趙燦培

江南大學(xué)，江蘇無(wú)錫 214000

抗腫瘤藥卡培他濱原料藥的質(zhì)量控制及穩(wěn)定性考察

趙燦培

江南大學(xué)，江蘇無(wú)錫 214000

目的 建立抗腫瘤藥卡培他濱原料藥的質(zhì)量控制方法，并考察其穩(wěn)定性。 方法 采用高效液相色譜法測(cè)定卡培他濱原料藥含量和有關(guān)物質(zhì)，并考察其在加速試驗(yàn)和長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下的穩(wěn)定性。 結(jié)果 建立了卡培他濱原料藥的質(zhì)量控制方法，包括性狀、鑒別、比旋度（+96.0°～+100.0°）、有關(guān)物質(zhì)（≤1.0%）、水分（≤0.3%）、熾灼殘?jiān)ā?.1%）、重金屬（≤20 mg/kg）和含量測(cè)定（98.0%～102.0%），樣品檢測(cè)檢測(cè)結(jié)果在規(guī)定的限度內(nèi)，并分別在加速試驗(yàn)[(40±2)℃，相對(duì)濕度75%±5%]和長(zhǎng)期試驗(yàn)[（30±2）℃，相對(duì)濕度60%±5%]條件下進(jìn)行了3個(gè)月的穩(wěn)定性試驗(yàn)，穩(wěn)定性考察期內(nèi)各項(xiàng)指標(biāo)未見(jiàn)明顯變化。 結(jié)論 所建立的卡培他濱原料藥質(zhì)量控制方法重復(fù)性好、專(zhuān)屬性強(qiáng)，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，穩(wěn)定性檢測(cè)結(jié)果在規(guī)定的限度內(nèi)，卡培他濱原料藥穩(wěn)定性良好。

抗腫瘤藥；卡培他濱；質(zhì)量控制；穩(wěn)定性考察

卡培他濱是第一個(gè)口服氟代嘧啶氨基甲酸酯類(lèi)抗腫瘤藥物，由瑞士羅氏（Roche）制藥公司開(kāi)發(fā)[1]，臨床適用于多種腫瘤的治療，包括乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、胃癌、宮頸癌以及氟尿嘧啶耐藥的腫瘤等[2]?？ㄅ嗨麨I具有靶向性殺傷腫瘤細(xì)胞的功效[3]，能選擇性地作用于腫瘤細(xì)胞，使藥物在腫瘤部位有更高活性[4]，增強(qiáng)療效的同時(shí)也減輕了不良反應(yīng)，易于耐受[5]，并能顯著提高患者的生存質(zhì)量，縮短平均住院時(shí)間，節(jié)約住院費(fèi)用[6]。

1 材料與試劑

1.1 產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱(chēng)：卡培他濱。

英文名稱(chēng)：Capecitabine。

中文化學(xué)名：1-（5-脫氧-β-D-呋喃核糖基）-5-氟-1，2-二氫-2-氧代-4-嘧啶氨基甲酸戊酯[7]。

英文化學(xué)名：1-（5-deoxy-β-D-ribofuranosyl）-5-fluoro-1，2-dihydro-2-oxo-4-pyrimidinecarbamate。

化學(xué)結(jié)構(gòu)式：

分子式：C15H22FN3O6。

分子量：359.35。

CAS號(hào)：154361-50-9。

1.2 儀器與試藥

Shimadzu LC-10A液相色譜儀；SF-3型微量水分測(cè)定儀；WZZ-2A型自動(dòng)旋光儀?？ㄅ嗨麨I原料藥（自制），卡培他濱對(duì)照品（美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局，批號(hào)：G0J205，含量：99.7%）；乙腈為色譜純，其余試劑為分析純。

1.3 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

1.3.1 性狀 本品為白色或類(lèi)白色粉末。

1.3.2 峰形鑒別 在含量測(cè)定項(xiàng)下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時(shí)間與對(duì)照品溶液主峰的保留時(shí)間一致。

1.3.3 比旋度 取樣品，加甲醇溶解并定量稀釋成每毫升中約含10 mg的溶液，按無(wú)水物計(jì)算，在20℃下，按《中華人民共和國(guó)藥典》（簡(jiǎn)稱(chēng) “中國(guó)藥典”）（二部）2010年版相關(guān)內(nèi)容依法測(cè)定[8]，比旋度應(yīng)為+96.0°～+ 100.0°。

1.3.4 有關(guān)物質(zhì) 按“2.8”項(xiàng)下方法，精密量取含量測(cè)定項(xiàng)下的對(duì)照溶液10 μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高約為滿量程的20%～25%[9]。再精密量取含量測(cè)定項(xiàng)下的對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μl分別注入液相色譜儀，記錄色譜至主峰保留時(shí)間的2倍，供試品溶液如顯雜質(zhì)峰，各雜質(zhì)峰面積之和不得大于對(duì)照溶液主峰的峰面積（1.0%）。

1.3.5 水分 取本品適量，按《中國(guó)藥典》2010年版（二部）相關(guān)內(nèi)容依法測(cè)定[8]，含水分不得＞0.3%。

1.3.6 熾灼殘?jiān)?取樣品適量，置鉑坩堝中，按《中國(guó)藥典》2010年版（二部）相關(guān)內(nèi)容依法測(cè)定[8]，熾灼殘?jiān)坏茫?.1%。

1.3.7 重金屬 取熾灼殘?jiān)?xiàng)下遺留的殘?jiān)?，按《中?guó)藥典》2010年版（二部）相關(guān)內(nèi)容依法測(cè)定[8]，含重金屬不得＞20 mg/kg。

1.3.8 含量測(cè)定 按無(wú)水物計(jì)算，含C15H22FN3O6應(yīng)為98.0%～102.0%。

2 方法與結(jié)果

2.1 溶液的配制

稀釋劑：乙腈∶甲醇∶水=7∶1∶12。

對(duì)照品溶液：精密稱(chēng)取適量卡培他濱對(duì)照品，溶解于稀釋劑中，制成每毫升中含0.6 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

對(duì)照溶液：精密量取卡培他濱對(duì)照品溶液1 ml，置于100 ml的量瓶中，加稀釋劑定容搖勻，作為對(duì)照溶液。

供試品溶液：精密稱(chēng)取適量卡培他濱樣品，溶解于稀釋劑中，制成每毫升中含0.6 mg的溶液，作為供試品溶液。

2.2 色譜條件

色譜柱為Kromasil C18柱 （以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，4.6 mm×250 mm，5 μm），檢測(cè)波長(zhǎng)為250 nm，流速為1 ml/min，柱溫為40℃，進(jìn)樣量為10 μl。流動(dòng)相：A為甲醇∶乙腈∶0.1%醋酸=7∶1∶12，B為甲醇∶乙腈∶0.1%醋酸=16∶1∶3；梯度洗脫：0→5 min，B在流動(dòng)相中的比例 （f）保持在0%；5→20 min，f由0%上升至51%；20→30 min，f保持在 51%，30→31 min，f由51%下降至0%；31→40 min，f保持在0%。在此色譜條件下，卡培他濱的理論塔板數(shù)≥6000。色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖

2.3 含量測(cè)定

精密量取上述對(duì)照品溶液和供試品溶液10 μl注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖，按外標(biāo)法以峰面積進(jìn)行計(jì)算，即得含量。

2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線

取卡培他濱對(duì)照品約50 mg，精密稱(chēng)定，置于25 ml的量瓶中，用少量稀釋劑溶解，定容搖勻，精密量取上述溶液0.5、1、2、3、4、5 ml，分別置10 ml量瓶中，用稀釋劑稀釋至刻度，搖勻。精密量取上述各溶液10 μl注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積值（A）對(duì)濃度（C）進(jìn)行線性回歸[12]。回歸方程為A=14 542 891C＋184 919，r＝0.9999（n=6）。結(jié)果表明，在0.0992～0.992 mg/ml濃度范圍內(nèi)，呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度試驗(yàn)

精密稱(chēng)取卡培他濱對(duì)照品適量，用稀釋劑溶解并稀釋成每毫升約含卡培他濱0.6 mg的溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，計(jì)算主峰面積的RSD為0.2%，表明含量測(cè)定的進(jìn)樣精密度良好，滿足測(cè)定要求。

2.6 重復(fù)性試驗(yàn)

精密稱(chēng)取卡培他濱樣品適量，用稀釋劑溶解并稀釋成每毫升約含卡培他濱0.6 mg的溶液，同法配制6份，分別測(cè)定含量，計(jì)算含量的RSD為0.1%，表明含量測(cè)定方法重復(fù)性好（表1）。

表1 重復(fù)性試驗(yàn)結(jié)果（%）

2.7 穩(wěn)定性試驗(yàn)

取“重復(fù)性試驗(yàn)”項(xiàng)下的供試品溶液，分別于0、2、4、6、8、10 h各進(jìn)樣10 μl，記錄峰面積，考察樣品溶液的穩(wěn)定性。計(jì)算含量的RSD為0.1%，表明供試品溶液在10 h內(nèi)比較穩(wěn)定（表2）。

表2 溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果（%）

2.8 樣品檢測(cè)

三批樣品（批號(hào)分別為Batch.01、Batch.02、Batch. 03）質(zhì)量控制項(xiàng)目（性狀、鑒別、比旋度、有關(guān)物質(zhì)、水分、熾灼殘?jiān)⒅亟饘俸秃繙y(cè)定）的檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表3，提示各項(xiàng)指標(biāo)均符合相關(guān)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。

2.9 穩(wěn)定性考察

2.9.1 加速穩(wěn)定性試驗(yàn) 取三批樣品（批號(hào)分別為Batch. 01、Batch.02、Batch.03）置于加速穩(wěn)定性試驗(yàn)條件下[（40±2）℃、相對(duì)濕度75%±5%]，定期于0、l、2、3個(gè)月時(shí)分別取樣并檢測(cè)，結(jié)果提示，l、2、3個(gè)月后各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)與0月數(shù)據(jù)相比均無(wú)明顯變化，表明本品在加速試驗(yàn)條件下放置3個(gè)月時(shí)質(zhì)量較為穩(wěn)定（表4）。

表3 樣品檢測(cè)結(jié)果

表4 加速穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

2.9.2 長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn) 取三批樣品 （批號(hào)分別為Batch.01、Batch.02、Batch.03）置于長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)[（30±2）℃、相對(duì)濕度65%±5%]條件下，定期于0、3個(gè)月時(shí)分別取樣并檢測(cè)產(chǎn)品質(zhì)量，結(jié)果提示，3個(gè)后月各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)與0月數(shù)據(jù)相比均無(wú)明顯變化，表明本品在長(zhǎng)期試驗(yàn)條件下放置3月后質(zhì)量較為穩(wěn)定（表5）。

3 討論

本次研究根據(jù)《中國(guó)藥典》2010年版（二部）對(duì)原料藥的要求，研究了卡培他濱原料藥的各項(xiàng)質(zhì)量指標(biāo)，建立了質(zhì)量控制方法，包括性狀、峰形鑒別、比旋度、有關(guān)物質(zhì)、水分、熾灼殘?jiān)?、重金屬和含量測(cè)定，可以很好地控制卡培他濱原料藥產(chǎn)品質(zhì)量，樣品檢測(cè)結(jié)果均在規(guī)定的限度內(nèi)，表明卡培他濱原料藥質(zhì)量可控。

本次研究同時(shí)對(duì)卡培他濱原料藥的穩(wěn)定性情況進(jìn)行了初步考察，在加速穩(wěn)定性試驗(yàn)和長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)條件下檢測(cè)產(chǎn)品質(zhì)量，包括外觀、比旋度、有關(guān)物質(zhì)、水分、含量等，結(jié)果提示，l、2、3個(gè)月后各項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)與0月數(shù)據(jù)相比均無(wú)明顯變化，表明產(chǎn)品穩(wěn)定性良好。

采用高效液相色譜法測(cè)定卡培他濱原料藥含量和有關(guān)物質(zhì)，方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確，可作為該原料藥的質(zhì)量控制方法[10-16]。并對(duì)線性試驗(yàn)、精密度試驗(yàn)、重復(fù)性試驗(yàn)、溶液穩(wěn)定性試驗(yàn)進(jìn)行方法驗(yàn)證，表明該控制方法重復(fù)性好、專(zhuān)屬性強(qiáng)、檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可以有效控制該產(chǎn)品的質(zhì)量。

表5 長(zhǎng)期穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果

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Quality control and stability study of anticancer drug capecitabine

ZHAO Can-pei
Jiangnan University in Jiangsu Province,Wuxi 214000,China

ObjectiveTo establish the method of the quality control of anticancer drug capecitabine and observe its stability.MethodsCapecitabine bulk drug content and related substances were determined by high performance liquid chromatography,and the stability under the condition of the accelerated test and long-term test was investigated.ResultsThe method of the quality control of capecitabine was established,which included character,identification,optical rotation(+96.0°to+100.0°),related substance(≤1.0%),water determination(≤0.3%),residue on ignition(≤0.1%),heavy metals(≤20 mg/kg)and content determination(98.0%－102.0%),the test results were all within defined margin.Meanwhile,the stability was observed in accelerated testing[(40±2)℃,RH 75%±5%]and long-term testing[(30±2)℃,RH 60%± 5%]for 3 months,no obvious changes were observed in each index of stability test.ConclusionThe established quality control method of capecitabine is recurrent and specific,the results are accurate and reliable,the test results of stability are within defined margin,capecitabine has good stability.

Anticancer drug;Capecitabine;Quality control;Stability study

R927.11

A

1674-4721（2014）04（a）-0012-04

2014-02-20本文編輯：袁 成）

趙燦培（1983-），男，碩士，工程師，主要從事化學(xué)藥物的研究