范張姣 景曉琦 蔡翠芳

苦參炭薄層色譜鑒別研究

范張姣 景曉琦 蔡翠芳

目的研究苦參炭的薄層色譜鑒別。方法選用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑, 濃氨水飽和, 碘化鉍鉀試液為顯色劑, 以苦參堿、槐定堿、氧化苦參堿為對照品進(jìn)行薄層鑒別。結(jié)果選用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑, 碘化鉍鉀試液為顯色劑進(jìn)行薄層鑒別, 色譜斑點(diǎn)清晰, 能有效提供鑒別特征。結(jié)論方法可行, 為建立完整、科學(xué)的苦參炭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供了參考依據(jù)。

苦參炭；薄層色譜；展開劑

苦參為豆科植物苦參(Sophora flavescens Ait.)的干燥根［1］。始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》, 列為中品, 在《雷公炮炙論》即有關(guān)于其炮制的記載, “凡使苦參, 先用糯米濃泔汁浸一宿, 其腥穢氣并浮在水面上, 須重重淘過, 即蒸, 從巳至申”等。歷代醫(yī)藥文獻(xiàn)中, 有關(guān)苦參炮制品的記述不多, 計(jì)有生苦參、炒苦參、麩炒苦參、煨苦參、苦參炭、醋苦參、酒苦參、米泔制苦參等, 現(xiàn)今常用的為生苦參［2］?？鄥⑻渴乾F(xiàn)代發(fā)展的炮制品, 在《全國中藥炮制規(guī)范》和《山西省中藥炮制規(guī)范》均載有苦參炭的炮制方法和成品性狀［3,4］?！吨腥A人民共和國藥典》2010版中對苦參質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的記載以苦參堿、氧化苦參堿作為指標(biāo), 未收錄苦參炭。本實(shí)驗(yàn)旨在研究苦參炭的薄層色譜鑒別方法, 為建立完整、科學(xué)的苦參炭質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提供參考依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1儀器 KQ-500B型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)；HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋(金壇市科析儀器有限公司)；QE-100二兩裝高速中藥粉碎機(jī)(武漢市屹立工具有限公司)；92SM-202A-DPR-SCS型電子分析天平；薄層層析硅膠G(青島海洋化工廠)；薄層層析硅膠G(青島基億達(dá)硅膠試劑廠)。

1.2藥材 苦參飲片10批分別購自山西省相關(guān)醫(yī)藥公司、河北安國藥市、安徽省亳州藥市, 經(jīng)山西藥科職業(yè)學(xué)院中藥系裴慧榮副教授鑒定所購藥材為豆科植物苦參(Sophora flavescens Ait.)的干燥根；苦參炭飲片由本實(shí)驗(yàn)室按苦參炭炮制方法炮制所得。

1.3試劑 苦參堿(中國食品藥品檢定所；110805-200508)；氧化苦參堿(中國食品藥品檢定所；110780-201007)；槐定堿(中國食品藥品檢定所；110784-200804)；其它試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1供試品制備 取苦參炭粉末0.5 g, 加濃氨試液0.3 ml、三氯甲烷25 ml, 放置過夜, 濾過, 濾液蒸干, 殘?jiān)尤燃淄?.5 ml使溶解, 作為供試品溶液。

2.2對照品液制備 取苦參堿、槐定堿、氧化苦參堿對照品各10 mg, 分別加乙醇5 ml使溶解, 制成每1 ml含2 mg的溶液, 作為對照品溶液。

2.3展開劑和顯色劑選擇 照薄層色譜法(附錄Ⅵ B)試驗(yàn), 吸取上述供試品和對照品兩種溶液各4 μl (對照品濃度為1 ml含0.2 mg), 分別點(diǎn)于噴以2%氫氧化鈉溶液制備的硅膠G薄層板上(青島海洋化工廠)。采用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑, 展距8 cm, 取出, 晾干, 再以甲苯-乙酸乙酯-甲醇-水(2:4:2:1)10℃以下放置的上層溶液為展開劑, 展開, 取出,展距8 cm展開, 噴以碘化鉍鉀試液所得斑點(diǎn)清晰、分離度較差, 對照品斑點(diǎn)不明顯。再噴亞硝酸鈉乙醇試液, 斑點(diǎn)立刻消失。

采用三氯甲烷-甲醇-濃氨試液(5:0.6:0.3)10℃以下放置的下層溶液為展開劑(《中華人民共和國藥典》2010年版一部苦參薄層色譜法)展開, 噴以碘化鉍鉀試液所得斑點(diǎn)清晰、分離度較差, 對照品斑點(diǎn)不明顯。再噴亞硝酸鈉乙醇試液,斑點(diǎn)立刻消失。

針對以上問題, 一是將對照品與供試品點(diǎn)樣量均改為5 μl；二是調(diào)整展開劑, 選用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑展開, 濃氨水飽和；三是僅噴碘化鉍鉀試液。同樣選用青島海洋化工廠分廠生產(chǎn)的薄層板進(jìn)行試驗(yàn), 所得斑點(diǎn)清晰、分離度好, 3種生物堿可在同一塊薄層板上檢識。

圖1

圖2

圖3

2.4耐用性試驗(yàn) 采用噴以2%氫氧化鈉溶液制備的羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G板(青島基億達(dá)硅膠試劑廠),作為固定相, 選用每1 ml含2 mg的對照品溶液, 點(diǎn)樣量為5 μl, 供試品點(diǎn)樣量為5 μl；用甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑展開, 濃氨水飽和, 噴碘化鉍鉀試液顯色。所得斑點(diǎn)清晰、分離度好。結(jié)果見圖3。結(jié)果所得斑點(diǎn)均顯色清晰且分離度好。

3 討論

根據(jù)藥典中記錄的苦參薄層色譜鑒別方法, 所得斑點(diǎn)不明顯, 分離不佳?？赡苡腥缦略颍阂皇菢悠泛蛯φ掌窛舛绕? 點(diǎn)樣量?。欢钦归_劑展開效果不理想, 且檢識方法繁瑣, 三種生物堿不能在同一塊薄層板上檢識；三是噴亞硝酸鈉乙醇試液后, 斑點(diǎn)消失達(dá)不到展開效果。經(jīng)對比, 最終選擇甲苯-丙酮-甲醇(8:3:1.5)為展開劑, 濃氨水飽和, 碘化鉍鉀試液為顯色劑, 得到的斑點(diǎn)清晰, 分離度佳。

炭藥炮制強(qiáng)調(diào)“炒炭存性”, “太過”或“不及”均會影響有效成分的含量及藥效發(fā)揮。有學(xué)者對苦參飲片的最佳炮制工藝進(jìn)行了研究［5］, 但對于苦參炭的炮制工藝鮮有研究。本實(shí)驗(yàn)所用苦參炭飲片為教師根據(jù)藥典要求及個(gè)人經(jīng)驗(yàn)炮制所得, 為規(guī)范苦參炭炮制工藝, 指導(dǎo)飲片企業(yè)進(jìn)行生產(chǎn), 需進(jìn)一步進(jìn)行相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。

參考資料

［1］ 藥典委員會.中華人民共和國藥典一部.北京：醫(yī)藥科技出版社, 2010:122.

［2］ 楊巨奎, 顧茂書, 楊兆兵。中藥炮制技術(shù)匯編.太原:山西科學(xué)技術(shù)出版社, 1997:78-79.

［3］ 中華人民共和國衛(wèi)生部藥政管理局.全國中藥炮制規(guī)范.北京：人民衛(wèi)生出版社, 1988(9):66-67.

［4］ 山西省衛(wèi)生廳.山西中藥炮制規(guī)范, 1984:70.

［5］ 鄧捷圓, 胡馨, 張英華, 等.正交設(shè)計(jì)法優(yōu)選苦參炮制工藝的研究.中成藥, 2011(07):1206-1208.

Identification research on sophora carbon TLC

FAN Zhang-jiao, JING Xiao-qi, CAI Cui-fang.
Shanxi Pharmaceutical Vocational College, Taiyuan 030031, China

ObjectiveTo study identification of sophora carbon TLC.MethodsSelecting toluenepain-methanol (8:3:1.5) as developing agent,using saturation strong aqua,taking bismuth potassium iodide solution as the chromogenic agent, and setting matrine, huaialkali,bitter and alkali oxide TLC identification for reference substance.ResultsSelects the toluene - acetone - methanol (8:3:1.5) as developing solvent, Bismuth potassium iodide solution for TLC identification as the chromogenic agent,the chromatographic spots were clear, and can effectively provide identification features.ConclusionThe method is feasible, and can be a reference to establish a complete, scientific sophora charcoal for quality standards.

Sophora carbon; TLC identification; Developing solvent

030031 太原, 山西藥科職業(yè)學(xué)院