吳娟子，張建麗，潘玉梅，劉智微，鐘小仙

（江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧所，江蘇 南京210014）

能源短缺是當(dāng)前人類面臨的重大挑戰(zhàn)。生物質(zhì)能是僅次于石油、煤炭和天然氣而位居世界第4位的能源，越來越受到世界各國的高度關(guān)注［1］。眾所周知，木質(zhì)纖維素類生物質(zhì)是地球上來源廣泛、可再生和環(huán)境友好的最豐富的生物質(zhì)資源，這些生物質(zhì)資源可通過化學(xué)或生物轉(zhuǎn)化等方法制造替代石油的燃料，如乙醇［2］。2007年國家《可再生能源中長期發(fā)展規(guī)劃》明確提出：“從長遠(yuǎn)考慮，要積極發(fā)展以木質(zhì)纖維素生物質(zhì)為原料的生物液體燃料技術(shù)”。

象草（Pennisetumpurpureum，elephantgrass，PP）是熱帶和亞熱帶地區(qū)廣泛栽培的優(yōu)質(zhì)、高產(chǎn)、多用途牧草［3－6］。蘇牧2號象草（P.purpureumcv.Sumu No.2）是由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院自主選育的耐鹽牧草新品種，2010年通過全國草品種審定委員會審定，適合各種類型的土壤種植，在中高鹽度海涂地生長顯著優(yōu)于其他牧草，非鹽堿地種植草產(chǎn)量更高［7－9］。雜交狼尾草（P.americanum×P.purpureum，hybridPennisetum，HP）是母本美洲狼尾草（P.americanum）不育系Tift23A與父本象草N51遠(yuǎn)緣雜交獲得的三倍體雜交種，綜合了母本品質(zhì)優(yōu)、父本生態(tài)適應(yīng)性廣、產(chǎn)量高的特點，并具有明顯的雜種優(yōu)勢，干物質(zhì)產(chǎn)量比象草可提高20%～50%，1989年通過全國草品種審定委員會審定［10］。國內(nèi)外的研究表明，象草和雜交狼尾草不僅可作為草食畜禽的優(yōu)質(zhì)青飼料、理想的水土保持作物、優(yōu)質(zhì)紙漿和綠色環(huán)保型復(fù)合人造板原料，還是理想的木質(zhì)纖維素類能源作物［3－6，11－12］。象草單位面積的生物量是能源作物甘蔗（Saccharumsinensis）和柳枝稷（Panicumvirgatum）的2倍，由于其成本更加低廉，歐美等國正在加強象草生物質(zhì)能源的開發(fā)利用研究［11－12］。

木質(zhì)纖維類生物質(zhì)主要由纖維素、半纖維素和木質(zhì)素三大部分組成，構(gòu)成了植物的細(xì)胞壁。纖維素和半纖維素是多糖，在酶的作用下可以水解生成單糖，然后由發(fā)酵平臺轉(zhuǎn)化為乙醇或其他高附加值化工產(chǎn)品［13］；而木質(zhì)素能夠抵抗自然界多數(shù)微生物的有效降解，目前工業(yè)上幾乎不能降解利用木質(zhì)素，它對纖維素酶和半纖維素酶存在空間阻礙作用，而且木質(zhì)素的存在還會對纖維素酶水解的活性產(chǎn)生致鈍作用，抑制纖維素和半纖維素的降解［14］。研究表明提高原料中纖維素、半纖維素含量、降低木質(zhì)素含量可顯著提高木質(zhì)纖維素的乙醇轉(zhuǎn)化效率［15］。不同的木質(zhì)纖維素類生物質(zhì)原料，在不同發(fā)育時期其所含的纖維素、半纖維素和木質(zhì)素均有一定差異，這導(dǎo)致其乙醇產(chǎn)量的不同。研究者往往通過比較分析植物細(xì)胞壁組分來預(yù)測、比較其木質(zhì)纖維素乙醇生產(chǎn)潛力［15－17］。

本試驗以蘇牧2號象草和雜交狼尾草為材料，探討了兩品種不同生長時期莖和葉中纖維素（cellulose，CEL）、半纖維素（hemicellulose，HMC）和酸性木質(zhì)素（acid detergent lignin，ADL）含量和總量以及來源于木質(zhì)纖維素的乙醇理論產(chǎn)量隨生長變化的規(guī)律，旨在為國審品種蘇牧2號象草和雜交狼尾草作為生物質(zhì)能源的評價及開發(fā)利用提供基礎(chǔ)資料。

1 材料與方法

1.1 供試材料

蘇牧2號象草和雜交狼尾草由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧研究所提供。

1.2 試驗地概況和設(shè)計

試驗地位于江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院內(nèi)，地處北緯32°32′、東經(jīng)118°48′，年均溫15℃，最高溫度39℃，最低溫度－12℃，年降水量1000mm左右，無霜期220～240d。供試土壤屬粘性馬肝土，肥力中等，整個試驗地肥力均勻。前一年秋季收割后在大棚內(nèi)越冬的象草和雜交狼尾草于2011年5月11日分株移栽，小區(qū)面積8m2，每小區(qū)種植36株，行距40cm，株距50cm，每小區(qū)間隔80cm，隨機區(qū)組排列，每一品種重復(fù)種植5個小區(qū)。

1.3 采樣及樣品處理

分別于2011年8月2日（移栽后83d）、9月2日（移栽后114d）和10月31日（移栽后173d）隨機選取小區(qū)刈割，所取樣品均為第1次刈割，刈割留茬高度為10～15cm。植株葉片和莖稈（含葉鞘）分離后，105℃殺青30 min，70℃烘干至恒重，稱量。

1.4 測定項目和方法

將各器官烘干稱重，計算葉莖比。烘干的莖和葉分別粉碎，過80目篩（篩孔尺寸0.18mm），冷卻后于密封袋中保存，待進(jìn)一步分析。CEL（cellulose，纖維素）、HMC（hemicellulose，半纖維素）和 ADL（acid detergent lignin，酸性木質(zhì)素）采用范氏洗滌纖維法測定［18］。

1.5 生物量計算

木質(zhì)纖維素乙醇產(chǎn)量（L/hm2）＝（CEL＋HMC）%×1.11（CEL和 HMC轉(zhuǎn)化為糖的轉(zhuǎn)換因子）×0.85（CEL和HMC轉(zhuǎn)化為糖的過程效率）×0.51（糖轉(zhuǎn)化為乙醇的轉(zhuǎn)換因子）×0.85（糖轉(zhuǎn)化為乙醇的過程效率）×1000/0.79（乙醇比重g/mL）［19］。

1.6 數(shù)據(jù)處理

對3個不同生長階段兩品種間的差異顯著性，運用SPSS 16.0軟件中的雙因素方差分析（two－way ANOVA），選擇S－N－K均數(shù)比較法（Student－Newman－Keuls’means test），分別在P＝0.05和P＝0.01水平上進(jìn)行多重比較分析。

2 結(jié)果與分析

2.1 兩供試品種葉和莖中CEL含量隨生長天數(shù)的變化

移苗后83d，蘇牧2號象草葉中CEL含量顯著高于雜交狼尾草（P＜0.01），二者分別為51.23%和43.46%；兩品種莖中CEL含量分別為44.10%和41.94%，無顯著差異。移苗后114d，蘇牧2號象草無明顯變化，雜交狼尾草葉中CEL含量顯著增加至56.67%（P＜0.01）；兩品種莖中CEL含量均顯著降低（P＜0.01）。與移苗后114d相比，移苗后173d兩品種葉中CEL含量均顯著降低（P＜0.01），莖中CEL含量無明顯變化?？傮w上，不同生長階段兩品種葉中CEL含量明顯高于莖；隨著生長時間的延長，兩品種莖、葉中CEL含量逐漸減少，早期（移苗后83d）蘇牧2號象草葉中CEL含量顯著高于雜交狼尾草（P＜0.01），二者莖組織CEL含量無顯著差異，但從移苗后114d起，蘇牧2號象草莖（P＜0.05）和葉（P＜0.01）中CEL含量均顯著低于雜交狼尾草（表1，表2）。

表1 象草和雜交狼尾草不同生長階段葉中CEL含量Table 1 The CEL content of leaves at different growth stages in EG and HP %DM

表2 象草和雜交狼尾草不同生長階段莖中CEL含量Table 2 The CEL content of stems at different growth stages in EG and HP %DM

2.2 兩供試品種葉和莖中HMC含量隨生長天數(shù)的變化

移苗后83d，蘇牧2號象草葉中HMC含量顯著高于雜交狼尾草（P＜0.01），二者莖組織HMC含量無顯著差異。移苗后114d，兩品種葉中HMC含量均顯著降低（P＜0.01），莖中HMC含量均顯著增加（P＜0.01）。移苗后173d，與移苗后114d相比，兩品種葉中HMC含量均顯著增加（P＜0.01），蘇牧2號象草莖中HMC含量顯著增加（P＜0.01），而雜交狼尾草顯著降低（P＜0.01）?？傮w上，不同生長階段，兩品種葉中HMC含量明顯低于莖，蘇牧2號象草葉中HMC含量均顯著高于雜交狼尾草（P＜0.01）；隨著生長時間的延長，兩品種莖中HMC含量呈增加趨勢，移苗后114和173d時蘇牧2號象草莖中HMC含量均顯著高于雜交狼尾草（P＜0.01）（表3，表4）。

2.3 兩供試品種葉和莖中ADL含量隨生長天數(shù)的變化

移苗后83d，蘇牧2號象草葉中ADL含量顯著低于雜交狼尾草（P＜0.01），二者莖組織ADL含量無顯著差異。移苗后114d，兩品種葉中ADL含量均顯著降低（P＜0.01），而莖中ADL含量均顯著增加（P＜0.05）。移苗后173d，與移苗后114d時相比，蘇牧2號象草葉中ADL含量顯著增加，而雜交狼尾草顯著降低（P＜0.01），兩品種莖中ADL含量無顯著變化。移苗后83～114d，蘇牧2號象草葉中ADL含量均顯著低于雜交狼尾草（P＜0.01），而移苗后173d，蘇牧2號象草葉中ADL含量顯著高于雜交狼尾草（P＜0.05）。隨著生長時間的延長，兩品種莖中ADL含量均逐漸增高，移苗后114～173d，蘇牧2號象草莖中ADL含量明顯高于雜交狼尾草（P＜0.05）（表5，表6）。

表3 象草和雜交狼尾草不同生長階段葉中HMC含量Table 3 The HMC content of leaves at different growth stages in EG and HP %DM

表4 象草和雜交狼尾草不同生長階段莖中HMC含量Table 4 The HMC content of stems at different growth stages in EG and HP %DM

表5 象草和雜交狼尾草不同生長階段葉中ADL含量Table 5 The ADL content of leaves at different growth stages in EG and HP %DM

表6 象草和雜交狼尾草不同生長階段莖中ADL含量Table 6 The ADL content of stems at different growth stages in EG and HP %DM

2.4 兩供試品種葉和莖細(xì)胞壁各組分總量隨生長天數(shù)的變化

隨著生長時間的延長，兩品種含水量逐漸降低，莖葉比和干物質(zhì)產(chǎn)量逐漸增加。移苗后83～114d，蘇牧2號象草和雜交狼尾草兩品種含水量逐漸降低，莖葉比穩(wěn)定，莖和葉產(chǎn)量穩(wěn)步增加；干物質(zhì)產(chǎn)量二者無明顯差異（P＞0.05）。移苗后114～173d，象草含水量緩慢減少，雜交狼尾草含水量顯著減少（P＜0.05）；兩品種莖葉比均迅速增加，葉產(chǎn)量穩(wěn)步增加，而莖產(chǎn)量急劇增加，雜交狼尾草莖的生長最為顯著（P＜0.01），此階段雜交狼尾草干物質(zhì)產(chǎn)量顯著高于象草（P＜0.01）（表7）。

隨著生長時間的延長，兩品種CEL、HMC和ADL總量逐漸增加。移苗后83～114d，蘇牧2號象草和雜交狼尾草莖和葉組織中CEL、ADL總量無顯著差異（P＞0.05）；HMC主要集中在莖組織中；兩品種間細(xì)胞壁各組分總量無顯著差異（P＞0.05）。移苗后114～173d，兩品種細(xì)胞壁各組分總量急劇增加，增加的產(chǎn)量更多來源于莖組織；兩品種間HMC和ADL總量無明顯差異，雜交狼尾草中CEL總量明顯高于蘇牧2號象草（P＜0.01）（表7）。

2.5 兩供試品種纖維素和半纖維素乙醇理論產(chǎn)量隨生長天數(shù)的變化

隨著生長時間的延長，兩品種來源于莖和葉組織的總乙醇產(chǎn)量（TCEY）逐漸增加，變化范圍為1300～16347 L/hm2；移苗后114d，蘇牧2號象草和雜交狼尾草TCEY分別是移苗后83d的4.0和4.5倍；移苗后174d，蘇牧2號象草和雜交狼尾草TCEY分別是移苗后83d的10.38和12.29倍；雜交狼尾草的乙醇產(chǎn)量增長幅度顯著高于象草（P＜0.01）。移苗后83d，TCEY為1300～1440L/hm2，象草略高于雜交狼尾草（P＞0.05）；移苗后114d，TCEY為5758～5852L/hm2，象草略小于雜交狼尾草（P＞0.05）；移苗后173d，TCEY 顯著增加至14943～16347L/hm2，象草明顯低于雜交狼尾草（P＜0.01）。3個不同生長階段，來源于葉組織的乙醇產(chǎn)量為577～3587L/hm2，各階段象草均略高于雜交狼尾草。大部分的乙醇來源于莖，移苗后83～114d，來自于象草和雜交狼尾草莖組織的乙醇產(chǎn)量占總乙醇產(chǎn)量的54.10%～57.26%，兩品種無明顯差異；移苗后173d，這一指標(biāo)上升至76.00%～78.97%，雜交狼尾草顯著高于象草（表8）。

3個不同的生長階段，象草和雜交狼尾草中來源于纖維素的乙醇分別占TCEY的48.00%～78.40%和60.97%～78.08%；隨著生長時間的延長，兩品種中其所占比例逐漸降低；生長114～173d，雜交狼尾草中的纖維乙醇產(chǎn)量顯著高于象草。相反，移苗后83～173d，來源于半纖維的乙醇所占比例逐漸升高（21.53%～52.00%）；而且莖是半纖維素最重要的儲存組織，移苗后114～173d，其半纖維素乙醇產(chǎn)量占總半纖維乙醇的比例高達(dá)88.19%～94.66%；不同時期象草中半纖維乙醇產(chǎn)量均高于雜交狼尾草（表8）。

表7 象草和雜交狼尾草不同生長階段細(xì)胞壁組分的總量Table 7 Changes in yield of cell wall components of leaves and stems at different growth stages in EG and HP

表8 象草和雜交狼尾草不同生長階段纖維素和半纖維素理論乙醇產(chǎn)量Table 8 Changes in calculated ethanol yields（CEY）from cellulose and hemicellulose of leaves and stems at different growth stages in EG and HP L/hm2

3 討論與結(jié)論

大量研究表明植物細(xì)胞壁組分與木質(zhì)纖維素類生物質(zhì)乙醇轉(zhuǎn)化效率密切相關(guān)［15－17］。木質(zhì)纖維素類能源植物的生物產(chǎn)量、細(xì)胞壁組分及相應(yīng)的生物質(zhì)乙醇產(chǎn)量隨生長發(fā)育動態(tài)變化，了解其變化規(guī)律，可為能源植物的適時刈割利用提供必要的科學(xué)依據(jù)，具有重要的理論價值和實踐意義，但相關(guān)研究報道尚少。最近，Godin等［20］分析報道了芒草（Miscanthus×giganteus），柳枝稷，纖維高粱（Sorghumbicolor），纖維玉米（Zeamays），高羊茅（Festucaarundinacea）等多種能源植物不同收獲期的化學(xué)組分和生物質(zhì)能源轉(zhuǎn)化潛能。本研究探討了蘇牧2號象草和雜交狼尾草兩品種細(xì)胞壁組分含量、總量和木質(zhì)纖維素乙醇理論產(chǎn)量隨生長的變化過程。

Sarath等［15］曾比較不同基因型柳枝稷的細(xì)胞壁組分和乙醇轉(zhuǎn)化效率的相關(guān)性，研究表明，木質(zhì)素含量是影響乙醇轉(zhuǎn)化效率的關(guān)鍵因素，木質(zhì)素含量越低，乙醇轉(zhuǎn)化效率越高。Studera等［16］對1100份楊樹（Populustrichocarpa）資源的木質(zhì)素含量和乙醇轉(zhuǎn)化效率的相關(guān)性分析也證實了這一推論。Serapiglia等［21］對不同基因型灌木柳（Salixspp.）的研究表明纖維素含量越高，木質(zhì)纖維素乙醇轉(zhuǎn)化效率越高。近年來大量植物基因工程研究也報道提高木質(zhì)纖維素生物質(zhì)原料中的纖維素含量、降低其木質(zhì)素含量可以顯著提高其乙醇轉(zhuǎn)化效率［22－23］。我們的研究發(fā)現(xiàn)，隨著生長天數(shù)的增加，蘇牧2號象草及其雜交種葉和莖中CEL含量逐漸降低，莖中ADL和HMC含量逐漸上升。早期（移苗后83d），雜交狼尾草葉中CEL含量低于象草，兩品種莖中CEL含量無顯著差異，移苗后114～173d，雜交狼尾草莖、葉中CEL含量顯著高于象草。不同生長階段，雜交狼尾草葉中HMC含量均顯著低于蘇牧2號象草，移苗后83d，兩品種莖中HMC無顯著差異，移苗后114～173d，雜交狼尾草莖中HMC含量顯著低于象草；雜交狼尾草葉中ADL含量早中期（移苗后83～114d）高于象草，后期低于象草，不同生長階段，雜交狼尾草莖中ADL含量均顯著低于象草。因此，僅從生物質(zhì)乙醇轉(zhuǎn)化效率的角度考慮，兩品種8月份（移苗后83d）的轉(zhuǎn)化效率顯著優(yōu)于9、10月，早期（移苗后83d），蘇牧2號象草轉(zhuǎn)化效率優(yōu)于雜交狼尾草，中后期（移苗后114～173d），雜交狼尾草轉(zhuǎn)化效率優(yōu)于蘇牧2號象草。

除細(xì)胞壁組成，生物質(zhì)產(chǎn)量也是影響木質(zhì)纖維素類生物質(zhì)能源利用潛力的關(guān)鍵因素［24］。Godin等［20］的研究表明芒草、柳枝稷、纖維高粱、纖維玉米、高羊茅等多種能源植物在秋季收獲具有最大的生物能源產(chǎn)出，雖然此階段這些植物的細(xì)胞壁組成并非最佳時期，但由于干物質(zhì)產(chǎn)量達(dá)到最高，一定程度上補償細(xì)胞壁品質(zhì)的降低。我們的研究也呈相似的規(guī)律。在南京地區(qū)，象草早期生長迅速，而雜交狼尾草在移苗后的前期和中期（移苗后83～114d）長勢較象草差，后期（移苗后114～173d），雜交狼尾草雜種優(yōu)勢明顯，長勢顯著優(yōu)于象草。隨著生長天數(shù)的增加，兩品種細(xì)胞壁木質(zhì)素含量逐漸增加，纖維素含量逐漸降低，但細(xì)胞壁各組分總量和TCEY均逐漸增加，而且兩品種來源于莖的乙醇產(chǎn)量占TCEY的比例逐漸增加。移苗后114和173d，兩品種乙醇產(chǎn)量分別是移苗后83d的4.0～4.5倍和10.38～12.29倍，雜交狼尾草的乙醇產(chǎn)量增長幅度顯著高于象草。移苗后83d，兩品種細(xì)胞壁各組分總量和TCEY無顯著差異，隨著生長的延長，雜交狼尾草中CEL總量以及來源于CEL的乙醇理論產(chǎn)量顯著高于象草，其HMC總量以及來源于HMC的乙醇理論產(chǎn)量和ADL總量顯著低于象草。

因此，綜合考慮乙醇轉(zhuǎn)化效率和生物質(zhì)產(chǎn)量因素，在中后期（移苗后114～173d），雜交狼尾草生物質(zhì)能的利用潛力優(yōu)于蘇牧2號象草。同時，雜交狼尾草可有效解決象草結(jié)實率極低，不能種子繁殖的難題，這為高效低成本產(chǎn)業(yè)化種植和應(yīng)用奠定了良好基礎(chǔ)［10］，使其更適合于大面積推廣。另外，同一地區(qū)大面積推廣單一品種會降低品種抗病蟲害和抵御不良環(huán)境的能力，并易在大范圍內(nèi)引發(fā)新的災(zāi)害而影響生產(chǎn)的穩(wěn)定性［25］，因此可以在同一地區(qū)同時大面積種植蘇牧2號象草和雜交狼尾草，蘇牧2號象草多次刈割利用，雜交狼尾草生長后期一次性刈割利用。這樣既能避免品種單一的潛在風(fēng)險，又充分發(fā)揮蘇牧2號象草早期生長迅速、生物質(zhì)乙醇轉(zhuǎn)化效率高以及雜交狼尾草后期生物產(chǎn)量高的品種優(yōu)勢，同時避免了生物質(zhì)原料收獲期過度集中，延長了原料的收獲期，減少原料收獲壓力和貯存成本。

已有研究報道刈割頻次對象草和雜交狼尾草飼用品質(zhì)的影響［26－27］，還未見刈割對象草和雜交狼尾草能源利用潛力影響的相關(guān)研究，今后我們將進(jìn)一步開展這方面的研究。同時目前我們僅對蘇牧2號象草和雜交狼尾草的乙醇理論產(chǎn)量進(jìn)行了預(yù)測和比較，這可能與實際的生產(chǎn)有一定的差異，今后我們將進(jìn)一步開展象草和雜交狼尾草乙醇生產(chǎn)研究。

［1］ 侯新村，范希峰，武菊英，等.纖維素類能源草在京郊地區(qū)的經(jīng)濟效益與生態(tài)價值評價［J］.草業(yè)學(xué)報，2011，20（6）：12－17.

［2］ 代王瑩，郭和蓉，張興龍，等.一年生黑麥草制取燃料酒精發(fā)酵工藝的初步研究［J］.草業(yè)學(xué)報，2012，21（1）：220－228.

［3］ Nyambati E M，Sollenberger L E，Kunkle W E.Feed intake and lactation performance of dairy cows offered napiergrass supplemented with legume hay［J］.Livestock Production Science，2003，83（2）：179－189.

［4］ 岳輝，陳志彪，黃炎和.象草在花崗巖侵蝕劣地的適應(yīng)性及其水土保持效應(yīng)［J］.福建農(nóng)林大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2007，36（2）：186－189.

［5］ 寧連珍，蔣紅花.象草燒堿—AQ法制漿草紙試驗［J］.湖南造紙，2000，1：10－11.

［6］ 周定國，張曉偉，徐詠蘭，等.楊木/狼尾草復(fù)合中密度纖維板工藝研究［J］.林業(yè)科技開發(fā)，2007，21（5）：58－60.

［7］ 鐘小仙，佘建明，顧洪如，等.象草幼穗離體培養(yǎng)植株再生研究［J］.草業(yè)學(xué)報，2007，16（3）：43－48.

［8］ 鐘小仙，佘建明，顧洪如，等.培養(yǎng)基不同濃度NaCl對象草離體篩選的影響［J］.江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，5：145－147.

［9］ 鐘小仙，張建麗，佘建明，等.體細(xì)胞突變體篩選法獲得象草耐鹽植株［J］.江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報，2009，25（6）：1325－1329.

［10］ 陳鐘佃，張麗梅，黃秀聲，等.雜交狼尾草莖葉解剖結(jié)構(gòu)及其與主要生物學(xué)特性的聯(lián)系［J］.中國草地學(xué)報，2009，31（6）：39－43.

［11］ Takara D，Khanal S K.Green processing of tropical banagrass into biofuel and biobased products：an innovative biorefinery approach［J］.Bioresour Technology，2011，102（2）：1587－1592.

［12］ Ge X M，Burner D M，Xu J F，etal.Bioethanol production from dedicated energy crops and residues in Arkansas，USA［J］.Biotechnology Journal，2011，6（1）：66－73.

［13］ 張景強，林鹿，孫勇，等.纖維素結(jié)構(gòu)與解結(jié)晶的研究進(jìn)展［J］.林產(chǎn)化學(xué)與工業(yè)，2008，28（6）：109－114.

［14］ Himmel M E，Ding S Y，Johnson D K，etal.Biomass recalcitrance：engineering plants and enzymes for biofuels production［J］.Science，2007，315：804－807.

［15］ Sarath G，Dien B，Sarath A J，etal.Ethanol yields and cell wall properties in divergently bred switchgrass genotypes［J］.Bioresource Technology，2011，102：9579－9585.

［16］ Studera M H，DeMartinia J D，Davisb M F，etal.Lignin content in natural Populus variants affects sugar release［J］.Proceedings of the National Academy of Sciences USA，2011，108（15）：6300－6305.

［17］ Lorenz A J，Anex R P，Isci A，etal.Forage quality and composition measurements as predictors of ethanol yield from maize（ZeamaysL.）stover［J］.Biotechnology for Biofuels，2009，2（5）：doi：10.1186/1754－6834－2－5.

［18］ 楊勝.飼料分析及飼料質(zhì)量檢測技術(shù)（第一版）［M］.北京：北京農(nóng)業(yè)出版社，1993：58－63.

［19］ Zhao Y L，Dolat A，Steinberger Y.Biomass yield and changes in chemical composition of sweet sorghum cultivars grown for biofuel［J］.Field Crops Research，2009，111：55－64.

［20］ Godin B，Lamaudière S，Agneessens R，etal.Chemical characteristics and biofuels potentials of various plant biomasses：influence of the harvesting date［J］.Journal of the Science of Food and Agriculture，2013，93（13）：3216－3224.

［21］ Serapiglia M J，Humiston M C，Xu H W，etal.Enzymatic saccharification of shrub willow genotypes with differing biomass composition for biofuel production［J］.Front Plant Science，2013，doi：10.3389/fpls.2013.00057.

［22］ Li X，Ximenes E，Kim Y，etal.Lignin monomer composition affectsArabidopsiscell－wall degradability after liquid hot water pretreatment［J］.Biotechnol Biofuels，2010，3：27－33.

［23］ Simmons B A，Loque D，Ralph J.Advances in modifying lignin for enhanced biofuel production［J］.Current Opinion in Plant Biology，2010，13（3）：313－320.

［24］ 劉建寧，石永紅，王運琦，等.高丹草生長動態(tài)及收割期的研究［J］.草業(yè)學(xué)報，2011，20（1）：31－37.

［25］ Smale M，Jason H，Paul W H，etal.The contribution of genetic resources and diversity to wheat production in the Punjab of Pakistan［J］.American Journal of Agricultural Economics，1998，80：482－483.

［26］ 王靜，沈文彤，張?zhí)N薇，等.種植密度和刈割頻率對雜交狼尾草產(chǎn)量和品質(zhì)的影響［J］.草地學(xué)報，2010，18（4）：589－593.

［27］ 黃水珍，謝善松，饒寶蓉.不同刈割高度對南牧1號雜交象草產(chǎn)量與品質(zhì)的影響分析［J］.福建農(nóng)業(yè)科技，2012，（5）：69－71.