程 雪，董曉琳，嚴(yán) 琴，查安生

（1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)2011級(jí)碩士研究生，安徽 合肥 230038；2.安徽省中醫(yī)院消化內(nèi)科，安徽 合肥 230031）

中藥治療潰瘍性結(jié)腸炎實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展

程 雪1，董曉琳1，嚴(yán) 琴1，查安生2

（1.安徽中醫(yī)藥大學(xué)2011級(jí)碩士研究生，安徽 合肥 230038；2.安徽省中醫(yī)院消化內(nèi)科，安徽 合肥 230031）

潰瘍性結(jié)腸炎（Ulcerative colitis，UC）是一種腸道慢性非特異性炎癥性疾病，主要侵及腸道黏膜和黏膜下層，多累及直腸和乙狀結(jié)腸，病變呈連續(xù)性彌漫性分布，臨床表現(xiàn)主要為腹痛、腹瀉、黏液膿血便以及里急后重，以結(jié)腸黏膜性炎癥和潰瘍形成為主要病理特點(diǎn)。

UC的病因及發(fā)病機(jī)制尚未完全明確，目前認(rèn)為UC的發(fā)病主要涉及免疫調(diào)節(jié)紊亂、遺傳易感性、感染、環(huán)境及腸黏膜屏障受損等因素。UC治療手段有限，目前西藥主要為氨基水楊酸類藥物、糖皮質(zhì)激素類藥物、免疫抑制劑和生物制劑等，但復(fù)發(fā)率高、副作用大，療效并不理想。近年來，中藥治療UC取得了很大進(jìn)展，現(xiàn)就中藥治療UC的實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)展概述如下。

1 影響免疫功能

UC發(fā)病與免疫功能紊亂有密切的關(guān)系。張紈等［1］采用2，4，6-三硝基苯磺酸（TNBS）/乙醇法建立潰瘍性結(jié)腸炎（UC）大鼠模型，觀察蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方（佩蘭、茵陳、鳳尾草、飛揚(yáng)草等）對(duì)模型大鼠C/C細(xì)胞亞群表達(dá)的影響，結(jié)果中藥大劑量組外周血中C/CT細(xì)胞亞群數(shù)量低于模型組和SPAP組。證實(shí)蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)TNBS/乙醇法的實(shí)驗(yàn)性UC大鼠有良好的治療作用，可能是通過抑制C/CT細(xì)胞亞群表達(dá)起到調(diào)節(jié)免疫的作用。劉喜平等［2］實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)參苓白術(shù)散可顯著降低脾虛證模型大鼠的CD44、CD62p表達(dá)，表明參苓白術(shù)散的作用機(jī)理可能與恢復(fù)機(jī)體的免疫功能，下調(diào)CD44、CD62p的表達(dá)，抑制局部炎性介質(zhì)、化學(xué)趨化物及炎性細(xì)胞的釋放，降低腸黏膜炎性反應(yīng)有關(guān)。劉先知等［3］用二硝基氯苯-乙酸復(fù)合法制作潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型，給予清胃理腸膠囊（枳實(shí)、梔子、白及等）治療后，結(jié)果外周血C、C百分率提升，C/C水平降低，因此推斷清胃理腸膠囊主要通過調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能實(shí)現(xiàn)對(duì)UC的治療作用。

2 影響細(xì)胞因子

促炎細(xì)胞因子與抗炎細(xì)胞因子之間的平衡失調(diào)一直以來被視為UC的一個(gè)重要的發(fā)病機(jī)制。何本求等［4］采用ELISA法檢測發(fā)現(xiàn)侗藥五味止瀉湯（登虐辰、尚圣篾、奴域等）能有效提高UC大鼠血清IL-10含量，降低IL-6含量，并對(duì)損傷的大腸黏膜有明顯的修復(fù)作用。說明侗藥五味止瀉湯抑制促炎細(xì)胞因子IL-6并促進(jìn)抗炎細(xì)胞因子IL-10生成，是治療UC的作用機(jī)理之一。柳越冬等［5］用TNBS/乙醇法建立UC大鼠模型，經(jīng)優(yōu)化潰結(jié)方（黃芪、炒白術(shù)、蒼術(shù)等）灌腸治療后，發(fā)現(xiàn)治療組的EGF含量明顯高于模型組，從而表明優(yōu)化潰結(jié)方對(duì)UC大鼠模型通過上調(diào)結(jié)腸組織EGF的含量，提高了機(jī)體細(xì)胞的增殖化分能力和組織生長修復(fù)及保護(hù)腸黏膜等能力，促進(jìn)潰瘍愈合。鄒穎等［6］觀察到黃芩湯（黃芩、芍藥、大棗等）能夠降低UC模型大鼠血清及結(jié)腸組織Th1細(xì)胞因子INF-γ和IL-12并提高Th2細(xì)胞因子IL-4和IL-10的表達(dá)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示黃芩湯可以改善濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎的炎癥反應(yīng)，調(diào)節(jié)Th1/Th2細(xì)胞的平衡，從而達(dá)到治療效應(yīng)。趙黨生等［7］通過葡聚糖硫酸鈉（DSS）致小鼠潰瘍性結(jié)腸炎，觀察到參白合劑能顯著升高IL-10含量，而降低TNF-α含量。其作用機(jī)制可能與其抑制促炎因子分泌，促進(jìn)抗炎因子分泌，調(diào)節(jié)免疫反應(yīng)，減少炎性介質(zhì)的釋放，控制腸道炎癥反應(yīng)有關(guān)。汪斌等［8］給予UC模型大鼠芍藥苷治療后，發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)大鼠血清IL-2、IL-6含量均明顯降低，而IL-10含量顯著升高。從而推測芍藥苷可能是通過抑制促炎因子IL-2、IL-6的表達(dá)，提高抗炎因子IL-10的含量，進(jìn)而調(diào)節(jié)腸道異常免疫反應(yīng)、抑制炎癥反應(yīng)，發(fā)揮治療效應(yīng)。陳宇等［9］通過實(shí)驗(yàn)研究，觀察到健脾解毒化瘀方可明顯改善以TNBS造成的大鼠UC模型的臨床及病理變化，減輕腹腔粘連及炎癥反應(yīng)，減少組織學(xué)損傷，調(diào)節(jié)細(xì)胞因子的平衡，進(jìn)而調(diào)節(jié)免疫炎癥反應(yīng)。

3 調(diào)控基因表達(dá)

孫陽等［10］采用2，4-二硝基氯苯（DNCB）加丙酮局部灌腸法建立UC大鼠模型，用免疫印跡法檢測結(jié)腸黏膜組織中TLR4、NF-κBp65蛋白的表達(dá)水平，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)烏梅丸（烏梅、細(xì)辛、干姜等）組TLR4和NF-κBp65蛋白表達(dá)均低于模型對(duì)照組，提示烏梅丸通過抑制TLR4的表達(dá)而降低NF-κBp65的活性免疫調(diào)節(jié)，這可能為烏梅丸治療UC的作用機(jī)制之一。朱向東等［11］通過研究痛瀉要方（炒陳皮、炒白術(shù)、炒白芍等）對(duì)TNBS/乙醇灌腸法誘導(dǎo)的UC大鼠模型結(jié)腸黏膜PPAR-γ蛋白和基因表達(dá)的影響發(fā)現(xiàn)，痛瀉要方能使其表達(dá)量上調(diào)，從而達(dá)到治療UC的效果，提示其深層機(jī)制可能與PPAR-γ/NF-κB信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑被激活有關(guān)。劉陽等［12］研究發(fā)現(xiàn)通過中藥復(fù)方改良愈瘍湯（白頭翁、穿山龍、敗醬草等）灌腸后ICAM-1的表達(dá)降低，其治療UC的作用機(jī)理可能是通過下調(diào)ICAM-1表達(dá)而抑制炎性細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞的粘附，減少細(xì)胞滲出，從而減輕腸道的炎癥反應(yīng)。陳文剛等［13］用泄?jié)峤舛痉剑~腥草、敗醬草、紅藤等）治療TNBS法灌腸復(fù)制的UC大鼠模型發(fā)現(xiàn)，治療組TLR4/NF-κB的表達(dá)均明顯低于模型組，說明泄?jié)峤舛痉街委烾C可能是通過降低TLR4 mRNA轉(zhuǎn)錄水平使TLR4蛋白的合成、表達(dá)減少，阻斷TLR4及NF-κB信號(hào)通路的轉(zhuǎn)導(dǎo)，減少促炎因子釋放，抑制免疫系統(tǒng)的過度激活，糾正結(jié)腸異常的免疫炎癥反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)的。王浩等［14］采用免疫誘導(dǎo)法復(fù)制UC大鼠模型，給予葛根芩連湯治療，結(jié)果顯示治療組血清Bcl-2、TGF-β1相較模型組明顯升高。表明葛根芩連湯的干預(yù)，可對(duì)抗細(xì)胞凋亡因子的作用趨勢，減緩細(xì)胞凋亡速率，從而起到保護(hù)結(jié)腸黏膜的作用。程曉磊等［15］實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)復(fù)方青黛顆粒通過降低結(jié)腸組織中TLR2、TLR4的表達(dá)，減少TLRs/NF-JB通路的激活，進(jìn)而調(diào)控炎癥遞質(zhì)的釋放，減弱對(duì)腸道黏膜的損害來治療UC模型大鼠。

4 抗氧化

通常機(jī)體在生理狀態(tài)下?lián)碛幸惶淄暾目寡趸烙到y(tǒng)，但是當(dāng)抗氧化系統(tǒng)消弱或氧自由基形成過量，氧自由基可以引起機(jī)體的一系列損傷［16］。陶弘武等［17］實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，潰結(jié)安康湯可以通過增加UC大鼠模型中結(jié)腸黏膜組織SOD活性、降低結(jié)腸黏膜組織MDA含量清除氧自由基，抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，減輕結(jié)腸組織黏膜組織損傷，發(fā)揮治療UC的功效。蔣世生等［18］用乙酸灌腸造模復(fù)制UC活動(dòng)期的大鼠模型進(jìn)行研究，芪連結(jié)腸寧片（黃芪、白術(shù)、黃連等）組大鼠組織損傷程度較模型對(duì)照組明顯緩解，芪連結(jié)腸寧片灌胃用藥能降低結(jié)腸炎模型大鼠代謝產(chǎn)生的脂質(zhì)過氧化物MDA含量，表現(xiàn)出抗氧化特性，從而抑制結(jié)腸組織中的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，對(duì)結(jié)腸具有一定的抗損傷及保護(hù)作用。

5 調(diào)節(jié)一氧化氮

一氧化氮（NO）是結(jié)腸平滑肌的抑制性調(diào)節(jié)介質(zhì)，能調(diào)節(jié)胃腸黏膜血流、胃腸道分泌和運(yùn)動(dòng)，并參與胃腸黏膜屏障修復(fù)及對(duì)抗炎癥過程［19］。劉青梅等［20］采用硝酸還原法檢測UC模型大鼠NO水平及NOS活性，提示腸康顆粒（干姜、白術(shù)、桂枝等）灌腸能有效降低NOS活性及NO水平，腸康顆?？赡苤饕ㄟ^抑制NOS表達(dá)減少NO生成，從而減輕NO引起的損傷。

6 修復(fù)腸黏膜

潰瘍性結(jié)腸炎作為腸黏膜損傷性疾病，其發(fā)病和黏膜修復(fù)過程都與腸上皮屏障功能有關(guān)。劉智群等［21］采用TNBS法誘導(dǎo)UC大鼠模型，結(jié)果顯示清腸化濕方（黃連、黃芩、白頭翁等）組結(jié)腸黏膜occludin、claudin-1的表達(dá)高于模型組?？芍兴幥迥c化濕方可能通過增強(qiáng)UC大鼠結(jié)腸occludin、claudin-1的表達(dá)，修復(fù)腸黏膜緊密連接，進(jìn)而恢復(fù)腸屏障功能，這可能是清腸化濕方治療UC的作用機(jī)制之一。李云海［22］采用TNBS局部灌腸加高脂高糖法建立UC大鼠模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，觀察到與模型組相比，加味白頭翁湯方組可使結(jié)腸黏膜組織損傷和病理組織學(xué)評(píng)分顯著降低，說明加味白頭翁湯方可通過減輕結(jié)腸炎癥，促進(jìn)結(jié)腸黏膜修復(fù)，從而起到治療UC的作用。劉杰民等［23］實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)，健脾益腸散（黃芪、太子參、焦白術(shù)等）高劑量組DAI評(píng)分和CMDI，以及中劑量組DAI評(píng)分均較模型組明顯降低。說明健脾益腸散能有效緩解UC模型大鼠癥狀，改善結(jié)腸組織學(xué)損傷，促進(jìn)結(jié)腸黏膜修復(fù)，治療UC。盧璐等［24］觀察復(fù)方中藥清腸栓（馬齒莧、三七、青黛等）對(duì)UC模型大鼠結(jié)腸黏膜纖絲狀肌動(dòng)蛋白的修復(fù)作用，實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)清腸栓能不同程度減輕UC對(duì)細(xì)胞骨架的破壞，改善F-actin蛋白的分布并使其表達(dá)升高。表明清腸栓能有效地調(diào)節(jié)腸黏膜屏障功能，抑制大鼠結(jié)腸通透性的升高，改善腸黏膜屏障功能，促進(jìn)潰瘍愈合。

7 小 結(jié)

中藥治療UC的實(shí)驗(yàn)機(jī)制研究主要集中在調(diào)節(jié)免疫、影響細(xì)胞因子、調(diào)控基因表達(dá)、抗炎抗氧化、調(diào)節(jié)NO和修復(fù)腸黏膜這些方面，但中藥對(duì)UC作用機(jī)理的實(shí)驗(yàn)研究仍存在不足之處。比如目前大部分實(shí)驗(yàn)多從整個(gè)方劑角度研究中藥的作用機(jī)制，而對(duì)中藥單體的研究較少，明確是何種藥物的何種成分作用于何種靶點(diǎn)發(fā)揮療效尚不十分明確，且與現(xiàn)代生命科學(xué)關(guān)于UC的病理研究進(jìn)展尚存在一定的差距。因此，應(yīng)深入研究，揭示中藥作用較確切的作用靶點(diǎn)，以提高中藥治療UC的效果。

［1］張紈，王志坤，董林林，等.蘭茵鳳揚(yáng)化濁解毒方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠免疫調(diào)控機(jī)制的影響［J］.中國實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2013，19（1）：236-239.

［2］劉喜平，賈育新，劉勍，等.參苓白術(shù)散對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎脾虛型模型大鼠CD44、CD54及CD62p的影響［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2011，22（11）：2671-2673.

［3］劉先知，王長海，劉華劍，等.清胃理腸膠囊對(duì)實(shí)驗(yàn)性大鼠潰瘍性結(jié)腸炎作用機(jī)制的研究［J］.中國中醫(yī)急癥，2011，20（2）：262-263.

［4］何本求，賴象權(quán)，肖成，等.侗藥五味止瀉湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠血清IL-6、IL-10的影響［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2012，23（11）：2801-2802.

［5］柳越冬，陶弘武，王長洪.優(yōu)化潰結(jié)方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠模型結(jié)腸組織表皮生長因子影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2012，39（2）：240-242.

［6］鄒穎，遲宏罡，戴世學(xué)，等.黃芩湯對(duì)濕熱型潰瘍性結(jié)腸炎大鼠Th1/Th2細(xì)胞因子的影響［J］.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2011，22（11）：2608-2611.

［7］趙黨生，晉梅，李琳，等.參白合劑對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型小鼠療效及對(duì)IL-10和TNF-α表達(dá)的影響［J］.中醫(yī)研究，2012，25（3）：64-66.

［8］汪斌，朱向東，段永強(qiáng)，等.芍藥苷對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織病理形態(tài)及血清抗炎和促炎因子平衡的影響［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2013，21（1）：1-4.

［9］陳宇，林一帆，王長洪，等.健脾解毒化瘀方對(duì)大鼠實(shí)驗(yàn)性潰瘍性結(jié)腸炎細(xì)胞因子的影響［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2012，20（5）：206-209.

［10］孫陽，張欣，李宇華，等.烏梅丸對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的治療作用及其機(jī)制［J］.華南國防醫(yī)學(xué)雜志，2013，27（1）：5-8.

［11］朱向東，梅曉云，王燕，等.痛瀉要方對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜PPAR-γ基因和蛋白表達(dá)的影響［J］.中華中醫(yī)藥雜志，2013，28（4）：941-945.

［12］劉陽，趙艷君，朱葉珊.改良愈瘍湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠ICAM-1表達(dá)的影響［J］.四川中醫(yī)，2012，30（5）：31-32.

［13］陳文剛，陳建權(quán)，劉建平，等.泄?jié)峤舛痉綄?duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠Toll樣受體4/核因子-κB信號(hào)通路的影響［J］.江蘇中醫(yī)藥，2012，44（2）：67-68.

［14］王浩，徐明，王思程.葛根芩連湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠血清Bcl-2、TGF-β1的影響［J］.四川中醫(yī)，2011，29（11）：12-14.

［15］程曉磊，杜立陽，劉清芳，等.復(fù)方青黛顆粒對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠結(jié)腸toll樣受體2，4基因表達(dá)的影響［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2011，19（1）：14-17.

［16］朱炳喜，呂愈敏.氧自由基在潰瘍性結(jié)腸炎發(fā)病機(jī)制中的研究［J］.中華消化內(nèi)鏡雜志，1997，14（2）：111-112.

［17］陶弘武，柳越冬.潰結(jié)安康湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸組織氧自由基影響的實(shí)驗(yàn)研究［J］.中華中醫(yī)藥學(xué)刊，2011，29（8）：1834-1835.

［18］蔣世生，李勇敏，朱克儉，等.芪連結(jié)腸寧片對(duì)損傷性潰瘍性結(jié)腸炎模型大鼠的影響［J］.新中醫(yī)，2011，43（10）：117-118.

［19］麥海妍.潰瘍性結(jié)腸炎血清一氧化氮濃度變化的觀察［J］.中國肛腸病雜志，2001，21（7）：8.

［20］劉青梅，韓輔.腸康顆粒對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠NO水平及NOS活力的影響［J］.中國老年學(xué)雜志，2012，32（10）：2113-2114.

［21］劉智群，沈洪，朱萱萱，等.清腸化濕方對(duì)TNBS誘導(dǎo)大鼠UC模型緊密連接蛋白的影響［J］.遼寧中醫(yī)雜志，2012，39（8）：1617-1619.

［22］李云海.白頭翁湯對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜損傷修復(fù)作用的影響［J］.中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育，2013，11（4）：155-157.

［23］劉杰民，藺曉源，王敏，等.健脾益腸散對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠的作用研究［J］.中國中醫(yī)急癥，2013，22（3）：348-349，355.

［24］盧璐，謝建群，袁建業(yè)，等.清腸栓對(duì)潰瘍性結(jié)腸炎大鼠結(jié)腸黏膜纖絲狀肌動(dòng)蛋白的影響［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合消化雜志，2012，20（11）：485-488.

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