胡伊樂，楊為民，涂心明

維生素B12對疼痛的抑制作用

InhibitoryEffectofVitaminB12onPain

胡伊樂，楊為民，涂心明

目的探討維生素B12對疼痛抑制的部位。方法制備疼痛模型大鼠，分別在大鼠靜脈蛛網膜下腔注射維生素B12，通過熱敏反應觀察其疼痛抑制的效果。結果維生素B12在靜脈注射與蛛網膜下腔注射都有一定的鎮(zhèn)痛作用，在蛛網膜下腔的抑制作用更強。結論維生素B12可以通過保護神經鞘起到疼痛抑制的作用，并且中樞效果更好。

維生素B12；疼痛抑制；蛛網膜下腔

維生素B12是一種由含鈷的卟啉類化合物組成的B族維生素，因其由4個還原的吡咯環(huán)連在一起變成為一個咕啉大環(huán)，構成維生素B12分子的核心，又被稱鈷胺素或氰鈷素，常溫下為淺紅色的針狀結晶，易溶于水和乙醇，具有促進甲基轉移、保護葉酸在細胞內的轉移和貯存、維護神經系統(tǒng)健康等作用[1]。在臨床應用中發(fā)現維生素B12在治療口腔潰瘍中不僅療效優(yōu)于傳統(tǒng)的維生素B2，而且對潰瘍引起的疼痛具有明顯的抑制功能[2]。為探討維生素B12對疼痛抑制的實際效果及機制，將維生素B12分別注入疼痛模型大鼠的靜脈與蛛網膜下腔，通過熱敏試驗觀察其對疼痛的抑制作用。

1 資料與方法

1.1材料維生素B12注射液購自山東方明藥業(yè)有限公司；成年Sprague-Dawley大鼠，體質量250～350 g，購自鄭州大學實驗動物中心；水合氯醛購自天津市科密歐化學試劑開發(fā)有限公司；鼠爪熱輻射刺激測痛儀購自意大利Ugo Basile公司。

1.2方法

1.2.1疼痛模型大鼠的制備 為驗證維生素B12對疼痛的抑制作用，先制作大鼠坐骨神經慢性壓迫疼痛模型，此模型由Bennett和Xie于1988年創(chuàng)建開發(fā)，在疼痛學研究中被廣泛應用。

1.2.2疼痛模型大鼠制備方法 取體質量250～350 g的成年雄性SD大鼠，按3 mL/kg腹腔注射10%水合氯醛進行麻醉，固定后備皮，聚維酮碘溶液消毒皮膚，切開后側大腿皮膚，鈍性分離股四頭肌暴露坐骨神經，用6號外科縫線圍繞坐骨神經干間距1～2 mm做4個輕度結扎環(huán)，為防止結扎過緊損害神經結扎強度以引起小腿肌肉輕度顫動反應為宜。術后逐層縫合切口后注意消毒。

1.2.3疼痛模型大鼠的制備模型成功判斷標準 熱刺激縮足反射潛伏期(PWTL)為模型大鼠的熱痛閾，為驗證疼痛模型大鼠的模型制備是否成功，利用鼠爪熱輻射刺激測痛儀測定大鼠足底部。檢測時，為保證數值的客觀性先讓大鼠適應20 min，調整好儀器刺激強度后，將大鼠置于檢測儀上，啟動熱源緩慢對鼠爪施加熱刺激，當達到一定熱值時大鼠會出現踮腳、回縮、舔足等動作，測痛儀將自動記錄大鼠反應時間，此時間即為大鼠的PWTL，即熱痛閾。如果動物損傷足PWTL降低約30%即提示有熱痛敏，表明疼痛模型大鼠制備成功。

1.2.4靜脈注射維生素B12取疼痛模型大鼠與普通大鼠各6只，分別按照600 pg/g靜脈注射維生素B12，注射完成后自5 min起每隔5 min測定1次大鼠的PWTL。

1.2.5蛛網膜下腔注射維生素B12取疼痛模型大鼠與普通大鼠各6只，10%水合氯醛麻醉后，取L4、5或L5、6椎間隙，在顯微解剖鏡下，使用100 μL微量注射器刺入蛛網膜下腔按照100 pg/g注射維生素B12，穿刺成功可見典型鼠尾甩動，注射完畢，留針2 min，自注射后5 min起每隔5 min測定1次大鼠的PWTL。

1.2.6統(tǒng)計學分析 用SPSS 14.0統(tǒng)計軟件對數據進行t檢驗和方差分析，以P﹤0.05為有統(tǒng)計學意義。

2 結果

疼痛模型大鼠靜脈注射維生素B12后，與對照組大鼠相比熱敏反應時間在10 min時開始延長，25～35 min時延長最為明顯(統(tǒng)計結果顯示P值為0.37)，40 min時開始縮短，結果顯示維生素B12對疼痛的抑制在10 min時起效，30 min時達到高峰，40 min時開始衰退。疼痛模型大鼠蛛網膜下腔注射維生素B12后，與對照組大鼠相比熱敏反應時間的改變與靜脈注射基本相同，但是在25～35 min時延長較靜脈注射更為明顯(統(tǒng)計結果顯示P<0.01)，結果證明在蛛網膜下腔注射維生素B12后鎮(zhèn)痛效果更為明顯。

3 討論

維生素B12屬水溶性含鈷維生素，是人體造血功能中不可缺少的物質，缺乏時主要影響造血系統(tǒng)和神經系統(tǒng)，具有治療惡性貧血，促進維生素A在肝中的儲存，促進細胞發(fā)育成熟和機體代謝，抗脂肪肝等作用。在機體內的作用機理為通過甲基鈷胺間接參與胸腺嘧啶脫氧核苷酸合成，缺乏時可致葉酸缺乏阻礙DNA的合成，導致巨幼紅細胞貧血[3]。此外它還具有維持有鞘神經纖維正常結構的功能，通過甲基丙二酸轉變?yōu)殓晁?，參與三羧循環(huán)，缺乏時也可影響神經髓鞘脂類的合成。實驗結果顯示疼痛模型大鼠靜脈注射維生素B12后，大鼠的耐熱敏試驗從10 min時起效，30 min時達到高峰，40 min時開始衰退，證明維生素B12具有疼痛的抑制作用。蛛網膜下腔注射后熱敏反應時間的改變與靜脈注射基本相同，但是對疼痛的抑制作用明顯高于靜脈注射組，證明維生素B12的鎮(zhèn)痛作用是通過直接作用于中樞神經系統(tǒng)而起作用的，其外周鎮(zhèn)痛的作用機理為通過維持有鞘神經纖維正常結構的功能來實現的，其中樞鎮(zhèn)痛作用機理目前尚不清楚，可能與催化Glu轉變?yōu)榧谆鵄sp的甲基天冬氨酸變位酶、催化甲基丙二酰CoA轉變?yōu)殓牾oA的甲基丙二酰CoA變位酶有關[4]。雖然目前維生素B12對疼痛的抑制的中樞作用機理尚不清楚，如果能在理論上有進一步的突破，廣泛應用于臨床后將可能使疼痛患者擺脫阿片類藥物的依賴，為疼痛的治療提供另一種思路。

[1]陳楠，黃巖，周麗娜.復方維生素B12溶液治療口腔潰瘍的臨床體會[J].中國社區(qū)醫(yī)師醫(yī)學專業(yè)，2012，14(321)：145.

[2]吳春根，何安慰.硬膜外注射甲基維生素B12治療周圍神經脫髓鞘病變臨床觀察[J].海軍醫(yī)學雜志，2012，33(4)：219-222.

[3]羅培林.綜合療法治療頑固性口腔潰瘍203例[J].中醫(yī)藥導報，2013，19(11)：124-125.

[4]韋寶偉，劉布鳴，陳力力，等.復方苯佐卡因凝膠治療豚鼠口腔潰瘍的實驗研究[J].實用口腔醫(yī)學雜志，2011，27(5)：693-695.

2014-07-19

河南科技大學醫(yī)學院，河南洛陽 471003

胡伊樂(1973-)，男，河南洛陽人，副教授，從事疼痛學研究工作。

R977.2+2,R339.11

B

1672-688X(2014)03-0175-02