劉亞敏，郄春花，李佳萌，李 穎，楊悅杰

(1天津市第二人民醫(yī)院，天津300192;2天津市疾病預(yù)防控制中心)

手足口病(HFMD)是一種全球性傳染病，多發(fā)生于學(xué)齡前兒童。自2008年5月我國將其納入法定傳染病以來，其每年發(fā)病人數(shù)及死亡人數(shù)一直居丙類傳染病之首。該病主要由小RNA病毒科的腸道病毒(EV)引起，最常見為柯薩奇A組16型(Cox-A16)、EV71。少數(shù)患者可出現(xiàn)無菌性腦膜炎、腦炎、急性弛緩性麻痹、神經(jīng)源性肺水腫和心肌炎等，個別重癥患兒病情進展快，可導(dǎo)致死亡。HFMD主要經(jīng)胃腸道、呼吸道及生活密切接觸等傳播，目前散居兒童和托幼兒童是HFMD預(yù)防控制重點人群，傳染源的管理主要集中在患兒，但對阻斷傳播作用有限。人是人EV的惟一宿主，但感染后僅少數(shù)表現(xiàn)為顯性感染，隱性感染和隱性傳播給疾病的預(yù)防和控制帶來困難，常出現(xiàn)暴發(fā)或流行。為了解與HFMD患兒密切接觸家屬EV感染及攜帶情況，分析其帶毒及在HFMD傳播過程中的作用，為制定HFMD防控策略提供依據(jù)，我們對HFMD患兒住院期間陪護家屬呼吸道、消化道分泌物進行了EV檢測分析?，F(xiàn)將結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 研究對象為2013年3～5月HFMD流行期間，隨機選取50例于天津市傳染病醫(yī)院住院HFMD患兒密切接觸家屬，患兒均符合衛(wèi)生部醫(yī)政司發(fā)布的《HFMD診療指南(2010年版)》HFMD診斷標準。密切接觸家屬選取住院期間每天陪床＞12 h并護理兒童飲食排便者;其中男2例，女48例;關(guān)系分別為父親2例，母親42例，祖母及外祖母6例。凡標本留取不全者予以剔除，研究均取得家屬知情同意。

1.2 方法

1.2.1 檢測方法 上述研究對象分別于患兒入院(急性期)及出院時(恢復(fù)期)采集咽拭子、糞便標本共200份，應(yīng)用熒光定量RT-PCR方法進行EV核酸檢測。首先應(yīng)用PE引物進行篩查，凡通用引物陽性者再應(yīng)用EV71、CoxA16引物進行分型。RNA提取試劑盒(QIAamp Viral RNA)為德國Qiagen公司產(chǎn)品，實時熒光定量PCR EV通用型、EV71型、Cox-A16型RNA檢測試劑盒購自廣州中山大學(xué)達安基因股份有限公司。同一家屬同期(急性期或恢復(fù)期)咽拭子及糞便標本任一陽性即認為陽性結(jié)果，稱急性期匯總或恢復(fù)期匯總。而同一家屬急性期或恢復(fù)期咽拭子及糞便4份標本任一陽性即認為陽性結(jié)果，稱匯總。

1.2.2 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計軟件。采用χ2檢驗。P≤0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

HFMD患兒密切接觸家屬中，急性期咽拭子檢測EV陽性3例、EV71陽性3例、CoxA16陽性0例，糞便標本中分別為28、13、10例，急性期匯總分別為28、15、10例;恢復(fù)期咽拭子檢測 EV陽性11例、EV71陽性3例、CoxA16陽性2例，糞便標本中分別為33、13、5 例，恢復(fù)期匯總分別為 38、20、10 例。HFMD患兒密切接觸家屬EV陽性檢出率糞便明顯高于咽拭子(P＜0.05)，且在患兒疾病恢復(fù)期陽性率高于急性期(P＜0.05)，尤其是糞便標本(P＜0.05)。本組總EV陽性檢出率78%(38/50)，其中97.3%(37/38)為隱性感染者。

3 討論

HFMD主要由小RNA病毒科的EV引起，其傳染性強、隱性感染比例大、傳播途徑復(fù)雜、傳播速度快、控制難度大，容易出現(xiàn)暴發(fā)和短時間內(nèi)較大范圍流行［1，2］。目前，尚無有效的抗病毒藥物和疫苗，主要通過高水平的監(jiān)測及公共衛(wèi)生干預(yù)［3］。臨床對隱性感染者的帶毒情況研究多集中在健康人群［4～7］，提示健康人群腸道病毒帶毒在 HFMD傳播中的作用不大［8，9］，而年齡的增長增加了隱性感染的機會［10］。對重癥患兒密切接觸者研究發(fā)現(xiàn)，EV隱性感染比較普遍［8，9］。近年來，HFMD 最常見病原為CoxA16與EV71。目前尚不能按不同病原對HFMD患兒進行分開診治，HFMD患兒陪床家屬呼吸道、消化道分泌物腸道病毒檢測亦未出現(xiàn)與自家患兒病原不同情況，與既往研究結(jié)果類同［10，11］。

在本研究中，HFMD患兒密切接觸家屬總EV陽性檢出率76.0%，遠高于以前的報道［7］，可能與接觸密切程度有關(guān)。密切接觸家屬EV陽性者中僅1例出現(xiàn)HFMD癥狀，97.4%(37/38)表現(xiàn)為隱性感染，提示EV感染在HFMD患兒密切接觸人群普遍存在。HFMD患兒密切接觸家屬EV陽性檢出率糞便明顯高于咽拭子，且在患兒疾病恢復(fù)期陽性率由急性期的56%(28/50)升至66%(38/50)，具有統(tǒng)計學(xué)意義，尤其是糞便標本。這些密切接觸者在患兒出院后，社會活動接觸范圍較患兒更廣，在HFMD傳播過程中意義更大。因此，建議將這類人群加入防控重點范圍，如對其排泄物消毒處理，有相應(yīng)疫苗后作為疫苗接種人群等，以減少糞口途徑傳播可能。

有研究表明，部分患兒在出現(xiàn)HFMD癥狀之前，即在疾病潛伏期，分泌物中已經(jīng)可檢出EV71，說明可能EV71潛伏期即有傳染性［12］。在本研究中，EV71患兒家屬呼吸道、消化道分泌物陽性率在患兒疾病急性期與恢復(fù)期檢出率相當(dāng)，與CoxA16急性期糞便陽性率最高不同，說明可能密切接觸者在EV71傳播過程中意義更大。

本研究沒有測血清IgG型抗體，對隱性感染評估有所欠缺。由于樣本量小，沒有進一步具體對CoxA16與EV71型隱性感染情況進一步分析，沒有進一步對隱性感染者進行長時間的追蹤了解其最短和最長排毒時間，本文研究者正申請課題進行相關(guān)更深入研究。

［1］Chung PW，Huang YC，Chang LY，et al.Duration of enterivirus shedding in stool［J］.J Microbiol Immunol Infect，2001，34(3):167-170.

［2］Han J，Ma XJ，Wang JF，et al.Long persistence of EV71 specific nucleotides in respiratory and feces samples of the patients with Hand-Foot-Mouth Disease after recovery［J］.BMC Infect Dis，2010，(10):178.

［3］McMinn PC.An overview of the evolution of enterovirus 71 and its clinical and public health significance［J］.FEMS Microbiol Rev，2002，26(1):91-107.

［4］張東曉，楊帆，王冰，等.深圳市社區(qū)人群EV71和CoxA16隱性感染的流行病學(xué)分析［J］中國熱帶醫(yī)學(xué)，2011，11(11):1332-1333.

［5］姜文國，丁淑軍，高中靜，等.手足口病流行期健康兒童及其監(jiān)護人腸道病毒帶毒狀況調(diào)查［J］.中國病原生物學(xué)雜志，2011，6(11):857-860.

［6］鄧愛萍，張永慧，孫立梅，等.廣東省健康人群手足口病病原隱性感染狀況調(diào)查［J］.中華流行病學(xué)雜志，2012，33(2):189-191.

［7］李佳萌，張穎，高璐，等.天津市2009～2010年健康人群腸道病毒71型中和抗體血清流行病學(xué)調(diào)查［J］.中華流行病學(xué)雜志，2011，32(6):568-570.

［8］陳勇，孫傳武，孫永紅，等.2010年徐州市重癥手足口病患者排毒及密切接觸者帶毒情況［J］.中華預(yù)防醫(yī)學(xué)雜志，2011，45(12):1117-1118.

［9］Chen LJ，Li RQ，Zhang HR，et al.Tracking investigating of the carriage status of virus among HFMD patients with EV71 and their close contacts［J］.Int J Virol，2011，18(5):134-138.

［10］徐逸鳴，楊萍.手足口病的醫(yī)院感染管理［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2009，19(7):851.

［11］汪錫文，高建慧，肖桐明，等.手足口病定點醫(yī)院救治的調(diào)查與管理［J］.中華醫(yī)院感染學(xué)雜志，2010，20(11):1581-1582.

［12］Li J，Lin C，Qu M，et al.Excretion of enterovirus 71 in persons infected with hand，foot and mouth disease［J］.Virol J，2013(10):31.