陳輝　湯道權(quán)　戚建良　李玉華　高愛軍

摘要[目的] 利用指紋圖譜技術(shù)快速檢測(cè)摻偽大豆油的花生油。[方法] 利用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（GCMS）建立大豆油、花生油、摻有大豆油的花生油GCMS指紋圖譜，并分別匹配特征峰，通過特征峰比對(duì)，快速辨識(shí)花生油與摻偽大豆油的花生油。[結(jié)果] 花生油指紋圖譜匹配了9個(gè)共有峰，摻偽花生油指紋圖譜共匹配了10個(gè)共有峰，利用共有峰差異可快速篩選摻偽花生油。經(jīng)過質(zhì)譜數(shù)據(jù)庫分析，摻偽花生油中增加的色譜峰為C18∶3不飽和脂肪酸，大豆油摻偽量最低檢出限為5.5%（V/V）。[結(jié)論] 利用指紋圖譜技術(shù)可快速、準(zhǔn)確地鑒別摻偽大豆油的花生油，也為其他油脂摻偽快速檢測(cè)提供參考。

關(guān)鍵詞指紋圖譜；快速檢測(cè)；GCMS；脂肪酸；大豆油；花生油

中圖分類號(hào)S188文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼A文章編號(hào)0517-6611（2014）22-07325-02

油脂在人們?nèi)粘Ｉ钪芯哂胁豢商娲淖饔茫渲饕煞质侵舅岣视王?。不同油脂由于價(jià)格差異較大，使得不法商販進(jìn)行油脂摻偽活動(dòng)，不僅嚴(yán)重?fù)p害了消費(fèi)者的利益，更擾亂了油脂流通市場(chǎng)的正常運(yùn)行。因此，亟需建立油脂摻偽檢測(cè)的快速方法。然而現(xiàn)有的一些檢測(cè)方法[1-4]都存在或特征指標(biāo)專一性不強(qiáng)，或檢測(cè)靈敏度不高，或檢測(cè)準(zhǔn)確性不高等缺點(diǎn)。

氣相色譜法因其信息量大、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)在油脂摻偽檢測(cè)中得到大量學(xué)者的重視[5]。植物油主要由脂肪酸甘油酯組成，不同油脂脂肪酸的組成和含量不同，摻偽后必然會(huì)改變其脂肪酸的組成與含量。將脂肪酸甲酯衍生化后，利用氣相色譜儀進(jìn)行檢測(cè)，通過脂肪酸組成或含量改變來快速判定油脂是否摻偽。與氣相色譜法相比，氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用能夠提供更豐富準(zhǔn)確的色譜信息。目前有文獻(xiàn)利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行油脂提取工藝考察[6]，但用于油脂摻偽檢驗(yàn)的尚未見報(bào)道。

指紋圖譜是利用現(xiàn)代儀器分析獲得能夠代表該物質(zhì)特征各種圖譜數(shù)據(jù)資料的一種技術(shù)，具有信息量大且簡(jiǎn)便快捷的優(yōu)點(diǎn)，尤其適用于含有復(fù)雜組分物種的分析鑒定。由于不同油脂其脂肪酸的組成成分不同，反映在指紋圖譜上會(huì)體現(xiàn)出不同的特征峰，利用特征峰的差異對(duì)摻偽油脂進(jìn)行鑒別，無疑是一種很有效的快速檢測(cè)方法。已有學(xué)者將指紋圖譜技術(shù)應(yīng)用到油脂鑒定和摻偽識(shí)別中[7]，但將GCMS與指紋圖譜相結(jié)合進(jìn)行油脂摻偽識(shí)別尚未見報(bào)道。

筆者利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)，以花生油摻偽大豆油為例，探討油脂摻偽的快速檢驗(yàn)方法。通過構(gòu)建花生油和大豆油的GCMS指紋圖譜，分別匹配特征峰，與摻偽花生油的指紋圖譜進(jìn)行比對(duì)，根據(jù)特征峰的差異，從而快速辨識(shí)花生油中是否摻偽大豆油。

1材料與方法

1.1材料研究對(duì)象：花生油、大豆油均購自本地超市。主要儀器：美國Agilent 7890A5975C氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀；HP5MS 5% Phenyl Methyl Silox 毛細(xì)管色譜柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm），Agilent Chemstation 工作站，NIST化學(xué)數(shù)據(jù)庫。主要試劑：化學(xué)試劑均為分析純，水為純化水。

1.2方法

1.2.1樣品前處理。精密稱取油樣0.05 g，置于10 ml比色管中，加苯-石油醚（1∶1）混合液2 ml，搖勻，加入0.4 mol/L KOH甲醇溶液2 ml，振搖1 min，靜置分層，取上清液體，待測(cè)。

1.2.2色譜條件。進(jìn)樣口溫度：280 ℃；升溫程序：初始溫度150 ℃保持1 min，以5 ℃/min升溫至160 ℃保持2 min，以2 ℃/min升溫至170 ℃保持2 min，以0.5 ℃/min升溫至180 ℃保持5 min，以4 ℃/min升溫至260 ℃保持10 min；載氣：氦氣；流速：1.0 ml/min；分流比：50∶1；進(jìn)樣量：0.5 μl。

1.2.3質(zhì)譜條件。電子轟擊（EI）離子源；離子源溫度：230 ℃；四級(jí)桿溫度：150 ℃；溶劑延遲：3.75 min。

1.2.4花生油標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立。取5個(gè)批次的花生油樣品，按照“1.2.1”方法進(jìn)行處理，進(jìn)樣分析，得到的色譜圖利用中藥指紋圖譜分析軟件分析，得到花生油的平均指紋圖譜（圖1A）。

注：A 花生油；B 大豆油；C 摻偽20%大豆油的花生油。

圖13種油脂指紋圖譜1.2.5大豆油標(biāo)準(zhǔn)指紋圖譜的建立。取5個(gè)批次的大豆油樣品，按照“1.2.1”方法進(jìn)行處理，進(jìn)樣分析，得到的色譜圖利用中藥指紋圖譜分析軟件分析，得到大豆油的平均指紋圖譜（圖1B）。

1.2.6摻偽花生油指紋圖譜的建立。將5個(gè)不同廠家的大豆油樣品以1∶4（V/V）比例，分別摻入花生油樣品中，按照“1.2.1”方法進(jìn)行處理，進(jìn)樣分析，得到的色譜圖利用中藥指紋圖譜分析軟件分析，得到摻偽花生油的平均指紋圖譜（圖1C）。

2結(jié)果與分析

2.1摻偽圖譜的辨識(shí)利用中藥指紋圖譜分析軟件對(duì)3種指紋圖譜進(jìn)行分析。在花生油指紋圖譜中，匹配了9個(gè)共有峰，在大豆油的指紋圖譜中，匹配了8個(gè)共有峰，通過比對(duì)可以看出，大豆油指紋圖譜中保留時(shí)間為31.5 min的5號(hào)峰在花生油的指紋圖譜中沒有出現(xiàn)，而該峰出現(xiàn)在了摻偽指紋圖譜中，因此，通過5號(hào)峰可以快速辨識(shí)摻偽大豆油的花生油。

2.2定性分析利用NIST化學(xué)數(shù)據(jù)庫對(duì)5號(hào)峰進(jìn)行辨識(shí)，其質(zhì)譜圖見圖2。經(jīng)分析，其對(duì)應(yīng)的脂肪酸為C18∶3不飽和脂肪酸，從而確立了C18∶3不飽和脂肪酸是辨識(shí)摻偽花生油的關(guān)鍵。

圖2第5號(hào)色譜峰的質(zhì)譜圖2.3最低檢出限逐步減少大豆油的摻偽比例，按“1.2.1”方法處理，進(jìn)樣分析，摻偽量的最低檢出限為5.5%（V/V）。

3結(jié)論與討論

（1）在檢測(cè)樣品時(shí)，進(jìn)行了多次重復(fù)性試驗(yàn)。從實(shí)際檢測(cè)結(jié)果來看，試驗(yàn)的重現(xiàn)性較好，不僅數(shù)據(jù)穩(wěn)定，而且各數(shù)據(jù)間的偏差也很小，各峰相對(duì)保留時(shí)間經(jīng)多次測(cè)定證明有很好的一致性。

（2）脂肪酸甲酯化的方法很多，該試驗(yàn)在確定使用堿催化脂肪酸甲酯化的方法時(shí)發(fā)現(xiàn)，萃取液的不同對(duì)衍生效率的影響很大。如萃取液是苯-石油醚時(shí)，萃取效果好，其衍生物脂肪酸甲酯在色譜圖上出峰多，表明衍生反應(yīng)完全。需要注意的是制備出的澄清樣品液，應(yīng)放置于恒溫條件（16～20 ℃）下，于較短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定。

（3）通過該試驗(yàn)，建立了一種利用GCMS指紋圖譜快速辨識(shí)摻偽花生油的方法，該方法簡(jiǎn)單、可靠，為花生油快速質(zhì)量檢測(cè)提供參考，同時(shí)為其他食用油的快速檢測(cè)方法研究提供參考。

參考文獻(xiàn)

[1] 王江蓉，周建平，張令夫，等.植物油摻偽檢測(cè)方法的應(yīng)用與研究進(jìn)展[J].中國油脂，2007，32（6）：78-81.

[2] 王小燕，王錫昌，劉源，等.近紅外光譜技術(shù)在食品摻偽檢測(cè)應(yīng)用中的研究進(jìn)展[J].食品科學(xué)，2011，32（1）：265-269.

[3] CHRISTY A A，KASEMSUMRAN S，DU Y P，et al.The detection and quantification of adulteration in olive oil by nearinfrared spectroscopy and chemometrics [J].Analytical Sciences，2004，20（6）：935-940.

[4] 曹文明， 薛斌， 楊波濤，等. 地溝油檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展與研究[J].糧食科技與經(jīng)濟(jì)， 2011，36（1）：41-44.

[5] 張宏榮.氣相色譜法測(cè)定花生油摻偽大豆油的研究[J].食品研究與開發(fā)，2011，32（7）：120-122.

[6] 劉春葉，張劍，苗延青，等.花椒籽油的提取及GCMS分析[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2012，40（6）：3594-3596，3599.

[7] 姚云平，李昌模，劉慧琳，等.指紋圖譜技術(shù)在植物油鑒定和摻假中的應(yīng)用[J].中國油脂，2012，37（7）：51-54.