陳福將 蔡振蕩 李 銳 浙江省溫州市兒童醫(yī)院 溫州 325000

毛細(xì)支氣管炎患兒外周血ADAM8、CD23水平及臨床意義

陳福將 蔡振蕩 李 銳 浙江省溫州市兒童醫(yī)院 溫州 325000

毛細(xì)支氣管炎；去整合素金屬蛋白酶8；CD23

毛細(xì)支氣管炎（簡(jiǎn)稱毛支）是嬰幼兒最常見的下呼吸道感染。流行病學(xué)資料顯示，毛支患兒在兒童期易患哮喘，毛支與哮喘的發(fā)病機(jī)制中有類似的細(xì)胞和炎癥介質(zhì)參與。研究發(fā)現(xiàn)去整合素金屬蛋白酶家族（ADAMs）在炎癥反應(yīng)、腫瘤發(fā)生發(fā)展轉(zhuǎn)移、免疫性疾病和過敏反應(yīng)疾病中有著重要作用，其中以ADAM33、ADAM8與過敏性疾病的關(guān)系最為密切[1]。筆者檢測(cè)毛支患兒血清中ADAM8、CD23的水平，并與喘息性支氣管炎、肺炎患兒及正常兒童進(jìn)行比較，探討其臨床意義。

1 臨床資料

選取2012年10月—2013年3月本院毛支住院患兒31例為毛支組，男17例，女l4例，平均年齡（7.8±4.2）月齡，平均病程（3.47±1.65）天；均為首次發(fā)病，無基礎(chǔ)心肺疾病。參考Bearman等[2]提出的標(biāo)準(zhǔn)，輕度16例（≤6分），中重度15例（7～12分）。同期喘息性支氣管炎住院患兒30例為喘息性支氣管炎組（喘支組），男16例，女14例，平均年齡（8.1±4.7）月齡，平均病程（3.53±1.48）天；診斷符合《諸福案實(shí)用兒科學(xué)》[3]第7版；既往有類似喘息發(fā)作病史2次，或達(dá)不到嬰幼兒哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)，無基礎(chǔ)心肺疾病。同期普通支氣管肺炎住院患兒31例為肺炎組，男16例，女15例，平均年齡（8.3±4.6）月齡，平均病程（3.86± 1.41）天；多為支原體肺炎、細(xì)菌性肺炎等，無基礎(chǔ)心肺疾病。同期保健門診體檢健康兒30名為健康對(duì)照組，男16名，性14名，平均年齡（8.5±4.1）月齡；無個(gè)人和家族特應(yīng)癥（如支氣管哮喘、過敏性鼻炎、特應(yīng)性皮炎等）病史。三組患兒性別、年齡、病程比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。所有研究對(duì)象獲得院醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)的批準(zhǔn)，并得到患兒家長(zhǎng)的知情同意。

2 方法

三組患兒均于入院后次晨，健康對(duì)照組于體檢時(shí)抽取空腹靜脈血2mL，室溫20～25℃放置60min， 2000轉(zhuǎn)/min離心10min，留取血清-70℃凍存?zhèn)錅y(cè)。采用酶聯(lián)免疫吸附分析法測(cè)定ADAM8、CD23，試劑盒購(gòu)自上海江萊生物科技有限公司，均按說明書進(jìn)行操作。

統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用SPSS13.0軟件，數(shù)據(jù)進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn)，數(shù)據(jù)以（±s） 表示。兩組比較采用t檢驗(yàn)，多組樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析（One-way ANOVA），兩變量相關(guān)分析采用Bivariate過程的Pearson等級(jí)相關(guān)法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3.1 各組血清ADAM8、CD23水平比較 毛支、喘支組患兒血清ADAM8、CD23含量均顯著高于健康對(duì)照及肺炎組（P＜0.01），見表1。

表1 三組外周血ADAM8、CD23含量比較（±s）

表1 三組外周血ADAM8、CD23含量比較（±s）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.01；與肺炎組比較，△P＜0.01；與喘支組比較，▲P＜0.01

組別對(duì)照組肺炎組喘支組毛支組F值n/例30 31 30 31 ADAM8/（pg/mL）155.37±6.29 163.82±6.23* 252.22±6.46*△213.48±5.06*△▲1703.47 CD23/（pg/mL）114.54±6.84 130.17±8.15* 174.69±7.45*△162.32±7.36*△▲420.57

3.2 毛支組病情程度與血清ADAM8、CD23含量相關(guān)性 中重度患兒血清ADAM8、CD23含量均顯著高于輕度患兒（P均＜0.01），見表2。毛支患兒血清中ADAM8與CD23含量呈正相關(guān)（r=0.937，P＜0.01）。

表2 中重度與輕度毛支患兒血清ADAM8、CD23含量比較（±s）

表2 中重度與輕度毛支患兒血清ADAM8、CD23含量比較（±s）

注：與輕度組比較，▽P＜0.05

CD23/（pg/mL）156.87±4.65 168.14±4.75▽組別輕度組中重度組n/例16 15 ADAM8/（pg/mL）209.73±3.26 217.47±3.23

4 討論

毛支發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，至今尚未完全闡明。ADAMs是鋅依賴性金屬蛋白酶家族中的I型跨膜蛋白，ADAM8是其中與過敏性疾病密切相關(guān)的一種。ADAM8基因，根據(jù)白細(xì)胞分化抗原命名為CD156，基因定位在染色體10q26.3上，編碼824個(gè)氨基酸[4]。2011年P(guān)aulissen等[4]研究變應(yīng)原誘發(fā)的哮喘小鼠，發(fā)現(xiàn)肺實(shí)質(zhì)和肺內(nèi)樹突細(xì)胞有ADAM8表達(dá)的增加；而在經(jīng)抗ADAM8抗體處理、ADAM8基因敲除小鼠的BALF液和支氣管周組織的ADAM8明顯減少，并且伴有CCL11、22水平的降低、DC細(xì)胞的減少以及嗜酸細(xì)胞性炎癥的減輕。認(rèn)為ADAM8通過促進(jìn)樹突細(xì)胞的募集、CCL11、22的產(chǎn)生而導(dǎo)致變應(yīng)原誘發(fā)的氣道炎癥。Chiba等[5]研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)抗原刺激后哮喘小鼠肺組織ADAM8 mRNA表達(dá)較對(duì)照組顯著增加，除在炎癥細(xì)胞有表達(dá)外，ADAM8在支氣管、血管平滑肌細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞均有表達(dá)，提示ADAM8參與了抗原刺激的哮喘小鼠氣道炎癥、氣道高反應(yīng)性的病理生理過程。Naus等[6]研究發(fā)現(xiàn)ADAM8基因敲除小鼠對(duì)哮喘誘發(fā)的氣道炎癥和高反應(yīng)性有明顯的抵抗力，T細(xì)胞中ADAM8的缺乏可明顯減輕哮喘的免疫反應(yīng)；結(jié)果表明，ADAM8對(duì)哮喘的氣道炎癥具有重要的促炎作用，ADAM8可能是哮喘治療的一個(gè)新的治療靶點(diǎn)。Knolle等[7]研究發(fā)現(xiàn)，ADAM8通過減少小鼠氣道白細(xì)胞存活而抑制氣道變應(yīng)性炎癥和氣道高反應(yīng)性，而且ADAM8通過激活自身的骨髓白細(xì)胞凋亡而導(dǎo)致小鼠的氣道變應(yīng)性炎癥；該研究認(rèn)為在哮喘的防治策略方面，增加骨髓白細(xì)胞的ADAM8水平可能有治療效果。另外，有研究發(fā)現(xiàn)ADAM8對(duì)變應(yīng)性鼻炎也有一定的作用。Park等[8]研究發(fā)現(xiàn)變應(yīng)性鼻炎患者下鼻甲黏膜ADAM8 mRNA表達(dá)增加，認(rèn)為ADAM8可能對(duì)變應(yīng)性鼻炎的鼻黏膜的慢性炎癥有一定的作用。CD23是IgE的低親和性受體，是ADAM8的底物之一，是淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IgE調(diào)節(jié)機(jī)制中重要的組成部分。

本組結(jié)果顯示，毛支患兒血清ADAM8、CD23含量顯著高于健康對(duì)照組及肺炎組（P均＜0.01）。提示毛支患兒的氣道可能存在與哮喘相類似的炎癥。喘支患兒血清ADAM8、CD23含量不但高于健康對(duì)照組及肺炎組，并且也高于毛支組。一般認(rèn)為喘支與感染、過敏及呼吸道解剖原因有關(guān),部分可能為嬰幼兒哮喘的早期表現(xiàn)。這些發(fā)現(xiàn)提示ADAM8、CD23在毛支患兒發(fā)展為嬰幼兒哮喘的過程中可能有一定的作用。本組結(jié)果還顯示，血ADAM8和CD23之間存在明顯正相關(guān)。毛支患兒ADAM8濃度與患兒病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)，CD23與ADAM8有關(guān)聯(lián)，共同參與氣道炎癥的發(fā)生。

研究發(fā)現(xiàn)，ADAM8不僅參與哮喘發(fā)病的病理生理過程，還與哮喘病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。Foley等[9]在哮喘患者氣道組織標(biāo)本中對(duì)比研究了ADAM8基因的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)ADAM8 mRNA在哮喘重、中度組表達(dá)較輕度、正常組顯著增高，而重度、中度組相比無顯著差異；重、中度哮喘患者氣道浸潤(rùn)炎癥細(xì)胞亦較輕度、正常組顯著增加。本組結(jié)果顯示，中重度毛支患兒血清ADAM8含量顯著高于輕度患兒，且ADAM8濃度與毛支患兒病情嚴(yán)重程度密切相關(guān)。

［1］Edwards DR，Handsley MM，Pennington CJ.The ADAM metalloproteinases［J］.Mol Aspects Med，2008，29（5）：258-289.

［2］Bearman JE，Tal A，Baviski C，et al.Dexamethasone and salbutamol in the treatment of acute wheezing in infants［J］. Pediatrics，1983，71（1）：13-18.

［3］胡亞美，江載芳.諸福棠實(shí)用兒科學(xué)［M］.第7版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：1171-1174.

［4］Paulissen G，Rocks N，Gueders MM，et al.ADAM-8，a metalloproteinase，drives acute allergen-induced airway inflammation［J］.Eur J Immunol，2011，41（2）：380-391.

［5］Chiba Y，Onoda S，Hattori Y，et al.Upregulation of ADAM8 in the airways of mice with allergic bronchial asthma［J］. Lung，2009，187（3）：179-185.

［6］Naus S，Blanchet MR，Gossens K，et al.The metalloproteasedisintegrin ADAM8 is essential for the development of experimental asthma［J］.Am J Respir Crit Care Med，2010，181（12）：1318-1328.

［7］Knolle MD，Nakajima T，Hergrueter A，et al.Adam8 limits the development of allergic airway inflammation in mice［J］. J Immunol，2013，190（12）：6434-6449.

［8］Park IH，Choi SW，Choi H，et al.Increased expression of a disintegrin and metalloprotease 8 in allergic rhinitis［J］.Am J Rhinol Allergy，2011，25（3）：107-111.

［9］Foley SC，Mogas AK，Olivenstein R，et al.Increased expression of ADAM33 and ADAM8 with disease progression in asthma［J］.J Allergy Clin Immunol，2007，119（4）：863-871.

2014-04-23

修回日期：2014-06-06

浙江省溫州市科技計(jì)劃項(xiàng)目（No.Y20120092）