趙玉梅 賈天華 朱仁英 尹松鶴

巴洛沙星分散片與普通片的藥代動力學(xué)比較研究※

趙玉梅1賈天華1朱仁英1尹松鶴2

目的 建立測定血漿中巴洛沙星濃度的HPLC法，比較巴洛西林分散片與巴洛沙星普通片在健康大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)差異。方法選擇12只健康大鼠分為兩組，分別單劑量口服巴洛沙星分散片與巴洛沙星普通片各10mg，采用高效液相色譜法檢測巴洛沙星的血藥濃度。結(jié)果巴洛沙星分散片與巴洛沙星普通片主要藥代動力學(xué)參數(shù) Cmax分別為（93.0±2.4）μg/L和（89.0±3.1）μg/L，tmax分別為（1.30±0.21）h和（1.80±0.11）h，t1/2分別為（4.68±1.65）h和（4.85±1.42）h，AUC0∞分別為（953.0±27.8）μg/（μg /l）和（836.0±30.1）μg/（μg /l），AUC01分別為（856.0±24.2）μg/（μg /l）和（735.0±32.5）μg/（μg /l）。結(jié)論巴洛沙星分散片tmax、t1/2小于普通片，AUC0∝、Cmax高于普通片，說明巴洛沙星分散片具有一定的速釋優(yōu)點(diǎn)，明顯優(yōu)于普通片。

巴洛沙星；分散片；藥代動力學(xué)；血藥濃度

巴洛沙星是第四代喹諾酮類抗菌藥物，由日本中外制藥株式會社研制并與韓國 Choongwae公司共同開發(fā)[1]，巴洛沙星水溶性差，溶解度僅為1.5mg/m l；口服吸收差，目前國內(nèi)僅有的制劑為膠囊劑和片劑，但其生物利用度較低，且體積較大，給老人、幼兒、特別是吞咽固體制劑困難患者的治療帶來了困難。本實驗研究制備的巴洛沙星分散片，藥物釋放迅速，血藥濃度在短時間內(nèi)達(dá)到峰值。本實驗建立了血漿中巴洛沙星的HPLC方法學(xué)；同時采用該方法，在健康大鼠體內(nèi)，對巴洛沙星分散片與其普通片的藥代動力學(xué)行為進(jìn)行了比較，獲得了比較滿意的試驗結(jié)果。

1 材料與儀器

1.1 儀器高效液相色譜儀（LC1100美國安捷倫公司）施渦混合器（XW-80上海醫(yī)科大學(xué)儀器廠）低溫離心機(jī)（CS-15R型美國Beemkna公司）電子天平（AL-204 賽多利斯）。

1.2 實驗動物選取健康大鼠12只，其均為黑龍江中醫(yī)藥大學(xué)實驗動物中心提供合格證號為P00101006（發(fā)證單位為黑龍江省實驗動物管理委員會）。

1.3 試劑與材料巴洛沙星對照品：由中國藥品生物制品檢定所提供；加替沙星對照品：由中國藥品生物制品檢定所提供；巴洛沙星分散片（自制）；巴洛沙星片：由廣東愛康藥業(yè)有限公司提供，批號20100708。乙腈為色譜純，其他試藥均為分析純。

2 方法

2.1 受試動物選擇12只大鼠，雄、雌各6只，平均體重（0.30±0.01）kg，兩個月內(nèi)未參加過藥物試驗。采用隨機(jī)單劑量雙交叉試驗設(shè)計方案[2]。將12只大鼠隨機(jī)分成兩組，每組6只。給藥前禁食12h，試驗當(dāng)日，分別單劑量1次口服巴洛沙星10mg，溫開水25m l送服，4h后進(jìn)食；試驗期間統(tǒng)一飲食、飲水，2次交叉試驗清洗期均為1周，觀察并記錄給藥后反應(yīng)情況。

2.2 樣本采集分別于服藥前和服藥后0.5、1.0、1.5、2.0、3.0、5.0、9.0、12.0、24.0h，采取 12只大鼠的1.5m l耳緣靜脈血，置于肝素試管中，離心，分取血漿貯存于-40℃冰箱備測。

2.3 方法學(xué)考察

2.3.1 色譜條件 色譜柱：ODS C18（5μm，200.0 mm ×4.6mm）；流動相：磷酸二氫鉀緩沖液-乙腈（75:25）（磷酸和三乙胺調(diào)pH為3.4）；流量：1.0m l；波長294nm；進(jìn)樣量20μl；柱溫：25℃。

2.3.2 血漿樣品預(yù)處理[3]精密量取 0.5m l血漿，加入50μl 5mg/l內(nèi)標(biāo)儲備液，漩渦1min混勻，加入4m l二氯甲烷，漩渦5min混勻，然后在4000r/min下離心15m in，取有機(jī)層2m l，在40℃下氮?dú)獯蹈?，?00μl流動相溶解殘渣，進(jìn)樣量20μl，在上述色譜條件下測定樣品，記錄其色譜圖和巴洛沙星峰面積，計算血清中巴洛沙星的濃度。

2.3.3 專屬性 在上述色譜條件下所得色譜圖顯示，巴洛沙星的保留時間約為9.6min，內(nèi)標(biāo)物加替沙星的保留時間約為11.8min，分離度為2.5；血漿中的雜質(zhì)不干擾樣品的測定，基線平穩(wěn)；因此本法專屬性良好。

2.3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液與標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 精密稱取25.0mg巴洛沙星對照品置于 25m l量瓶中，加水溶解并加0.5m l稀鹽酸助溶，稀釋至刻度制成1.0g/L的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。另精取10.0mg加替沙星對照品置于10m l量瓶中溶解，稀釋至5.0mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作液。精密吸取標(biāo)準(zhǔn)貯備液適量，分別加入空白血漿0.5m l中，制成含巴洛沙星 50、100、200、500、1000、2000和4000μg/L的標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品，對其進(jìn)行液相色譜分析。結(jié)果表明，以巴洛沙星與內(nèi)標(biāo)的峰面積比(Y)對濃度(X)回歸，血漿濃度在50～4000μg/L內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。用加權(quán)法處理，得回歸方程:Y=8.2 ×10-4X－3.5×10-2，Y=0.9982。

2.3.5 精密度 按血漿標(biāo)準(zhǔn)曲線測定方法，配制低、中、高不同濃度數(shù)份巴洛沙星血漿樣品100、500、2000μg/L，按血漿樣品預(yù)處理過程對血漿樣品進(jìn)行預(yù)處理，當(dāng)日內(nèi)測定5批，連續(xù)測定3d，并求得日內(nèi)精密度和日間精密度。結(jié)果日內(nèi) RSD分別為0.8%、0.6%、1.1%（n=5）；日間RSD分別為2.5%、 2.7%、3.0%（n=3）。

2.3.6 回收率 配制低、中、高3種不同濃度的巴洛沙星標(biāo)準(zhǔn)血漿樣品100、500、2000μg/L各5份，按以上相同方法處理步驟操作，計算血漿提取回收率。結(jié)果巴洛沙星在3種濃度時的方法回收率分別為98.3%、98.8%、99.1%（n=5）。

2.3.7 穩(wěn)定性 將含巴洛沙星血漿樣品，于-20℃冷凍24h，反復(fù)分別凍融3次后其含量下降了5%，置于-20℃冰箱分段低溫保存。分別測定其在1、2、5、10、20d冰凍樣品穩(wěn)定性，測定結(jié)果RSD均在±13%以內(nèi)。結(jié)果說明巴洛沙星在血漿中的穩(wěn)定性良好。

3 結(jié)果

取12只大鼠分為兩組，分別給與口服巴洛沙星分散片10mg和巴洛沙星普通片10mg后，測定兩組大鼠的血漿，其平均血藥濃度-時間曲線見圖1。對巴洛沙星的藥-時曲線，采用DAS 2.1軟件進(jìn)行擬合，所計算出的主要藥動學(xué)參數(shù)見表1。結(jié)果表明，巴洛沙星的藥-時曲線符合二室模型。

表1 巴洛沙星主要藥代動力學(xué)參數(shù)[(±s),n=6]

表1 巴洛沙星主要藥代動力學(xué)參數(shù)[(±s),n=6]

參數(shù) 巴洛沙星分散片 巴洛沙星片AUC0-t(μg/h/L) AUC0-∞(μg/h/L) Cmax(μg/L) tmax(h) t1/2(h) 856.0±24.2 953.0±27.8 93.0±2.4 1.30±0.21 4.68±1.65 735.0±32.5 836.0±30.1 89.0±3.1 1.80±0.11 4.85±1.42

圖1 單劑量口服巴洛沙星分散片和巴洛沙星普通片10mg后大鼠體內(nèi)的血藥濃度-時間曲線

4 討論

用不同劑量巴洛沙星分散片和譜通片對 12只健康大鼠交叉口服，測定藥代動力學(xué)參數(shù)，結(jié)果t1/2與給藥劑量無關(guān)。從藥代動力學(xué)參數(shù)比較，巴洛沙星分散片達(dá)到最大峰值時間tmax為1.3h左右，而巴洛沙星普通片達(dá)到最大峰值時間tmax約為1.8h；巴洛沙星分散片的生物利用度是巴洛沙星普通片的1.4倍。結(jié)果表明，巴洛沙星分散片的優(yōu)勢是高效、速釋、生物利用度高，從而證明了分散片制劑的科學(xué)性、優(yōu)越性。

本實驗采用反相高效液相色譜法，以O(shè)DS C18（5μm，200.0 mm×4.6mm，）；流動相：乙腈-磷酸二氫鉀緩沖液（25:75）（三乙胺和磷酸調(diào)pH為3.4）；流量：1.0m l/m in；波長294nm進(jìn)行定量檢測，檢測樣品中巴洛沙星與加替沙星（內(nèi)標(biāo)）均獲得滿意的分離效果，且峰形對稱良好，保留時間短。文中建立的測定人血漿中巴洛沙星濃度的HPLC法，具有操作簡便、靈敏度高、分析時間短等優(yōu)點(diǎn)。

[1] 糜志遠(yuǎn),劉萬忠.新氟喹諾酮類抗生素巴洛沙星研究進(jìn)展[J].中國新藥雜志,2005,14(9):1205-1207.

[2] 陳奇.中藥藥理研究方法學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,1993: 556-557,562-564.

[3] 徐叔云.藥理實驗方法學(xué)[M].2版.北京:人民衛(wèi)生出版社,1991: 712-712.

Pharmacokinetics Comparison Between Amoxicillin Dispersible Tablets and Balofloxacin Tablets and Balofloxacin tablets in Healthy Volunteers

Zhao Yumei Jia Tianhua Zhu Renying Yin Songhe

Ob jective To develop a HPLC method for determ ination of balo floxacin in human plasma and com pare the pharmacokinetics of balofloxacin dispersible tab lets and ba lo floxacin tablets in healthy volunteers.MethodsTwe lve hea lthy m ale volunteers were selected and divided into two groups,who

a single oral dose of 10 m g balofloxacin sustained release tablets and balofloxacin tablets respectively.The p lasma concentrations of balofloxacin were determ ined by HPLCResu ltsBalofloxacin dispersible tablets and balofloxacin tab lets in the main pharm acokinetic parameters of Cmaxwere(93±2.4)μg/L and (89±3.1)μg/L,Tmaxwere (1.30±0.21)h and (1.80±0.11)h, t1/2were(4.68±1.65)h and (4.85±1.42)h,AUC0∞) were (953±27.8)μg/(μg/l) and (836±30.1)μg/(μg/l), AUC01were (856 ±24.2)μg/(μg/l) and (735±32.5)μg/(μg/l).Conc lusionBalofloxacin dispersible tab lets Tmax,t1/2is less than common tablets, AUC0∞, Cmaxhigher than ordinary tablets, indicate that it has certain advantages of quick release balofloxacin dispersib le tablets,significantly better than the ordinary tab lets.

Balofloxacin;Dispersibletablets;Plasmadrug concentration;Pharmacokineticd

R969.1

A

1673-5846(2014)05-0214-03

1黑龍江省牡丹江醫(yī)學(xué)院紅旗醫(yī)院，黑龍江牡丹江 157011

2牡丹江市食品藥品檢驗檢測中心，黑龍江牡丹江 157011

黑龍江省衛(wèi)生廳科研課題（2011-305）