摘要血液生化指標(biāo)檢驗(yàn)是新藥長(zhǎng)毒動(dòng)物試驗(yàn)中一類(lèi)常用的檢測(cè)技術(shù)，對(duì)于評(píng)價(jià)受試藥物對(duì)動(dòng)物的安全性有重要意義。但在血液生化指標(biāo)檢驗(yàn)過(guò)程中常存在多種因素影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，可能導(dǎo)致藥物評(píng)價(jià)機(jī)構(gòu)對(duì)某些新藥毒理學(xué)性質(zhì)的誤判，甚至造成嚴(yán)重后果。對(duì)血液生化檢驗(yàn)中常見(jiàn)的影響因素進(jìn)行了總結(jié)，并制定了相關(guān)解決對(duì)策，以提升血液生化指標(biāo)檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性，為藥物的動(dòng)物安全評(píng)價(jià)試驗(yàn)提供更為可靠的數(shù)據(jù)。

關(guān)鍵詞藥物安全評(píng)價(jià)；血液生化檢驗(yàn)；影響因素；解決對(duì)策

中圖分類(lèi)號(hào)S859文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2014）09-02611-02

作者簡(jiǎn)介樊靜（1983- ），女，四川成都人，研究實(shí)習(xí)員，從事實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)的教學(xué)與研究工作。

在新藥研發(fā)過(guò)程中，藥物安全性評(píng)價(jià)是新藥研究開(kāi)發(fā)的重要前提， 而長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)又是安全性評(píng)價(jià)試驗(yàn)中的重中之重[1]。長(zhǎng)毒試驗(yàn)需要檢測(cè)的血液生化指標(biāo)包括：丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)堿性磷酸酶移酶和總膽紅素等10余項(xiàng)指標(biāo)，是評(píng)判受試藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物肝、腎等重要臟器功能損傷的重要指標(biāo)。生化指標(biāo)檢測(cè)的準(zhǔn)確性對(duì)于新藥的安全性評(píng)價(jià)至關(guān)重要，而采血、離心、保存及檢測(cè)等的各環(huán)節(jié)均可能影響結(jié)果的準(zhǔn)確性[2]。

只有對(duì)采樣前后影響血液生化檢驗(yàn)的各種因素進(jìn)行有效控制，才能使檢測(cè)結(jié)果具有可靠的參考價(jià)值，如果血生化檢測(cè)結(jié)果不可靠，會(huì)導(dǎo)致人們對(duì)受試藥物的毒理學(xué)性質(zhì)造成誤判，甚至造成嚴(yán)重后果[3]。因此，筆者對(duì)從血樣采集到實(shí)驗(yàn)室檢查的各個(gè)環(huán)節(jié)中的影響因素進(jìn)行了總結(jié)，并制定了有效的解決方案，從而提升檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，以更好地為新藥的安全性評(píng)價(jià)提供可靠的依據(jù)。

1血液生化檢驗(yàn)過(guò)程中的影響因素

1.1采血過(guò)程中的影響因素

1.1.1應(yīng)激。動(dòng)物生理狀態(tài)受到年齡、性別、人員操作技術(shù)等因素的影響。例如，在動(dòng)物的捉取和保定過(guò)程中動(dòng)作粗魯、落地摔傷、用力過(guò)猛等操作不當(dāng)行為，則容易引起試驗(yàn)動(dòng)物的應(yīng)激，造成血糖及乳酸的含量升高。

1.1.2飲食。采集血樣時(shí)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物應(yīng)處于空腹?fàn)顟B(tài)，喂食后食物中的色素、維生素等多種有效成分可能會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成干擾。喂食會(huì)增加血清中 ALT和AST等的水平。飼料中維生素C可使實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血中乳酸脫氫酶含量降低[4]。

1.1.3溶血。造成標(biāo)本溶血的因素有很多，包括采血針頭過(guò)細(xì)、抽吸用力過(guò)猛，劇烈振蕩試管或采血管負(fù)壓過(guò)大等均可造成血樣溶血。溶血標(biāo)本中堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、乳酸脫氫酶、天門(mén)冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶和鉀離子等的含量會(huì)發(fā)生異常增高，對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響[5]。

1.2保存與檢測(cè)中的影響因素

1.2.1血樣的保存。因?yàn)檠獦硬杉笪醇皶r(shí)進(jìn)行檢測(cè)，可引起血液中化學(xué)物質(zhì)的改變，甚至可能發(fā)生病原菌污染，因此采集血樣后應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢測(cè)[6]。

1.2.2處理不當(dāng)。血樣應(yīng)放置應(yīng)在恒定溫度的環(huán)境中，分離血清時(shí)應(yīng)在低溫離心機(jī)中進(jìn)行，氣溫過(guò)高等因素都有可能造成血清化學(xué)成分變化，從而導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。

1.2.3試劑盒選擇。試劑盒種類(lèi)、保存方法、有效期及操作步驟等均可能對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成影響，如試劑盒保存不當(dāng)或超過(guò)有效期等也可對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成誤差。

1.2.4檢測(cè)儀器。血液生化檢驗(yàn)中一般使用全自動(dòng)血生化分析儀進(jìn)行檢測(cè)，儀器的維護(hù)保養(yǎng)及工作狀態(tài)均對(duì)血生化指標(biāo)的檢測(cè)產(chǎn)生影響，如長(zhǎng)時(shí)間未清洗造成污染、長(zhǎng)時(shí)間未校準(zhǔn)等均可影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性[7]。

2采取的解決對(duì)策

2.1血樣采集時(shí)的注意事項(xiàng)①要求試驗(yàn)動(dòng)物采集血樣前禁食禁水。②防止動(dòng)物在檢查前受到外界環(huán)境或人為的劇烈刺激，導(dǎo)致其受到驚嚇并避免劇烈的活動(dòng)。這些因素均可導(dǎo)致應(yīng)激，引起體內(nèi)激素分泌過(guò)多，血液中化學(xué)成分發(fā)生變化，從而影響檢驗(yàn)結(jié)果[8]。③提高采血人員的靜脈穿刺操作水平，防止由于操作不當(dāng)而造成的溶血或凝血等影響血樣質(zhì)量的情況出現(xiàn)。④前壁頭靜脈采血時(shí)，避免結(jié)扎的止血帶過(guò)緊，結(jié)扎后1 min內(nèi)將穿刺工作完成，結(jié)扎太久會(huì)導(dǎo)致采血部位血液循環(huán)不良，血液中成分發(fā)生變化。⑤采取有效手段防止血樣發(fā)生溶血。按照操作規(guī)則合理使用抗凝劑，采樣前檢測(cè)抗凝劑的抗凝效果，及時(shí)淘汰抗凝效果不好的抗凝管；采血過(guò)程中輕輕搖動(dòng)采血管，使血液與抗凝劑成分充分混合；盡量不要使用太細(xì)的針頭采血且在采血時(shí)操作要迅速，避免延遲，以免造成溶血；采血后禁止劇烈搖動(dòng)采血管。另外，若發(fā)現(xiàn)采集的血樣出現(xiàn)溶血現(xiàn)象，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)采血樣[9]。

2.2血樣保存過(guò)程中的注意事項(xiàng)①采集的血樣應(yīng)盡快進(jìn)行檢測(cè)，避免因長(zhǎng)時(shí)間放置血樣而造成微生物的污染或血樣內(nèi)化學(xué)物質(zhì)的變化。②對(duì)于未能及時(shí)檢測(cè)的血樣應(yīng)做好保存工作，可根據(jù)檢測(cè)的指標(biāo)及樣本情況進(jìn)行合理保存，通常的方法是分離血清后進(jìn)行保存，血液樣本以2 000～3 000 r/min，4 ℃離心下10 min，分離上層血清后先暫時(shí)保存在4 ℃冰箱中，檢測(cè)時(shí)再取出。樣本盡量當(dāng)天測(cè)完，特別是血糖、乳酸脫氫酶、肌酸激酶及其同工酶、尿酸、鉀離子等必須在當(dāng)日檢測(cè)完畢，否則存儲(chǔ)24 h 后血清生化指標(biāo)會(huì)受到明顯影響[9]。③制定血樣收驗(yàn)制度，嚴(yán)格審查血樣標(biāo)本的質(zhì)量，對(duì)于質(zhì)量較差的血樣特別是溶血血樣應(yīng)及時(shí)發(fā)現(xiàn)，并及時(shí)重新采集樣本，提升檢驗(yàn)準(zhǔn)確性。對(duì)于檢測(cè)結(jié)果異常的數(shù)據(jù)，及時(shí)對(duì)該樣本進(jìn)行重新檢測(cè)，并反復(fù)比對(duì)，及時(shí)校對(duì)由于個(gè)人操作失誤導(dǎo)致的檢測(cè)結(jié)果誤差。

2.3血樣檢測(cè)過(guò)程中的注意事項(xiàng)①檢驗(yàn)室的環(huán)境條件因素可直接或間接影響檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，環(huán)境條件要符合標(biāo)準(zhǔn)，濕度、溫度等應(yīng)控制在規(guī)定范圍內(nèi)，并注意定期消毒。②嚴(yán)格按照操作說(shuō)明使用儀器，每次檢測(cè)前對(duì)儀器進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)品標(biāo)定，并做好儀器的日常維護(hù)保養(yǎng)，加樣時(shí)注意血清中是否有蛋白凝集物形成，避免堵塞儀器。每次檢測(cè)后要及時(shí)清洗，避免因儀器污染或運(yùn)轉(zhuǎn)不正常造成結(jié)果上的誤差[10]。③校準(zhǔn)檢驗(yàn)所需的臨界值及背景參考值等，要求工作人員能夠?qū)Ω鞣N標(biāo)準(zhǔn)值進(jìn)行核對(duì)，以便于更加準(zhǔn)確地評(píng)估檢測(cè)結(jié)果。

3小結(jié)

影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液生化檢驗(yàn)的因素很多，為進(jìn)一步提高新藥長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)中實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血液生化指標(biāo)檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性，對(duì)可能影響血生化檢查結(jié)果的常見(jiàn)因素進(jìn)行了分析，并制定了可靠的方案，有效防止了影響血清生化指標(biāo)的大部分因素的干擾，減少了檢測(cè)誤差，提高了臨床檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，為評(píng)估新藥的安全性提供了可靠依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1] 齊云，蔡潤(rùn)蘭，劉彬，等.新藥長(zhǎng)毒試驗(yàn)動(dòng)物血液生化測(cè)規(guī)范化研究系列之五[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2006，16（4）：193-196.

[2] 齊云，蔡潤(rùn)蘭，宋楊，等.新藥長(zhǎng)毒試驗(yàn)動(dòng)物血液生化測(cè)定規(guī)范化研究系列之—采血部位對(duì)血液生化值的影響[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2006，16（2）：65-68.

[3] 包玉龍，杜佳林，李顯華，等.不同存放時(shí)間對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物血清生化值影響[J].實(shí)用中醫(yī)內(nèi)科雜志，2011，25（10）：10-12.

[4] 詹純列，肖育華，李新春，等. 普通級(jí)、 SPF 級(jí) SD、Wistar 大鼠血液生化常值的測(cè)定與比較[J].中國(guó)比較醫(yī)學(xué)雜志，2004，14（2）：94-96.

[5] 朱兆生. 探究血液生化檢驗(yàn)過(guò)程中的影響因素及解決對(duì)策[J].中國(guó)實(shí)用醫(yī)藥，2014，9（3）：247-248.

[6] 李平. 淺談化驗(yàn)前的準(zhǔn)備[J].中外醫(yī)學(xué)研究，2009，7（9）： 184-185.

[7] 呂海燕. 臨床生化檢驗(yàn)測(cè)試的質(zhì)量保證[J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2010，17（4）： 373-374.

[8] 李佳. 溶血對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響[J]. 醫(yī)學(xué)信息，2010，23（10）：3830-3831.

[9] 田越. 血生化檢驗(yàn)的影響因素[J].醫(yī)學(xué)信息，2011，11（4）：1660-1661.

[10] 叢玉隆.臨床實(shí)驗(yàn)室分析前質(zhì)量管理及對(duì)策[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2004，27（8）：483-487.