曾振基 鐘瑩瑩 周衛(wèi)雄 劉 明 肖自添 何煥清**

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靈芝室內(nèi)袋栽孢子粉的收集方式比較*

曾振基1鐘瑩瑩1周衛(wèi)雄1劉 明2肖自添2何煥清2**

（1.梅州市微生物研究所，廣東 梅州 514071；2.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所 廣東省蔬菜新技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州 510640）

靈芝；孢子粉；子實(shí)體；收集；產(chǎn)量；污染率

廣東省梅州市開展室內(nèi)靈芝袋栽20多年來，取得了很多很好的經(jīng)驗(yàn)與成果。但隨著規(guī)模擴(kuò)大和復(fù)種指數(shù)增加，遇到了不少亟待解決的新問題，如靈芝孢子粉收集的最佳時(shí)間選擇與收集時(shí)間的長短的確定等。在實(shí)際生產(chǎn)過程中，種植戶反映靈芝孢子粉收集50～60天后還能產(chǎn)粉，也有反映僅收集25天左右就開始出現(xiàn)木霉等雜菌污染，嚴(yán)重影響靈芝孢子粉及子實(shí)體的產(chǎn)量和品質(zhì)。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用二次收粉的方式，可有效解決以上問題，明顯提高孢子粉產(chǎn)量和品質(zhì)。

1 材料與方法

1.1 供試菌株 靈芝菌種“泰山赤芝”由廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所食用菌研究室提供。

1.2 母種制作 按常規(guī)方法制備PDA培養(yǎng)基，配方：馬鈴薯200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1 000 mL，pH自然（5～6）。培養(yǎng)基分裝入18×180（mm）試管中，每管10 mL，121 ℃滅菌0.5 h，取出后擺斜面。在超凈工作臺上定量接入菌絲，25 ℃恒溫培養(yǎng)。

1.3 原種制作 原種培養(yǎng)基配方為：玉米（不粉碎）99%，石膏1%，料/水比為1/1.2，含水量約60%，pH為8。制作方法：玉米粒精選后水洗，清水浸泡12～13 h，水煮至用手按開玉米粒感覺軟而不糊為適，晾干至表面無水，加入石膏粉，混勻裝袋。每袋料濕重500 g，121 ℃滅菌1.5 h，冷卻后在超凈工作臺上定量接入母種菌絲，25 ℃恒溫培養(yǎng)。

1.4 培養(yǎng)料配制、接種及培養(yǎng) 培養(yǎng)料配方：雜木屑78%，玉米粉6%，麩皮15%，石膏粉1%。

調(diào)配培養(yǎng)料時(shí)，先將雜木屑預(yù)濕堆制24 h，再將各種輔料充分拌勻后加入到雜木屑中，料/水比為1/1.2，最后用石灰水調(diào)節(jié)pH至8，最終含水量約60%。栽培袋為折徑17×35（cm）、厚0.05 mm的聚丙烯袋，每袋裝培養(yǎng)料干重計(jì)350 g，裝好后采用常壓滅菌，保持100 ℃ 16～18 h。滅菌后將菌包搬入經(jīng)消毒的接種室，冷卻至室溫后接種。接種嚴(yán)格按照無菌操作規(guī)程進(jìn)行。將菌包搬入培養(yǎng)室以墻式擺放，保持室內(nèi)黑暗，在自然溫度條件下培養(yǎng)。早、中、晚各通風(fēng)1 h，培養(yǎng)過程發(fā)現(xiàn)污染的菌包及時(shí)清理出培養(yǎng)室。

大部分菌絲長滿菌袋的時(shí)間為45天。此批試驗(yàn)靈芝菌袋為2012年12月生產(chǎn)。

1.5 子實(shí)體培養(yǎng) 2013年4月25日，靈芝菌袋菌絲已長滿，此時(shí)氣溫回升，晝夜溫差較小，用小刀在菌袋的扎口上方開一個(gè)十字形的小口，使靈芝子實(shí)體由十字形小口長出。開口后將菌袋均勻堆放，栽培室溫度保持在22～28 ℃，空氣相對濕度90%～95%，栽培室經(jīng)常通風(fēng)換氣，保持空氣清新。此段時(shí)間約為40～45天。

1.6 上架產(chǎn)粉 2013年6月5日至6日，靈芝子實(shí)體邊緣的金黃色轉(zhuǎn)為棕紅色，將菌包清洗干凈，選擇長勢相當(dāng)?shù)膫€(gè)體同時(shí)上架。靈芝孢子粉多層式收集，培養(yǎng)架采用杉木制作，規(guī)格為2 m（長）×1 m（寬）×2 m（高），分3層，層間距為60 cm。試驗(yàn)共設(shè)6個(gè)培養(yǎng)架，分別編號為A、B、C、D、E、F。每個(gè)培養(yǎng)架放靈芝370個(gè)，上架完畢后用白紙密封，6個(gè)架的靈芝采用相同方法進(jìn)行管理，并按照下面的時(shí)間點(diǎn)收集孢子粉和子實(shí)體。

（1）A、B架于上架25天（2013年7月2日）收集孢子粉和子實(shí)體。記錄A、B架污染袋數(shù)，孢子粉和子實(shí)體曬干后稱重。

（2）C、D架于上架25天（2013年7月2日）收集孢子粉。收完粉后將靈芝菌袋放回架上，再次用白紙密封，讓靈芝繼續(xù)產(chǎn)粉。操作時(shí)須輕拿輕放，以免靈芝子實(shí)體脫落，影響第二次收粉的產(chǎn)量。收集的孢子粉曬干后稱重，并記錄污染袋數(shù)。架上的靈芝繼續(xù)彈粉至2013年7月30日（上架55天），進(jìn)行第二次收粉并收子實(shí)體，曬干稱重。

（3）E、F架于上架55天（2013年7月30日）時(shí)收集靈芝孢子粉和子實(shí)體，曬干后稱重，并記錄污染袋數(shù)。

1.7 統(tǒng)計(jì)方法 靈芝菌袋污染率的差異比較采用卡方檢驗(yàn)；孢子粉產(chǎn)量與子實(shí)體產(chǎn)量兩組間的比較采用t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 菌袋污染率 對表1的數(shù)據(jù)進(jìn)行卡方檢驗(yàn)，結(jié)果為三種采收方式靈芝菌袋的污染率有顯著差異（c2=9.35，P=0.009 3＜0.05 ），其中A、B組污染率最低，為0.68%；C、D組污染率居中，為0.95%；E、F組污染率最高，為2.03%。

2.2 孢子粉產(chǎn)量 從表2可以看出，C、D組單位孢子粉產(chǎn)量明顯高于A、B組和E、F組，分別高24%和 10.7%。E、F組與A、B組的孢子粉產(chǎn)量也有明顯差異。

2.3 子實(shí)體產(chǎn)量 從表3可以看出，C、D組子實(shí)體產(chǎn)量明顯高于A、B組和E、F組，分別高11.23%和9.1%。E、F組與A、B組無明顯差異。

表1 不同收粉方式靈芝菌袋的污染情況

表2 不同收粉方式靈芝孢子粉的產(chǎn)量比較

表3 不同收粉方式靈芝子實(shí)體的產(chǎn)量比較

3 小 結(jié)

傳統(tǒng)栽培靈芝上架產(chǎn)粉周期為25～55天，25天后產(chǎn)粉量明顯減少，但不會停止，產(chǎn)粉過程子實(shí)體繼續(xù)生長。上架25天收第一次粉可使子實(shí)體和菌包內(nèi)的菌絲接觸到更多氧氣，促進(jìn)靈芝生長，既可有效解決菌棒的污染問題，又能明顯提高后期孢子粉和子實(shí)體的產(chǎn)量。因此，二次收粉的方式值得大力推廣。

（略）

廣東省產(chǎn)學(xué)研項(xiàng)目（2012B091100077），廣東省農(nóng)業(yè)攻關(guān)項(xiàng)目（2012A020100010）

曾振基，高級農(nóng)藝師，從事食用菌研究推廣，E-mail: mzwsw88@163.com

，研究員，E-mail:hhq407@sina.com

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2095-0934（2014）03-149-02