夏 菁， 謝媛媛， 張宗璇， 張延惠， 王義明， 梁瓊麟， 羅國(guó)安*

（1.江西中醫(yī)學(xué)院， 江西 南昌 330004； 2.清華大學(xué)化學(xué)系， 北京 100084； 3.中國(guó)藥科大學(xué)， 江蘇 南京210009； 4.桂林天和藥業(yè)股份有限公司， 廣西 桂林 541001）

骨通貼膏指紋圖譜及化學(xué)成分研究

夏 菁1，2， 謝媛媛2*， 張宗璇3， 張延惠4， 王義明1，2， 梁瓊麟2， 羅國(guó)安1，2*

（1.江西中醫(yī)學(xué)院， 江西 南昌 330004； 2.清華大學(xué)化學(xué)系， 北京 100084； 3.中國(guó)藥科大學(xué)， 江蘇 南京210009； 4.桂林天和藥業(yè)股份有限公司， 廣西 桂林 541001）

目的 應(yīng)用 HPLC法建立骨通貼膏 （丁公藤、 麻黃、 當(dāng)歸、 干姜等） 指紋圖譜并結(jié)合兩種 LC/MS 聯(lián)用技術(shù)進(jìn)行多成分結(jié)構(gòu)鑒定。 方法 以 AlltimaTMC18（4.6 mm×250 mm， 5 μm） 為分析柱， 0.1%甲酸水溶液-乙腈為流動(dòng)相，梯度洗脫， 檢測(cè)波長(zhǎng)為 280nm； 質(zhì)譜定性采用飛行時(shí)間質(zhì)譜 （TOF-MS） 結(jié)合離子阱多級(jí)質(zhì)譜 （ Ion-trap/MSn）， 正、負(fù)兩種離子模式掃描。 結(jié)果 以 Z-藁本內(nèi)酯為參照物峰， 確定了骨通貼膏 HPLC指紋圖譜， 指定了 19 個(gè)共有峰 （21個(gè)化學(xué)成分）， 10 批骨通貼膏 HPLC指紋圖譜相似度大于 0.990。 結(jié)論 所建立骨通貼膏指紋圖譜分析方法簡(jiǎn)單準(zhǔn)確，穩(wěn)定可靠，可用于其質(zhì)量評(píng)價(jià)。

骨通貼膏；指紋圖譜；高效液相色譜；飛行時(shí)間質(zhì)譜；離子阱多級(jí)質(zhì)譜

骨通貼膏由丁公藤、麻黃、當(dāng)歸、干姜、白芷、海風(fēng)藤、乳香、三七、姜黃、辣椒、樟腦、肉桂油、金不換、薄荷腦等多味藥材制備而成，輔料為橡膠、氧化鋅、松香、羊毛脂、黃凡士林、月桂氮酮，具有祛風(fēng)散寒、活血通絡(luò)、消腫止痛的功效?，F(xiàn)行的骨通貼膏質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)收載于國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn) WS3-120 （Z-024） -2000（Z） -2010［1］，在 【鑒別】項(xiàng)下僅以東莨菪內(nèi)酯、延胡索乙素、樟腦、薄荷腦及肉桂醛等對(duì)照品及當(dāng)歸對(duì)照藥材等為指標(biāo)進(jìn)行薄層色譜或氣相色譜鑒別，在 【含量測(cè)定】 項(xiàng)下利用薄層掃描法測(cè)定麻黃中鹽酸麻黃堿的量，檢測(cè)指標(biāo)較少，且存在分析方法落后，操作復(fù)雜，檢測(cè)靈敏度低等缺陷，難以全面表征骨通貼膏全面質(zhì)量。

中藥指紋圖譜具有整體宏觀和半定量分析等特點(diǎn)，是目前能夠?yàn)閲?guó)內(nèi)外廣泛接受的一種中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)技術(shù)［2］， 它克服了僅僅依賴一種或幾種指標(biāo)成分的物理化學(xué)性質(zhì)鑒別中藥質(zhì)量的局限性，從整體層面全面、 準(zhǔn)確地體現(xiàn)中藥質(zhì)量［3］。 液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù) （LC-MS） 在中藥復(fù)雜體系化學(xué)成分快速分離和鑒定方面已得到廣泛應(yīng)用。其中，液相色譜用于分離復(fù)雜成分，多種質(zhì)譜聯(lián)合檢測(cè)用于化學(xué)成分鑒定。 飛行時(shí)間質(zhì)譜 （TOF/MS） 與離子阱質(zhì)譜 （Ion-trap/MSn） 聯(lián)合應(yīng)用是復(fù)雜樣品成分鑒定的有效方法， TOF/MS 提供精確質(zhì)量數(shù)， Iontrap/MSn可提供化合物的碎片信息用于結(jié)構(gòu)解析，在中藥缺少對(duì)照品的情況下，能較準(zhǔn)確地獲得復(fù)方中的化學(xué)成分信息［3-7］。

本實(shí)驗(yàn)采用 HPLC法建立了骨通貼膏的指紋圖譜，經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證，該方法具良好的重復(fù)性，符合指紋圖譜測(cè)定要求，運(yùn)用國(guó)家藥典委員會(huì)研發(fā)的相似度計(jì)算軟件， 對(duì) 10 批次的骨通貼膏指紋圖譜進(jìn)行了相似度評(píng)價(jià)， 結(jié)果相似度良好； 并通過(guò) HPLCTOF/MS 及 HPLC-ion-trap/MSn聯(lián)用技術(shù)對(duì)骨通貼膏中主要化學(xué)成分進(jìn)行分析鑒定，為骨通貼膏的全面質(zhì)量控制提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 SHIMADZU LC-2010A 色譜儀， 配有二元梯度 泵 LC-20AT， 二極 管 陣 列檢測(cè)器 SPDM20A， LC solution 色譜工 作站 （ SHIMADZU， Japan） ； Agilent 1200 LC/MSD TOF高效液相色譜-飛行時(shí)間質(zhì)譜連用儀， 配有二元梯度泵 G1312A， 二極管陣列檢測(cè)器 G1315D， 電噴霧離子源 （ESI）（Agilent， USA）；Agilent 1100 series LC/MSD Trap高效液相色譜-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用儀， 配有二元梯度泵 G1312A， 二極管陣列檢測(cè)器 G1328A， 電噴霧離子源 （Agilent，USA）；SHB-Ⅲ循環(huán)水式多用真空泵 （鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司）； DLSB-10L/10低溫冷卻液循環(huán)泵及 HH-S 型水浴鍋 （鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）； RQ-250B型超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）； Milli-Q Synthesis超純水純 化系 統(tǒng) （ Millipore， USA）， 0.45 μm 濾 膜（天津津騰實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）。

1.2 試劑與樣品 Z-藁本內(nèi)酯對(duì)照品 （四川維克奇生物科技有限公司， 純度≥98%）； 洋川芎內(nèi)酯I、 洋川芎內(nèi)酯 H對(duì)照品 （鼎瑞化工有限公司， 純度≥98%）。 甲酸、 無(wú)水乙醇、 三氯甲烷 （分析純， 北京化工廠）； 乙腈 （色譜純， Merck KGaA）；Milli-Q超純水 （自制）。 骨通貼膏共計(jì) 10 批 （批號(hào)分別為 20090449，20091006， 20090903，20090913，20090818， 20090933， 20090944， 20090707， 20090508，20090327）， 均由桂林天和藥業(yè)股份有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件 AlltimaTMC18色譜 柱 （4.6 mm× 250 mm， 5 μm）； 流動(dòng)相 A為 0.1%甲酸水溶液，流動(dòng) 相 B為 乙 腈， 梯 度 洗 脫； 體 積 流 量 1.0 mL/min；柱 溫 25 ℃； 檢 測(cè) 波 長(zhǎng) 280 nm。進(jìn) 樣量 5 μL。

2.2 質(zhì)譜條件

2.2.1 飛行時(shí)間質(zhì)譜 電噴霧離子源 （ESI）； 采用正、負(fù)兩種離子模式采集數(shù)據(jù)；質(zhì)量掃描范圍為50 ～2 200 m/z； 干燥氣體積流量為 10 L/min； 干燥氣溫度為 350 ℃； 霧化氣壓為 35 psi（1psi= 6.895kPa）； 毛細(xì)管電壓在正模式下為4 000 V， 負(fù)模式下為 3 500 V； 碎裂電壓 175 V； Skimmer電壓60 V； 八級(jí)桿 DC1 電壓 -38.0 V；八級(jí)桿射頻電壓250 V； 采用分流比設(shè)置， 分流比為 1 ∶4； 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 Analyst QS 軟件處理。 測(cè)定樣品之前， 使用校正液校準(zhǔn)質(zhì)量軸，以保證質(zhì)量精度誤差小于5 ppm； 元素組成計(jì)算參數(shù)設(shè)定如下： C≤60，H≤100， O≤30， N≤2， 環(huán)加雙鍵數(shù)0 ～30； 容許質(zhì)量范圍100 ppm。

2.2.2 離子阱質(zhì)譜 電噴霧離子源 （ESI）； 采用正、負(fù)兩種離子模式采集數(shù)據(jù)；自動(dòng)二級(jí)碎片分析； 質(zhì)量掃描范圍為 50 ～2 200 m/z； 干燥氣體積流量為 10 L/min； 干燥氣溫度為 350 ℃； 霧化氣壓為 35 psi； 毛細(xì)管電壓在正模式下為 4 000 V， 負(fù)模式下為3 500 V； 碎裂電壓為 1.0 V； ICC目標(biāo)參數(shù)為30 000， 累積時(shí)間為 200 ms； 采用分流比設(shè)置，分流比為 1 ∶4； 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用 Agilent化學(xué)工作站Rev.A.09.01 軟件處理。

2.3 對(duì)照品溶液的制備 精密稱取 5.0 mg Z-藁本內(nèi)酯對(duì)照品于10 mL量瓶中， 用無(wú)水乙醇溶解并定容配成質(zhì)量濃度為 0.5 mg/mL的 Z-藁本內(nèi)酯對(duì)照品溶液。

2.4 供試品溶液的制備 取本品 2 片， 除去蓋襯，剪成小塊， 置 250 mL具塞錐形瓶中， 加三氯甲烷50 mL， 超聲溶脫 30 min， 加無(wú)水乙醇 100 mL， 搖勻，放置使溶液澄清，濾過(guò)，減壓蒸干濾液，殘?jiān)脽o(wú)水乙醇溶解，轉(zhuǎn)移至5 mL量瓶中，加無(wú)水乙醇至刻度， 搖勻， 經(jīng) 0.45 μm微孔濾膜過(guò)濾， 作為供試品溶液。

2.5 測(cè)定方法 分別精密量取對(duì)照品溶液及供試品溶液5 μL進(jìn)樣， 以 Z-藁本內(nèi)酯的色譜峰為參照峰，其余共有峰的保留時(shí)間和峰面積與之比值分別為相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積。

2.6 精密度試驗(yàn) 取同一批號(hào) （批號(hào) 20090449）的供試品溶液， 按 “2.1” 項(xiàng)色譜條件連續(xù)進(jìn)樣測(cè)定6次，記錄色譜圖，考察各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的一致性。結(jié)果表明，色譜圖中各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的 RSD為 0.04% ～0.57%，相對(duì)峰面積的 RSD為 1.83% ～4.80%，表明本儀器精密度良好。

2.7 重復(fù)性試驗(yàn) 取同一批號(hào) （批號(hào) 20090449）骨通貼膏， 重復(fù)制備 6 份供試品溶液，按 “2.1”項(xiàng)色譜條件進(jìn)樣測(cè)定6次，記錄色譜圖，考察各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的一致性。結(jié)果表明， 色譜圖中各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的 RSD為0.04% ～0.97%，相對(duì)峰面積的 RSD為 1.25% ～4.59%， 表明重復(fù)性良好。

2.8 穩(wěn)定性試驗(yàn) 取同一批號(hào) （批號(hào) 20090449）的供試品溶液， 按 “2.1” 項(xiàng)色譜條件分別在 0、2、 4、8、 12、24 h 進(jìn)樣測(cè)定，記錄色譜圖， 考察各色譜峰的相對(duì)保留時(shí)間和相對(duì)峰面積的一致性。結(jié)果表明，色譜圖中各共有峰相對(duì)保留時(shí)間的RSD為 0.04% ～0.62%， 相對(duì)峰面積的 RSD為1.82% ～4.66%，表明供試品溶液在常溫條件下可在24 h內(nèi)保持穩(wěn)定。

2.9 對(duì)照指紋圖譜的生成及 10 批骨通貼膏指紋圖譜相似度評(píng)價(jià) 利用上述指紋圖譜測(cè)定方法，對(duì)10 批骨通貼膏進(jìn)行指紋圖譜檢測(cè)，標(biāo)定了 19 個(gè)共有峰， 見(jiàn)圖 1、圖 2。 利用國(guó)家藥典委員會(huì) 《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng) 2004A版》 對(duì) 10 批骨通貼膏指紋圖譜進(jìn)行匹配， 以批號(hào) 20090449 色譜圖為參照?qǐng)D譜， 設(shè)置時(shí)間窗為 0.1，采用中位數(shù)法生成骨通貼膏對(duì)照指紋圖譜 （見(jiàn)圖 1）。 計(jì)算 10批樣品指紋圖譜與對(duì)照指紋圖譜的相似度，結(jié)果見(jiàn)表 1。 結(jié)果表明 10 批骨通貼膏指紋圖譜相似度均大于 0.990， 相似度良好， 說(shuō)明 10 批骨通貼膏質(zhì)量穩(wěn)定。

2.10 骨通貼膏化學(xué)成分分析 利用 HPLC-TOF/ MS 及 HPLC-ion-trap/MSn對(duì)骨通貼膏供試品溶液進(jìn)行正、負(fù)離子掃描，兩種模式下的總離子流圖（見(jiàn)圖3） 顯示各化學(xué)組分在不同掃描模式下響應(yīng)強(qiáng)度不一，因此對(duì)正離子和負(fù)離子兩種模式進(jìn)行采集，使獲得的化合物信息互補(bǔ)。根據(jù)文獻(xiàn)建立組方藥材的化學(xué)成分信息庫(kù)［8-13］， 利用 TOF/MS 獲得的精確相對(duì)分子質(zhì)量信息及 Ion-trap/MSn獲得的多級(jí)碎片信息與庫(kù)中成分進(jìn)行比對(duì)，鑒定骨通貼膏化學(xué)成分，同時(shí)對(duì)色譜峰進(jìn)行藥材歸屬。通過(guò)以上方法， 本實(shí)驗(yàn)解析了骨通貼膏色譜圖中 21個(gè)化學(xué)成分，分別歸屬于丁公藤、麻黃、當(dāng)歸、白芷、金不換、 海風(fēng)藤、三七、 干姜、姜黃、 辣椒10味藥材，結(jié)果見(jiàn)圖3及表2。

圖1 骨通貼膏對(duì)照指紋圖譜Fig.1 Reference fingerp rint of Gutong Plsater

圖 2 10 批骨通貼膏指紋圖譜Fig.2 Fingerprints of 10 batches of Gutong Plsater

表 1 10 批骨通貼膏 HPLC指紋圖譜相似度Tab.1 Sim ilarities of fingerprint for 10 batches of Gutong Plsater

圖 3 骨通貼膏 TOF/MS總離子流圖 （TIC） 及 HPLC色譜圖Fig.3 TOF/M S total ion ch romatogram s（ TIC） and HPLC chromatogram of Gutong Plsater

3 討論

3.1 在供試品制備方法的考察中，本研究分別對(duì)不同提取溶劑 （乙醇、 甲醇、 丙酮）， 不同提取方法 （超聲、 熱回流）和不同提取時(shí)間 （15 min、30 min、45 min、60 min） 進(jìn)行了考察，并參照中藥指紋圖譜信息 “最大化” 原則，確定了供試品溶液的制備方法。

3.2 在色譜分析中， 流動(dòng)相體系對(duì)色譜分離影響較大。 本實(shí)驗(yàn)分析測(cè)試了水-乙腈、 0.1%甲酸水-乙腈、 0.1%磷酸水-乙腈體系下骨通貼膏色譜圖，通過(guò)比較發(fā)現(xiàn)流動(dòng)相中加入一定比例的酸，可有效改善色譜峰分離效果及峰型， 0.1%甲酸水-乙腈、0.1%乙酸水-乙腈體系得到的指紋圖譜整體峰形優(yōu)于0.1%磷酸水-乙腈體系， 考慮到添加劑對(duì)質(zhì)譜解析的影響， 最終選擇了 0.1%甲酸水-乙腈流動(dòng)相體系。柱溫和體積流量是影響色譜行為的重要參數(shù)，骨通貼膏色譜圖中色譜峰較多，柱溫或體積流量的改變會(huì)影響色譜峰的保留值，進(jìn)而影響分離效果。本實(shí)驗(yàn)比較了 25 ℃、 30 ℃、 35 ℃柱溫下色譜圖，選擇分離效果最優(yōu)的 25 ℃作為檢測(cè)柱溫， 當(dāng)溫度升高時(shí)， 部分區(qū)域的色譜峰 （例如 22、 23 號(hào)峰）分離度下降，甚至重疊，說(shuō)明本方法對(duì)溫度敏感，在試 驗(yàn) 時(shí) 應(yīng) 控 制 柱 溫 為 25 ℃。 對(duì) 0.8 mL/min、1.0 mL/min、1.2 mL/min 體積流量下色譜圖進(jìn)行比較， 選 取 分 離 效 果 及 色 譜 峰 型 較 好 的 1.0 mL/min為最佳體積流量，當(dāng)體積流量升高時(shí)， 27、28、 29 號(hào)峰產(chǎn)生重疊， 體積流量降低時(shí)， 22、 23號(hào)峰分離度下降，說(shuō)明本方法對(duì)體積流量敏感，在試驗(yàn)時(shí)應(yīng)控制體積流量為 1.0 mL/min。

3.3 骨通貼膏由丁公藤、麻黃、 當(dāng)歸等十余種藥材提取制備而成，所含成分類型復(fù)雜，色譜響應(yīng)行為千差萬(wàn)別。因此，用于其綜合質(zhì)量控制的指紋圖譜檢測(cè)波長(zhǎng)的選擇就顯得尤為重要。 利用 HPLC/ DAD對(duì)骨通貼膏樣品進(jìn)行紫外全波長(zhǎng)掃描， 色譜峰整體在 190 ～350 nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)吸收較強(qiáng)， 280 nm下色譜峰數(shù)最多， 且均有較好吸收， 可最大化地反應(yīng)指紋圖譜有效信息， 故選擇 280 nm為骨通貼膏綜合質(zhì)量控制的指紋圖譜檢測(cè)波長(zhǎng)。皂苷及麻黃堿類成分僅在低波長(zhǎng)有吸收，因此選擇 203 nm、280 nm兩個(gè)波長(zhǎng)進(jìn)行全方化學(xué)成分研究。

表2 骨通貼膏化學(xué)成分的鑒定Tab.2 Identification of com pounds in Gutong Plsater

3.4 在質(zhì)譜分析中， 19 號(hào)與 23 號(hào)峰均得到 m/z 271 的分子離子峰， 與成分信息庫(kù)對(duì)比推測(cè)兩者為歐前胡素或異歐前胡素。 23號(hào)峰二級(jí)質(zhì)譜信息得到 m/z203 的碎片峰， 根據(jù)文獻(xiàn) ［14］， m/z 203［202+H］+是呋喃香豆素骨架與質(zhì)子的耦合離子，為異歐前胡素特征碎片峰，且 19 號(hào)與 23 號(hào)峰的色譜行為符 合 文 獻(xiàn)［14-15］中 歐 前 胡 素與 異 歐 前胡 素 的色譜行為， 因此判斷 19 號(hào)峰為歐前胡素， 23 號(hào)峰為異歐前胡素。7號(hào)與8號(hào)峰的精確分子量與多級(jí)碎片信息相同，推測(cè)其為一對(duì)同分異構(gòu)體，通過(guò)對(duì)照品比對(duì)， 確定 7 號(hào)峰為洋川芎內(nèi)酯 I， 8 號(hào)峰為洋川芎內(nèi)酯H。

3.5 本實(shí)驗(yàn)建立的骨通貼膏指紋圖譜可較全面地反映骨通貼膏的內(nèi)在質(zhì)量，相似度分析可用于骨通貼膏的真?zhèn)舞b別及質(zhì)量控制。 采用 HPLC-TOF/MS及 HPLC-ion-trap/MSn聯(lián)用技術(shù)對(duì)骨通貼膏中的化學(xué)成分進(jìn)行了快速鑒別， 檢測(cè)鑒定了 21個(gè)分別源于丁公藤、麻黃、當(dāng)歸、白芷、金不換、海風(fēng)藤、三七、 干姜、 姜黃、 辣椒 10味藥材的特征成分，基本闡明了該復(fù)方制劑的化學(xué)組成，為多指標(biāo)成分同時(shí)定量測(cè)定分析提供了理論依據(jù)，從而為骨通貼膏的全面質(zhì)量控制奠定科學(xué)基礎(chǔ)。

［ 1 ］ WS3-120 （ Z-024） -2000 （ Z） -2010， 國(guó) 家 食 品 藥 品 監(jiān) 督管理局國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)［S］.

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HPLC fingerprint and chem ical constituents of Gutong Plaster

XIA Jing1， XIE Yuan-yuan2*， ZHANG Zong-xuan3， ZHANG Yan-hui4， WANG Yi-ming1，2，LIANG Qiong-lin2， LUO Guo-an1，2*
（1.JiangxiUniversity of Traditional Chinese Medicine， Nanchang 330004， China； 2.Chemistry Department of Tsinghua University， Beijing 100084，China； 3.China Pharmaceutical University， Nanjing 210009， China； 4.Guilin Tianhe Pharmaceutical Co.， Ltd.Guilin 541001， China）

Gutong Plaster； fingerprint； HPLC； time-of-flightmass spectrometer； ion trap tandem mass spectrometer

R284.1

： A

： 1001-1528（2014）03-0571-06

10.3969/j.issn.1001-1528.2014.03.027

2013-05-09

國(guó)家 “ 重大新藥創(chuàng)制” 科技重大專項(xiàng) （2011ZX09201-201-07， 2011ZX09201-201-23）

夏 菁 （1987—） ， 女， 碩士生， 研究方向： 中藥質(zhì)量控制。 Tel：（010） 62772265， E-mail： xiahuaz@126.com

*通信作者： 羅國(guó)安 （1946—） ， 男， 教授， 研究方向： 中藥質(zhì)量控制。 Tel：（010） 62781688， E-mail： luoga@mail.tsinghua.edu.cn謝媛媛 （ 1980—）， 女 （ 滿 ） ， 博 士， 助 理 研 究 員， 研 究 方 向： 中 藥 質(zhì) 量 控 制。 Tel： （ 010 ） 62794103， E-mail：yuanyuan8078@gmail.com

ABSTRACT： AIM To establish a fingerprintmethod for analyzing Gutong Plaster（ Erycibes Caulis， Ephedrae Herba， Angelicae sinensis Radix， Zingiberis Rhizoma， etc） by HPLC and a combinative LC/MS method for the identification ofmulti-components in Gutong Plaster.METHODS An HPLC in combination with PDA detector was applied on AlltimaTMC18（4.6 mm×250 mm， 5 μm） column in gradientelutionmanner using acetonitrile-0.1%formic acid solution as themobile phase.The flow rate was1 mL/min and the detection wavelength was set at280 nm.A combination of time-of-flightmass spectrometer（ TOF-MS） and ion trap tandem mass spectrometer（Trap-MSn）was used for qualitative analysis under positive and negative ion modes.RESULTS HPLC fingerprintof Gutong Plaster was established choosing Z-Ligustilide peak as the reference peak and nineteen common peaks（21 chemical constituents） were obtained from standard fingerprint chromatograms of ten batches with similarity no lower than 0.990.CONCLUSION The HPLC method with good precision and reproducibility can be used for the quality control of Guton Plaster.