衛(wèi)平知

摘要：一件事情能否順利地做成功，取決于實(shí)際操作時(shí)每一個(gè)細(xì)節(jié)的成敗。大到航天飛機(jī)的發(fā)射，小到有關(guān)一個(gè)知識(shí)的實(shí)驗(yàn)。

關(guān)鍵詞：細(xì)節(jié) DNA 實(shí)驗(yàn)

1986年1月28日，美國(guó)航天飛機(jī)“挑戰(zhàn)者”號(hào)從發(fā)射架上升空73秒后發(fā)生爆炸，價(jià)值12億美元的航天飛機(jī)化作碎片，7名機(jī)組人員全部遇難，造成了世界航天史上最大的慘劇。事故原因是因?yàn)橛覀?cè)固態(tài)火箭推進(jìn)器上面的一個(gè)O形密封環(huán)失效，導(dǎo)致一連串的連鎖反應(yīng)，并且在升空73秒后，爆炸解體墜毀。此事在當(dāng)時(shí)震驚全世界。

眾所周知，DNA技術(shù)在現(xiàn)代社會(huì)的應(yīng)用主要有兩方面：一個(gè)是重大刑事案件的偵破（如殺人案），可通過DNA技術(shù)準(zhǔn)確確定犯罪嫌疑人的身份；另一方面用于親子鑒定，人的血液、毛發(fā)、唾液、口腔細(xì)胞等都可以用于親子鑒定。DNA親子鑒定，否定親子關(guān)系的準(zhǔn)確率幾近100%，肯定親子關(guān)系的準(zhǔn)確率可達(dá)到99.99%。

分組實(shí)驗(yàn)“DNA的粗提取與鑒定”是學(xué)生特別感興趣的一個(gè)實(shí)驗(yàn)。然而本實(shí)驗(yàn)操作步驟多、時(shí)間長(zhǎng)、用到的實(shí)驗(yàn)器材多，學(xué)生由于某一個(gè)細(xì)節(jié)不注意造成實(shí)驗(yàn)失敗的有很多，好多失敗的學(xué)生都想重做一遍，但由于沒有足夠的時(shí)間或受實(shí)驗(yàn)材料的限制而無法補(bǔ)做。下面談一談在這個(gè)實(shí)驗(yàn)操作中應(yīng)該注意的幾個(gè)細(xì)節(jié)。

一、不清楚雞血細(xì)胞液的盛放容器

1.正確做法。盛放雞血細(xì)胞液的容器，最好是塑料制品。因?yàn)殡u血細(xì)胞破碎后釋放出來的DNA，易被玻璃容器吸附。所以，在第1步提取雞血細(xì)胞核物質(zhì)時(shí)，最好放入塑料燒杯內(nèi)提取。這樣才能保證提取到足夠的DNA來觀察和鑒定。

2.錯(cuò)誤做法。在配有塑料燒杯的情況下，好多學(xué)生都將雞血細(xì)胞液倒入到100毫升的玻璃燒杯內(nèi)提取DNA，使提取出的DNA量有所減少。

二、不清楚每步攪拌的速度、力度和方向

1.正確做法。第1步提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)時(shí)，要快速攪拌，使雞血細(xì)胞快速破裂釋放出DNA；而第3步析出DNA的粘稠物；第5步將DNA粘稠物再溶解和第7步提取含雜質(zhì)較少的DNA時(shí)，攪拌要輕要慢，以便獲得完整的DNA分子。每次攪拌時(shí)都要沿一個(gè)方向攪拌，否則DNA分子易斷裂。

2.錯(cuò)誤做法。學(xué)生在做第1步時(shí)知道應(yīng)該快速攪拌，于是想當(dāng)然地認(rèn)為在以后各步攪拌時(shí)都要快速攪拌。結(jié)果是：在第3步觀察DNA絲狀物時(shí)幾乎看不到（因?yàn)镈NA分子已被攪斷）；在第5步溶解DNA黏稠物時(shí)，紗布上的黏稠物很少，用鑷子幾乎夾不起（因?yàn)閿嗔训腄NA分子沒有被過濾出來，進(jìn)入到濾液中）；在第7步提取含雜質(zhì)較少的DNA時(shí)，卷在玻璃棒上的DNA分子只有寥寥幾根，有的甚至于沒有（因?yàn)镈NA分子已被攪斷，留在了溶液中）。

三、不清楚加水方式

1.正確做法。在第3步加水時(shí)，要沿?zé)瓋?nèi)壁緩緩加入蒸餾水。

2.錯(cuò)誤做法。加水時(shí)不沿?zé)瓋?nèi)壁并且快速倒入燒杯。

四、不清楚每個(gè)過濾步驟要什么不要什么

1.正確做法。本實(shí)驗(yàn)共需過濾3次，其中第1步提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)和第6步過濾含有DNA的氯化鈉溶液，要的是濾液；第4步濾取含DNA的黏稠物，要的是濾出物。

2.錯(cuò)誤做法。學(xué)生將第1步和第6步的濾液倒掉，將第4步的濾出物倒掉。該要的倒掉了，不該要的留下來了。

五、不清楚每個(gè)過濾步驟的紗布層數(shù)

1.正確做法。本實(shí)驗(yàn)共需過濾3次，其中第1步提取雞血細(xì)胞的細(xì)胞核物質(zhì)和第6步過濾含有DNA的氯化鈉溶液，要2層紗布；第4步濾取含DNA的黏稠物，要4層紗布。

2.錯(cuò)誤做法。學(xué)生在做第1步和第6步時(shí)紗布層數(shù)多，導(dǎo)致過濾時(shí)間加長(zhǎng)或者就過濾不下去；做第4步時(shí)，紗布層數(shù)少，導(dǎo)致紗布上的粘稠物很少。

六、添加氯化鈉試劑不正確

1.正確做法。在做第2步溶解細(xì)胞核內(nèi)的DNA和第5步將DNA粘稠物再溶解時(shí)，要加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液；在第8步DNA的鑒定時(shí)，要加入物質(zhì)的量濃度為0.015mol/L的NaCl溶液。

2.錯(cuò)誤做法。學(xué)生在該加入物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液時(shí)（第2、5步）加入了物質(zhì)的量濃度為0.015mol/L的NaCl溶液，而在該加入物質(zhì)的量濃度為0.015mol/L的NaCl溶液時(shí)（第8步）卻加入了物質(zhì)的量濃度為2mol/L的NaCl溶液，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。

七、二苯胺試劑試劑配制錯(cuò)誤

1.正確做法。二苯胺試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用，使用時(shí)每10mlA液中加入B液2滴。

2.錯(cuò)誤做法。每10mlB液中加入A液2滴；或者A液、B液各取一半。

八、配制（或加入）的試劑沒有混合均勻

1.正確做法。二苯胺試劑配制好以后及配好的二苯胺試劑加入到盛有5ml物質(zhì)的量濃度為0.015mol/L的NaCl溶液的試管后都必須混合均勻。

2.錯(cuò)誤做法。這兩步都沒有混合均勻或其中一步?jīng)]有混合均勻，這都會(huì)導(dǎo)致鑒定實(shí)驗(yàn)的失敗。

除了上述原因之外，還有如容器清洗不干凈、不會(huì)振蕩試管等也會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。

實(shí)驗(yàn)是綜合性很強(qiáng)的動(dòng)手動(dòng)腦過程。要順利完成一個(gè)實(shí)驗(yàn)，不僅要有扎實(shí)的理論基礎(chǔ)，更要有熟練的動(dòng)手操作能力和良好的動(dòng)手操作習(xí)慣來做后盾。完美的成功來自對(duì)每個(gè)細(xì)節(jié)的孜孜追求。只有踏踏實(shí)實(shí)走好每一步，才能到達(dá)成功的彼岸。

（責(zé)編 田彩霞）