楊穎，李一清，徐佳萍，曲勃，邢秀梅※

(1．中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所吉林省特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物分子生物學(xué)省部共建實(shí)驗(yàn)室，長(zhǎng)春 130112； 2．長(zhǎng)春職業(yè)技術(shù)學(xué)院，長(zhǎng)春 130021)

育成期是幼齡水貂的生長(zhǎng)發(fā)育期，這一時(shí)期的水貂生長(zhǎng)發(fā)育旺盛，體長(zhǎng)和體重增加速度快，對(duì)能量需要量較高[1]。因此，飼糧應(yīng)充分保證幼貂機(jī)體快速生長(zhǎng)發(fā)育的能量需要。如果飼糧能量供給不足，會(huì)導(dǎo)致生長(zhǎng)發(fā)育緩慢或停止，進(jìn)而會(huì)導(dǎo)致一些疾病的產(chǎn)生。血清生化指標(biāo)在一定程度上反映動(dòng)物機(jī)體的代謝機(jī)能和健康狀況，也是進(jìn)行疾病診斷的一個(gè)重要途徑。近年來，國(guó)內(nèi)、外關(guān)于營(yíng)養(yǎng)因素對(duì)毛皮動(dòng)物的血清指標(biāo)影響有些報(bào)道，但能量水平對(duì)水貂血清生化指標(biāo)的影響卻鮮有報(bào)道[2～5]。本研究以水貂為研究對(duì)象，通過配制不同能量水平的飼糧，研究其對(duì)水貂生長(zhǎng)性能和血清生化指標(biāo)的影響，旨在探討水貂飼糧能量需要與機(jī)體能量代謝相關(guān)血清指標(biāo)的相關(guān)性，為科學(xué)、合理設(shè)計(jì)育成期水貂飼料配方提供科學(xué)的依據(jù)和參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)日糧

設(shè)計(jì)8種水貂干粉料試驗(yàn)日糧，能量水平分別為13.0 MJ/kg(A組)、13.5MJ/kg(B組)、14.0MJ/kg(C組)、14.5MJ/kg(D組)、15.0MJ/kg(E組)、15.5MJ/kg(F組)、16.0MJ/kg(G組)、16.5MJ/kg(H組)。試驗(yàn)飼糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分見表1。

表1試驗(yàn)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)成分(風(fēng)干基礎(chǔ))

Table1compositionandnutrientlevelsofexperimentaldiets(dry matter，%)

項(xiàng) 目Items組 別 GroupsABCDEFGH原料Ingredients膨化玉米Extrudedcorn4023723523222922552319豆粕Soybeanmeal99664553545玉米蛋白粉Cornproteinmeal78889999魚粉Fishmeal1312151616161717肉骨粉Bonemeatmeal17517181717171717乳酪粉Cheesemeal657555555羽毛粉Hydrolyzedfeathermeal111115151515血粉Driedblood11111121212水貂預(yù)混料Premixofmink111111111大豆油Soybeanoil3691215182124賴氨酸Lysine0303030303030303蛋氨酸Methionine0303030303030303食鹽Salt020202020202202總計(jì)Total100100100100100100100100營(yíng)養(yǎng)水平Nutrientlevels2粗蛋白CP32663234324332373250325032223231粗脂肪EE8191115150617812041235826082906代謝能ME(MJ/kg)312571314138114411500155716191675賴氨酸Lys168165165166164164164166蛋氨酸Met088087089090090090091091鈣Ca305297312306305306308309總磷TP205197209208206206208207

注：1.每千克預(yù)混料含有VA200 000IU，VD340 000IU，VE5000IU，VB112mg，VB2200mg，VB6200mg，VB122.5mg，VK340mg，VC7500mg，煙酸500mg，泛酸800mg，葉酸100mg，膽堿10 000mg，生物素7.5mg，F(xiàn)e 2000mg，Cu 500mg，Mn 400mg，Zn 1500mg，I 15mg，Se 5mg，Co 7.5mg；2.粗蛋白、粗脂肪、鈣、總磷為測(cè)定值，其它為計(jì)算值；3.代謝能是根據(jù)消化率、總能以及狗的氮矯正公式[NRC 2005]得出的推算值，其他為測(cè)定值。

Note:Contained the following per kg of premix VA200 000IU,VD340 000IU,VE5000IU,VB112mg,VB2200mg,VB6200mg,VB122.5mg,VK340mg,VC7500mg,niacin acid 500mg,pantothenic acid 800mg,folic acid 100mg,choline 10 000mg,biotin 7.5mg,Fe 2000mg,Cu 500mg,Mn 400mg,Zn 1500mg,I 15mg,Se 5mg,Co 7.5mg;2.Values of CP,EE,Ca and TP were measured,others were calculated;3.ME calculated according to the digestibility coefficients achieved,GE and N-correction from Nutrient requirements of dogs[NRC 2005].

1.2 主要試劑及儀器

總蛋白試劑盒、白蛋白試劑盒、葡萄糖試劑盒、總膽固醇試劑盒、直接高密度脂蛋白試劑盒、直接低密度脂蛋白試劑盒(北京中生北控生物科技有限公司)，AMS-18型全自動(dòng)生化分析儀(北京北方奧普森科技發(fā)展有限公司)。

1.3 試驗(yàn)動(dòng)物及飼養(yǎng)管理

2011年7月初，在中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院特產(chǎn)研究所毛皮基地(農(nóng)業(yè)部長(zhǎng)白山野外觀測(cè)實(shí)驗(yàn)站)選擇60日齡192只體重(♂1.04±0.06kg、♀0.76±0.03kg)相近、健康水貂，隨機(jī)分成8組，每組24只(公、母各半)，單籠飼養(yǎng)。8組水貂分別飼喂代謝能為13.0MJ/kg、13.5MJ/kg、14.0MJ/kg、14.5MJ/kg、15.0MJ/kg、15.5MJ/kg、16.0MJ/kg、16.5MJ/kg的試驗(yàn)日糧。預(yù)飼期7d，正式飼喂50d。每天早、晚各飼喂1次，自由飲水，每15d稱重1次。

1.4 血液采集及處理

每組選擇7只公貂、7只母貂于晨飼前剪趾采血5mL，置于一次性真空采血促凝管中，立即顛倒混合5次～8次，室溫靜置30min，3000r/min離心15min，取上層血清分裝于1.5mL滅菌Eppondorf管中，保存于-80℃?zhèn)溆谩?/p>

1.5 檢測(cè)原理及分析方法

將保存在-80℃的血清樣品置于4℃冰箱中緩慢融化。同時(shí)參照各試劑盒說明書進(jìn)行血清生化指標(biāo)的檢測(cè)。具體測(cè)試指標(biāo)及原理如下：

總蛋白(Total Protein，TP)：雙縮脲法；白蛋白(Albumin，Alb)：溴甲酚綠法；總膽固醇(Cholesterol，TC)：酶比色法；直接高密度脂蛋白膽固醇(Direct High Density Cholesterol，DHDL-C)、直接低密度脂蛋白膽固醇(Direct Low Density Cholesterol，DLDL-C)：清除法；葡萄糖(Glucose，Glu)：葡萄糖氧化酶法。

1.6 數(shù)據(jù)處理

2 結(jié)果

2.1 能量水平對(duì)育成期水貂生長(zhǎng)性能的影響

水貂試驗(yàn)?zāi)w重差異極顯著(P<0.01)。公貂試驗(yàn)?zāi)w增重明顯高于母貂，公貂的A組(13.0MJ/kg)顯著低于其他各組，母貂G組(16.0MJ/kg)的體重顯著高于其他各組(表2)。

表2育成期水貂體重累積生長(zhǎng)結(jié)果

Table2GrowthofbodyweightinminksofgrowingPeriod(kg)

性 別Sex日 齡(d)A組B組C組D組E組F組G組H組公♂75102±007103±005104±008103±006104±006103±007104±005105±00690115±006B118±007120±007122±007120±008126±007A122±008126±009A105126±006C134±009141±008146±008144±017149±009A153±008A152±009A母♀75075±003076±003076±003076±003076±004076±004076±004076±00490076±004C076±004C080±004083±004086±006A084±004086±005082±003105079±005C080±004C086±004091±004093±008092±005094±007A091±006

注：同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)不同大寫字母表示差異極顯著(P<0.01)，不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，未標(biāo)字母表示差異不顯著(P>0.05)，下表同。

Note:In the same row,values with different capital letter superscripts mean very significant difference(P<0.01),small letter superscripts mean significant difference(P<0.05),while no letter superscripts mean no significant difference(P>0.05),the same as below.

2.2 能量水平對(duì)育成期水貂血清生化指標(biāo)的影響

2.2.1公貂血清生化指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果由表3可以看出，公貂的血清白蛋白F組、E組極顯著高于B組(P<0.01)，G組、A組、H組、D組、C組、B組之間差異不顯著(P>0.05)；血清總膽固醇G組、F組、H組顯著高于E組、C組、D組、B組、A組(P<0.05)，G組、F組、H組之間及E組、C組、D組、B組、A組之間差異不顯著(P>0.05)；血清總蛋白F組顯著高于C組、A組、B組(P<0.05)，而H組、G組、E組、D組之間差異不顯著(P>0.05)；血清葡萄糖各組之間沒有顯著差異(P>0.05)；直接高密度脂蛋白膽固醇H組顯著高于C組、A組(P<0.05)，而F組、E組、G組、D組、B組之間沒有顯著差異(P>0.05)；直接低密度脂蛋白膽固醇G組、H組、D組顯著高于F組、C組、E組、A組、B組，各處理組之間存在顯著差異(P<0.05)，而G組、H組、D組之間及F組、C組、E組、A組、B組之間差異不顯著(P>0.05)；血清總膽固醇/直接高密度脂蛋白膽固醇的比值中G組顯著高于C組、B組、A組、H組、E組、D組、F組(P<0.05)，C組、B組、A組、H組、E組、D組、F組之間沒有顯著差異(P>0.05)。

表3公貂血清生化指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果

Table3Testingresultsofserumparametersmaleminks

組別Groups項(xiàng) 目ItemsAlb(g/L)TC(mmol/L)TP(g/L)Glu(mmol/L)DHDL-C(mmol/L)DLDL-C(mmol/L)TC/DHDL-CA1475±025bc626±056Cb5118±518ab617±090 766±059b 292±022Cb 082±002bB1421±020Bc635±013Cb5110±496Aab620±052785±039278±042Cb083±003bC1448±069c663±034Cb5151±159615±101777±059b312±034BCb084±003bD1453±103c656±054Cb5298±404Bc581±132834±048444±110ABa079±006BbE1558±106ab683±041BCb5352±140bc691±147869±057292±032Cb079±002BbF1568±071Aa752±076ABa5756±488Aa589±064877±176336±036BCb078±009BbG1478±046bc786±068Aa5370±340640±073855±031526±126Aa093±006AaH1461±076c746±019ABa5393±189697±081901±138a487±154Aa082±011Bb

2.2.2母貂血清生化指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果由表4可以看出，母貂的血清白蛋白F組顯著高于A組(P<0.01)，B組、C組、D組之間差異不顯著(P<0.05)；血清總膽固醇各處理組之間存在極顯著差異(P<0.01)，依次為H組、F組、G組>D組>A組、B組。H組、F組、G組之間，E組、D組之間以及C組、A組、B組之間差異不顯著(P>0.05)；血清總蛋白G組、F組、D組、E組、H組、C組與A組、B組差異極顯著(P<0.01)，D組、E組、H組之間及A組、B組之間差異不顯著(P>0.05)；血清葡萄糖F組顯著高于A組(P<0.05)，D組、B組、G組、C組、H組之間差異不顯著(P>0.05)；直接高密度脂蛋白膽固醇各處理組之間存在極顯著差異(P<0.01)，依次為G組、H組、F組>C組、E組、D組、A組、B組。G組>F組>C組>A組、B組差異顯著(P<0.05)，H組與F組之間、G組與H組之間、C組、E組、D組之間及E組、D組、A組、B組之間差異不顯著(P>0.05)；直接低密度脂蛋白膽固醇(DLDL-C)指標(biāo)中G組、H組顯著高于E組、D組、A組、C組、F組、B組(P<0.05)。G組、H組之間及E組、D組、A組、C組、F組、B組之間差異不顯著(P>0.05)；血清總膽固醇/直接高密度脂蛋白膽固醇(TC/DHDL-C)的比值中各處理組之間差異顯著(P<0.05)，依次為E組>F組>G組。E組、D組、A組之間，A組、B組、F組之間，F(xiàn)組、C組、H組之間及C組、H組、G組之間差異不顯著(P>0.05)。

表4母貂血清生化指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果

Table2Testingresultsofserumparametersfemaleminks

組別Groups項(xiàng) 目ItemsAlb(g/L)TC(mmol/L)TP(g/L)Glu(mmol/L)DHDL-C(mmol/L)DLDL-C(mmol/L)TC/DHDL-CA1481±077c656±058Dd4224±337b565±042c 697±057Bd 207±063Bb094±009ABCabcB1552±112B636±042Dd4616±049b639±065694±048Bd169±028Bb092±003ABCDbcdC1549±078679±093CDd5536±530b596±026bc825±173Bc179±017Bb084±013CDEdefD1537±104bc772±079BCc5901±607672±117787±046Bcd224±034b098±007ABabE1605±076Aab823±068ABbc5890±237698±096ab802±042Bcd224±056b102±005AaF1658±094Aa903±068Aa5978±255a728±152a1040±126Ab171±032Bb088±009BCDEcdeG1513±127bc882±082Aab6109±416631±0741156±116Aa291±082Aa077±004EfH1620±042ab910±034Aa5699±162584±165bc1119±108Aab290±050Aa082±007DEef

3 討論

3.1 飼糧能量水平對(duì)育成期水貂體重的影響

試驗(yàn)組60日齡時(shí)體重相同，隨著日齡的增加，體重差異越來越大；到105日齡時(shí)，G組水貂的生長(zhǎng)強(qiáng)度顯著大于其他各組，G組母貂體重高于A組150g，G組公貂的體重高于A組270g。能量過高造成動(dòng)物的采食量過低，導(dǎo)致水貂從飼料中獲得的其他營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)不足，從而影響動(dòng)物的生長(zhǎng)性能。由此可以表明，能量在一定范圍內(nèi)可提高水貂體重，而超出此范圍反而抑制了其生長(zhǎng)。依照NRC(1982)[6]，公貂成長(zhǎng)所需的能量比母貂高33%，公貂成長(zhǎng)所需代謝能為17.07MJ/kg DM，母貂為16.44MJ/kg DM。

3.2 飼糧能量水平對(duì)血清蛋白質(zhì)代謝的影響

血清生化指標(biāo)的變化是組織細(xì)胞通透性和機(jī)體新陳代謝機(jī)能發(fā)生改變的反應(yīng)[7]。血清中總蛋白、白蛋白的含量變化在一定程度上反映了動(dòng)物機(jī)體對(duì)日糧蛋白質(zhì)吸收和代謝程度。血清中TP含量升高是蛋白質(zhì)代謝旺盛的體現(xiàn)，有利于機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收和利用，從而降低飼料消耗[8]。

本試驗(yàn)中各組TP公貂都略高于母貂，都隨日糧能量水平的升高呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)。公貂在E組、F組沒有顯著差異(P>0.05)，但F組(代謝能為15.5MJ/kg)達(dá)到最高；母貂G組、F組沒有顯著差異，但G組(代謝能為16.0MJ/kg)最高。血清Alb也是機(jī)體蛋白質(zhì)的一個(gè)來源，它能夠增加血容量和維持血漿膠體滲透壓，同時(shí)有運(yùn)輸和解毒的作用，能促使組織蛋白和血漿蛋白之間的相互轉(zhuǎn)化，是衡量肝臟功能和機(jī)體營(yíng)養(yǎng)狀況的重要指標(biāo)[9]。周勤飛等[7](2010)對(duì)生長(zhǎng)豬的研究結(jié)果顯示，血清中TP、Alb指標(biāo)隨日糧消化能水平的升高呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)。本試驗(yàn)的研究結(jié)果與之一致，水貂飼喂不同能量水平的日糧后，血清Alb含量母貂各組都明顯高于公貂，且均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，公貂、母貂均在日糧F組(代謝能為15.5MJ/kg)達(dá)到最高。

3.3 飼糧能量水平對(duì)血清血糖和血脂代謝的影響

血清中的Glu是動(dòng)物機(jī)體內(nèi)不可缺少的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，不僅為動(dòng)物大腦、神經(jīng)系統(tǒng)、肌肉、脂肪組織等的代謝提供能源，而且還是合成脂肪代謝所需的還原性輔酶(NADPH)的重要物質(zhì)[10]。Ligt等[11](2002)研究發(fā)現(xiàn)，處于生長(zhǎng)期的豬飼喂含不同能量水平日糧后，血糖濃度隨消化能水平提高而上升，而采食量下降。本試驗(yàn)?zāi)铬跹撬诫S日糧代謝能水平的升高出現(xiàn)先升高后降低趨勢(shì)，F(xiàn)組(代謝能為15.5MJ/kg)最高；公貂血糖沒有顯著差異(P>0.05)，但H組(代謝能為16.5MJ/kg)最高。

血脂是指血漿或血清中的脂類物質(zhì)，主要包括甘油三酯(TG)、膽固醇、磷脂(PL)和非酯化脂肪酸(NEFA)。血脂是機(jī)體賴以生存的重要基本物質(zhì)，它在體內(nèi)過多或過少將導(dǎo)致機(jī)體代謝的不平衡。血脂水平可以間接反映機(jī)體不同的生理或病理狀態(tài)[12]。林映才等[13](2003)用不同代謝能水平的日糧飼喂育肥豬發(fā)現(xiàn)，血清TC隨代謝能水平的升高呈上升趨勢(shì)。Adam等[14](2008)用豆油飼喂小鼠也發(fā)現(xiàn)，血清TC隨日糧膽固醇的增加而增加。本試驗(yàn)結(jié)果與上述結(jié)果一致，水貂血清TC隨日糧代謝能升高而升高，且母貂明顯高于同組公貂，其中母貂血清TC在代謝能為16.5MJ/kg時(shí)達(dá)到最高，而公貂則代謝能為16.0MJ/kg時(shí)最高。高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)是膽固醇的主要運(yùn)輸者，HDL-C通過膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)，并且把外周組織中衰老細(xì)胞膜上的膽固醇以及血漿中的膽固醇運(yùn)回肝臟代謝，而LDL-C是向組織轉(zhuǎn)運(yùn)肝臟合成的內(nèi)源性膽固醇[15]。本試驗(yàn)結(jié)果顯示，HDL-C和LDL-C都隨能量水平的升高呈上升趨勢(shì)，血清HDL-C母貂G組、H組、F組之間沒有顯著差異(P>0.05)，代謝能16.5MJ/kg為最高。公貂H組、F組、E組之間沒有顯著差異(P>0.05)，代謝能16.0MJ/kg為最高；血清LDL-C母貂C組、F組、B組之間沒有顯著差異(P>0.05)，代謝能13.5MJ/kg為最低，公貂E組、A組、B組之間差異不顯著(P>0.05)，代謝能13.5MJ/kg為最低。

4 結(jié)論

通過本研究的結(jié)果得出，隨著日糧能量水平的提高，水貂血清中的TC、Glu、HDL-C、LDL-C含量也隨著升高；血清中TP、Alb隨飼喂日糧濃度的升高出現(xiàn)先升高后降低的結(jié)果。水貂可能在拐點(diǎn)處(F組，代謝能為15.5MJ/kg)蛋白質(zhì)的消化吸收效果最好；育成期水貂體重隨著能量水平的提高也呈現(xiàn)先升高后降低的結(jié)果，其中G組(16.0MJ/kg)最高。

通過以上的血清生化指標(biāo)可推斷，育成期日糧代謝能水平公貂不低于13.5MJ/kg、母貂不低于14.0MJ/kg能夠滿足水貂的基本能量需求。

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