范 微, 劉巴睿, 劉海青, 張發(fā)榮, 徐小青, 加 洛, 王忠東, 陶元清, 薛紅梅

(1. 青海省地方病預防控制所, 西寧 811602; 2. 青海省實驗動物協(xié)會, 西寧 811602)

人工飼養(yǎng)喜馬拉雅旱獺主要臟器重量及臟器系數(shù)的測定

范 微1,2, 劉巴睿1, 劉海青1, 張發(fā)榮1, 徐小青1, 加 洛1, 王忠東1,2, 陶元清1,2, 薛紅梅1

(1. 青海省地方病預防控制所, 西寧 811602; 2. 青海省實驗動物協(xié)會, 西寧 811602)

目的 對人工飼養(yǎng)成年喜馬拉雅旱獺的體質量和主要臟器重量、臟器系數(shù)進行測定。方法 選用成年喜馬拉雅旱獺20只，雌雄各半，分別測定體質量和15個臟器重量，計算臟器系數(shù)。結果 性別間比較體質量無明顯差異(P＞0.05)，腦重量雄性顯著大于雌性旱獺(P＜0.01);雌雄個體間心臟、胸腺、褐色脂肪等器官組織重量雄性略大于雌性，但差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);膽囊重量雄性略小于雌性，也無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);其余各臟器重量差異均不顯著(P＞0.05)。喜馬拉雅旱獺各臟器系數(shù)雌雄個體間差異均不顯著(P＞0.05)。結論 成年喜馬拉雅旱獺雌雄間腦重量差異顯著，而體質量、其他臟器重量及各臟器系數(shù)差異不顯著。

喜馬拉雅旱獺; 人工飼養(yǎng); 臟器重量; 臟器系數(shù)

在生物醫(yī)學研究中，實驗動物的臟器重量和臟器系數(shù)是評價動物健康與否的重要指標和鑒定動物遺傳品質的重要依據(jù)，是其主要的生物學特性之一，可用來衡量和反映動物的功能狀態(tài)，同時也是動物實驗中常用的重要基礎數(shù)據(jù)，并對實驗動物種屬標準化鑒定有一定意義[1～2]。

青藏高原特有動物—喜馬拉雅旱獺(Marmota himalayana), 屬哺乳綱(Mammalia)、嚙齒目(Rodentia)、松鼠科(Scim idae)、旱獺屬(Marmota)，是松鼠科中體型最大的一種，具冬眠性。近年來，喜馬拉雅旱獺實驗動物化研究已取得明顯成效，人工條件下繁殖的喜馬拉雅旱獺已經在人類乙肝動物模型、藥物線粒體毒性替代模型、低氧適應動物模型的建立方面顯現(xiàn)獨特作用，正在成為生物醫(yī)學科研工作中的重要實驗材料，已經得到廣泛關注[3～8]。

本文對人工飼養(yǎng)3年以上成年喜馬拉雅旱獺主要臟器重量和臟器系數(shù)進行了測定分析，為喜馬拉雅旱獺的種質資源保護及作為實驗動物的廣泛應用和研究提供基礎數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 動物來源

喜馬拉雅旱獺指名亞種(Marmota himalayana, Hodgson,1841)20只，捕自青海同仁多哇地區(qū)，雌雄各半，體質量4.5～7.0 kg，年齡5～7歲，人工飼養(yǎng)于青海省實驗動物中心3年以上。

1.2 飼養(yǎng)條件

動物室內溫度控制在10～15℃, 相對濕度40%～60%，光照為自然光或白熾燈。飼養(yǎng)室定時抽風，降低室內氨氣濃度。每日6∶00、12∶00、18∶00定時飼喂; 早晨供給品種多樣、鮮嫩的可食綠草, 中午和晚餐供給由玉米粉、小麥粉、麩皮、苜蓿草粉、食鹽、微量元素及少量魚粉組成的復合半干粉料或顆粒飼料。營養(yǎng)成分指標為: 粗蛋白12%、粗脂肪3%、粗纖維40%、粗灰分6%、水分30%; 飲水供給pH 2.5～2.8的酸化水。每天上午清掃室內衛(wèi)生; 隔周用2%來蘇爾、2%過氧乙酸或強力消毒靈等消毒液輪換消毒飼養(yǎng)設施一次。

1.3 儀器及測定方法

電子天平JJ200，分度值0.01 g(常熟雙杰測試儀器廠生產)，用于稱量臟器重量; ACS-20-YE 電子嬰兒秤，最大稱量20 kg，最小分值度10 g(上海益聯(lián)科教設備有限公司)，稱量動物體質量; 常規(guī)手術器械。

測量方法參考文獻[9]。測量前動物禁食12 h。測量時, 動物經鹽酸氯胺酮麻醉[10], 稱體質量，腹主動脈放血處死。迅速分離心、肝、脾、肺、腎、腦、甲狀腺、腎上腺、胰腺、胸腺、睪丸、子宮、卵巢、膽囊、胃等器官和腋下褐色脂肪。用眼科剪和鑷子仔細分離，剔除和清除附著在器官表面的淤血、脂肪和結締組織，胃等中空性臟器沿器官長軸剪開，生理鹽水洗凈內容物，用濾紙吸去臟器內外表面血液或體液后稱重，計算臟器系數(shù)(臟器系數(shù)=臟器重量/體質量×100%)。

1.4 統(tǒng)計學方法

所得數(shù)據(jù)用SPSS17.0軟件統(tǒng)計分析，數(shù)據(jù)用(x-± s)表示, 進行t檢驗, P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 臟器重量

喜馬拉雅旱獺成年雌雄個體間體質量無明顯差異(P＞0.05); 各臟器重量比較顯示，旱獺雌雄個體間心臟、胸腺、褐色脂肪等器官組織重量雄性略大于雌性，但差異不顯著(P＞0.05); 膽囊重量雄性略小于雌性，但也無顯著性(P＞0.05); 腦重量雄性顯著大于雌性旱獺(P＜0.01); 其余各臟器重量雖有略微差異，但差異均不顯著(P＞0.05)(表1)。

2.2 臟器系數(shù)

喜馬拉雅旱獺臟器系數(shù)比較顯示，雌雄個體間心臟、胸腺、褐色脂肪及腦系數(shù)雄性均大于雌性，但無顯著性差異(P＞0.05); 同臟器重量比較結果類似，膽囊系數(shù)雄性略小于雌性，但也沒有統(tǒng)計學意義(P＞0.05); 其余各臟器系數(shù)雌雄個體間差異皆不顯著(P＞0.05)(表2)。

3 討論

依據(jù)臟器重量、臟器系數(shù)可大體確定臟器病變的性質和程度，所以，實驗動物臟器重量、臟器系數(shù)是動物實驗中常用的重要基礎數(shù)據(jù)[11]。由于對喜馬拉雅旱獺研究起步較晚，實驗動物化仍處于研究階段，因此未見臟器重量、臟器系數(shù)的相關報道，本研究結果填補了這方面的空白，為生物醫(yī)學研究提供了基礎數(shù)據(jù)。

表1 喜馬拉雅旱獺臟器重量

表2 喜馬拉雅旱獺臟器系數(shù) %

國內對大鼠和豚鼠等臟器重量及臟器系數(shù)測定報道中，均表明性別對臟器系數(shù)影響較小[12～13]。本研究結果表明人工飼養(yǎng)成年喜馬拉雅旱獺雌雄個體間腦重量雄性顯著大于雌性(P＜0.01), 其它臟器重量及臟器系數(shù)不因性別不同而有所不同。

哺乳動物體內存在褐色脂肪組織，初步推斷對于動物的體溫調節(jié)、冬眠覺醒、抵抗寒冷、防止肥胖、調節(jié)能量平衡以及抵抗感染等方面有著重要的生理意義。生活在青藏高原的長爪沙鼠、高原鼠兔適應寒冷環(huán)境的有效產熱方式是非顫抖性產熱, 其主要產熱源是褐色脂肪組織, 這兩種動物褐色脂肪在冬季和枯草期最重[14～15]。作者對冬眠前10月份成年喜馬拉雅旱獺腋下褐色脂肪進行稱重，約占體質量的0.29%，其重量與冬季和枯草期是否存在差異，還有待于今后補充相關資料后再進行討論。

到目前為止，本研究中的喜馬拉雅旱獺均為成年，所涵蓋年齡范圍較大，年齡間的差異不能完全消除；在解剖過程中，肉眼觀察到有臟器明顯病變的測定的數(shù)據(jù)不統(tǒng)計在內，但也有可能存在一些潛在感染和自發(fā)性疾病，一定程度上影響了測定的數(shù)據(jù); 另外，受條件限制，我們沒能測定野生狀態(tài)下喜馬拉雅旱獺的臟器重量和臟器系數(shù)，無法對野外和人工飼養(yǎng)旱獺的臟器指標進行比較。這些要求我們要進一步深入探討其生物學參數(shù)，在制定實驗動物臟器重量及臟器系數(shù)正常值參考范圍時，應該綜合考慮各種可能的影響因素并加以標準化，才能得到較為可靠的結果。隨著喜馬拉雅旱獺相關研究的不斷拓展，有關喜馬拉雅旱獺生物學特性的研究也將不斷深入，因此研究喜馬拉雅旱獺主要臟器重量和臟器系數(shù)統(tǒng)一的參考值具有重要意義。

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Q95-33

B

1674-5817(2014)01-0059-03

10.3969/j.issn.1674-5817.2014.01.013

2013-11-01

青海省科技計劃項目(2012-T-Y20)

范 微(1964-), 女, 副研究員, 研究方向: 實驗動物與動物實驗, 野生動物實驗動物化研究, E-mail: fanweiqy@163.com

王忠東(1962-), 男, 研究員, 研究方向: 實驗動物管理與研究, E-mail: wangzhongdong@163.com