柴文亞等

摘 要：為了研究生物有機(jī)肥防治煙草黑脛病的效果及對煙株生長發(fā)育的影響，通過設(shè)置對照、施用土壤調(diào)理劑、施用生物有機(jī)肥和生物有機(jī)肥與土壤調(diào)理劑配合施用共4個田間試驗處理，分別測定了移栽前、團(tuán)棵期、旺長期和成熟期煙株根際土壤的細(xì)菌、真菌和放線菌的數(shù)量變化，調(diào)查了煙株的農(nóng)藝性狀和黑脛病發(fā)病率。研究結(jié)果表明，施用生物有機(jī)肥可大幅度提高煙株根際土壤中細(xì)菌、真菌及放線菌的數(shù)量，同時施用生物有機(jī)肥還可以提高煙株的株高、煙葉葉面積系數(shù)，并有效抑制煙草黑脛病的發(fā)病率。

關(guān)鍵詞：煙草；黑脛病；生物有機(jī)肥；土壤微生物；發(fā)病率

中圖分類號：S572 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A DOI編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2014.04.008

土壤中可培養(yǎng)微生物主要有細(xì)菌、放線菌和真菌3大類群，它們是土壤養(yǎng)分形成、轉(zhuǎn)化、循環(huán)的動力，對土壤肥力的提高起著舉足輕重的作用。土壤微生物直接參與土壤中有機(jī)物質(zhì)的分解及轉(zhuǎn)化，腐殖質(zhì)的形成和分解，營養(yǎng)元素的釋放、循環(huán)與各種生化過程。因此，土壤微生物數(shù)量可以作為評價土壤肥力的一個重要指標(biāo)[1]。根際微生物的生長繁殖有賴于土壤的肥力水平和環(huán)境狀況，微生物和土壤肥力之間具有相互促進(jìn)、協(xié)同發(fā)展的關(guān)系[2]。周陳等[3]研究表明，施用生物有機(jī)肥料能夠顯著提高土壤微生物數(shù)量，尤其是有益微生物數(shù)量的增加，提高了土壤中微生物的活性，從而提高土壤肥力。Alexander[4]研究表明，生物有機(jī)肥為煙株生長創(chuàng)造了良好的土壤肥力條件，從而為土壤微生物提供了良好的生態(tài)環(huán)境。通常情況下，大部分微生物在土壤中實際處于一種低營養(yǎng)狀態(tài)，當(dāng)施用生物有機(jī)肥后，生物有機(jī)肥不僅能為微生物提供新的能源，同時也為土壤帶入大量新鮮的微生物種類，從而導(dǎo)致土壤微生物在種群數(shù)量上發(fā)生較大的改變。施用有機(jī)肥可以影響煙草生長發(fā)育、煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)。劉雪琴[5]研究認(rèn)為，配施有機(jī)肥能不同程度地提高煙株株高、葉片數(shù)、莖圍和節(jié)距，擴(kuò)大葉面積，促進(jìn)烤煙生長。徐健欽和徐智[6]研究認(rèn)為，生物有機(jī)肥可使植煙土壤的養(yǎng)分趨于協(xié)調(diào)，促進(jìn)烤煙的生長發(fā)育，降低病害的發(fā)生。陳巧玲等[7]通過盆栽試驗表明，施用生物有機(jī)肥對烤煙有害病原微生物具有一定的抑制效果。可見，施用生物有機(jī)肥可以影響土壤的理化性狀和生物性狀，進(jìn)而影響土壤的微生態(tài)平衡，最終影響到作物的生長發(fā)育進(jìn)程和農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)量與質(zhì)量。

本研究利用對煙草黑脛病有拮抗作用的幾種微生物生產(chǎn)生物有機(jī)肥，研究了生物有機(jī)肥對煙株根際土壤微生物種類與數(shù)量的變化和煙株農(nóng)藝性狀及黑脛病發(fā)病率的影響，以期實現(xiàn)利用生物有機(jī)肥提高煙葉品質(zhì)并抑制煙草黑脛病發(fā)生的目的。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

供試煙葉品種為紅花大金元（簡稱‘紅大），該品種有一定的抗旱能力，不耐澇。從大田移栽至現(xiàn)蕾期易發(fā)黑脛病，屬于高感煙草黑脛病的品種。

生物有機(jī)肥由腐熟的油枯與拮抗菌劑經(jīng)過二次發(fā)酵而成，其中拮抗菌的數(shù)量達(dá)到106 cfu·g-1。

1.2 試驗設(shè)計

大田試驗選取地勢平坦、肥力相對均勻、往年黑脛病發(fā)病相對嚴(yán)重的地塊為試驗田。

試驗分為4個處理。T1：對照（按照當(dāng)?shù)爻Ｒ?guī)施肥數(shù)量和方式進(jìn)行，有機(jī)肥施用腐熟油枯，450 kg·hm-2）；T2：施用土壤調(diào)理劑（在對照基礎(chǔ)上施用土壤調(diào)理劑，1 500 kg·hm-2）；T3：施用生物有機(jī)肥（在對照基礎(chǔ)上將腐熟油枯和拮抗菌劑經(jīng)過二次發(fā)酵，油枯施用量仍為450 kg·hm-2）；T4：施用土壤調(diào)理劑和生物有機(jī)肥（在對照的基礎(chǔ)上，施用土壤調(diào)理劑1 500 kg·hm-2和經(jīng)過二次發(fā)酵的油枯450 kg·hm-2）。每個處理3次重復(fù)。大田共分為12個小區(qū)，植株密度為1 100株·666.67 m-2，每小區(qū)種植170株，大田面積為1 236.34 m2，株距行距為0.5 m×1.1 m。

1.3 項目測定與方法

1.3.1 根際土壤樣品的采集 采用S形5點取樣法取樣，將整棵煙株連同根部土壤一起取出，盡量不要破壞根系，去掉根部一些大塊土后，輕輕將粘接在細(xì)根上的土壤抖落混勻，這些土壤即為根際土壤，將其存放于4 ℃的冰箱內(nèi)待測。

1.3.2 土壤微生物數(shù)量測定 土壤樣品中的細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量測定：準(zhǔn)確稱取10 g土樣放入裝有 90 mL無菌水和玻璃珠的錐形瓶中，放置搖床上以130 r·min-1速度振蕩30 min，靜置15 min后稀釋，其中選取細(xì)菌稀釋度為10-4～10-6、真菌為10-2～10-4、放線菌為10-3～10-5。吸取0.1 mL菌液裝入無菌培養(yǎng)皿中，每個梯度重復(fù)3 次。分別用牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)菌，孟加拉紅培養(yǎng)基培養(yǎng)真菌，高氏1號培養(yǎng)基培養(yǎng)放線菌。

1.3.3 煙株田間農(nóng)藝性狀調(diào)查 煙株打頂后，分別選取具有代表性煙株10株進(jìn)行農(nóng)藝性狀調(diào)查，記錄其株高、有效葉片數(shù)、莖圍、最大葉長和葉寬，計算公式如下。

葉面積=葉長×葉寬×修正系數(shù)（0.634 5）

葉面積系數(shù)=（平均單葉面積×單株葉數(shù)×株數(shù)）/取樣的土地面積。

該試驗田中葉面積系數(shù)為葉長×葉寬×0.634 5×單株葉數(shù)×0.11/666.67。

1.3.4 煙株發(fā)病率調(diào)查 在煙株發(fā)病后，對每個小區(qū)進(jìn)行黑脛病發(fā)病率的調(diào)查。

1.4 數(shù)據(jù)分析

采用Excel 2003和DPS v7.05軟件進(jìn)行試驗數(shù)據(jù)的統(tǒng)計分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 煙株不同生育期根際土壤微生物數(shù)量變化

2.1.1 根標(biāo)土壤細(xì)菌數(shù)量變化 表1是不同處理下煙株各生育時期煙株根際土壤細(xì)菌的數(shù)量變化。從表1可以看出，在移栽前土壤中細(xì)菌數(shù)量相對較低，但施用生物有機(jī)肥后土壤中細(xì)菌的數(shù)量均有所增高，其中T4處理的細(xì)菌數(shù)量最高，T1處理中細(xì)菌數(shù)量最低。這說明生物有機(jī)肥的施用不僅直接增加了土壤中微生物的數(shù)量，而且通過向土壤提供有機(jī)營養(yǎng)也促進(jìn)了土壤自身微生物的繁殖生長。T2處理在旺長期和成熟期細(xì)菌數(shù)量均高于T1和T3處理，這可能是由于土壤調(diào)理劑的添加，使土壤pH值得到了部分調(diào)節(jié)，從而促進(jìn)了土壤細(xì)菌數(shù)量的增殖。在煙株生長期內(nèi)不同處理下細(xì)菌數(shù)量均表現(xiàn)出了相似的變化趨勢，即表現(xiàn)為先增加，到旺長期達(dá)到最大值，由旺長期到成熟期數(shù)目又有所下降。這種變化趨勢與羅明等[8]研究棉花各個生育期內(nèi)土壤微生物數(shù)量的變化相類似。

2.1.2 根際土壤真菌的數(shù)量變化 在煙株生長發(fā)育的各個時期內(nèi)，不同施肥處理間根際土壤的真菌數(shù)量變化如表2所示。由表2可以看出，T2、T3和T4隨著煙株生育期推進(jìn)，根際土壤真菌的數(shù)量均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。在旺長期內(nèi)除T1外各處理的土壤真菌數(shù)量明顯增加，其中以T4處理真菌數(shù)量增加尤為顯著，進(jìn)入成熟期后土壤真菌數(shù)量顯著下降，但仍高于團(tuán)棵期土壤中真菌的數(shù)量。

2.1.3 根際土壤中放線菌數(shù)量的變化 在煙株生長發(fā)育的各個時期內(nèi)，不同施肥處理間根際土壤放線菌數(shù)量變化如表3所示。由表3可知，在煙株生長的團(tuán)棵期，T2，T4土壤放線菌的數(shù)量均高于移栽前期，并在旺長期數(shù)量達(dá)到最大值。一方面可能是由于土壤調(diào)理劑的施用，使土壤pH值得到了部分調(diào)節(jié)，相對較高的土壤pH值有利于放線菌的生長；另一方面隨著作物根系功能的健全，根系土壤的能量循環(huán)和物質(zhì)轉(zhuǎn)化更為順暢，可使放線菌獲得更多的營養(yǎng)而大量繁殖。比較而言，T4處理由于土壤調(diào)理劑和生物有機(jī)肥配合施用，根際土壤的放線菌數(shù)量在煙株旺長期均高于其他處理，這主要是由于生物有機(jī)肥在為微生物生長繁殖提供營養(yǎng)的同時，也提供了較大數(shù)量的有益拮抗菌群，并在土壤中增殖。進(jìn)入成熟期后，除T1外其它處理中根際土壤的放線菌數(shù)量均有所降低。

綜上所述，在煙草生產(chǎn)中施用生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑，增加了土壤中細(xì)菌、放線菌和真菌的數(shù)量，改變了土壤微生物區(qū)系與結(jié)構(gòu)，從而有利于煙株的生長發(fā)育和抗病能力的提高。

2.2 不同處理對煙株農(nóng)藝性狀的影響

煙株生長的快慢在一定程度上反映了烤煙生長代謝的強(qiáng)弱，其中株高是煙株生長的主要表現(xiàn)之一。在株高增加的同時，葉片數(shù)、莖圍也在增加，這是煙株生長發(fā)育過程中內(nèi)在協(xié)同性強(qiáng)弱的外在表現(xiàn)。表4為不同處理下煙株農(nóng)藝性狀，從表4可以看出，T2，T3和T4處理中煙株株高分別高出T1處理7.0%，10.3%和13.6%，說明生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑均促進(jìn)了煙株的生長，其中生物有機(jī)肥與土壤調(diào)理劑配施處理效果最好。另外，從煙株的有效葉片數(shù)來看，T3和T4處理均高于T1和T2處理。

烤煙田間葉面積系數(shù)指煙田上煙株葉片總面積與占地面積的比值。在一定范圍內(nèi)，烤煙的產(chǎn)量隨葉面積系數(shù)的增大而提高，當(dāng)葉面積增加到一定的限度后，田間密度過大，光照不足，光合效率減弱，產(chǎn)量反而下降。葉面積系數(shù)大小是衡量煙葉優(yōu)劣的重要指標(biāo)。由表4可以看出，各處理間煙葉葉面積未表現(xiàn)出顯著性差異，但T2、T3和T4處理的葉面積均大于T1對照，并分別高出了7.8%，23.0%，23.1%。從煙葉葉面積系數(shù)來看，T3和T4處理與T1和T2處理間有顯著性差異，其中T3、T4處理葉面積系數(shù)分別比T1對照高出34.7%，35.8%。

可見，施用生物有機(jī)肥處理的煙株農(nóng)藝指標(biāo)均優(yōu)于T1、T2處理，說明施用生物有機(jī)肥可以顯著地促進(jìn)煙株生長并改善煙株的長勢長相。施用土壤調(diào)理劑能夠有效地調(diào)節(jié)土壤pH值，從而促進(jìn)了煙株對土壤中營養(yǎng)元素的吸收。另外，土壤調(diào)理劑的添加也可在一定程度上增加土壤中細(xì)菌和放線菌數(shù)量，從而改善了土壤微生態(tài)平衡，增強(qiáng)了土壤養(yǎng)分的利用效率，因而對煙株的生長發(fā)育有一定的促進(jìn)作用。

2.3 不同處理對煙株黑脛病發(fā)病的影響

不同施肥處理下煙株黑脛病的發(fā)病情況如表5所示。從表5可以看出，T3和T4處理黑脛病發(fā)病率和T1、T2相比均有顯著性地差異，兩處理與T1對照相比，發(fā)病率分別降低了3.7個百分點和4.1個百分點。T2處理與T1對照相比黑脛病發(fā)病率僅降低了0.8個百分點，未表現(xiàn)出顯著性地差異。由此可見，施用生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑均可以降低煙草黑脛病的發(fā)生，但是二者相比生物有機(jī)肥的防控效果更為顯著。生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑配合施用，對煙草黑脛病的防控能力比分別單施效果更好。

在四川省涼山煙區(qū)，因連作種植等原因煙草黑脛病和青枯病均會發(fā)生。因此，試驗期間也對煙株青枯病的發(fā)生情況進(jìn)行了調(diào)查（表5）。本研究中的生物有機(jī)肥由黑脛病生防菌劑制成，當(dāng)大量的生防菌劑進(jìn)入根際土壤后，對土壤中微生物群落的數(shù)量和多樣性均不可避免地產(chǎn)生影響，從而使土壤肥力和土壤生態(tài)系統(tǒng)的平衡關(guān)系發(fā)生變化，進(jìn)而影響到植物的抗病能力[9]。從對青枯病的發(fā)生率調(diào)查結(jié)果來看，不同處理對煙草青枯病的發(fā)生率均有一定的影響，其中T3處理對青枯病的防控效果最好，但統(tǒng)計結(jié)果表明各處理間無顯著性差異。

3 結(jié)論與討論

徐潔、羅華元[10]通過研究認(rèn)為，施用生物有機(jī)肥其本身所含有的功能有益微生物在施入土壤后會迅速繁殖，分解土壤中的礦質(zhì)營養(yǎng)從而提高土壤肥力，同時有利于土壤中抗菌素和激素類物質(zhì)的增加，并對煙株病害發(fā)生起一定的抑制作用。施用生物有機(jī)肥還可以促進(jìn)煙株生長，提高煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)，增加烤煙株高、有效葉片數(shù)、田間葉面積系數(shù)[11]，有利于提高烤煙產(chǎn)量，煙株經(jīng)濟(jì)價值。本試驗的研究表明，土壤調(diào)理劑與生物有機(jī)肥配合施用，在為煙株生長發(fā)育提供更多營養(yǎng)物質(zhì)的同時，促進(jìn)了根際土壤中細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量的大量增殖，從而改善了土壤微生態(tài)平衡，促進(jìn)了煙株的生長與發(fā)育，進(jìn)而提高了煙株對黑脛病的抵抗能力。

參考文獻(xiàn)：

[1] 歐陽志云.BIOLOG在土壤微生物群落功能多樣性研究中的應(yīng)用[J].土壤學(xué)報，2004，41（3）：456-461.

[2] 李惠民.影響根際土壤微生物多樣性的因素研究[J].科技與生活，2011（5）：98-99.

[3] 周陳，李徐斌.生物有機(jī)肥對土壤微生物及冬小麥產(chǎn)量效應(yīng)研究[J].耕作與栽培，2008（1）：12-14.

[4] Alexander M.Introduction to soil microbiology[M].2 ed.New York：John Wiley&Sons，1977：1-3.

[5] 劉雪琴.有機(jī)肥對烤煙產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[D].重慶：西南大學(xué)，2007.

[6] 徐健欽，徐智.不同有機(jī)肥對烤煙生長發(fā)育產(chǎn)質(zhì)量及青枯病的影響[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報， 2013，28（1）：118-123.

[7] 肖漢乾，羅建新，王國寶.煙草活性有機(jī)無機(jī)專用肥的施用效果對烤煙生長發(fā)育和煙葉產(chǎn)量品質(zhì)的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2003，29（1）：28-31.

[8] 羅明，文啟凱.不同用量的氮磷無機(jī)肥對棉田土壤微生物區(qū)系及活性的影響[J].土壤通報，2000，31（2）：67-69.

[9] Kaare J，Carsten S J，Vigdis T，et al.Pesticide effects on bacterial diversity in agricultural soils a review[J].Biology and Fertility of Soils，2001，33（6）：443-453.

[10] 徐潔，羅華元.煙草根際土壤微生物區(qū)系分析及其相關(guān)性研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011 ，24（6）：2 279-2 284.

[11] 謝莉.有機(jī)肥對植煙土壤微生物活性及烤煙產(chǎn)量品質(zhì)的影響[D]. 重慶：西南大學(xué)，2010.

2.1.2 根際土壤真菌的數(shù)量變化 在煙株生長發(fā)育的各個時期內(nèi)，不同施肥處理間根際土壤的真菌數(shù)量變化如表2所示。由表2可以看出，T2、T3和T4隨著煙株生育期推進(jìn)，根際土壤真菌的數(shù)量均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。在旺長期內(nèi)除T1外各處理的土壤真菌數(shù)量明顯增加，其中以T4處理真菌數(shù)量增加尤為顯著，進(jìn)入成熟期后土壤真菌數(shù)量顯著下降，但仍高于團(tuán)棵期土壤中真菌的數(shù)量。

2.1.3 根際土壤中放線菌數(shù)量的變化 在煙株生長發(fā)育的各個時期內(nèi)，不同施肥處理間根際土壤放線菌數(shù)量變化如表3所示。由表3可知，在煙株生長的團(tuán)棵期，T2，T4土壤放線菌的數(shù)量均高于移栽前期，并在旺長期數(shù)量達(dá)到最大值。一方面可能是由于土壤調(diào)理劑的施用，使土壤pH值得到了部分調(diào)節(jié)，相對較高的土壤pH值有利于放線菌的生長；另一方面隨著作物根系功能的健全，根系土壤的能量循環(huán)和物質(zhì)轉(zhuǎn)化更為順暢，可使放線菌獲得更多的營養(yǎng)而大量繁殖。比較而言，T4處理由于土壤調(diào)理劑和生物有機(jī)肥配合施用，根際土壤的放線菌數(shù)量在煙株旺長期均高于其他處理，這主要是由于生物有機(jī)肥在為微生物生長繁殖提供營養(yǎng)的同時，也提供了較大數(shù)量的有益拮抗菌群，并在土壤中增殖。進(jìn)入成熟期后，除T1外其它處理中根際土壤的放線菌數(shù)量均有所降低。

綜上所述，在煙草生產(chǎn)中施用生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑，增加了土壤中細(xì)菌、放線菌和真菌的數(shù)量，改變了土壤微生物區(qū)系與結(jié)構(gòu)，從而有利于煙株的生長發(fā)育和抗病能力的提高。

2.2 不同處理對煙株農(nóng)藝性狀的影響

煙株生長的快慢在一定程度上反映了烤煙生長代謝的強(qiáng)弱，其中株高是煙株生長的主要表現(xiàn)之一。在株高增加的同時，葉片數(shù)、莖圍也在增加，這是煙株生長發(fā)育過程中內(nèi)在協(xié)同性強(qiáng)弱的外在表現(xiàn)。表4為不同處理下煙株農(nóng)藝性狀，從表4可以看出，T2，T3和T4處理中煙株株高分別高出T1處理7.0%，10.3%和13.6%，說明生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑均促進(jìn)了煙株的生長，其中生物有機(jī)肥與土壤調(diào)理劑配施處理效果最好。另外，從煙株的有效葉片數(shù)來看，T3和T4處理均高于T1和T2處理。

烤煙田間葉面積系數(shù)指煙田上煙株葉片總面積與占地面積的比值。在一定范圍內(nèi)，烤煙的產(chǎn)量隨葉面積系數(shù)的增大而提高，當(dāng)葉面積增加到一定的限度后，田間密度過大，光照不足，光合效率減弱，產(chǎn)量反而下降。葉面積系數(shù)大小是衡量煙葉優(yōu)劣的重要指標(biāo)。由表4可以看出，各處理間煙葉葉面積未表現(xiàn)出顯著性差異，但T2、T3和T4處理的葉面積均大于T1對照，并分別高出了7.8%，23.0%，23.1%。從煙葉葉面積系數(shù)來看，T3和T4處理與T1和T2處理間有顯著性差異，其中T3、T4處理葉面積系數(shù)分別比T1對照高出34.7%，35.8%。

可見，施用生物有機(jī)肥處理的煙株農(nóng)藝指標(biāo)均優(yōu)于T1、T2處理，說明施用生物有機(jī)肥可以顯著地促進(jìn)煙株生長并改善煙株的長勢長相。施用土壤調(diào)理劑能夠有效地調(diào)節(jié)土壤pH值，從而促進(jìn)了煙株對土壤中營養(yǎng)元素的吸收。另外，土壤調(diào)理劑的添加也可在一定程度上增加土壤中細(xì)菌和放線菌數(shù)量，從而改善了土壤微生態(tài)平衡，增強(qiáng)了土壤養(yǎng)分的利用效率，因而對煙株的生長發(fā)育有一定的促進(jìn)作用。

2.3 不同處理對煙株黑脛病發(fā)病的影響

不同施肥處理下煙株黑脛病的發(fā)病情況如表5所示。從表5可以看出，T3和T4處理黑脛病發(fā)病率和T1、T2相比均有顯著性地差異，兩處理與T1對照相比，發(fā)病率分別降低了3.7個百分點和4.1個百分點。T2處理與T1對照相比黑脛病發(fā)病率僅降低了0.8個百分點，未表現(xiàn)出顯著性地差異。由此可見，施用生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑均可以降低煙草黑脛病的發(fā)生，但是二者相比生物有機(jī)肥的防控效果更為顯著。生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑配合施用，對煙草黑脛病的防控能力比分別單施效果更好。

在四川省涼山煙區(qū)，因連作種植等原因煙草黑脛病和青枯病均會發(fā)生。因此，試驗期間也對煙株青枯病的發(fā)生情況進(jìn)行了調(diào)查（表5）。本研究中的生物有機(jī)肥由黑脛病生防菌劑制成，當(dāng)大量的生防菌劑進(jìn)入根際土壤后，對土壤中微生物群落的數(shù)量和多樣性均不可避免地產(chǎn)生影響，從而使土壤肥力和土壤生態(tài)系統(tǒng)的平衡關(guān)系發(fā)生變化，進(jìn)而影響到植物的抗病能力[9]。從對青枯病的發(fā)生率調(diào)查結(jié)果來看，不同處理對煙草青枯病的發(fā)生率均有一定的影響，其中T3處理對青枯病的防控效果最好，但統(tǒng)計結(jié)果表明各處理間無顯著性差異。

3 結(jié)論與討論

徐潔、羅華元[10]通過研究認(rèn)為，施用生物有機(jī)肥其本身所含有的功能有益微生物在施入土壤后會迅速繁殖，分解土壤中的礦質(zhì)營養(yǎng)從而提高土壤肥力，同時有利于土壤中抗菌素和激素類物質(zhì)的增加，并對煙株病害發(fā)生起一定的抑制作用。施用生物有機(jī)肥還可以促進(jìn)煙株生長，提高煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)，增加烤煙株高、有效葉片數(shù)、田間葉面積系數(shù)[11]，有利于提高烤煙產(chǎn)量，煙株經(jīng)濟(jì)價值。本試驗的研究表明，土壤調(diào)理劑與生物有機(jī)肥配合施用，在為煙株生長發(fā)育提供更多營養(yǎng)物質(zhì)的同時，促進(jìn)了根際土壤中細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量的大量增殖，從而改善了土壤微生態(tài)平衡，促進(jìn)了煙株的生長與發(fā)育，進(jìn)而提高了煙株對黑脛病的抵抗能力。

參考文獻(xiàn)：

[1] 歐陽志云.BIOLOG在土壤微生物群落功能多樣性研究中的應(yīng)用[J].土壤學(xué)報，2004，41（3）：456-461.

[2] 李惠民.影響根際土壤微生物多樣性的因素研究[J].科技與生活，2011（5）：98-99.

[3] 周陳，李徐斌.生物有機(jī)肥對土壤微生物及冬小麥產(chǎn)量效應(yīng)研究[J].耕作與栽培，2008（1）：12-14.

[4] Alexander M.Introduction to soil microbiology[M].2 ed.New York：John Wiley&Sons，1977：1-3.

[5] 劉雪琴.有機(jī)肥對烤煙產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[D].重慶：西南大學(xué)，2007.

[6] 徐健欽，徐智.不同有機(jī)肥對烤煙生長發(fā)育產(chǎn)質(zhì)量及青枯病的影響[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報， 2013，28（1）：118-123.

[7] 肖漢乾，羅建新，王國寶.煙草活性有機(jī)無機(jī)專用肥的施用效果對烤煙生長發(fā)育和煙葉產(chǎn)量品質(zhì)的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2003，29（1）：28-31.

[8] 羅明，文啟凱.不同用量的氮磷無機(jī)肥對棉田土壤微生物區(qū)系及活性的影響[J].土壤通報，2000，31（2）：67-69.

[9] Kaare J，Carsten S J，Vigdis T，et al.Pesticide effects on bacterial diversity in agricultural soils a review[J].Biology and Fertility of Soils，2001，33（6）：443-453.

[10] 徐潔，羅華元.煙草根際土壤微生物區(qū)系分析及其相關(guān)性研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011 ，24（6）：2 279-2 284.

[11] 謝莉.有機(jī)肥對植煙土壤微生物活性及烤煙產(chǎn)量品質(zhì)的影響[D]. 重慶：西南大學(xué)，2010.

2.1.2 根際土壤真菌的數(shù)量變化 在煙株生長發(fā)育的各個時期內(nèi)，不同施肥處理間根際土壤的真菌數(shù)量變化如表2所示。由表2可以看出，T2、T3和T4隨著煙株生育期推進(jìn)，根際土壤真菌的數(shù)量均呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢。在旺長期內(nèi)除T1外各處理的土壤真菌數(shù)量明顯增加，其中以T4處理真菌數(shù)量增加尤為顯著，進(jìn)入成熟期后土壤真菌數(shù)量顯著下降，但仍高于團(tuán)棵期土壤中真菌的數(shù)量。

2.1.3 根際土壤中放線菌數(shù)量的變化 在煙株生長發(fā)育的各個時期內(nèi)，不同施肥處理間根際土壤放線菌數(shù)量變化如表3所示。由表3可知，在煙株生長的團(tuán)棵期，T2，T4土壤放線菌的數(shù)量均高于移栽前期，并在旺長期數(shù)量達(dá)到最大值。一方面可能是由于土壤調(diào)理劑的施用，使土壤pH值得到了部分調(diào)節(jié)，相對較高的土壤pH值有利于放線菌的生長；另一方面隨著作物根系功能的健全，根系土壤的能量循環(huán)和物質(zhì)轉(zhuǎn)化更為順暢，可使放線菌獲得更多的營養(yǎng)而大量繁殖。比較而言，T4處理由于土壤調(diào)理劑和生物有機(jī)肥配合施用，根際土壤的放線菌數(shù)量在煙株旺長期均高于其他處理，這主要是由于生物有機(jī)肥在為微生物生長繁殖提供營養(yǎng)的同時，也提供了較大數(shù)量的有益拮抗菌群，并在土壤中增殖。進(jìn)入成熟期后，除T1外其它處理中根際土壤的放線菌數(shù)量均有所降低。

綜上所述，在煙草生產(chǎn)中施用生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑，增加了土壤中細(xì)菌、放線菌和真菌的數(shù)量，改變了土壤微生物區(qū)系與結(jié)構(gòu)，從而有利于煙株的生長發(fā)育和抗病能力的提高。

2.2 不同處理對煙株農(nóng)藝性狀的影響

煙株生長的快慢在一定程度上反映了烤煙生長代謝的強(qiáng)弱，其中株高是煙株生長的主要表現(xiàn)之一。在株高增加的同時，葉片數(shù)、莖圍也在增加，這是煙株生長發(fā)育過程中內(nèi)在協(xié)同性強(qiáng)弱的外在表現(xiàn)。表4為不同處理下煙株農(nóng)藝性狀，從表4可以看出，T2，T3和T4處理中煙株株高分別高出T1處理7.0%，10.3%和13.6%，說明生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑均促進(jìn)了煙株的生長，其中生物有機(jī)肥與土壤調(diào)理劑配施處理效果最好。另外，從煙株的有效葉片數(shù)來看，T3和T4處理均高于T1和T2處理。

烤煙田間葉面積系數(shù)指煙田上煙株葉片總面積與占地面積的比值。在一定范圍內(nèi)，烤煙的產(chǎn)量隨葉面積系數(shù)的增大而提高，當(dāng)葉面積增加到一定的限度后，田間密度過大，光照不足，光合效率減弱，產(chǎn)量反而下降。葉面積系數(shù)大小是衡量煙葉優(yōu)劣的重要指標(biāo)。由表4可以看出，各處理間煙葉葉面積未表現(xiàn)出顯著性差異，但T2、T3和T4處理的葉面積均大于T1對照，并分別高出了7.8%，23.0%，23.1%。從煙葉葉面積系數(shù)來看，T3和T4處理與T1和T2處理間有顯著性差異，其中T3、T4處理葉面積系數(shù)分別比T1對照高出34.7%，35.8%。

可見，施用生物有機(jī)肥處理的煙株農(nóng)藝指標(biāo)均優(yōu)于T1、T2處理，說明施用生物有機(jī)肥可以顯著地促進(jìn)煙株生長并改善煙株的長勢長相。施用土壤調(diào)理劑能夠有效地調(diào)節(jié)土壤pH值，從而促進(jìn)了煙株對土壤中營養(yǎng)元素的吸收。另外，土壤調(diào)理劑的添加也可在一定程度上增加土壤中細(xì)菌和放線菌數(shù)量，從而改善了土壤微生態(tài)平衡，增強(qiáng)了土壤養(yǎng)分的利用效率，因而對煙株的生長發(fā)育有一定的促進(jìn)作用。

2.3 不同處理對煙株黑脛病發(fā)病的影響

不同施肥處理下煙株黑脛病的發(fā)病情況如表5所示。從表5可以看出，T3和T4處理黑脛病發(fā)病率和T1、T2相比均有顯著性地差異，兩處理與T1對照相比，發(fā)病率分別降低了3.7個百分點和4.1個百分點。T2處理與T1對照相比黑脛病發(fā)病率僅降低了0.8個百分點，未表現(xiàn)出顯著性地差異。由此可見，施用生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑均可以降低煙草黑脛病的發(fā)生，但是二者相比生物有機(jī)肥的防控效果更為顯著。生物有機(jī)肥和土壤調(diào)理劑配合施用，對煙草黑脛病的防控能力比分別單施效果更好。

在四川省涼山煙區(qū)，因連作種植等原因煙草黑脛病和青枯病均會發(fā)生。因此，試驗期間也對煙株青枯病的發(fā)生情況進(jìn)行了調(diào)查（表5）。本研究中的生物有機(jī)肥由黑脛病生防菌劑制成，當(dāng)大量的生防菌劑進(jìn)入根際土壤后，對土壤中微生物群落的數(shù)量和多樣性均不可避免地產(chǎn)生影響，從而使土壤肥力和土壤生態(tài)系統(tǒng)的平衡關(guān)系發(fā)生變化，進(jìn)而影響到植物的抗病能力[9]。從對青枯病的發(fā)生率調(diào)查結(jié)果來看，不同處理對煙草青枯病的發(fā)生率均有一定的影響，其中T3處理對青枯病的防控效果最好，但統(tǒng)計結(jié)果表明各處理間無顯著性差異。

3 結(jié)論與討論

徐潔、羅華元[10]通過研究認(rèn)為，施用生物有機(jī)肥其本身所含有的功能有益微生物在施入土壤后會迅速繁殖，分解土壤中的礦質(zhì)營養(yǎng)從而提高土壤肥力，同時有利于土壤中抗菌素和激素類物質(zhì)的增加，并對煙株病害發(fā)生起一定的抑制作用。施用生物有機(jī)肥還可以促進(jìn)煙株生長，提高煙葉產(chǎn)量和品質(zhì)，增加烤煙株高、有效葉片數(shù)、田間葉面積系數(shù)[11]，有利于提高烤煙產(chǎn)量，煙株經(jīng)濟(jì)價值。本試驗的研究表明，土壤調(diào)理劑與生物有機(jī)肥配合施用，在為煙株生長發(fā)育提供更多營養(yǎng)物質(zhì)的同時，促進(jìn)了根際土壤中細(xì)菌、真菌和放線菌數(shù)量的大量增殖，從而改善了土壤微生態(tài)平衡，促進(jìn)了煙株的生長與發(fā)育，進(jìn)而提高了煙株對黑脛病的抵抗能力。

參考文獻(xiàn)：

[1] 歐陽志云.BIOLOG在土壤微生物群落功能多樣性研究中的應(yīng)用[J].土壤學(xué)報，2004，41（3）：456-461.

[2] 李惠民.影響根際土壤微生物多樣性的因素研究[J].科技與生活，2011（5）：98-99.

[3] 周陳，李徐斌.生物有機(jī)肥對土壤微生物及冬小麥產(chǎn)量效應(yīng)研究[J].耕作與栽培，2008（1）：12-14.

[4] Alexander M.Introduction to soil microbiology[M].2 ed.New York：John Wiley&Sons，1977：1-3.

[5] 劉雪琴.有機(jī)肥對烤煙產(chǎn)量和品質(zhì)的影響[D].重慶：西南大學(xué)，2007.

[6] 徐健欽，徐智.不同有機(jī)肥對烤煙生長發(fā)育產(chǎn)質(zhì)量及青枯病的影響[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報， 2013，28（1）：118-123.

[7] 肖漢乾，羅建新，王國寶.煙草活性有機(jī)無機(jī)專用肥的施用效果對烤煙生長發(fā)育和煙葉產(chǎn)量品質(zhì)的影響[J].湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報：自然科學(xué)版，2003，29（1）：28-31.

[8] 羅明，文啟凱.不同用量的氮磷無機(jī)肥對棉田土壤微生物區(qū)系及活性的影響[J].土壤通報，2000，31（2）：67-69.

[9] Kaare J，Carsten S J，Vigdis T，et al.Pesticide effects on bacterial diversity in agricultural soils a review[J].Biology and Fertility of Soils，2001，33（6）：443-453.

[10] 徐潔，羅華元.煙草根際土壤微生物區(qū)系分析及其相關(guān)性研究[J].西南農(nóng)業(yè)學(xué)報，2011 ，24（6）：2 279-2 284.

[11] 謝莉.有機(jī)肥對植煙土壤微生物活性及烤煙產(chǎn)量品質(zhì)的影響[D]. 重慶：西南大學(xué)，2010.