李 斌

(黑龍江省黑河市藥品檢驗所，黑龍江黑河164300)

生脈飲(人參方)為《中國藥典2010年版一部》收錄的品種，由紅參、五味子、麥冬組成，有益氣復脈、養(yǎng)陰生津的功效，其質量標準只有鑒別、檢查項，無含量測定項［1］。為確保生脈飲藥品質量，我們對生脈飲(人參方)的質量標準控制進行摸索，采用高效液相色譜法(HPLC)測定制劑中五味子醇甲的含量，方法如下。

1 儀器與試藥

日本LC－2010AHT高效液相色譜儀，甲醇為色譜純，五味子醇甲對照品由中國藥品生物制品檢定所提供(批號:110857－200709)，五批生脈飲(人參方)分別由北京同仁堂藥廠提供批號為:20120322、20120324、20120326、20120921、20120923，生脈飲(人參方)五味子陰性由黑河三精藥廠制備(除五味子不加，處方其他藥按工藝生產)。

2 方法與結果

2.1 波長選擇:取五味子醇甲對照品溶液，在紫外區(qū)200～400 nm進行掃描，確定最大吸收波長為250.1 nm。

2.2 色譜條件及專屬性:色譜柱為AgilentC18(250 mm×4.6 nm);流動相為甲醇 － 水(58:42);流速 1.0 mL/min;柱溫 30 ℃;檢測波長 250 nm［2］。

2.3 五味子醇甲對照品溶液制備:精密稱取五味子醇甲對照品12.18 mg，置50 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，精密吸取3.0 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得作為對照品溶液。(制成每1 mL含0.073 mg的溶液)，即得。見圖1。

2.4 供試品溶液制備:精密量取裝量差異項下的本品25 mL，用乙酸乙酯振搖提取5次，30 mL/次，合并乙酸乙酯液，蒸干，殘渣加甲醇適量使溶解，轉移至10 mL量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0.45 μm)濾過，作為供試品溶液。見圖2。

2.5 五味子陰性溶液制備:以相同的處方比例，按生脈飲(人參方)制備工藝制備不含五味子藥材的陰性樣品，精密吸取此樣品25 mL，按供試品溶液的制備方法制備不含五味子的陰性溶液。見圖3。

2.6 線性關系考察:精密吸取五味子醇甲對照品溶液1、5、10、15、20、25 μL 在上述色譜條件下重復進樣 2 次，測定峰面積值，以峰面積平均值和濃度進行回歸處理，得回歸方程為:Y=1948084X+5295.66，r=1.0000。線性范圍在 0.073 ～1.825 μg 呈良好的線性關系。專屬性:

圖1 五味子醇甲對照品溶液色譜圖

圖2 供試品溶液色譜圖

圖3 五味子陰性溶液色

2.7 系統(tǒng)適應性:精密吸取五味子醇甲對照品溶液10 μL，重復進樣5次，測定結果RSD為0.8%。

2.8 穩(wěn)定性試驗:取批號為20120322供試品溶液，每隔4 h進樣10 μL，測定五味子醇甲峰面積值，共測定6次，測定結果 RSD 為0.9%

2.9 精密度(重復性)試驗:取批號為20120322供試品溶液進行6次平行試驗，測定五味子醇甲的含量，每次進樣量10 μL，測定結果平均值每毫升含五味子醇甲為0.022 mg(RSD 為 0.9%)。

2.10 準確度試驗:采用加樣回收法，精密稱取進行重復性試驗的生脈飲(人參方)批號為20120322樣品10 mL，精密量取3 mL五味子醇甲對照品溶液加入，按供試品制備法制備，按五味子醇甲含量測定方法進行測定，計算加樣回收率，結果見表1。

表1 回收率試驗結果

2.11 樣品含量測定:取各供試品溶液，按上述色譜分離條件，進樣10 μL，測定五味子醇甲峰面積，計算含量，結果見表2。

3 小結與討論

生脈飲(人參方)中五味子為處方中臣藥，有收斂固色、益氣生津、補腎寧心的功效，臨床多用于抗肝損傷、抗氧化、增強代謝、中樞鎮(zhèn)靜等，主要成分為五味子中木脂素(五味子醇甲、五味子乙素等)［3］，選擇五味子醇甲進行對處方中五味子含量評價，是因為南五味子中五味子醇甲含量非常低，所以選擇五味子醇甲作為含量評價，可以防止投料時南北五味子混用。對五味子中五味子醇甲進行了含量測定，可以控制生脈飲(人參方)的質量。

表2 樣品測定結果 (n=2)

本實驗采用高效液相色譜法測定有效成分五味子醇甲的含量，本法能達到有效分離各組分的目的，具有靈敏度高、操作簡單、分離效果好、陰性無干擾等優(yōu)點，試驗證明五個批號生脈飲(人參方)中五味子醇甲含量均值為0.023 mg/mL，根據制劑含量方法學驗證中范圍規(guī)定為平均值的80%，推算生脈飲(人參方)中五味子醇甲含量應不低于0.018 mg/mL。

［1］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部［S］.北京:中國科技出版社，2010:653.

［2］ 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典一部［S］.北京:中國科技出版社，2010:760.

［3］ 肖培根.新編中藥志第二卷［M］.北京:化學工業(yè)出版社，2002:123.