陳姍姍

【摘 要】 目的：對(duì)高效液相色譜儀分析法對(duì)食品中人工色素進(jìn)行測(cè)定方法進(jìn)行分析探討，為今后的研究工作提供可靠的參考依據(jù)。方法：采取Venusil MP C18柱，流動(dòng)相為甲醇-乙腈（1：1）梯度洗脫，外標(biāo)法進(jìn)行定量，對(duì)食品中7種人工合成色素進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果：該方法檢測(cè)食品中人工合成色素時(shí)色素濃度在0.5-20.0mg/l時(shí)存在良好線性關(guān)系，r>0.9991，加樣回收率在78.6%-100.7%之間，RSD值在0.2%-4.3%之間。結(jié)論：采取高效液相色譜法對(duì)食品中人工色素檢測(cè)檢測(cè)時(shí)方法可靠，值得推廣。

【關(guān)鍵詞】 高效液相色譜法 食品 人工色素 技術(shù)研究

食品中的人工合成色素為化學(xué)合成方法所制備的，以苯、甲苯、萘等化工產(chǎn)品作為原料，經(jīng)一系列反應(yīng)合成制得。目前食品中合成色素濫用現(xiàn)象嚴(yán)重，食品合成色素檢測(cè)已經(jīng)成為食品檢查工作中一項(xiàng)重要內(nèi)容[1]。本次研究中建立了高效液相色譜法對(duì)食品中人工色素進(jìn)行了檢測(cè)，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1 材料與方法

（1）儀器與試劑

實(shí)驗(yàn)中所需儀器為我實(shí)驗(yàn)室現(xiàn)有高效液相色譜儀，電子天平、旋渦混合儀、超聲波清洗機(jī)、恒溫水浴鍋、高速離心機(jī)、純水器。

實(shí)驗(yàn)試劑包括：甲醇、乙腈均為色譜純，乙酸銨、乙酸鉛為分析純，日落黃（0.500mg/mL）、檸檬黃（0.500mg/mL）、莧菜紅 （0.500mg/mL）、亮藍(lán)（0.500mg/mL）、胭脂紅（0.500mg/mL）、赤蘚紅（100mg/L）以及誘惑紅（100mg/L）標(biāo)準(zhǔn)品。

（2）樣品來(lái)源：本次實(shí)驗(yàn)中樣品來(lái)源于周邊超時(shí)、零售攤點(diǎn)以及菜市場(chǎng)食品。

（3）方法：（a）標(biāo)準(zhǔn)品配制：將上述7種標(biāo)準(zhǔn)品經(jīng)濃度為20%的甲醇進(jìn)行溶解制成質(zhì)量濃度為100mg/l的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，在4℃條件下保存。將制備好的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液經(jīng)濃度為20%的甲醇稀釋成不同濃度（0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0mg/l）的標(biāo)準(zhǔn)系列溶液，先用現(xiàn)配。（b）色譜條件：實(shí)驗(yàn)中所需色譜柱為Venusil MP C18柱，柱溫設(shè)定為30℃，流動(dòng)相A相為甲醇乙腈，B相為濃度為0.02mol/l的乙酸銨溶液，流速為1.0ml/min，梯度洗脫：0-12.0 min時(shí)A相5%，12-30min時(shí)A相自5%-35%，30-35min時(shí)A相自35%-98%，35-35.1min是A相在98%-4%，35.1-55min時(shí)A相維持5%。進(jìn)樣量為10ul，檢測(cè)波長(zhǎng)分別為：檸檬黃、莧菜紅、胭脂紅、日落黃為254nm，誘惑紅、赤蘚紅為500nm，亮藍(lán)為600nm。分別展開(kāi)線性關(guān)系考察、加樣回收實(shí)驗(yàn)、精密度實(shí)驗(yàn)。（c）樣品處理：所取樣品進(jìn)行處理后取上清液，在10ml的離心管中在10000r/min條件下離心操作5min，經(jīng)0.45微孔濾膜過(guò)濾后備用。

2 結(jié)果

2.1 線性關(guān)系考察結(jié)果

本次試驗(yàn)中7種人工合成色素0.5、1.0、2.0、5.0、10.0、20.0mg/l不同濃度溶液經(jīng)1.3.2色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，以峰面積為縱坐標(biāo)，以色素濃度為橫坐標(biāo)，的線性回歸方程，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，色素濃度在0.5-20.0mg/l時(shí)存在良好線性關(guān)系，r>0.9991，詳見(jiàn)表1。

2.2 加樣回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果和精密度

本次實(shí)驗(yàn)中在樣品中分別添加各色素含量為3、15、40mg/kg的標(biāo)準(zhǔn)品，以1.3.2所示色譜條件進(jìn)樣檢測(cè)，外標(biāo)法進(jìn)行定量，計(jì)算回收率和RSD值，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，7中色素加樣回收率在78.6%-100.7%之間，RSD值在0.2%-4.3%之間，詳見(jiàn)表2。

3 討論

近幾年的實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，高效液相色譜法在藥學(xué)、食品等諸多領(lǐng)域均發(fā)揮了重要作用，為含量測(cè)定、質(zhì)量控制等工作提供了可靠的參考依據(jù)[2]。本次實(shí)驗(yàn)中建立的高效液相色譜法在7種食品人工合成色素檢測(cè)中，色素濃度在0.5-20.0mg/l之間時(shí)存在良好線性關(guān)系，回收率在78.6%-100.7%之間，相對(duì)較高， RSD值在理想范圍內(nèi)，精密度良好，檢測(cè)效果理想，在大批量樣品中多種色素檢測(cè)中可發(fā)揮重要作用，值得對(duì)其給予重視并推廣，為今后的食品安全檢驗(yàn)工作提供參考依據(jù)。

參考文獻(xiàn)

[1]中華人民共和國(guó)國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).GB/T 23496-2009，食品中禁用物質(zhì)的檢測(cè)-堿性橙染料 高效液相色譜法[S]，2009.

[2]路勇，渠巖，馮楠等.超高效液相色譜-串聯(lián)四極桿質(zhì)譜法快速篩查食品中的45種工業(yè)染料[J].食品科學(xué)，2012，33（6）：176-180.endprint