童 丹

（定西師范高等?？茖W(xué)校，甘肅 定西 743000）

測定作物中淀粉含量的方法較多，如酶水解法、酸水解法、還原糖法、碘量法、比色法、折光法、相對(duì)密度法、旋光法等。其中旋光法使用的儀器簡單，試劑種類少，操作簡便、快速，重現(xiàn)性好。本文研究了用旋光法測定馬鈴薯淀粉含量時(shí)水解時(shí)間的差異對(duì)測定結(jié)果的影響，結(jié)果表明，在該實(shí)驗(yàn)條件下，最佳水解時(shí)間為15 min，此時(shí)淀粉完全水解成葡萄糖。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

WXG-4圓盤旋光儀，電子分析天平（精確度為0.000 1 g），0.309 mol/L鹽酸，0.250 mol/L亞鐵氰化鉀，0.100 mol/L醋酸鋅溶液，40%體積分?jǐn)?shù)的乙醇溶液。

實(shí)驗(yàn)材料為新大坪、隴薯3號(hào)、隴薯5號(hào)品種的馬鈴薯。2013年4月28日種于定西師范高等?？茖W(xué)校馬鈴薯試驗(yàn)田，10月10日收獲。收獲后每個(gè)品種隨機(jī)取10個(gè)塊莖，測定淀粉含量。

1.2 實(shí)驗(yàn)原理

（1）一部分樣品用稀鹽酸水解，在澄清和過濾后用旋光法測定淀粉含量。

（2）另一部分樣品用體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液萃取出可溶性糖和相對(duì)分子量低的多糖。然后按（1）給出的步驟進(jìn)行過濾。

1.3 實(shí)驗(yàn)步驟

1.3.1 樣品的制備 將馬鈴薯樣品在60℃～65℃下烘干，粉碎，過60目篩，備用。

1.3.2 樣品總旋光度的測定（1）稱?。?.50±0.05）g制備好的實(shí)驗(yàn)樣品，置于100 ml容量瓶中，加入25 ml 0.309 mol/L鹽酸，攪拌至較好的分散狀態(tài)，再加入25 ml 0.309 mol/L鹽酸。

（2）將容量瓶放入沸水浴中并不停振搖，或者將容量瓶放入裝有磁力攪拌器的沸水浴中以最小速度攪拌。

（3）容量瓶在沸水浴中振搖一定時(shí)間，停止搖動(dòng)或攪拌后取出，立即加入30 ml冷水，用流動(dòng)水快速冷卻至(20±2)℃。

（4）加入5 ml 0.250 mol/L亞鐵氰化鉀溶液，振搖1 min。

（5）加入5 ml 0.100 mol/L醋酸鋅溶液，振搖1 min。

（6）用水定容，搖勻后用合適的濾紙過濾，如果濾出液不完全澄清，用10 ml亞鐵氰化鉀溶液和醋酸鋅溶液重復(fù)上述操作。

（7）在20 cm旋光管中用旋光儀測定溶液的旋光度。

1.3.3 在體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液中可溶性物質(zhì)的旋光度測定 （1）稱取（5.0±0.1）g樣品，置于100 ml容量瓶中，加入80 ml體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇溶液，將容量瓶在室溫下放置1 h；在這1 h中劇烈搖動(dòng)容量瓶6次，以保證樣品和乙醇充分混合；用體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇定容到100 ml，搖勻后過濾。

（2）用移液管吸取50 ml濾液（相當(dāng)于2.5 g樣品）放入100 ml容量瓶中，加入2.1 ml 7.7 mol/L稀鹽酸，劇烈搖動(dòng)；在容量瓶上安裝回流冷凝管，同時(shí)置于沸水浴中；一段時(shí)間后將容量瓶取出，冷卻至（20±2）℃。

（3）測定醇溶液的旋光度步驟同1.3.2。

1.3.4 干樣品中淀粉質(zhì)量分?jǐn)?shù)的計(jì)算 計(jì)算用公式：

其中：α1——測定的樣品總旋光度值（°）；

α2——醇溶物質(zhì)的旋光度值（°）；

表1 干物質(zhì)中淀粉含量及旋光度

m1——總旋光度測定時(shí)樣品的總質(zhì)量（g）；

m2——醇溶物測定時(shí)樣品的質(zhì)量（g）；

ω1——樣品中干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)（%）；

α20D——醇淀粉在589.3 nm波長下測得比旋光度（°）（此方法中其取值為185.7°）。

2 結(jié)果與討論

在測定樣品總旋光度時(shí)，樣品在沸水浴鍋中的水解時(shí)間分別為 10 min、15 min、20 min、25 min、30 min，測定總旋光度值、旋光度值，利用上述公式求得干物質(zhì)中淀粉含量（見表1）。

由表1可以看出，當(dāng)樣品在沸水浴鍋中的水解時(shí)間為15 min時(shí)，旋光度達(dá)到最大值，相應(yīng)的淀粉含量也最高。隨著水解時(shí)間的增加，旋光度反而降低，同時(shí)，淀粉含量也減少。由此可知，在此實(shí)驗(yàn)條件下，淀粉的最佳水解時(shí)間為15 min。這是因?yàn)槿绻鈺r(shí)間太短，淀粉未完全水解，測定結(jié)果會(huì)偏低；相反，如果水解時(shí)間太長，會(huì)發(fā)生糊化反應(yīng)，使測定結(jié)果產(chǎn)生誤差。所以本實(shí)驗(yàn)確定的最佳水解時(shí)間應(yīng)為15min。

3 結(jié)論

用旋光法分別測定隴薯3號(hào)、新大坪、隴薯5號(hào)3個(gè)品種的馬鈴薯在不同水解時(shí)間條件下的淀粉含量，水解時(shí)間為15 min時(shí)，測定結(jié)果的準(zhǔn)確度最高，時(shí)間太短或太長，都會(huì)使測定結(jié)果偏低。由此可以確定該實(shí)驗(yàn)條件下，用旋光法測定馬鈴薯淀粉含量的最佳水解時(shí)間為15 min?！?/p>