轉(zhuǎn)基因技術(shù)是進(jìn)行品種改良的有力工具,西南大學(xué)家蠶基因組生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)制備出高抗病毒的轉(zhuǎn)基因家蠶品系。導(dǎo)入性狀的遺傳穩(wěn)定性對(duì)轉(zhuǎn)基因家蠶的應(yīng)用推廣具有重要影響,同時(shí)也是轉(zhuǎn)基因安全檢測(cè)的重要內(nèi)容之一。
制備轉(zhuǎn)基因家蠶主要利用piggyBac轉(zhuǎn)座子,外源性和內(nèi)源性的piggyBac轉(zhuǎn)座酶都可能影響轉(zhuǎn)基因家蠶的遺傳穩(wěn)定性。作為唯一的馴化昆蟲,家蠶在室內(nèi)飼養(yǎng),幾乎不可能獲得外源轉(zhuǎn)座酶;但家蠶體內(nèi)的部分piggyBac類似元件可能具有轉(zhuǎn)座酶活性,對(duì)轉(zhuǎn)基因家蠶的遺傳穩(wěn)定性產(chǎn)生了潛在威脅。性別連鎖的性狀非常有利于遺傳分析,家蠶是雌異配型,ZZ為雄,ZW為雌。家蠶功能基因組研究團(tuán)隊(duì)轉(zhuǎn)基因抗病育種小組成員利用piggyBac[3×p3EGFP afm]轉(zhuǎn)座載體隨機(jī)插入的特性,制備了135個(gè)轉(zhuǎn)基因品系,并篩選出一個(gè)W染色體連鎖的轉(zhuǎn)基因品系,命名為W-T。W-T只有雌個(gè)體為轉(zhuǎn)基因,在復(fù)眼和神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)出綠色熒光。通過(guò)連續(xù)11代的調(diào)查,對(duì)W-T的22 759個(gè)后代個(gè)體進(jìn)行了性別鑒定和綠色熒光觀察,發(fā)現(xiàn)雌個(gè)體都具有綠色熒光而雄個(gè)體都沒(méi)有綠色熒光;進(jìn)一步的PCR檢測(cè)結(jié)果表明,W-T后代雄個(gè)體不含有EGFP序列,雌個(gè)體插入位點(diǎn)沒(méi)有發(fā)生變化。經(jīng)典遺傳分析和分子檢測(cè)結(jié)果都表明,轉(zhuǎn)基因家蠶可以穩(wěn)定遺傳。該研究結(jié)果以“Postintegration stability of the silkworm piggyBac transposon”為題,發(fā)表在國(guó)際昆蟲學(xué)權(quán)威期刊《Insect biochemistry and molecular biology》。這為家蠶轉(zhuǎn)基因抗性品系及其他轉(zhuǎn)基因素材的應(yīng)用推廣提供了理論基礎(chǔ)。
實(shí)驗(yàn)室夏慶友教授是論文的通訊作者,蔣亮博士后為論文的第一作者,碩士研究生孫強(qiáng)為共同第一作者。該研究得到了國(guó)家“973”和“863”計(jì)劃的支持。
論文鏈接:http://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0965174814000496