徐兵，戴蔡榮，鄭麗雪，湯文，冀宏

（常熟理工學(xué)院生物與食品工程學(xué)院，江蘇常熟215500）

白背毛木耳枝條菌種的制作

徐兵，戴蔡榮，鄭麗雪，湯文，冀宏*

（常熟理工學(xué)院生物與食品工程學(xué)院，江蘇常熟215500）

用3種不同材質(zhì)的枝條為材料制作白背毛木耳枝條菌種，然后用制作的枝條進(jìn)行菌種擴(kuò)大栽培。以菌絲長滿袋時(shí)間為指標(biāo)，考查菌絲對不同材質(zhì)枝條的吃料深度，確定了經(jīng)過打毛處理的竹筷為白背毛木耳袋栽的最適宜枝條，枝條接種根數(shù)為2根。在培養(yǎng)溫度26℃下，以竹筷為枝條菌種的菌包平均生產(chǎn)周期為21 d，相比傳統(tǒng)栽培方式縮短了16 d。

白背毛木耳；枝條菌種；制作

白背毛木耳 （Auricularia polytricha）隸屬于擔(dān)子菌亞門、層菌綱、木耳目、木耳科、木耳屬中的毛木耳種[1]，20世紀(jì)末由臺(tái)灣地區(qū)引進(jìn)，是國際市場需求的主要毛木耳品種[2]。

在食用菌袋栽時(shí)利用枝條菌種栽培是一種新興技術(shù)，任桂梅[3]等的研究表明：枝條種與木屑種相比，枝條種菌絲生長速度更快、長勢更好，且單位接種量是后者的1.5倍～2倍。吳華軍等[4]采用的長枝條菌種法具有發(fā)菌快、周期短、菌齡整齊一致，接種方便且成本低等優(yōu)點(diǎn)。姜濤[5]等報(bào)道了用枝條菌種生產(chǎn)香菇栽培種較傳統(tǒng)的生產(chǎn)方法具有以下優(yōu)勢：①操作簡便，感染率低；②菌齡上下一致，菌種純度高，抗雜力強(qiáng)；③培養(yǎng)周期短，節(jié)省燃料；④擴(kuò)繁指數(shù)提高2倍～3倍。

本實(shí)驗(yàn)以白背毛木耳為研究對象，通過比較不同枝條制作的枝條菌種生產(chǎn)食用菌的生產(chǎn)周期，篩選出適宜的枝條及接種量來完善枝條菌種栽培技術(shù)，以期為枝條菌種在生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 供試菌種

白背毛木耳：常熟理工學(xué)院微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室提供。

1.1.2 枝條材質(zhì)

木筷、竹筷、一次性筷子。

1.1.3 培養(yǎng)基

斜面培養(yǎng)基：PDA培養(yǎng)基[6]。

制種栽培料：木屑40%、棉籽殼50%、麩皮8%、石膏粉1%、石灰粉1%，含水量60%。

擴(kuò)培栽培料：棉籽殼44%、木屑42%、麩皮10%、生石灰2%、石膏粉1%、葡萄糖1%，含水量60%。

1.2 方法

1.2.1 枝條預(yù)處理

將3種不同材質(zhì)的枝條統(tǒng)一截成7.5 cm，用1%的生石灰水浸泡4 d～5 d，使枝條吸透水。然后將半數(shù)的每種枝條進(jìn)行打毛，使枝條表面變粗糙。

1.2.2 菌種活化

配制PDA培養(yǎng)基，分裝試管，滅菌后擺斜面。接種白背毛木耳菌種后，置于26℃霉菌培養(yǎng)箱培養(yǎng)，當(dāng)菌絲長滿斜面即完成了菌種活化。

1.2.3 制種栽培

1.2.3.1 拌料

按照比例，備齊合適重量的材料，進(jìn)行拌料。先把鋸木屑平鋪在底層，再倒入麩皮，最后是棉籽殼，將石灰粉充分?jǐn)嚢枞芙夂?，倒入料堆，用腳踩實(shí)。最后將石膏粉攪拌溶解，倒入料堆，加水至60%的含水量。

1.2.3.2 發(fā)酵

攪好的基料要堆放在室外發(fā)酵一周。將料堆修成平頂，然后拍實(shí)表面，再用竹桿將料堆從頂?shù)降状┮恍┛?，這樣可以避免料堆內(nèi)部厭氧菌的過度繁殖，酸性過高。發(fā)酵周期為一周，其間每隔2天將料堆翻動(dòng)一次[7]。一周之后，發(fā)酵好的基料就可以裝袋了。

1.2.3.3 裝袋

將發(fā)酵好的栽培料裝袋。裝袋時(shí)每袋插入50根枝條，且枝條處于栽培料中央，表面被基料覆蓋。

1.2.3.4 滅菌接種

將栽培種袋放入蒸汽滅菌鍋內(nèi)121℃滅菌2 h。滅菌完成后，等袋溫降到33℃以下，開始接種，每袋接種量為1.5 cm2。

1.2.3.5 培養(yǎng)

將接種好的栽培袋置于26℃的霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。當(dāng)菌絲長滿袋后就可以進(jìn)行擴(kuò)大栽培了。在進(jìn)行擴(kuò)培時(shí)，每種材質(zhì)的枝條隨機(jī)取5根觀察菌絲附著情況，測量并統(tǒng)計(jì)菌絲吃料深度。

1.2.4 擴(kuò)大栽培

1.2.4.1 拌料同制種期

1.2.4.2 發(fā)酵同制種期

1.2.4.3 裝袋

將發(fā)酵好的栽培料裝袋。裝袋時(shí)要注意每袋插入一根試管，制孔用于接下來接種枝條菌種。

1.2.4.4 滅菌接種

滅菌同制種期，接種時(shí)，每種枝條菌種均分別接1、2、3、4根。

1.2.4.5 培養(yǎng)

將接種好的栽培袋置于26℃的霉菌培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)，考查菌絲滿袋時(shí)間。

2 結(jié)果與分析

2.1 制種期結(jié)果

圖1 制種期菌絲長滿袋時(shí)間Fig.1 The time of mycelia overgrowing the bag for seed production period

表1 白背毛木耳菌絲在枝條上的附著密集程度Table 1 Adhesion intensity in the branches of Auricularia Polytricha hyphae

由圖1可以看出，一次性筷子、竹筷、木筷的栽培袋菌絲長滿袋的時(shí)間分別為30、28、34 d，竹筷制種所耗時(shí)間最短。

由表1可以看出，當(dāng)菌絲長滿袋后，隨機(jī)抽取的6種枝條中，木筷上的菌絲密集程度最高，附著力最強(qiáng)，最不易脫落，而且菌絲在木筷內(nèi)延伸的最深；竹筷上菌絲較密集，附著力一般，不易脫落，吃料深度最淺；一次性筷子上菌絲較少，附著力低，易脫落，吃料深度居中。其中經(jīng)過打毛處理的枝條上菌絲多于未經(jīng)處理的枝條，附著力高于后者。

2.2 擴(kuò)培期結(jié)果

擴(kuò)培期結(jié)果如圖2～圖7。

綜合圖2～圖7，當(dāng)枝條菌種接種量越大時(shí)，菌絲長滿袋的時(shí)間越短。當(dāng)枝條接種量分別為2、3、4根時(shí)，菌絲長滿袋的時(shí)間差在4d以內(nèi)。從接種枝條成本、操作簡便性等方面綜合考慮，2根枝條菌種是適宜的接種量。

圖2 一次性筷子接種數(shù)與菌絲長滿袋時(shí)間的關(guān)系Fig.2 The relationship between the inoculated number of disposable chopsticks and the time of mycelia overgrowing the bag

圖3 一次性筷子（打毛）接種數(shù)與菌絲長滿袋時(shí)間的關(guān)系Fig.3 The relationship between the inoculated number of disposable chopsticks after dealing with the rough machining and the time of mycelia overgrowing the bag

圖4 竹筷接種數(shù)與菌絲長滿袋時(shí)間的關(guān)系Fig.4 The relationship between the inoculated number of bamboo chopsticks and the time of mycelia overgrowing the bag

由圖8可以看出，當(dāng)接種量為2根時(shí)，接種竹筷（打毛）的菌包菌絲長滿袋時(shí)間最短。傳統(tǒng)白背毛木耳生產(chǎn)方式菌絲長滿袋時(shí)間為30 d～40 d，利用打毛竹筷枝條菌種生產(chǎn)時(shí)平均時(shí)間為21 d，平均可以縮短16 d。

3 結(jié)論

木筷枝條種菌絲吃料深度最大、附著力最強(qiáng)，但生產(chǎn)周期過長，而且使用木筷與森林環(huán)保相悖。竹筷枝條種生產(chǎn)周期相對最短，而且竹筷來源廣泛、價(jià)格低廉，所以經(jīng)過打毛處理的竹筷是白背毛木耳枝條種栽培的適宜枝條，適宜的接種量為每袋菌包2根枝條菌種。

圖5 竹筷（打毛）接種數(shù)與菌絲長滿袋時(shí)間的關(guān)系Fig.5 The relationship between the inoculated number of bamboo chopsticks after dealing with the rough machining and the time of mycelia overgrowing the bag

圖6 木筷接種數(shù)與菌絲長滿袋時(shí)間的關(guān)系Fig.6 The relationship between the inoculated number of chopsticks and the time of mycelia overgrowing the bag

圖7 木筷（打毛）接種數(shù)與菌絲長滿袋時(shí)間的關(guān)系Fig.7 The relationship between the inoculated number of chopsticks after dealing with the rough machining and the time of mycelia overgrowing the bag

利用枝條菌種栽培食用菌有著許多優(yōu)點(diǎn)，例如由于枝條菌種接種工序簡單，所以能克服其它菌種常規(guī)接種存在的一些問題，加之接種后，發(fā)菌時(shí)間短，又大大降低了雜菌污染的危險(xiǎn)性。調(diào)查顯示，應(yīng)用該技術(shù)的農(nóng)村栽培戶，結(jié)果污染率最高為7%，是一項(xiàng)很值得推廣的新技術(shù)[8]。相信將來枝條菌種袋栽食用菌的技術(shù)會(huì)得到長足發(fā)展，使食用菌栽培更加規(guī)模化。

圖8 接種量為2根時(shí)各枝條種菌絲長滿袋時(shí)間Fig.8 The time of mycelia overgrowing the bag when inoculum size were two branchs

[1]呂作舟.食用菌栽培學(xué)[M].北京:高等教育出版社,2006

[2]冀宏,李智,鄭麗雪.白背毛木耳菌絲體深層發(fā)酵工藝優(yōu)化[J].食品科學(xué),2010,31(23):204-209

[3]任桂梅,喬文蘭,賀曉龍.廢筷子制作食用菌枝條菌種初探[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2005,33(11):2039

[4] 吳華軍,康先坡,張振喜,等.香菇長枝條菌種生產(chǎn)技術(shù)[J].中國食用菌,1998,17(4):32-33

[5] 姜濤,張忠偉,薛建臣,等.香菇枝條菌種的制作與應(yīng)用技術(shù)[J].農(nóng)業(yè)與技術(shù),2007,27(1):125

[6]鄭麗雪,胡耀輝,齊斌.釀酒酵母生產(chǎn)谷胱甘肽的培養(yǎng)條件的研究[J].食品科學(xué),2007,28(10):391-394

[7] 李會(huì)杰,劉巧寧,馬俊江,等.利用枝條菌種高效栽培平菇[J].食用菌,2011(3):45-46

[8]倪琪,李書生,汪婉芳,等.金針菇枝條菌種預(yù)防生產(chǎn)中病害技術(shù)初探[J].中國食用菌,1990,9(6):21-22

Branch Strains Production of Auricularia Polytricha

XU Bing，DAI Cai-rong，ZHENG Li-xue，TANG Wen，JI Hong*
（College of Biology and Food Engineering，Changshu Institute of Technology，Changshu 215500，Jiangsu，China）

The branches of the three kinds of different materials were used to make branch strains. Then the branch strains were used to expand the cultivation.Using the time of mycelia overgrowing the bag as index，the depth of materials were examined for different branchs.The result showed that the best branchs were bamboo chopsticks after dealing with the rough machining.Inoculum size were two chopsticks.Under the conditions of 26℃，The average production cycle of hyphae package was 21 days，shorten the 16 days compared with the traditional methods.

Auricularia Polytricha；branch strains；production

10.3969/j.issn.1005-6521.2014.19.031

2014-02-28

白背毛木耳特色品種選育及液體菌種關(guān)鍵技術(shù)研究與示范（CN201308）；白背毛木耳生產(chǎn)關(guān)鍵技術(shù)及規(guī)?；瘧?yīng)用（JHB2012-49）作者簡介：徐兵（1982—），男（漢），實(shí)驗(yàn)師，學(xué)士，研究方向：食用菌學(xué)。

*通信作者：冀宏（1969—），男（漢），教授，博士，研究方向：食、藥用菌工程技術(shù)研究及現(xiàn)代農(nóng)業(yè)技術(shù)經(jīng)濟(jì)與管理。