国产日韩欧美一区二区三区三州_亚洲少妇熟女av_久久久久亚洲av国产精品_波多野结衣网站一区二区_亚洲欧美色片在线91_国产亚洲精品精品国产优播av_日本一区二区三区波多野结衣 _久久国产av不卡

?

試論貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的特點及其體系的建立

2014-08-07 07:32:51馮婉婉
2014年13期
關(guān)鍵詞:特點

作者簡介:馮婉婉(1991.10-),漢族。就讀于西北民族大學(xué)生命科學(xué)與工程學(xué)院生物技術(shù)專業(yè)。

摘要:文章主要對貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)進行研究。本次研究中通過文獻(xiàn)資料分析了貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的特點,然后對培養(yǎng)中體系建立的要求進行明確。體系建立的過程中嚴(yán)格依照外植體培養(yǎng)標(biāo)準(zhǔn)及愈傷組織選取標(biāo)準(zhǔn)實施,體系建立非??茖W(xué)。該體系的構(gòu)建對細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)的豐富具有一定的貢獻(xiàn)性作用。

關(guān)鍵詞:植物細(xì)胞;懸浮培養(yǎng);特點;培養(yǎng)體系1.貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的特點

細(xì)胞懸浮培養(yǎng)主要指在培養(yǎng)的過程中將細(xì)小的細(xì)胞聚集在培養(yǎng)液上實施培養(yǎng),該操作主要在搖床上完成,可以在短時間內(nèi)獲得大量細(xì)胞,培養(yǎng)效果非常顯著。該培養(yǎng)的過程中主要選取植物細(xì)胞完成培養(yǎng)過程,通過將植物愈傷組織處理后放置在液體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)操作,可以有效改善愈傷組織的分裂和增殖能力,細(xì)胞生長速度大大提升。

植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時一般不需要支持物,生長速度較快,對培養(yǎng)條件要求并不苛刻。這種培養(yǎng)的過程中植物細(xì)胞可以懸浮在培養(yǎng)基中培養(yǎng),上述狀況下植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)面積有效提升,培養(yǎng)效果較好。與此同時,這種培養(yǎng)的過程中植物細(xì)胞敏感性一般較低,培養(yǎng)操作中無需加入動物細(xì)胞培養(yǎng)過程中的血清、微生物培養(yǎng)過程中的有機物質(zhì)等,整體培養(yǎng)成本較低,經(jīng)濟效益較好。其具體培養(yǎng)特點見表1.

表1植物貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中培養(yǎng)特點性質(zhì)微生物植物細(xì)胞植物器官大小(μm)1-1010-200≥103細(xì)胞聚集經(jīng)常發(fā)生通常成團毛狀根、芽、體胚等倍增時間≤1h24-150h幾天不等接種密度小整個體積的5%-20%大剪切力敏感程度低高、敏感高、敏感遺傳穩(wěn)定性強弱一般耗氧量一般低高營養(yǎng)要求簡單較復(fù)雜較為復(fù)雜產(chǎn)物積累胞外,高常存于液泡中,濃度低多為胞內(nèi)產(chǎn)物,較高通氣量(L/(L.min))高≥1低≤0.6略高,1左右環(huán)境敏感性適應(yīng)范圍廣可浸沒培養(yǎng)長期浸沒易玻璃化傳統(tǒng)變異篩選技術(shù)廣泛使用有時使用有時使用

2.貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系的建立

2.1培養(yǎng)流程

在實施植物細(xì)胞貼壁懸浮培養(yǎng)的過程中人員要嚴(yán)格依照培養(yǎng)原則要求,細(xì)化細(xì)胞培養(yǎng)流程,保證培養(yǎng)的有效性、合理性、科學(xué)性。該過程中培養(yǎng)人員需要控制從外植體的選取著手,控制好愈傷組織的誘導(dǎo),合理篩選愈傷組織,從而提升原細(xì)胞的分裂分化的控制效果。貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)流程主要為:誘導(dǎo)、篩選愈傷組織→液體懸浮培養(yǎng)→形成懸浮體系。

2.2植物外植體的選取

植物外植體在選取的過程中要控制好以下三項原則:

第一,選取分化程度較低的植物部分,例如植物的幼芽、根系等;第二,選取幼嫩的部位,盡量保證組織類型較為豐富,例如植物的下胚軸、子葉等;第三,嚴(yán)禁選取無分化分裂部位組織細(xì)胞,部分組織細(xì)胞抑制發(fā)育物質(zhì)較多也不可選取,例如老化葉片。

植物外植體的選取作為影響細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的重要因素,其選取效益直接影響著后續(xù)培養(yǎng)質(zhì)量,直接限制著植物細(xì)胞的培養(yǎng)效益。上述培養(yǎng)的過程中培養(yǎng)人員必須要嚴(yán)格依照外植體選取標(biāo)準(zhǔn)。

2.3愈傷組織的誘導(dǎo)篩選

愈傷組織是指外植體在培養(yǎng)過程中經(jīng)過脫分化、再分化等過程形成的無特定細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞團。該細(xì)胞團具有非常好的增殖分化能力,具有較高的遺傳穩(wěn)定性,是植物組織形成的前提。在外植體培養(yǎng)獲得愈傷組織后,培養(yǎng)人員需要對愈傷組織進行誘導(dǎo)和篩選,從而保證愈傷組織能夠依照需求方向進行對應(yīng)分裂、分化,從而提升細(xì)胞培養(yǎng)效益。具體誘導(dǎo)篩選中要控制好:

(1)培養(yǎng)基的選?。寒?dāng)前細(xì)胞培養(yǎng)基除了能夠完成細(xì)胞培養(yǎng)外還可以實現(xiàn)細(xì)胞分離的誘導(dǎo),是愈傷組織生長分化的重要促進因素。愈傷組織培養(yǎng)基在選取的過程中可以選取MS、SH、N6等多種類型,需要依照植物細(xì)胞特定確定對應(yīng)培養(yǎng)操作,從而提升植物培養(yǎng)的有效性和合理性。例如在青錢柳無菌葉愈傷組織誘導(dǎo)和篩選的過程中培養(yǎng)人員可以通過SH培養(yǎng)基完成,在SH培養(yǎng)基中加入MS培養(yǎng)基成分,通過MS培養(yǎng)基中因素實現(xiàn)青錢柳無菌愈傷組織的誘導(dǎo)和繼代培養(yǎng),從而實現(xiàn)誘導(dǎo)和篩選的雙管齊下,從本質(zhì)上提升培養(yǎng)的效果和質(zhì)量。

(2)激素的選取和配合:激素在選取的過程中要對其組成、配比、濃度等進行全面控制,要依照誘導(dǎo)和分化指標(biāo)需求進行對應(yīng)使用。植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的過程中生長素常選取濃度為0.01-10mg/L左右的2,4-D、NAA、IAA等,細(xì)胞分裂素常選取濃度為0.1-10mg/L左右的KT、6-BA、ZT等。

(3)其他條件的選?。涸谫N壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)過程中人員要對其溫度進行有效控制,保持恒溫狀態(tài)。愈傷組織培養(yǎng)中溫度一般控制在25-28℃左右,可以依照植物細(xì)胞狀況適當(dāng)調(diào)整。部分植物細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中需要適量光照才能夠完成誘導(dǎo),部分植物在培養(yǎng)的過程中需要進行暗處理才能夠完成誘導(dǎo),培養(yǎng)人員可以依照植物對光的需求對應(yīng)處理,合理控制光強、光色等光照因素。

3.總結(jié)

貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)可以有效提升細(xì)胞的培養(yǎng)質(zhì)量,通過培養(yǎng)過程中的各項處理提升細(xì)胞培養(yǎng)效益,從而形成安全、高性能細(xì)胞體系,對我國生物學(xué)發(fā)展和應(yīng)用具有至關(guān)重要的作用。當(dāng)前細(xì)胞學(xué)發(fā)展的過程中我國雖然已經(jīng)加大了對貼壁細(xì)胞懸浮培養(yǎng)的研究,但研究深度不夠,仍需進一步挖掘。

參考文獻(xiàn):

[1]曹露,李傳偉,于愛蓮,王兆輝,牛麗婷,吳開祥,王學(xué)春.懸浮培養(yǎng)與貼壁培養(yǎng)對乳腺癌MCF-7細(xì)胞形態(tài)及CD44、CD24表達(dá)的影響[J].臨床與實驗病理學(xué)雜志,2013,09:969-971+975.

[2]周欣,程海衛(wèi),王永生,王川慶,楊霞.動物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)研究進展[J].中國畜牧獸醫(yī),2012,11:129-134.

[3]李群,錢鐘,范娟,李玉和.動物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)技術(shù)在獸用疫苗生產(chǎn)領(lǐng)域中的應(yīng)用[J].中國畜牧獸醫(yī),2013,06:236-240.

[4]劉小英.枇杷細(xì)胞懸浮培養(yǎng)體系的建立及優(yōu)化[D].福建農(nóng)林大學(xué),2013.

猜你喜歡
特點
關(guān)于小學(xué)體育業(yè)余訓(xùn)練的研究
體育時空(2016年8期)2016-10-25 20:09:18
職業(yè)院校學(xué)生職業(yè)素養(yǎng)培養(yǎng)研究
互聯(lián)網(wǎng)時代小米的成本管理特點
高中生道德價值觀的特點及原因分析
高壓輸配電線路工程施工技術(shù)控制之我見
中低壓配網(wǎng)桿塔防撞措施淺析
微信輔助對外漢語口語教學(xué)研究
科技視界(2016年21期)2016-10-17 17:18:00
利用野花組合營造花海景觀的技術(shù)研究
淺談現(xiàn)澆混凝土渠施工技術(shù)
機械制造自動化的特點及發(fā)展趨勢
海宁市| 长汀县| 深圳市| 龙州县| 定南县| 太保市| 上杭县| 陇西县| 田阳县| 山东| 外汇| 绥棱县| 双鸭山市| 常宁市| 安泽县| 福鼎市| 盖州市| 仙居县| 桦川县| 肇州县| 辉南县| 无极县| 孝昌县| 林州市| 裕民县| 清远市| 磐石市| 丹巴县| 通化市| 屯门区| 北宁市| 丹江口市| 顺义区| 乐至县| 青冈县| 大邑县| 北宁市| 靖宇县| 稷山县| 岚皋县| 湖州市|