黃毅（安徽省淮南市農(nóng)業(yè)科學研究所，安徽淮南232008）

甘藍新組合0807 原種組培快速繁育研究

黃毅
（安徽省淮南市農(nóng)業(yè)科學研究所，安徽淮南232008）

隨著甘藍原種繁殖代數(shù)的增加，原種的生活力下降，穩(wěn)定性降低。利用組培方法進行原種繁育，可減少越冬春甘藍原原種繁殖代數(shù)，提高原種的生活力，保持親本多年多代一致性。我國20世紀50年代就開展了甘藍的雜優(yōu)利用研究[1]。20世紀70年代后期，甘藍的雜優(yōu)利用研究得到了快速發(fā)展。1983年底，甘藍的雜種一代品種覆蓋面積已達到栽培面積的80%。自20世紀90年代以來，我國的結(jié)球甘藍育種研究取得了長足的發(fā)展，筆者在前人研究基礎(chǔ)上開展了甘藍原種組培快速繁育試驗，旨在為甘藍快速繁殖提供借鑒。

1 材料與方法

1.1 材料

安徽省淮南市農(nóng)業(yè)科學研究所自育甘藍新組合0807親本腋芽080a與070b。

1.2 方法

試驗于2010年在安徽省淮南市農(nóng)業(yè)科學研究所生物育種中心進行。

1.2.1 外植體消毒。將0807親本腋芽經(jīng)75%酒精浸泡30 s，無菌水沖洗3次，再用0.1%升汞消毒8 min，無菌水沖洗5次，接種于MS培養(yǎng)基上，在無菌培養(yǎng)室內(nèi)25℃恒溫光照培養(yǎng)。

1.2.2 莖尖誘導培養(yǎng)。切取培養(yǎng)10 d后的無菌苗莖尖作為誘導材料。接種在MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L培養(yǎng)基上，pH為5.8，蔗糖30 g/L，瓊脂6.5 g/L，培養(yǎng)溫度25℃，光照時間12 h/d，光照強度1 000～1 200 lx。

1.2.3 愈傷組織繼代培養(yǎng)。誘導培養(yǎng)基中生成的愈傷組織25 d后轉(zhuǎn)瓶接入新鮮培養(yǎng)基繼代培養(yǎng)。

1.2.4 不定芽分化。誘導培養(yǎng)基中生成的愈傷組織進行繼代培養(yǎng)25d有不定芽生成。將其接種于分化培養(yǎng)基①MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L及培養(yǎng)基②MS+6-BA 2.0 mg/L上進行培養(yǎng)，pH為5.8，蔗糖30 g/L，瓊脂6.5 g/L，培養(yǎng)溫度23℃，光照時間12 h/d，光照強度1 000～1 800 lx。以后每隔25 d進行1次繼代培養(yǎng)。

1.2.5 生根培養(yǎng)。將幼苗接種于生根培養(yǎng)基1/2MS+ NAA 0.5 mg/L上，pH為5.8，蔗糖30 g/L，瓊脂6.2 g/L，培養(yǎng)溫度25℃，光照時間12 h/d，光照強度1 000～1 800 lx。

1.2.6 煉苗。將生根后的瓶苗移出培養(yǎng)室，開瓶后常溫培養(yǎng)3 d，取出小苗清洗凈根部培養(yǎng)基后移栽于基質(zhì)中培養(yǎng)。

1.2.7 數(shù)據(jù)處理。試驗3次重復，于6月13日對組培親本及常規(guī)親本進行考種，測量小區(qū)種株種子產(chǎn)量，以常規(guī)繁殖的親本作對照，觀察植株生長狀況，測量植株莖粗，統(tǒng)計10株各級分枝數(shù)，取其平均值。

2 結(jié)果與分析

2.1 組培對0807親本采種量的影響

常規(guī)繁育方式因為在溫度、濕度、光照等方面無法進行精確控制，導致繁育產(chǎn)量低，增加了繁育成本，不符合現(xiàn)代育種要求，而組培方式卻可以嚴格控制親本的生長環(huán)境，從而達到增加繁育產(chǎn)量、降低繁育成本的目的。由表1可以看出，2個親本利用組培繁殖的產(chǎn)量明顯高于常規(guī)繁殖的產(chǎn)量，080a親本組培繁育產(chǎn)量高出常規(guī)繁殖16.5%，070b親本組培繁育產(chǎn)量高出常規(guī)繁殖39.8%。結(jié)果表明，組培繁殖苗產(chǎn)量遠高于常規(guī)繁殖苗，原種繁殖系數(shù)增加，原原種繁殖供給提高，繁殖成本降低，有效擴大了雜交一代種子生產(chǎn)供應能力[2]。

2.2 組培對0807親本后代種子發(fā)芽率的影響

常規(guī)繁育方式后代種子普遍存在發(fā)芽率低、發(fā)芽勢弱等問題，發(fā)芽勢低會導致幼苗生命力弱、出苗率低、用種量增加，但試驗結(jié)果表明，組培方式能有效解決發(fā)芽率低、發(fā)芽勢弱等問題。由表2可以看出，組培苗種子千粒重、發(fā)芽勢、發(fā)芽率均高于對照，特別是發(fā)芽勢較對照有大幅提高，080a和070b組培親本種子發(fā)芽勢分別高出8.6%、8.4%，發(fā)芽率分別高出2.4%、3.9%。由此可見，組培方式親本后代生活力強，發(fā)芽率高，對品種親本繁育起到了積極作用[3]。

表1 不同繁育方式條件下親本繁育產(chǎn)量

表2 不同繁育方式親本種子芽發(fā)率

2.3 組培對0807親本后代種苗生長的影響

由表3可以看出，組培苗生長勢較強，株高、分枝及花期均較對照有所增加。經(jīng)觀察，組培苗后代表現(xiàn)生長勢強，植株高大、呈寶塔型、有效分枝多，常規(guī)繁殖的長勢弱、枝條叢生、有效分枝少[2]。

表3 不同繁育方式后代種苗生長勢

3 結(jié)論與討論

隨著原種繁殖代數(shù)的增加，原種的生活力下降，穩(wěn)定性降低。利用組培方法進行原種繁育，可減少越冬春甘藍原原種繁殖代數(shù)，提高原種的生活力，保持親本多年多代一致性[4-5]。通過對新組合0807誘導培養(yǎng)、繼代培養(yǎng)、分化培養(yǎng)、生根培養(yǎng)、煉苗移栽等手段進行組織培養(yǎng)觀察發(fā)現(xiàn)，品種親本組培苗成活率高達95%以上，親本后代發(fā)芽率、發(fā)芽勢比常規(guī)培育提高明顯，親本后代組培苗長勢強，植株高大，親本產(chǎn)量有顯著提高，遠優(yōu)于直接從大田獲得的外植體。利用組織培養(yǎng)技術(shù)可以對品種大量快速繁殖，節(jié)約原種和原原種繁育時間，降低生產(chǎn)和消費成本。科學，2004（5）：31-34.

[2]石曉云.結(jié)球甘藍的組織培養(yǎng)與快繁研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學，2010 （32）：18077-18078.

[3]石淑穩(wěn)，周永明，吳江生.甘藍型油菜試管苗人工低溫春化方法研究[J].西南農(nóng)業(yè)學報，2004（5）：584-587.

[4]祝立芳，劉麗，周廣柱，等.羽衣甘藍離體培養(yǎng)研究[J].沈陽農(nóng)業(yè)大學學報，2003，34（4）：249-251.

[5]余建明，蔡小寧，朱楨，等.結(jié)球甘藍的離體再生及基因轉(zhuǎn)化條件的研究[J].江蘇農(nóng)業(yè)學報，1996，12（3）：6-9.

（責任編輯 張楊林）

[1]李曉明，李曉紅，馮輝.結(jié)球甘藍的雜種優(yōu)勢利用進展[J].遼寧農(nóng)業(yè)

Study on Rapid Tissue Culture Propagation of Protospecies of New Cabbage Combination 0807

[目的]為甘藍快速繁殖提供借鑒。[方法]對甘藍新組合0807原種進行組織培養(yǎng)研究，探討組織培養(yǎng)對0807親本后代種子發(fā)芽率及種苗生長等指標的影響。[結(jié)果]通過組織培養(yǎng)觀察發(fā)現(xiàn)，品種親本組培苗成活率高達95%以上；親本后代發(fā)芽率、發(fā)芽勢對比常規(guī)培育提高明顯；親本后代組培苗長勢強，植株高大；親本產(chǎn)量有顯著提高，遠優(yōu)于直接從大田獲得的外植體。[結(jié)論]利用組織培養(yǎng)技術(shù)可以對品種大量快速繁殖，節(jié)約原種和原原種繁育時間，降低生產(chǎn)和消費成本。

甘藍；組培；繁育

HUANG Yi(Huainan Institute of Agricultural Sciences,Huainan,Anhui 232008)

[Objective]The aim was to provide a reference for rapid propagation of cabbage.[Method]The new combination of cabbage 0807 seed was studied by tissue culture,to investigate the effect of tissue culture of germination rate and seedling growth of 0807 parent offspring seeds.[Result]Observed by tissue culture,breed parent seedling survival rate reached more than 95%.Parent progeny germination rate and germination potential increased significantly compared to conventional cultivation.Parent progeny seedlings grew strongly, had tall plant height.And tissue culture could significantly improve the parents'yield.The explants were far superior to that obtained directly from the field. [Conclusion]The rapid propagation of variety could be obtained,by using the technique of tissue culture.Seed and seed breeding time could be saved,and the cost of production and consumption could be reduced.

Cabbage;Tissue culture;Breeding

S565.4

A

2095-0896（2014）05-003-02

黃毅（1982-），男，安徽壽縣人，農(nóng)藝師，碩士，從事園藝、蔬菜栽培及育種研究，E-mail：77788175@qq.com。

2014-04-15