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百合花粉的形態(tài)特征觀察及溫度對其萌發(fā)率的影響

2014-07-18 15:39張靜左丹唐道城
江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2014年1期
關(guān)鍵詞:花粉粒百合溫度

張靜 左丹 唐道城

摘要:以蘭州百合、普瑞頭、波安娜、白天堂、耀眼等百合品種的成熟花粉粒為材料,在顯微鏡下觀察各花粉粒形態(tài)結(jié)構(gòu),并分別將5種花粉粒置于5、10、15、20、25、30 ℃下培養(yǎng),觀察其萌發(fā)狀況。結(jié)果表明,白天堂極軸和赤道軸長度最長,幾個(gè)品種間差異極顯著,但所有花粉粒極軸長/赤道軸長的值不存在極顯著差異;蘭州百合和耀眼在20 ℃時(shí)萌發(fā)率最高,普瑞頭的最適萌發(fā)溫度則是25 ℃,波安娜、白天堂的萌發(fā)率在30 ℃時(shí)最高。

關(guān)鍵詞:百合;花粉粒;形態(tài)結(jié)構(gòu);溫度;花粉萌發(fā)

中圖分類號(hào): S682.2+65.01文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A文章編號(hào):1002-1302(2014)01-0148-03

收稿日期:2013-05-15

基金項(xiàng)目:青海省國際合作項(xiàng)目(編號(hào):2011-H-806)。

作者簡介:張靜(1988—),女,四川合江人,碩士研究生,研究方向?yàn)閳@林植物栽培生理。E-mail:jingzhangyx@163.com。

通信作者:唐道城(1954—),男,四川南充人,碩士,教授,博士生導(dǎo)師,主要從事花卉遺傳育種及栽培生理研究工作。E-mail:tangdaocheng6333@163.com。百合是百合科百合屬多年生草本球根植物,具有很高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值[1],全世界共有百合屬植物約94個(gè)種,起源于我國的有47個(gè)種、18個(gè)變種,其中36個(gè)種、15個(gè)變種為我國特有種[2],豐富的野生資源為我國百合的育種提供了材料基礎(chǔ)?,F(xiàn)在百合的育種多采用常規(guī)雜交,雖然生殖隔離是限制育種成功的根本原因,但了解雜交花粉的形態(tài)特征和生理習(xí)性對育種工作具有重要意義。近些年,張彥妮等分別對百合花粉粒進(jìn)行了電鏡掃描,得到了清晰的百合花粉粒的表觀結(jié)構(gòu)[3-4]。周蘊(yùn)薇等分別研究了花粉粒的貯藏條件[1,5],說明貯藏溫度對百合花粉生命力有很大的影響,低溫(-18、-20、-80 ℃)更有利于保持花粉活性。本研究在此基礎(chǔ)之上對四大類型(山丹百合、亞洲百合、麝香百合、L/A)5個(gè)品種(蘭州百合、普瑞頭、波安娜、白天堂、耀眼)的成熟花粉粒的體態(tài)進(jìn)行了比較,同時(shí)將5個(gè)品種花粉粒置于不同溫度下培養(yǎng),觀察花粉萌發(fā)情況,旨在為西寧地區(qū)夏季百合雜交育種的雜交組合選配、雜交授粉時(shí)間和授粉環(huán)境提供依據(jù)。

1材料與方法

1.1供試材料

以種植于青海大學(xué)高原花卉研究中心試驗(yàn)溫室內(nèi)的5個(gè)百合品種蘭州百合(山丹百合)、普瑞頭(亞洲百合)、波安娜(亞洲百合)、白天堂(麝香百合)、耀眼(L/A)為試驗(yàn)材料。

1.2方法

1.2.1花粉粒觀察取新鮮成熟花藥,置防塵處干燥。用毛筆將花粉粒蘸到載玻片上,于OlympusCX51顯微鏡下觀察,用OlympusDP21圖像采集系統(tǒng)取樣,用Image-Pro Plus 5.1圖像分析系統(tǒng)測量花粉粒極軸長、赤道軸長,每種測量20 ?;ǚ郏?jì)算平均值并進(jìn)行差異顯著性分析。

1.2.2花粉管萌發(fā)參考年玉欣等選用的百合花粉萌發(fā)的最適培養(yǎng)基配方:蔗糖100 g/L+H3BO3 20 mg/L +CaCl2 20~30 mg/L[6],在此培養(yǎng)基中加入瓊脂4.5 g/L做成固體培養(yǎng)基,倒入培養(yǎng)皿中,將不同花粉粒用毛筆蘸取涂抹于培養(yǎng)基上,分別置于5、10、15、20、25、30 ℃下培養(yǎng),每隔1 h觀察1次花粉萌發(fā)情況,每個(gè)培養(yǎng)皿取5個(gè)清晰的視野進(jìn)行觀察,對發(fā)芽和未發(fā)芽花粉粒計(jì)數(shù),計(jì)算花粉萌發(fā)率。

2結(jié)果與分析

2.1花粉粒的形態(tài)

顯微鏡下觀察的5個(gè)品種花粉粒情況如圖1所示,花粉粒極軸長、赤道軸長測量比較結(jié)果如表1所示。5個(gè)百合品種的花粉粒在形態(tài)學(xué)上具有很多相似之處,花粉粒均以單粒形式存在,具有1個(gè)萌發(fā)溝,萌發(fā)溝長達(dá)兩極、細(xì)長、溝緣整齊?;ǚ哿1砻婕y飾幾乎都為不規(guī)則網(wǎng)狀,網(wǎng)孔密度和大小存在一定差異。從花粉粒的大小來看,品種間存在較明顯的差異。

由表1可知,極軸從長到短依次為白天堂>蘭州百合>耀眼>波安娜>普瑞頭;赤道軸從長到短依次為白天堂>蘭州百合>耀眼>波安娜>普瑞頭。白天堂的極軸與蘭州百合差異不顯著,與波安娜、耀眼、普瑞頭差異極顯著 (P<001);蘭州百合顯著長于耀眼(P<0.05),極顯著長于普瑞頭(P<0.01);波安娜與普瑞頭差異極顯著(P<0.01);耀眼比普瑞頭長22.15 μm,且差異極顯著(P<0.01)。白天堂赤道軸長與蘭州百合差異顯著(P<0.05),與波安娜、耀眼、普瑞頭差異極顯著(P<0.01);蘭州百合較普瑞頭長 15.84 μm,且差異極顯著(P<0.01);波安娜極顯著長于普瑞頭(P<001);耀眼比普瑞頭長12.64 μm,且差異極顯著(P<0.01)。極軸長/赤道軸長的值從大到小依次為普瑞頭>蘭州百合>波安娜>白天堂>耀眼,且5個(gè)品種中僅白天堂、耀眼與普瑞頭差異顯著(P<0.05)。

2.2不同溫度對花粉萌發(fā)率的影響

在6個(gè)溫度下處理5 h,統(tǒng)計(jì)花粉萌發(fā)率,結(jié)果見表2。在5、10 ℃下,花粉均不萌發(fā)。在15 ℃時(shí),5個(gè)品種花粉萌發(fā)率在5 h內(nèi)都較低,其中耀眼、普瑞頭、波安娜等3個(gè)品種的萌發(fā)率為0;白天堂和蘭州百合在培養(yǎng)3 h時(shí)開始萌發(fā),白天堂萌發(fā)率始終較低,蘭州百合在3 h以后萌發(fā)率大幅提高。在20 ℃時(shí),5個(gè)品種都開始萌發(fā),但萌發(fā)率差異較大,其中普瑞頭和蘭州百合在培養(yǎng)2 h時(shí),開始萌發(fā),耀眼、白天堂、波安娜在培養(yǎng)3 h時(shí)開始萌發(fā);培養(yǎng)5 h,萌發(fā)率最高的是蘭州百合,達(dá)60%以上,其次依次是耀眼、普瑞頭、波安娜、白天堂。在25 ℃時(shí),耀眼的萌發(fā)率始終為0;蘭州百合和普瑞頭培養(yǎng) 2 h 時(shí)開始萌發(fā),波安娜在培養(yǎng)3 h時(shí)開始萌發(fā),這3個(gè)品種的萌發(fā)率均在培養(yǎng)2~3 h間增長最快,白天堂則在培養(yǎng)4 h時(shí)開始萌發(fā),且?guī)缀踹_(dá)到最高值;培養(yǎng)5 h,5個(gè)品種中以蘭州百合萌發(fā)率最高,其后依次為普瑞頭、白天堂、波安娜。30 ℃時(shí),耀眼始終不萌發(fā),蘭州百合、白天堂、普瑞頭在培養(yǎng) 1 h 開始萌發(fā),波安娜培養(yǎng)2 h開始萌發(fā),其中普瑞頭萌發(fā)率<1%,蘭州百合、白天堂、波安娜均在培養(yǎng)2~3 h開始大量萌發(fā);培養(yǎng)5 h,萌發(fā)率從高到低依次是蘭州百合>白天堂>波安娜>普瑞頭>耀眼。

蘭州百合和耀眼花粉萌發(fā)率在20 ℃時(shí)較高,蘭州百合萌發(fā)率在60%以上;當(dāng)溫度繼續(xù)升高時(shí),蘭州百合萌發(fā)時(shí)間提前,但萌發(fā)率開始降低,當(dāng)溫度升高到30 ℃時(shí),萌發(fā)率為 42.53%;耀眼最大萌發(fā)率為27.4%(20 ℃),當(dāng)溫度高于 25 ℃ 時(shí)幾乎不萌發(fā)。普瑞頭的萌發(fā)率在25 ℃時(shí)最高,為437%,溫度低于15 ℃時(shí)不萌發(fā),高于30 ℃時(shí)極少數(shù)(<1%)萌發(fā)。白天堂和波安娜萌發(fā)率隨溫度升高而升高,在 20~25 ℃ 間萌發(fā)率增幅最大,30 ℃時(shí)萌發(fā)率最高,分別為2522%、24.76%。

3結(jié)論與討論

從花粉形態(tài)學(xué)角度看,百合屬花粉橢圓體,極面觀為橢圓形,極軸為70.5~142 μm,具遠(yuǎn)極單溝,表面具清楚的網(wǎng)狀雕紋,雕紋粗細(xì)在花粉不同部位較均勻,但會(huì)因品種不同而不同,網(wǎng)脊由大小形狀不一致的單行顆粒組成[7]。本研究的5個(gè)品種百合屬植物花粉皆呈橢圓體,具單溝萌發(fā)孔,雕紋類型為單基柱網(wǎng)紋,與前人研究結(jié)論一致,極軸為92.99~132.72 μm, 與王伏雄等研究的結(jié)論“百合花粉粒極軸長為表2不同溫度下5種花粉的萌發(fā)情況

70.5~142 μm”[7]相符,但較曾小英等測定的結(jié)果“蘭州百合(65 μm)、普瑞頭(84 μm)、波安娜(75 μm)極軸”長[8],這可能是由種植地區(qū)差異和測定時(shí)標(biāo)尺誤差引起的。

百合花粉萌發(fā)所需要的培養(yǎng)時(shí)間不同,年玉欣等的研究結(jié)果表明,不同季節(jié)的花粉在同一條件下培養(yǎng),萌發(fā)時(shí)間差異很大,5月中旬培養(yǎng)4 h后花粉萌發(fā)率達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài),11月上旬培養(yǎng)8 h后花粉萌發(fā)率達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)[6],這可能與生長環(huán)境溫度和光照強(qiáng)度有關(guān)。同時(shí),年玉欣等還以培養(yǎng)基100 g/L+H3BO320 mg/L+CaCl230 mg/L培養(yǎng)溫室東方百合花粉,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在2 h內(nèi)無萌發(fā),5 h后萌發(fā)率較高[6]。

本研究結(jié)果表明,在相同溫度下,不同品種百合萌發(fā)時(shí)間有差異,同一品種不同溫度下萌發(fā)時(shí)間和最終萌發(fā)率也有明顯差異。隨著溫度升高,各品種花粉粒萌發(fā)時(shí)間提前,但最終萌發(fā)率不同,蘭州百合和耀眼的最適萌發(fā)溫度為20 ℃,普瑞頭的為25 ℃,白天堂和波安娜則可能是30 ℃或更高溫度。

花粉生活力和萌發(fā)率主要取決于品種自身的遺傳特性,與引種栽培適應(yīng)性也有一定的關(guān)系[9]。在雜交育種中可選擇蘭州百合、普瑞頭等萌發(fā)率較高的品種作為父本,這樣可以大大提高授粉成功率,從而進(jìn)一步確保雜交的成功和植株的正常生長。另外,在西寧等晝夜溫差很大的地區(qū)選擇花粉粒萌發(fā)速度快、萌發(fā)率高的時(shí)間段授粉也至關(guān)重要,由本試驗(yàn)得出如以蘭州百合、耀眼為父本授粉,可選擇在夏天的上午進(jìn)行,西寧上午的溫度約20 ℃,有利于花粉管迅速萌發(fā),提高雜交成功率;以普瑞頭作父本,則適合中午雜交,下午的升溫正好滿足花粉萌發(fā);白天堂和波安娜則適合在午后雜交,下午持續(xù)的高溫為花粉萌發(fā)提供良好條件。當(dāng)然,花粉萌發(fā)不只受溫度的影響,濕度、輻射、貯藏條件等[10-11]對不同品種百合花粉的萌發(fā)率也有影響,判定一種花粉的萌發(fā)能力,須要綜合各影響因子,這還有待進(jìn)一步研究。

參考文獻(xiàn):

[1]周蘊(yùn)薇,劉芳,李俊濤. 百合花粉生活力及貯藏特性[J]. 東北林業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2007,35(5):39-40,46.

[2]程金水,劉青林. 園林植物遺傳育種學(xué)[M]. 北京:中國林業(yè)出版社,2010:340-341.

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[7]王伏雄,錢南芬,張玉龍,等. 中國花粉形態(tài)研究[M]. 北京:科學(xué)出版社,1997:256-266.

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[11]夏瑾華,王愛斌,俞曉風(fēng),等. 硼酸與蔗糖對三角梅花粉生活力的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(9):186-187.羊建平,武彩紅,趙旭庭,等. 冷凍保存對豬精子DNA完整性及形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(1):151-153.

蘭州百合和耀眼花粉萌發(fā)率在20 ℃時(shí)較高,蘭州百合萌發(fā)率在60%以上;當(dāng)溫度繼續(xù)升高時(shí),蘭州百合萌發(fā)時(shí)間提前,但萌發(fā)率開始降低,當(dāng)溫度升高到30 ℃時(shí),萌發(fā)率為 42.53%;耀眼最大萌發(fā)率為27.4%(20 ℃),當(dāng)溫度高于 25 ℃ 時(shí)幾乎不萌發(fā)。普瑞頭的萌發(fā)率在25 ℃時(shí)最高,為437%,溫度低于15 ℃時(shí)不萌發(fā),高于30 ℃時(shí)極少數(shù)(<1%)萌發(fā)。白天堂和波安娜萌發(fā)率隨溫度升高而升高,在 20~25 ℃ 間萌發(fā)率增幅最大,30 ℃時(shí)萌發(fā)率最高,分別為2522%、24.76%。

3結(jié)論與討論

從花粉形態(tài)學(xué)角度看,百合屬花粉橢圓體,極面觀為橢圓形,極軸為70.5~142 μm,具遠(yuǎn)極單溝,表面具清楚的網(wǎng)狀雕紋,雕紋粗細(xì)在花粉不同部位較均勻,但會(huì)因品種不同而不同,網(wǎng)脊由大小形狀不一致的單行顆粒組成[7]。本研究的5個(gè)品種百合屬植物花粉皆呈橢圓體,具單溝萌發(fā)孔,雕紋類型為單基柱網(wǎng)紋,與前人研究結(jié)論一致,極軸為92.99~132.72 μm, 與王伏雄等研究的結(jié)論“百合花粉粒極軸長為表2不同溫度下5種花粉的萌發(fā)情況

70.5~142 μm”[7]相符,但較曾小英等測定的結(jié)果“蘭州百合(65 μm)、普瑞頭(84 μm)、波安娜(75 μm)極軸”長[8],這可能是由種植地區(qū)差異和測定時(shí)標(biāo)尺誤差引起的。

百合花粉萌發(fā)所需要的培養(yǎng)時(shí)間不同,年玉欣等的研究結(jié)果表明,不同季節(jié)的花粉在同一條件下培養(yǎng),萌發(fā)時(shí)間差異很大,5月中旬培養(yǎng)4 h后花粉萌發(fā)率達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài),11月上旬培養(yǎng)8 h后花粉萌發(fā)率達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)[6],這可能與生長環(huán)境溫度和光照強(qiáng)度有關(guān)。同時(shí),年玉欣等還以培養(yǎng)基100 g/L+H3BO320 mg/L+CaCl230 mg/L培養(yǎng)溫室東方百合花粉,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在2 h內(nèi)無萌發(fā),5 h后萌發(fā)率較高[6]。

本研究結(jié)果表明,在相同溫度下,不同品種百合萌發(fā)時(shí)間有差異,同一品種不同溫度下萌發(fā)時(shí)間和最終萌發(fā)率也有明顯差異。隨著溫度升高,各品種花粉粒萌發(fā)時(shí)間提前,但最終萌發(fā)率不同,蘭州百合和耀眼的最適萌發(fā)溫度為20 ℃,普瑞頭的為25 ℃,白天堂和波安娜則可能是30 ℃或更高溫度。

花粉生活力和萌發(fā)率主要取決于品種自身的遺傳特性,與引種栽培適應(yīng)性也有一定的關(guān)系[9]。在雜交育種中可選擇蘭州百合、普瑞頭等萌發(fā)率較高的品種作為父本,這樣可以大大提高授粉成功率,從而進(jìn)一步確保雜交的成功和植株的正常生長。另外,在西寧等晝夜溫差很大的地區(qū)選擇花粉粒萌發(fā)速度快、萌發(fā)率高的時(shí)間段授粉也至關(guān)重要,由本試驗(yàn)得出如以蘭州百合、耀眼為父本授粉,可選擇在夏天的上午進(jìn)行,西寧上午的溫度約20 ℃,有利于花粉管迅速萌發(fā),提高雜交成功率;以普瑞頭作父本,則適合中午雜交,下午的升溫正好滿足花粉萌發(fā);白天堂和波安娜則適合在午后雜交,下午持續(xù)的高溫為花粉萌發(fā)提供良好條件。當(dāng)然,花粉萌發(fā)不只受溫度的影響,濕度、輻射、貯藏條件等[10-11]對不同品種百合花粉的萌發(fā)率也有影響,判定一種花粉的萌發(fā)能力,須要綜合各影響因子,這還有待進(jìn)一步研究。

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[6]年玉欣,羅鳳霞,張穎,等. 測定百合花粉生命力的液體培養(yǎng)基研究[J]. 園藝學(xué)報(bào),2005,32(5):922-925.

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[10]王剛,呂新,劉輝,等. 貯藏溫度和時(shí)間對雜交棉新陸早43號(hào)父本花粉生活力的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(3):81-82.

[11]夏瑾華,王愛斌,俞曉風(fēng),等. 硼酸與蔗糖對三角梅花粉生活力的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2012,40(9):186-187.羊建平,武彩紅,趙旭庭,等. 冷凍保存對豬精子DNA完整性及形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響[J]. 江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué),2014,42(1):151-153.

蘭州百合和耀眼花粉萌發(fā)率在20 ℃時(shí)較高,蘭州百合萌發(fā)率在60%以上;當(dāng)溫度繼續(xù)升高時(shí),蘭州百合萌發(fā)時(shí)間提前,但萌發(fā)率開始降低,當(dāng)溫度升高到30 ℃時(shí),萌發(fā)率為 42.53%;耀眼最大萌發(fā)率為27.4%(20 ℃),當(dāng)溫度高于 25 ℃ 時(shí)幾乎不萌發(fā)。普瑞頭的萌發(fā)率在25 ℃時(shí)最高,為437%,溫度低于15 ℃時(shí)不萌發(fā),高于30 ℃時(shí)極少數(shù)(<1%)萌發(fā)。白天堂和波安娜萌發(fā)率隨溫度升高而升高,在 20~25 ℃ 間萌發(fā)率增幅最大,30 ℃時(shí)萌發(fā)率最高,分別為2522%、24.76%。

3結(jié)論與討論

從花粉形態(tài)學(xué)角度看,百合屬花粉橢圓體,極面觀為橢圓形,極軸為70.5~142 μm,具遠(yuǎn)極單溝,表面具清楚的網(wǎng)狀雕紋,雕紋粗細(xì)在花粉不同部位較均勻,但會(huì)因品種不同而不同,網(wǎng)脊由大小形狀不一致的單行顆粒組成[7]。本研究的5個(gè)品種百合屬植物花粉皆呈橢圓體,具單溝萌發(fā)孔,雕紋類型為單基柱網(wǎng)紋,與前人研究結(jié)論一致,極軸為92.99~132.72 μm, 與王伏雄等研究的結(jié)論“百合花粉粒極軸長為表2不同溫度下5種花粉的萌發(fā)情況

70.5~142 μm”[7]相符,但較曾小英等測定的結(jié)果“蘭州百合(65 μm)、普瑞頭(84 μm)、波安娜(75 μm)極軸”長[8],這可能是由種植地區(qū)差異和測定時(shí)標(biāo)尺誤差引起的。

百合花粉萌發(fā)所需要的培養(yǎng)時(shí)間不同,年玉欣等的研究結(jié)果表明,不同季節(jié)的花粉在同一條件下培養(yǎng),萌發(fā)時(shí)間差異很大,5月中旬培養(yǎng)4 h后花粉萌發(fā)率達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài),11月上旬培養(yǎng)8 h后花粉萌發(fā)率達(dá)到穩(wěn)定狀態(tài)[6],這可能與生長環(huán)境溫度和光照強(qiáng)度有關(guān)。同時(shí),年玉欣等還以培養(yǎng)基100 g/L+H3BO320 mg/L+CaCl230 mg/L培養(yǎng)溫室東方百合花粉,結(jié)果發(fā)現(xiàn),在2 h內(nèi)無萌發(fā),5 h后萌發(fā)率較高[6]。

本研究結(jié)果表明,在相同溫度下,不同品種百合萌發(fā)時(shí)間有差異,同一品種不同溫度下萌發(fā)時(shí)間和最終萌發(fā)率也有明顯差異。隨著溫度升高,各品種花粉粒萌發(fā)時(shí)間提前,但最終萌發(fā)率不同,蘭州百合和耀眼的最適萌發(fā)溫度為20 ℃,普瑞頭的為25 ℃,白天堂和波安娜則可能是30 ℃或更高溫度。

花粉生活力和萌發(fā)率主要取決于品種自身的遺傳特性,與引種栽培適應(yīng)性也有一定的關(guān)系[9]。在雜交育種中可選擇蘭州百合、普瑞頭等萌發(fā)率較高的品種作為父本,這樣可以大大提高授粉成功率,從而進(jìn)一步確保雜交的成功和植株的正常生長。另外,在西寧等晝夜溫差很大的地區(qū)選擇花粉粒萌發(fā)速度快、萌發(fā)率高的時(shí)間段授粉也至關(guān)重要,由本試驗(yàn)得出如以蘭州百合、耀眼為父本授粉,可選擇在夏天的上午進(jìn)行,西寧上午的溫度約20 ℃,有利于花粉管迅速萌發(fā),提高雜交成功率;以普瑞頭作父本,則適合中午雜交,下午的升溫正好滿足花粉萌發(fā);白天堂和波安娜則適合在午后雜交,下午持續(xù)的高溫為花粉萌發(fā)提供良好條件。當(dāng)然,花粉萌發(fā)不只受溫度的影響,濕度、輻射、貯藏條件等[10-11]對不同品種百合花粉的萌發(fā)率也有影響,判定一種花粉的萌發(fā)能力,須要綜合各影響因子,這還有待進(jìn)一步研究。

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