時(shí)的表達(dá)均顯著高于胃良性組織，因而檢測表達(dá)有助于胃癌的早期診斷[15]，可作為胃癌患者一個(gè)獨(dú)立的預(yù)后因素[16]，有研究顯示ki67陽性表達(dá)率越高，胃癌分化類型越差，因而其預(yù)后越差[17]，Ki67高表達(dá)的胃癌患者存活率較低，Ki67被認(rèn)為是較可靠地全面反映細(xì)胞群體增殖活性的客觀指標(biāo)[18]，Ki67可以較好地反映胃癌細(xì)胞的增殖能力[19]，這與張艷紅等[2]研究Ki67陽性表達(dá)和胃癌是否轉(zhuǎn)移之間有顯著相關(guān)性，Ki67在低分化組的表達(dá)高于中高分化組相一致。

本實(shí)驗(yàn)表明，細(xì)胞增殖活性的改變在不典型增生階段就已經(jīng)發(fā)生，且增殖活性的改變與癌變過程相關(guān)，在腫瘤組織中Ki67表達(dá)越高，表明腫瘤細(xì)胞增殖越活躍，提示腫瘤生長越快[20]，表明惡性腫瘤中Ki67的表達(dá)遠(yuǎn)高于正常組織[21]。因此，檢測Ki67對鑒別一些交界性病變，具有重要的參考價(jià)值。從本實(shí)驗(yàn)對比結(jié)果表明胃癌中p16與Ki67兩者表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（P＜0.05），利用免疫組化法檢測胃組織中p16與Ki67蛋白的異常表達(dá)，有助于癌及其癌前病變的早期發(fā)現(xiàn)。推測異常增殖的細(xì)胞中可能有p16抑癌基因的功能異常，Ki67基因的表達(dá)活躍，正常細(xì)胞增殖周期分為四個(gè)連續(xù)階段，即G1期（first gap phase，DNA合成前期）、S期（synthtic phase，DNA合成期）、G2期（second gap pjase，DNA合成后期）和M期（mitotic phase，有絲分裂期），p16主要作用于DNA合成前期至DNA合成期的過程中，Ki67則作用于DNA合成期，CDK受p16調(diào)控而不受Ki67的調(diào)控，兩方面對細(xì)胞惡變可能有不同途徑的協(xié)同促進(jìn)作用，說明胃癌是多基因異常的結(jié)果，具體作用機(jī)理有待于進(jìn)一步研究。

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（收稿日期：2014-03-10）

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