王 菲 陶林靜

（南陽(yáng)市中心醫(yī)院，河南 南陽(yáng) 473000）

兩種細(xì)菌鑒定法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果分析

王 菲 陶林靜

（南陽(yáng)市中心醫(yī)院，河南 南陽(yáng) 473000）

目的 對(duì)直接藥敏試驗(yàn)法與常規(guī)藥敏試驗(yàn)法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果進(jìn)行分析。方法 選取從2012年8月至2014年8月200例檢查患者的陽(yáng)性血液標(biāo)本（200份），分別采取直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)，對(duì)比兩種試驗(yàn)方法的符合率。結(jié)果 通過(guò)BACTEC9240系統(tǒng)檢測(cè)200份血液樣品，其中160份陽(yáng)性樣品。直接法檢出革蘭陰性球菌與革蘭陽(yáng)性桿菌符合率分別為85.00%與95.12%，對(duì)比常規(guī)法無(wú)明顯差異（P＞0.05）。結(jié)論 直接藥敏試驗(yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)均具有較高的符合率，但是直接藥敏試驗(yàn)時(shí)間短、操作方便，有利于血液細(xì)菌感染檢測(cè)。

常規(guī)藥敏試驗(yàn)；直接藥敏試驗(yàn)；血液；細(xì)菌

在臨床中，菌血癥與敗血癥對(duì)患者生命造成嚴(yán)重威脅，病死率較高[1,2]。因此，臨床診治重點(diǎn)為準(zhǔn)確的菌種鑒定與藥敏試驗(yàn)。最近幾年以來(lái)，濫用抗生素造成不同病菌敏感性與耐藥性產(chǎn)生變異，選取正確細(xì)菌鑒定方法，能使診斷準(zhǔn)確率得以提升，進(jìn)而提高臨床療效。藥敏試驗(yàn)主要的利用血液樣本中細(xì)菌檢測(cè)抗菌藥物敏感度，進(jìn)而鑒定細(xì)菌類型，方便快捷。本文主要對(duì)直接藥敏試驗(yàn)法與常規(guī)藥敏試驗(yàn)法在臨床血液檢驗(yàn)中的應(yīng)用效果進(jìn)行分析，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：選取從2012年8月至2014年8月收治的200例發(fā)熱且全身感染患者，均在發(fā)熱早期采集血液標(biāo)本，僅采集1次，即30 mL，共200份，血液樣本冷藏保存，及時(shí)送檢。樣本采集需注意對(duì)象是否曾接受治療或者服用藥物，是否存在凝血功能障礙，有無(wú)血液系統(tǒng)疾病。

1.2 方法

1.2.1 直接藥敏試驗(yàn)：將樣本直接放到BACTEC9240系統(tǒng)中，并進(jìn)行檢測(cè)與培養(yǎng)。檢測(cè)出陽(yáng)性樣本時(shí)，使用消毒注射器快速抽取陽(yáng)性樣本10 mL，將陽(yáng)性樣本放到無(wú)菌試管內(nèi)，細(xì)菌分離，1600 r/min離心，6 min后收集上層清液，2900 r/min離心，13 min后去除上清液，使用PBS進(jìn)行洗滌，沉淀兩次以后重懸。取懸液20 μL涂片，應(yīng)用革蘭染色，顯微鏡下倒放觀察。一旦革蘭陽(yáng)性菌產(chǎn)生鏈狀情況，第1次藥敏試驗(yàn)使用MH+6%羊血。在得出試驗(yàn)結(jié)果以后，選取酶，將菌液濃度調(diào)節(jié)至6.0×105cfu/L，并將其接種至NC21綜合板上，然后采取細(xì)菌鑒定與藥敏試驗(yàn)。普通菌種，MH平板中大概接種1滴～3滴的懸液，并且應(yīng)用無(wú)菌試紙涂抹均勻，貼于藥敏紙片，根據(jù)2005 NCCLSI標(biāo)準(zhǔn)判斷耐藥性以及敏感度。

1.2.2 常規(guī)藥敏試驗(yàn)：將所采集的陽(yáng)性血液樣本分別放置于血平板、巧克力平板以及麥康凱平板接種，于36 ℃下經(jīng)16～22 h。使用6.0% CO2孵育，將菌落涂于板上，采取革蘭染色。在得到檢測(cè)結(jié)果以后，選取酶，最后根據(jù)Walkaway40系統(tǒng)鑒定藥敏試驗(yàn)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析：數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析使用SPSS 13.0 軟件，計(jì)量資料采取t檢驗(yàn)，±標(biāo)準(zhǔn)差表示，計(jì)數(shù)資料采取χ2檢驗(yàn)，百分?jǐn)?shù)表示，P＜0.05，其差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

通過(guò)BACTEC9240系統(tǒng)檢測(cè)200份血液樣品，其中160份陽(yáng)性樣品。直接法檢出革蘭陰性球菌與革蘭陽(yáng)性桿菌符合率分別為85.00%與95.12%，對(duì)比常規(guī)法無(wú)明顯差異，P＞0.05，其差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。兩種方法菌種檢測(cè)符合率對(duì)比見(jiàn)表1。

表1 兩種方法菌種檢測(cè)符合率對(duì)比（例）

3 討 論

最近幾年以來(lái)，由于細(xì)菌耐藥性逐漸增加，菌血癥以及敗血癥等疾病逐漸上升，血液相關(guān)疾病患者病死率明顯提高[3,4]。有效且快速檢測(cè)方法，能及時(shí)對(duì)患者進(jìn)行確診，確保用藥合理性。在臨床中，血液檢驗(yàn)內(nèi)的細(xì)菌鑒定通常采取藥敏試驗(yàn)，不僅對(duì)藥敏試驗(yàn)有著嚴(yán)格的要求，同時(shí)創(chuàng)造試驗(yàn)條件難度大。目前，抗生素濃度梯度法、全自動(dòng)培養(yǎng)檢測(cè)儀、紙片擴(kuò)散法以及稀釋法在臨床藥敏試驗(yàn)檢驗(yàn)中得到廣泛應(yīng)用。本組研究，檢測(cè)主要應(yīng)用BACTEC9240系統(tǒng)，這一系統(tǒng)屬于全自動(dòng)血液培養(yǎng)系統(tǒng)，通過(guò)熒光探測(cè)對(duì)密封培養(yǎng)瓶中由于微生物代謝所造成的CO2或者是O2濃度改變進(jìn)行持續(xù)測(cè)定，并且檢測(cè)微生物的實(shí)際增殖狀況，在細(xì)菌其他標(biāo)本中的真菌、分支桿菌以及感染等自動(dòng)培養(yǎng)系統(tǒng)與血液檢測(cè)中得到普遍應(yīng)用。在采取BACTEC9240系統(tǒng)進(jìn)行檢測(cè)以后，通過(guò)血液培養(yǎng)的陽(yáng)性標(biāo)本中所采取的兩種試驗(yàn)方法在細(xì)菌鑒定結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，對(duì)于革蘭陰性桿菌以及革蘭陽(yáng)性球菌的鑒定符合率比較高，同時(shí)發(fā)現(xiàn)腸桿菌鑒定符合率是其中最高的。這個(gè)系統(tǒng)不僅對(duì)于革蘭陰性桿菌以及革蘭陽(yáng)性球菌的鑒定或者是檢測(cè)較為適合，對(duì)于腸桿菌也同樣適合，研究結(jié)果顯示，通過(guò)BACTEC9240系統(tǒng)檢測(cè)200份血液樣品，其中160份陽(yáng)性樣品。直接法檢出革蘭陰性球菌與革蘭陽(yáng)性桿菌符合率分別為85.00%與95.12%，對(duì)比常規(guī)法無(wú)明顯差異（P＞0.05），這說(shuō)明這一系統(tǒng)可以替代常規(guī)藥敏試驗(yàn)?？偠灾苯铀幟粼囼?yàn)與常規(guī)藥敏試驗(yàn)均具有較高的符合率，但是直接藥敏試驗(yàn)時(shí)間短、操作方便，有利于血液細(xì)菌感染檢測(cè)，在各級(jí)醫(yī)療單位均可運(yùn)用。

[1] 莊華君,金映川,楊旭.API 20E、VITEK-32在臨床細(xì)菌鑒定中的應(yīng)用[J].中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué),2011,3(4):198-200.

[2] 陳歡歡,文怡,劉根焰,等.血培養(yǎng)陽(yáng)性標(biāo)本直接細(xì)菌鑒定和藥敏中應(yīng)用分離膠試管的方法探討[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志,2011,3 (15):143-145.

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