趙硯杰

(遼寧省本溪市中心醫(yī)院，遼寧 本溪 117000)

細(xì)胞塊免疫標(biāo)記技術(shù)在胸腹水細(xì)胞病理診斷及鑒別診斷中的應(yīng)用價(jià)值

趙硯杰

(遼寧省本溪市中心醫(yī)院，遼寧 本溪 117000)

目的分析并探討細(xì)胞塊免疫標(biāo)記技術(shù)應(yīng)用于胸腹水細(xì)胞病理診斷及鑒別診斷中的價(jià)值。方法收集我院病理科以胸腹水做成的細(xì)胞塊122例，其中確診為癌的病例116例，為間皮細(xì)胞增生活躍的有6例。對(duì)其進(jìn)行HE常規(guī)染色和細(xì)胞免疫標(biāo)記的處理，并對(duì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果CEA在大部分腺癌中表達(dá)水平都比較高，但在間皮細(xì)胞下基本不表達(dá)；CA125在卵巢癌細(xì)胞中表達(dá)的水平比較高為88%；TTF-1在肺腺癌細(xì)胞中表達(dá)水平較高為90%；BerEP4在大部分腺癌中表達(dá)水平都比較高，但在間皮細(xì)胞下基本不表達(dá)；CDX2在腸癌和胃癌細(xì)胞中表達(dá)較高分別為90%和56%；GDFP15在乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)較高為88%；Calretinin在間皮瘤及間皮增生細(xì)胞中表達(dá)較高分別為100%和83%，在其他腺癌細(xì)胞中表達(dá)的情況極少。結(jié)論細(xì)胞塊免疫標(biāo)記技術(shù)能夠較為準(zhǔn)確的進(jìn)行胸腹水細(xì)胞病理的診斷及鑒別，且方法簡(jiǎn)便實(shí)用，具有較好的應(yīng)用價(jià)值。

胸腹水；細(xì)胞塊；免疫標(biāo)記；診斷及鑒別

在臨床上細(xì)胞病理診斷時(shí)，常常會(huì)遇到各種體液找癌細(xì)胞的送檢標(biāo)本，其中最多也最為常見(jiàn)的就是胸腹水標(biāo)本[1]。由于經(jīng)常規(guī)離心制作的涂片容易發(fā)生細(xì)胞堆積的現(xiàn)象，致使胸腹水找癌細(xì)胞時(shí)細(xì)胞量不理想，結(jié)構(gòu)不清晰等，導(dǎo)致很難進(jìn)行及時(shí)準(zhǔn)確的診斷[2]。

1 資料與方法

1.1 一般資料：收集我院病理科以胸腹水做成的細(xì)胞塊122例，其中確診為癌的病例116例，為間皮細(xì)胞增生活躍的有6例。診斷為癌的116例病例中包括腹水37例，胸水79例，通過(guò)組織學(xué)證實(shí)，其中腸癌21例，胃癌16例，肺癌29例，卵巢癌17例，乳腺癌17例，惡性間皮瘤8例，間皮細(xì)胞增生活躍的6例。

病例滿足條件：①所選取的病例具有較好的免疫標(biāo)記、細(xì)胞塊和HE切片的資料；②所選取的病例經(jīng)影像學(xué)檢查、病理切片和臨床跟蹤觀察確診。

1.2 方法：①細(xì)胞塊制備的方法：收集10 mL胸腹水，將其置于一次性可用于離心的塑料管中，以2000 r/min離心10～15 min，取出后倒去上清液，如果樣本為血性胸腹水，可加入少量50%的酒精，待其破壞紅細(xì)胞后再次進(jìn)行離心。離心后，如果沉淀物量少可以重復(fù)加入胸腹水并進(jìn)行離心，直至沉淀物足夠多并且形成固體塊，隨后用擦鏡紙包裹固定，如果離心后沉淀物不成塊狀，可以用少量3%的融化瓊脂塊混勻后再次離心，直至離心后沉淀成為塊狀為止。將塑料管切開(kāi)，然后將擦鏡紙包裹和普通組織一起放入脫水機(jī)，進(jìn)行一系列的脫水處理。②細(xì)胞塊及常規(guī)切片以細(xì)胞免疫化學(xué)方法：使用HE染色法對(duì)細(xì)胞塊切片進(jìn)行染色，并采用細(xì)胞免疫化學(xué)SP法對(duì)其進(jìn)行處理，按照說(shuō)明的修復(fù)要求修復(fù)抗體，按照常規(guī)設(shè)置陰陽(yáng)性對(duì)照，所用試劑生產(chǎn)公司為上海太陽(yáng)生物科技有限公司。

2 結(jié) 果

2.1 HE常規(guī)切片結(jié)果：HE常規(guī)切片能明顯分辯出腫瘤細(xì)胞異型，呈腺泡、腺管和實(shí)性細(xì)胞團(tuán)等方式排列。

2.2 細(xì)胞免疫結(jié)果。免疫結(jié)果判定標(biāo)準(zhǔn)：①陽(yáng)性：細(xì)胞胞質(zhì)或是胞膜、胞核見(jiàn)棕黃色，或是有黃褐色顆粒出現(xiàn)，并且所占細(xì)胞比例＞10%；②陰性：細(xì)胞胞質(zhì)或是胞膜、胞核沒(méi)有棕黃色或黃褐色顆粒出現(xiàn)，或是棕黃色、黃褐色顆粒所占細(xì)胞比例＜10%。

根據(jù)結(jié)果統(tǒng)計(jì)：①CEA在大部分腺癌中表達(dá)水平都比較高，但在間皮細(xì)胞下基本不表達(dá)；②CA125在卵巢癌細(xì)胞中表達(dá)的水平比較高為88%；③TTF-1在肺腺癌細(xì)胞中表達(dá)水平較高為90%；④BerEP4在大部分腺癌中表達(dá)水平都比較高，但在間皮細(xì)胞下基本不表達(dá)；⑤CDX2在腸癌和胃癌細(xì)胞中表達(dá)較高分別為90%和56%；⑥GDFP15在乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)較高為88%；⑦Calretinin在間皮瘤及間皮增生細(xì)胞中表達(dá)較高分別為100%和83%。見(jiàn)表1。

表1 免疫細(xì)胞化學(xué)標(biāo)記（+）表達(dá)[n(%)]

3 討 論

制作細(xì)胞塊的操作過(guò)程比較簡(jiǎn)單，對(duì)設(shè)備是要求比較低，對(duì)于臨床上胸腹水找癌細(xì)胞的診斷中有很高的實(shí)用性，同時(shí)以免疫標(biāo)記進(jìn)行輔助配合，可以明顯提高癌性胸腹水的陽(yáng)性診斷率[3]。CA125分子量為200 kDa，它是卵巢細(xì)胞相關(guān)的膜表面糖蛋白，只有孕期和經(jīng)期婦女的卵巢中可發(fā)現(xiàn)這種抗原，在正常卵巢細(xì)胞中并沒(méi)有CA125抗原；TTF-1在甲狀腺組織和肺組織中均能夠表達(dá)，但其在肺組織中表達(dá)僅局限于肺終末氣道細(xì)胞和肺終末氣道細(xì)胞的腫瘤，因此可作為標(biāo)志物；BerEP4在間皮中不表達(dá)，在腺癌中表達(dá)，它對(duì)于腺癌的敏感性很高在60%～100%，而在間皮瘤中僅有4%表達(dá)，表達(dá)比較微弱；CDX2由311個(gè)氨基酸組成，是一種腸特異性的轉(zhuǎn)錄因子，它主要定位于腸上皮絨毛和隱窩的表面，在腸癌細(xì)胞中陽(yáng)性表達(dá)率高達(dá)95%；GCDFP-15常見(jiàn)于組織囊性病變的囊泡液中，是一種15 kDa的單鏈蛋白，可作為乳腺癌高度敏感型和特異性的標(biāo)志；Calretinin是一種鈣結(jié)合蛋白，它主要在間皮細(xì)胞中表達(dá)，尤其對(duì)上皮性間皮細(xì)胞瘤的鑒定診斷可高達(dá)100%。

CA125在卵巢癌細(xì)胞中表達(dá)的水平比較高為88%；TTF-1在肺腺癌細(xì)胞中表達(dá)水平較高為90%；BerEP4在大部分腺癌中表達(dá)水平都比較高，但在間皮細(xì)胞下基本不表達(dá)；CDX2在腸癌和胃癌細(xì)胞中表達(dá)較高分別為90%和56%；GDFP15在乳腺癌細(xì)胞中表達(dá)較高為88%；Calretinin在間皮瘤及間皮增生細(xì)胞中表達(dá)較高分別為100%和83%，在其他腺癌細(xì)胞中表達(dá)的情況極少。

[1] 郭智俊.胸腹水沉淀物瓊脂石蠟雙包埋切片法與常規(guī)涂片法的對(duì)比[J].臨床與實(shí)驗(yàn)病理學(xué)雜志,2012,18(4):437.

[2] 王琪.兒童腸旋轉(zhuǎn)不良伴中腸扭轉(zhuǎn)的影像分析[J].江蘇醫(yī)藥,2010, 34(7):751.

[3] 李敏.結(jié)腸造影對(duì)新生兒腸旋轉(zhuǎn)不良診斷價(jià)值的探討[J].中國(guó)新生兒科雜志,2011,20(5):219.

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1671-8194（2014）35-0113-01