巫曉華

(韶關(guān)市粵北第二人民醫(yī)院藥劑科，廣東 韶關(guān) 512026)

大觀霉素是世界衛(wèi)生組織推薦治療淋球菌感染的藥物，也是目前我國(guó)淋病治療方案選用藥物之一，抗生素對(duì)淋球菌抗菌活性監(jiān)測(cè)結(jié)果對(duì)于淋病治療的藥物選擇起著重要作用，可了解現(xiàn)行淋病治療方案在當(dāng)?shù)氐挠行?，為淋病防治策略的制定提供科學(xué)依據(jù)。為了解大觀霉素對(duì)淋球菌的抗菌活性情況，我們按WH0西太平洋地區(qū)淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)方法測(cè)定了大觀霉素和其他4種抗生素對(duì)在廣州地區(qū)2011～2013年問收集493株淋球菌的最小抑菌濃度(MIC)，分析其對(duì)淋球菌抑菌活性，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 493株淋球菌由2011～2013年我中心性病門診患者的泌尿生殖道分泌物中分離得到，男性標(biāo)本自尿道口內(nèi)3～4 cm處，女性由宮頸口內(nèi)1～2 cm處取材，接種于選擇性培養(yǎng)基(TM)，所有菌株經(jīng)革蘭染色，氧化酶和過氧化氫酶試驗(yàn)及糖發(fā)酵試驗(yàn)確證后液氮凍存?zhèn)溆谩４笥^霉素、頭孢曲松、青霉素、四環(huán)素和環(huán)丙沙星等5種抗生素由中國(guó)性病防治技術(shù)指導(dǎo)中心提供。GC基礎(chǔ)培養(yǎng)基(OXOID公司)加入10%新鮮羊血。5株淋球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株(A，B，C，D，E)由中國(guó)性病防治技術(shù)指導(dǎo)中心贈(zèng)送，其中A，B，C，D株為產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶陰性菌株，E株為產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性菌株。

1.2方 法

1.2.1菌株對(duì)抗生素敏感性測(cè)定采用WH0西太區(qū)淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)項(xiàng)目推薦的瓊脂稀釋法測(cè)定MIC。先將各種抗生素用適當(dāng)?shù)木彌_液溶解，配成溶液，再倍比稀釋成多個(gè)濃度，分別取1 ml藥液與9 ml高壓滅菌冷至50 ℃左右含10%羊血Gc培養(yǎng)基混合，傾注平皿，各種抗生素在培養(yǎng)基平皿上的最終濃度分別為：青霉素0．03～128 μg/ml，四環(huán)素l～64 μg/ml，頭孢曲松0．001～1 μg/mJ，大觀霉素2～128 μg/ml，環(huán)丙沙星0．03～32 μg/ml。

試驗(yàn)菌株和標(biāo)準(zhǔn)菌株先在無選擇性培養(yǎng)基(GC)上傳代2次，用16～18 h的新鮮培養(yǎng)物制成107～108 efu/ml的菌懸液，用多頭點(diǎn)接種器蘸取菌液接種于各抗生素瓊脂平皿，經(jīng)35 ℃培養(yǎng)24 h觀察結(jié)果，以能抑制淋球菌生長(zhǎng)的最小藥物濃度為該藥的MIC。每批試驗(yàn)均由標(biāo)準(zhǔn)菌株作質(zhì)控，按WH0西太區(qū)淋球菌耐藥監(jiān)測(cè)項(xiàng)目推薦的標(biāo)準(zhǔn)判斷藥物敏感性．

1.2.2產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶淋球菌測(cè)定采用紙片酸度定量法，即將濾紙片吸足青霉素溶液(以溴甲酚紫為指示劑)取待檢菌株在濾紙片上涂一直徑為5 mm的涂膜，置37 ℃孵育30 min，涂膜顏色由紫變黃為陽(yáng)性(產(chǎn)生B—內(nèi)酰胺酶的菌株能分解青霉素的13—內(nèi)酰胺環(huán)形成青霉素噻唑酸，使指示劑發(fā)生顏色變化)，涂膜顏色不變者為陰性。以標(biāo)準(zhǔn)菌株E株作為陽(yáng)性對(duì)照，標(biāo)準(zhǔn)菌株A株為陰性對(duì)照。

2 結(jié) 果

2.1大觀霉素與其他4種抗生素對(duì)493株淋球菌抑茵活性比較檢測(cè)493株淋球菌未發(fā)現(xiàn)對(duì)大觀霉素和頭孢曲松耐藥株，耐藥率為0，而頭孢曲松中敏的菌株有164株(33．3%)；環(huán)丙沙星的耐藥株436株，耐藥率88．5%；四環(huán)素耐藥率為85．6%(422/493)；對(duì)青霉素耐藥率最高達(dá)89．0%(439/493)。見表1。

表1 大觀霉素與其他4種抗生素對(duì)493株淋球菌抑菌活性比較

2.2大觀霉素與其他4種抗生素對(duì)產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶淋球菌抑菌活性比較493株淋球菌共檢出產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶淋球菌l06株。大觀霉素對(duì)產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶淋球菌MIC50，和MIC50，均為16 mg/L，比耐藥標(biāo)準(zhǔn)低8倍。見表2。

表2 大觀霉素與其他4種抗生素對(duì)106株產(chǎn)B一內(nèi)酰胺酶淋球菌抑菌活性比較

3 討 論

大觀霉素，舊稱奇放線菌素或壯觀霉素，是一族由氨基環(huán)醇為主體和氨基糖苷類以苷鍵結(jié)合而成的抗生素，屬氨基糖苷類抗生素。大觀霉素通過作用于30S核糖體亞基上，抑制細(xì)菌蛋白質(zhì)的合成，對(duì)革蘭陰性和革蘭陽(yáng)性菌均有抗菌作用。大觀霉素是WHO推薦治療淋球菌感染的藥物，也是目前我國(guó)淋病治療方案選用藥物之一，該方案推薦用大觀霉素治療淋菌性尿道炎、直腸炎2 g/次肌肉注射，宮頸炎妊娠期淋病4 g/次肌肉注射，以及兒童淋病、淋菌性附睪炎、盆腔炎等的治療選用藥物。

本次研究結(jié)果顯示大觀霉素對(duì)淋球菌的抑菌活性最高，敏感性為100%，表明本地區(qū)2011～2013年間大觀霉素對(duì)淋球菌具有強(qiáng)大的抑菌活性，雖然部分地區(qū)偶有報(bào)道檢測(cè)出耐大觀霉素淋球菌，但其耐藥率很低，僅有1%左右，說明大觀霉素仍然對(duì)淋球菌有很好的抗菌活性。目前頭孢曲松也作為WHO和我國(guó)推薦治療淋病的首選藥物，本次研究雖未檢出淋球菌對(duì)頭孢曲松耐藥株，而其低敏的占33．3%，治療時(shí)應(yīng)注意劑量和療效。青霉素、環(huán)丙沙星和四環(huán)素的耐藥率甚高，分別為89．0%、88．5%和85．6%，提示這3種藥物對(duì)淋球菌的抗菌活性很低。

MIC結(jié)果分析顯示大觀霉素的MIC均為16 μg/ml，與耐藥標(biāo)準(zhǔn)(≥128 μg/ml)相差8倍，累計(jì)抑菌率為100%(MIC100)時(shí)，MIC值才32 μg/ml，提示大觀霉素仍有很好的抑菌活性。頭孢曲松MIC50和MIC90分別為0．03 μg/ml和0．06 μg/ml，累計(jì)抑菌率為100%(MIC100)時(shí)，其MIC值為0．25 μg/ml，處在中敏范圍。青霉素的MIC50及MIC90分別超過耐藥標(biāo)準(zhǔn)的8倍和l28倍。四環(huán)素和環(huán)丙沙星的MIC50及MIC90也超過了耐藥標(biāo)準(zhǔn)。提示青霉素、四環(huán)素和環(huán)丙沙星已不能作為治療淋病的主要藥物。

大觀霉素對(duì)產(chǎn)B一內(nèi)酰胺酶淋球菌也具有強(qiáng)大的抗菌活性，產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶淋球菌對(duì)大觀霉素的MIC50和MIC90均為16 μg/ml，比耐藥標(biāo)準(zhǔn)低8倍，而青霉素和四環(huán)素對(duì)產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶淋球菌抗菌活性更差，青霉素的MIC50和MIC90分別達(dá)到為64 μg/ml和>128 μg/ml，超出耐藥標(biāo)準(zhǔn)64倍和大于128倍；四環(huán)素的MIC50和MIC90分別超出耐藥標(biāo)準(zhǔn)4倍和64倍。表明大觀霉素?zé)o論對(duì)產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶陰性淋球菌還是產(chǎn)B—內(nèi)酰胺酶陽(yáng)性淋球菌都有很好的抗菌活性。

[1] 蘇曉紅，戴秀芹，孫厚華，等．l999—2002年南京地區(qū)淋球菌分離株抗生素敏感性監(jiān)測(cè)[J]．中華皮膚科雜志，2008，37 (5)：262-264．

[2] 鄭和平，劉仲秋，張木有，等．5種抗生素對(duì)淋病奈瑟氏菌的抑菌效果研究[J]．中國(guó)抗生素雜志，2011，23(5)：377-379．