海海杰 吳七十三

(1.呼倫貝爾市扎蘭屯中蒙醫(yī)院，內(nèi)蒙古 呼倫貝爾 162650;2.內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院，內(nèi)蒙古 通遼 028000)

利喜咽喉膠囊是在蒙醫(yī)驗(yàn)方立西如克巴基礎(chǔ)上研制的新劑型，由丁香、木香、甘草、石膏、玉簪花、訶子等6味藥組成［1，2］。具有利肺，清咽等功效。用于外感咳嗽，聲音嘶啞，咽喉腫痛等病癥［1，2］。本文通過(guò)比較立西如克巴和利喜咽喉膠囊抗炎作用和小鼠急性毒性反應(yīng)，評(píng)價(jià)立西如克巴改新劑型的必要性。

1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1 實(shí)驗(yàn)藥品、試劑:立西如克巴，內(nèi)蒙古通遼市奈曼旗蒙醫(yī)院提供，批號(hào)2009102602。利喜咽喉由內(nèi)蒙古民族大學(xué)蒙醫(yī)藥學(xué)院研制，批號(hào)20091124、20091126、20091128的混合。本試驗(yàn)中作氨酚咖匹林片為對(duì)照藥。角叉菜膠，sigma公司產(chǎn)品，由北京拜爾迪公司提供，批號(hào)015k0172。二甲苯，沈陽(yáng)市東興試劑廠產(chǎn)品，批號(hào)20060504。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器:BT25型電子分析天平，北京賽多利斯天平有限公司產(chǎn)品;MDF-U2086S型超低溫冰箱，日本產(chǎn)品;PV-200型足容積測(cè)定儀，成都泰盟科技有限公司產(chǎn)品。

1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:昆明種小鼠，體重18g～22g，雌雄各半;Wistar大鼠，體重200～220g，雌雄各半，均由沈陽(yáng)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào):SCXK-(吉)2007-0003。

2 實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果

2.1 利喜咽喉膠囊對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響［3］:取小鼠90只，按體重隨機(jī)分為對(duì)照組、利喜咽喉低劑量組(0.325g/kg)，利喜咽喉中劑量組(0.750g/kg)、利喜咽喉高劑量組(1.500g/kg)、立西如克巴組(0.160g/kg)和陽(yáng)性組(氨酚咖匹林片0.111g/kg)等6組，每組15只，雌雄分籠飼養(yǎng)。各給藥組分別灌胃相應(yīng)藥物的0.5% 羧甲基纖維素鈉溶液(0.2ml/10g)，對(duì)照組灌胃同體積的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，每天1次，連續(xù)7d。末次給藥后30min，取0.1ml二甲苯涂于各組小鼠右耳前后兩面致炎。1h后，將小鼠脫頸處死，沿耳廓基線剪下兩耳，用直徑6mm的打孔器分別在兩耳同一部位打下圓耳片，迅速用電子天平稱重，計(jì)算耳片炎癥腫脹度(右耳片減去左耳片重量等于腫脹度)。結(jié)果見(jiàn)表1。

結(jié)果顯示，利喜咽喉膠囊中、高劑量對(duì)小鼠二甲苯所致耳廓腫脹均具有明顯的抑制作用(P＜0.05)。

表1 利喜咽喉膠囊對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 s·mg，n=15)

表1 利喜咽喉膠囊對(duì)二甲苯所致小鼠耳廓腫脹的影響 s·mg，n=15)

注:與空白組比較※P＜0.05

組別 給藥劑量(g/kg)耳廓腫脹度對(duì)照組-3.43 ±1.73利喜咽喉低劑量組 0.325 3.65 ±1.82利喜咽喉中劑量組 0.750 2.32 ±0.69※利喜咽喉高劑量組 1.500 1.98 ±0.88※立西如克巴組 0.160 3.56 ±1.64氨酚咖匹林片組 0.111 2.19 ±1.01※

2.2 利喜咽喉膠囊對(duì)角叉菜所致大鼠足腫脹的影響［4］:取大鼠72只，雌雄兼用，按體重隨機(jī)分為模型組、利喜咽喉低劑量組(0.22g/kg)、利喜咽喉中劑量組(0.44g/kg)、利喜咽喉高劑量組(0.88g/kg)、立西如克巴組(0.096g/kg)和陽(yáng)性組(0.067g/kg)等6組，每組12只，雌雄分籠飼養(yǎng)。各給藥組大鼠分別灌胃相應(yīng)藥的0.5%羧甲基纖維素鈉混懸液(2ml/100g)。模型組灌胃同體積的0.5%羧甲基纖維素鈉溶液，每日1次，連續(xù)10d。建立模型前用容積法測(cè)量各組大鼠右后足跖容積。于末次給藥后30min，將各組大鼠右后足腱膜下注射1%角叉菜膠溶液0.1ml，在2h、4h、6h和8h后用足容積測(cè)定儀分別測(cè)量大鼠右后足跖容積，并進(jìn)行相關(guān)組間t檢驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表2。

結(jié)果顯示，利喜咽喉對(duì)大鼠角叉菜膠致足腫脹4d之內(nèi)抑制作用比較穩(wěn)定(P＜0.05)，具有量效關(guān)系。立西如克從6d后開(kāi)始出現(xiàn)作用(P＜0.05)，具有作用較晚的特點(diǎn)。根據(jù)藥物在本試驗(yàn)中所表現(xiàn)出的作用時(shí)間，其體內(nèi)停留時(shí)間、代謝速度等問(wèn)題值得進(jìn)一步研究。

表2 利喜咽喉膠囊對(duì)角叉菜致大鼠足腫脹的影響± s·ml，n=12)

表2 利喜咽喉膠囊對(duì)角叉菜致大鼠足腫脹的影響± s·ml，n=12)

注:與模型組比較 ※P＜0.05

組別 致炎前致炎后不同時(shí)間足跖腫脹度2h 4h 6h 8h模型組 1.97 ±0.36 2.31 ±0.23 2.35 ±0.38 2.24 ±0.38 2.21 ±0.41利喜咽喉低劑量組 1.70±0.14 1.93±0.17※ 2.09±0.24※ 1.91±0.20※ 1.88±0.12※利喜咽喉中劑量組 1.73±0.27 1.88±0.26 2.11±0.38※ 2.06±0.25 2.11±0.15利喜咽喉高劑量組 1.75±0.19 1.92±0.18※ 1.87±0.36※ 2.07±0.18 2.16±0.20立西如克巴組 1.76±0.21 2.09±0.21 2.12±0.22 2.00±0.34※ 2.07±0.29※陽(yáng)性組 1.78 ±0.30 2.16 ±0.31 2.18 ±0.31 1.96 ±0.23※1.95 ±0.20

3 利喜咽喉膠囊小鼠最大給藥量實(shí)驗(yàn)研究［5］

取昆明種小鼠60只，雌雄各半，按體重隨機(jī)分為立西如克巴組、利喜咽喉組和對(duì)照組等3組，雌雄分籠飼養(yǎng)。將小鼠禁食16h(自由飲水)后，立西如克巴組大鼠灌胃最大濃度(0.45g/ml)、利喜咽喉組最大濃度(2g/ml)的混懸液(0.3ml/10g)，灌胃1次。立西如克巴1日最大給藥量為30.8g/kg、利喜咽喉原材料為60g/kg;對(duì)照組按相同條件給予等量的生理鹽水。給藥后常規(guī)飼養(yǎng)，給藥后連續(xù)觀察動(dòng)物的反映情況，連續(xù)觀察14d，分別于給藥前及給藥后第3、7、10、14d稱體重。每天觀察2次(上下午各1次)動(dòng)物的外觀、行為、分泌物、排泄物等。記錄所有動(dòng)物的死亡情況、中毒癥狀及中毒反應(yīng)的起始時(shí)間、嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間、是否可逆等。結(jié)果見(jiàn)表3、表4。

結(jié)果顯示，小鼠1日最大給藥量立西如克巴為30.8g/kg/d時(shí)，15min內(nèi)小鼠出現(xiàn)蹣跚走路，但未見(jiàn)睡眠現(xiàn)象，4h后出現(xiàn)脹肚、縱毛、活動(dòng)緩慢及活動(dòng)量少等現(xiàn)象，此現(xiàn)象延續(xù)1到2d;利喜咽喉灌胃給藥60g/kg/d時(shí)，15min內(nèi)小鼠出現(xiàn)睡眠(翻正反射消失)現(xiàn)象，1h后恢復(fù)正常;4h后出現(xiàn)脹肚、縱毛、活動(dòng)緩慢及活動(dòng)量少等現(xiàn)象，此現(xiàn)象延續(xù)3到4d;小鼠均未見(jiàn)異常行為、體重下降和死亡，第14d尸解肉眼觀察未發(fā)現(xiàn)異常。提示立西如克巴、利喜咽喉經(jīng)口給給予小鼠的急性毒性較小，測(cè)不出小鼠LD50?？烧J(rèn)為臨床用藥安全性較好。

表3 立西如克巴和利喜咽喉膠囊對(duì)雌性小鼠體重的影響 ± s·g，n=20)

表3 立西如克巴和利喜咽喉膠囊對(duì)雌性小鼠體重的影響 ± s·g，n=20)

組別 給藥前 給藥后3d 給藥后7d 給藥后10d 給藥后14d對(duì)照組 34.1 ±4.9 34.4 ±4.8 35.7 ±5.2 36.7 ±5.2 37.3 ±4.7立西如克巴組 37.2 ±3.4 35.3 ±2.9 37.1 ±4.2 38.8 ±3.2 39.6 ±3.5利喜咽喉組 36.4 ±3.2 34.3 ±3.4 34.8 ±4.5 35.3 ±5.1 36.5 ±4.6

表4 立西如克巴和利喜咽喉膠囊對(duì)雄性小鼠體重的影響 ± s·g，n=20)

表4 立西如克巴和利喜咽喉膠囊對(duì)雄性小鼠體重的影響 ± s·g，n=20)

組別 給藥前 給藥后3d 給藥后7d 給藥后10d 給藥后14d對(duì)照組 31.0 ±1.9 31.7 ±2.0 32.4 ±1.9 33.6 ±2.3 34.0 ±1.9立西如克巴組 30.3 ±2.8 27.8 ±2.7 29.6 ±1.8 30.0 ±1.5 30.5 ±1.7利喜咽喉組 30.8 ±3.3 28.7 ±2.3 30.2 ±2.3 30.4 ±2.0 31.0 ±2.5

4 討論

按照蒙藥學(xué)及蒙醫(yī)方劑學(xué)理論分析，利喜咽喉膠囊中3味蒙藥為寒涼性，2味藥為溫性、1味為平性，故該復(fù)方屬?zèng)鲂苑絼?。利喜咽喉膠囊對(duì)小鼠二甲苯致耳廓腫脹有顯著的抑制作用;對(duì)大鼠角叉菜膠致足腫脹亦有顯著的抑制作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與原劑型立西如克巴的抗炎作用相比，利喜咽喉具有良好的抗炎作用，無(wú)急性毒性等不良反應(yīng)。利喜咽喉膠囊對(duì)小鼠有效劑量為0.325g/kg～1.5g/kg;對(duì)大鼠的有效劑量為 0.22g/kg ～ 0.88g/kg。

［1］白清云.中國(guó)醫(yī)學(xué)百科全書(shū)·蒙醫(yī)學(xué)［M］.赤峰:內(nèi)蒙古科技出版社，1986

［2］特木爾.蒙醫(yī)方劑學(xué)［M］.呼和浩特:內(nèi)蒙古人民出版社，1986，290

［3］陳奇.中藥藥理實(shí)驗(yàn)方法［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，1993，356-361

［4］陳奇.中藥藥效研究思路與方法.［M］.北京:人民衛(wèi)生出版社，2005，683 ～691

［5］衛(wèi)生部藥政局.中藥新藥臨床前研究指導(dǎo)原則匯編(藥學(xué)、藥理學(xué)、毒理學(xué))，北京，1993，203