馬麗 田笠

【摘要】探討乳腺癌的微衛(wèi)星不穩(wěn)定性及其與乳腺癌臨床病理的關系，尋找更有效的判斷乳腺癌預后的分子標志，為乳腺癌的發(fā)生及預后判斷提供理論依據(jù)。乳腺癌中普遍存在著MSI，并且MSI更多發(fā)生在有腋窩淋巴結轉移、HER2表達及臨床晚期的病例中，提示預后較差的乳腺癌病例中MSI的發(fā)生率更高，MSl可能是判斷乳腺癌臨床分期的一個分子標志，有助于對乳腺癌的預后評估。

【關鍵詞】乳腺癌 微衛(wèi)星不穩(wěn)定 預后

【中圖分類號】G64 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-3089（2014）12-0233-01

乳腺癌是女性最常見的惡性腫瘤之一。其發(fā)生是一種多基因參與，多種遺傳學改變累積的結果。而細胞的基因組不穩(wěn)定是導致乳腺癌發(fā)生的重要遺傳學改變。目前研究認為，人類腫瘤的基因組不穩(wěn)定性分為兩種不同的類型：一種是微衛(wèi)星不穩(wěn)定性（microsatellite instability，MSI），另一種是雜合性缺失（Loss of heterozygosity，LOH）。微衛(wèi)星（microsatellite，MS）是廣泛分布于原核和真核生物基因組中小于10個核苷酸的簡單重復序列，約占人類基因的10%，核心序列為1～6 bp[2]。MS在人群中表現(xiàn)為高度多態(tài)性主要是由于重復序列中堿基的數(shù)目不同，正常個體體細胞在生長發(fā)育過程中MS長度（或重復序列的重復次數(shù)）是保持不變的。MSI是指由于復制錯誤引起的簡單重復序列的增加或丟失。MSI是細胞核內基因組不穩(wěn)定的一個重要標志，腫瘤組織與相對應的非腫瘤組織相比，其結構性等位基因的大小發(fā)生改變，即MS重復單元的增加和丟失。在擴增片段長度多態(tài)性分析中，表現(xiàn)為腫瘤組織DNA出現(xiàn)而非腫瘤組織中不出現(xiàn)的異常的條帶，或腫瘤組織的一個等位基因與非腫瘤組織相應等位基因相同，而另一等位基因的位置發(fā)生改變。1993年，Altonen等[1]首次發(fā)現(xiàn)在HNPCC細胞中D2S123位點存在高頻率的MSI，以后相繼在肺癌、胃癌、白血病等其它腫瘤細胞內也發(fā)現(xiàn)了MSl的存在。隨著對MSI的深入研究，現(xiàn)在普遍認為MSI的發(fā)生與DNA錯配修復系統(tǒng)功能缺陷有關。有研究顯示人類錯配修復（mismatch repair。MMR）系統(tǒng)中任何一個基因的突變都可使DNA復制精確性下降，導致整個基因組的不穩(wěn)定，而最易觀察到的不穩(wěn)定性表型即為MSI。另外有文獻報道通過對MSI的腫瘤細胞系進行體外錯配修復活性檢測，發(fā)現(xiàn)這些腫瘤細胞系均表現(xiàn)有DNA鏈特異性錯配修復功能的缺陷，因此推斷MSI可能是由于MMR缺陷所致，而MSI可作為一個檢測腫瘤細胞突變表型的敏感指標[3]。而在乳腺癌中是否存在MSI，不同的實驗結果很不一致。Pehomaki等[4]檢測了84例乳腺癌，結果沒有發(fā)現(xiàn)二核苷酸的MS位點存在MSI。而Luqmani等[5]發(fā)現(xiàn)在發(fā)病年齡較早的乳腺癌患者中MSI的發(fā)生率很高。

我們的實驗有18例正常乳腺病例均未見MSI，39例乳腺良性腫物病例有5例發(fā)生了MSI，MSI的發(fā)生率為12.82%，而在78例乳腺癌病例中則有35例發(fā)生了MSI，MSI的總發(fā)生率為44.87%，3組病例MSI的發(fā)生率差異有統(tǒng)計學意義（P=0.000），提示乳腺癌中更容易發(fā)生MSI?？紤]產(chǎn)生MSI的原因可能是外源性化學或物理的損傷，使DNA復制過程中滑動或修復時滑動鏈與互補鏈發(fā)生堿基錯配。導致一個或幾個重復單位的插入或缺失，即復制錯誤引起簡單重復序列的改變而產(chǎn)生了MSI。而機體中的MMR基因也可能是因為環(huán)境因素所致突變，使整個MMR系統(tǒng)功能缺陷，無法修復DNA復制過程出現(xiàn)的錯誤，而使已經(jīng)發(fā)生的MSI得以保存在細胞DNA中。如果MSI發(fā)生于控制細胞生長和增殖的基因（如BAX和TGFl3），使得這些基因的突變，細胞增生失去控制而惡性變，從而導致腫瘤的發(fā)生。Seitz S等[6]用CAL51和MT-3兩個乳腺癌細胞株來檢測MSI，結果發(fā)現(xiàn)兩種細胞株中均普遍存在著MSI。本實驗中還發(fā)現(xiàn)在腋窩淋巴結轉移、creb-B2基因表達及臨床分期較晚的乳腺癌病例中MSI的發(fā)生更多?？赡苁且驗殡S著細胞群體持續(xù)擴增，已保存在細胞DNA中的MSI為下一輪致突變事件提供克隆性的靶細胞群體，使MSI在新擴增的細胞內再一次發(fā)生，最終有可能導致細胞基因組穩(wěn)定性嚴重受損，細胞增生及分化異常而出現(xiàn)細胞惡變，甚至發(fā)生惡性細胞的增殖和侵襲。Paulson等[7]報道乳腺癌中MSI與存活率下降及預后不良有關，具有MSl的病例較MSS病例的腫瘤體積更大，受累的腋窩淋巴結數(shù)更多，組織學分期更晚。實驗中所選用的兩個2號染色體上的位點D2S443和D2S2739 MSI的發(fā)生率分別為23.08%和29.49%，MSI的發(fā)生率均較高。同時MMR基因中的hMSH2也定位在2號染色體上，因此懷疑乳腺癌中MSI的發(fā)生可能與hMSH2基因有關，但兩者是否有關還有待進一步研究。另外有研究顯示，乳腺癌中MSI的發(fā)生與MMR系統(tǒng)無關，可能存在著別的機制促使乳腺癌中MSI的發(fā)生。Wild PJ等[8]的實驗發(fā)現(xiàn)乳腺癌MSI的病例表達hMSH2和hMLHl正常，而p53基因的外顯子5～9均有突變，從而得出乳腺癌MSI的發(fā)生與錯配修復途徑失活并不一致的結論，p53基因突變是導致乳腺癌MSI發(fā)生的機制之一。可見乳腺癌廣泛存在著MSI，但其發(fā)生機制還有待更多的實驗來進行研究。

綜上所述，MSI在乳腺癌中普遍存在，且與乳腺癌臨床預后較差的因素（腋窩淋巴結轉移、creb-B2基因表達及臨床分期晚）有關。提示MSI可能是判斷乳腺癌臨床分期的一個分子標志，亦可能成為判斷預后的一個分子標志，可對推測預后提供有益的幫助。