朱運(yùn)平，劉文清，李秀婷，3，*，肖 林，王雅珍，伍少明，范園園

（1.北京工商大學(xué)食品學(xué)院，北京100048；2.食品添加劑與配料北京高校工程研究中心，北京100048；3.北京市食品風(fēng)味化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100048；4.山東龍力生物科技股份有限公司，山東禹城251200）

葡萄糖氧化酶的固定化及其在快速檢測(cè)中的應(yīng)用研究現(xiàn)狀

朱運(yùn)平1，2，劉文清1，李秀婷1，3，*，肖 林4，王雅珍1，伍少明1，范園園1

（1.北京工商大學(xué)食品學(xué)院，北京100048；2.食品添加劑與配料北京高校工程研究中心，北京100048；3.北京市食品風(fēng)味化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，北京100048；4.山東龍力生物科技股份有限公司，山東禹城251200）

游離葡萄糖氧化酶在生產(chǎn)應(yīng)用中易失活、儲(chǔ)存穩(wěn)定性差的缺點(diǎn)促進(jìn)了人們對(duì)葡萄糖氧化酶固定化的方法及固定化載體的研究。固定化葡萄糖氧化酶在穩(wěn)定性、重復(fù)使用率等方面具有顯著的優(yōu)勢(shì)，在食品、醫(yī)藥、藥物殘留檢測(cè)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用，使得葡萄糖氧化酶的固定化技術(shù)成為人們熱衷的前沿生物技術(shù)之一。本文主要綜述了葡萄糖氧化酶的固定化方法與固定化載體，并對(duì)固定化葡萄糖氧化酶在快速檢測(cè)中的應(yīng)用進(jìn)行了闡述。

葡萄糖氧化酶，固定化，方法，快速檢測(cè)

葡萄糖氧化酶（GOD，E.C.l.l.3.4）能夠催化β-D-葡萄糖生成葡萄糖酸和過(guò)氧化氫，因其具有高效、專(zhuān)一、反應(yīng)條件溫和等特點(diǎn)在食品、醫(yī)藥、發(fā)酵等領(lǐng)域中廣泛應(yīng)用。游離的葡萄糖氧化酶在應(yīng)用中存在穩(wěn)定性差、易失活、酶與底物難以分離，不利于產(chǎn)物的回收與連續(xù)生產(chǎn)等缺點(diǎn)[1-2]，因此，近年來(lái)人們致力于研究將游離葡萄糖氧化酶進(jìn)行固定化，以彌補(bǔ)游離葡萄糖氧化酶在應(yīng)用中的不足。酶固定化技術(shù)就是將酶束縛在某種載體中，保持酶活力，使固定化的酶能夠進(jìn)行催化反應(yīng)，并且可以重復(fù)使用[3]。傳統(tǒng)的葡萄糖氧化酶固定方法及載體存在一定缺陷，如酶易泄露，酶活損失較高，因此，目前國(guó)內(nèi)外學(xué)者不斷改進(jìn)和發(fā)展新的固定化方法及固定化載體以解決目前葡萄糖氧化酶固定化過(guò)程中存在的問(wèn)題，并不斷開(kāi)拓固定化葡萄糖氧化酶的應(yīng)用領(lǐng)域。如用具有導(dǎo)電性的金納米粒子固定葡萄糖氧化酶制備生物傳感器應(yīng)用于快速檢測(cè)[4-6]。

葡萄糖氧化酶固定化的關(guān)鍵在于選用合適的固定化方法及固定化載體。本文對(duì)葡萄糖氧化酶的固定化方法、固定載體，及其相應(yīng)固定化酶在食品快速檢測(cè)方面的應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行了綜述，旨在為固定化葡萄糖氧化酶的深入研究與應(yīng)用拓展提供理論依據(jù)。

1 葡萄糖氧化酶固定化技術(shù)的研究現(xiàn)狀

1.1 葡萄糖氧化酶的固定化方法

關(guān)于葡萄糖氧化酶的固定化方法已有大量的文獻(xiàn)報(bào)道，不同的固定化方法對(duì)葡萄糖氧化酶的酶活性、穩(wěn)定性、重復(fù)使用率均有不同影響。目前葡萄糖氧化酶的固定化方法主要有四種：吸附法，包埋法，交聯(lián)法，共價(jià)結(jié)合法。其中吸附法和包埋法屬于物理法，交聯(lián)法和共價(jià)結(jié)合法屬于化學(xué)法[7-8]。

通過(guò)傳統(tǒng)固定化方法對(duì)葡萄糖氧化酶的固定，使得固定化酶不僅最適反應(yīng)溫度得到了上升，酶的溫度穩(wěn)定性也相應(yīng)提高；固定化對(duì)酶反應(yīng)最適pH也有影響，一般使酶pH穩(wěn)定性提高；同時(shí)固定化酶表現(xiàn)出了良好的儲(chǔ)存穩(wěn)定性。張?jiān)绖椎萚10]通過(guò)用羥基磷灰石為載體以吸附法固定葡萄糖氧化酶，使酶最適溫度提高了4℃，最適pH由原游離酶5.6上升到6.5，回收率提高了35.1%。肖志方等[11]以海藻酸鈣凝膠顆粒為載體采用包埋法將葡萄糖氧化酶固定，與游離酶相比最適溫度及pH分別提高了7℃、0.6，固定化葡萄糖氧化酶平均酶回收率為61.69%，重復(fù)使用率及儲(chǔ)存穩(wěn)定性也均有提高。Rauf及周濤等[12-13]分別采用交聯(lián)法與共價(jià)結(jié)合法對(duì)葡萄糖氧化酶固定化進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，固定化酶在pH穩(wěn)定性及儲(chǔ)存穩(wěn)定性方面均有明顯提高。

1.2 葡萄糖氧化酶的固定化載體

葡萄糖氧化酶的固定化按載體不同可分為：傳統(tǒng)載體材料固定及新型載體材料固定。傳統(tǒng)載體材料主要包括無(wú)機(jī)載體，有機(jī)高分子載體；新型載體材料分為磁性載體，導(dǎo)電載體等[14]。

1.2.1 傳統(tǒng)載體材料在葡萄糖氧化酶固定化中的應(yīng)用

1.2.1.1 無(wú)機(jī)載體在葡萄糖氧化酶固定化中的應(yīng)用

無(wú)機(jī)載體不僅價(jià)格低廉，而且具有來(lái)源方便、無(wú)毒、機(jī)械性及穩(wěn)定性好的特點(diǎn)。但無(wú)機(jī)載體結(jié)構(gòu)不易改變，影響了載體與酶之間的鍵合能力，而且在固定過(guò)程中會(huì)產(chǎn)生傳質(zhì)阻力，均不利于酶與固定載體的結(jié)合。通過(guò)對(duì)無(wú)機(jī)載體分子進(jìn)行適當(dāng)?shù)男揎椏梢愿纳拼祟?lèi)載體對(duì)葡萄糖氧化酶的固定化效果。如美國(guó)、德國(guó)多家研究機(jī)構(gòu)通過(guò)對(duì)氧化鋁或二氧化硅無(wú)機(jī)載體進(jìn)行修飾，顯著改善了酶與固定載體的結(jié)合效果[15]。

1.2.1.2 有機(jī)高分子載體在葡萄糖氧化酶固定化中的應(yīng)用 有機(jī)高分子載體材料分為兩種：天然高分子凝膠載體與合成高分子有機(jī)材料載體。

a.天然高分子凝膠載體：天然高分子凝膠載體無(wú)毒、傳質(zhì)性好，但是強(qiáng)度低、易被微生物分解、使用壽命短。天然高分子載體在酶的固定化過(guò)程中能夠提高酶的親和力與生物相容性，有利于酶的固定化，改善酶促反應(yīng)的微環(huán)境。瓊脂、海藻酸鈉等天然高分子載體材料已被廣泛應(yīng)用，殼聚糖、甲殼素及其衍生物和絲素膜等則是新發(fā)展起來(lái)的天然高分子載體。

采用戊二醛，殼聚糖等天然高分子作為葡萄糖氧化酶固定載體，固定化酶不僅在操作穩(wěn)定性、溫度穩(wěn)定性、pH穩(wěn)定性與底物親和力方面較游離酶顯著增強(qiáng)；利用交聯(lián)法將殼聚糖作為葡萄糖氧化酶的固定載體，制備生物傳感器能明顯增加膜的傳導(dǎo)性，這為固定化葡萄糖氧化酶在生物傳感器方面的應(yīng)用提供了科學(xué)依據(jù)[16-17]。此外，有研究表明用賴(lài)氨酸修飾后的殼聚糖微球載體及以戊二醛作為交聯(lián)劑的殼聚糖微球應(yīng)用于葡萄糖氧化酶的固定化中，不僅操作簡(jiǎn)單，而且固定化的葡萄糖氧化酶具有很好的熱穩(wěn)定性、貯存穩(wěn)定性、重復(fù)使用穩(wěn)定性，底物親和力也有所提高[18-20]?？梢?jiàn)將天然高分子載體用于固定葡萄糖氧化酶具有顯著優(yōu)勢(shì)。

b.合成高分子有機(jī)材料載體：常見(jiàn)的合成高分子有機(jī)材料主要有聚丙烯酰胺，聚乙烯醇等。合成高分子有機(jī)材料強(qiáng)度大，但是傳質(zhì)差，近些年來(lái)人們開(kāi)發(fā)出來(lái)了一些新型優(yōu)良載體，如聚乙烯醇氧化物、聚乙烯醇冷凍膠、聚苯乙烯磺酸鈉、聚苯乙烯/聚苯乙烯磺酸鈉PF凝膠載體（對(duì)苯二酚和甲醛聚合物）、多孔醋酸纖維素球形載體等。Rauf等[12]用醋酸纖維素有機(jī)玻璃固定葡萄糖氧化酶，不僅使酶的最適溫度提高，而且使酶呈現(xiàn)了良好的操作穩(wěn)定性和儲(chǔ)存穩(wěn)定性。

1.2.2 新型載體材料在葡萄糖氧化酶固定化中應(yīng)用

1.2.2.1 磁性載體在葡萄糖氧化酶固定化中的應(yīng)用

磁性載體就是在具有磁性微粒的表面修飾功能性基團(tuán)，使其與目標(biāo)分子、細(xì)胞或膠體顆粒產(chǎn)生親和性，從而利用磁性顆粒制備出來(lái)的合適的載體[21]。磁性載體固定葡萄糖氧化酶主要是利用其磁效應(yīng)，使固定化酶在反應(yīng)體系中能夠被外磁場(chǎng)富集、分離和回收，方便了對(duì)酶反應(yīng)進(jìn)程的控制，同時(shí)也提高了酶的使用效率[13]。如帶有磁性的納米顆粒（NPs）合成Co-B/SiO2/NH2NPs用于固定葡萄糖氧化酶，在生物燃料細(xì)胞和生物傳感器上應(yīng)用，具有高靈敏度與穩(wěn)定性[22]。

表1 固定葡萄糖氧化酶方法及其優(yōu)缺點(diǎn)Table.1 The merits of different methods on immobilization of glucose oxidase

很多學(xué)者在磁性載體的利用上多會(huì)選擇鐵氧化物，如姜德生等[20]將殼聚糖與Fe3O4納米粒子制成復(fù)合微粒，再與戊二醛交聯(lián)后使復(fù)合微球硬化，使得固定化的酶易于從混合體系中分離。另外，程娟[23]利用CuTAPP-Fe3SO4納米復(fù)合粒子固定葡萄糖氧化酶并且構(gòu)建了靈敏度高，穩(wěn)定性好的光纖葡萄糖生物傳感器。磁性載體方便分離回收的優(yōu)點(diǎn)使得人們?cè)絹?lái)越親睞用磁性載體固定葡萄糖氧化酶。

1.2.2.2 導(dǎo)電載體在葡萄糖氧化酶固定化中的應(yīng)用導(dǎo)電載體分為兩類(lèi)，一類(lèi)是導(dǎo)電高聚物載體，一類(lèi)是導(dǎo)電復(fù)合物載體。

導(dǎo)電高聚物主要是含共軛結(jié)構(gòu)和帶電的聚合物，包括聚吡咯、聚苯胺、聚噻吩等。Talay等[24]用聚吡咯和聚氨酯復(fù)合材料對(duì)葡萄糖氧化酶進(jìn)行了固定化，并且制備成了生物傳感器，固定化酶在100bar、30℃時(shí)酶活力和比活達(dá)到最高，分別為0.040U/cm2和4.9U/mg，并且儲(chǔ)存21d酶活性仍保留80%。

導(dǎo)電復(fù)合體是通過(guò)對(duì)一些特殊物質(zhì)復(fù)合形成導(dǎo)電復(fù)合體。吳國(guó)權(quán)等[25]用納米碳管和納米金導(dǎo)電復(fù)合體對(duì)葡萄糖氧化酶固定化，并且制成了傳感器用于血糖濃度的測(cè)量，該生物傳感器不僅靈敏度高、穩(wěn)定性強(qiáng)、重復(fù)性好，而且成本低，操作簡(jiǎn)單快速，能定量檢測(cè)血糖濃度。采用導(dǎo)電復(fù)合體固定化葡萄糖氧化酶制備生物傳感器在集成化設(shè)計(jì)與實(shí)現(xiàn)多通道多參數(shù)同步檢測(cè)方面具有推動(dòng)作用。而且導(dǎo)電載體因其具有導(dǎo)電性在葡萄糖氧化酶固定化中的應(yīng)用也多見(jiàn)于生物傳感器的開(kāi)發(fā)。

2 固定化葡萄糖氧化酶在快速檢測(cè)中的應(yīng)用

由于葡萄糖氧化酶在啤酒氧化，果汁澄清及面粉品質(zhì)改良等方面具有顯著改善產(chǎn)品品質(zhì)的效果[26-27]，固定化葡萄糖氧化酶在此類(lèi)食品加工領(lǐng)域中也有廣泛應(yīng)用。而固定化葡萄糖氧化酶另一個(gè)重要的應(yīng)用領(lǐng)域是快速檢測(cè)行業(yè)，國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)固定化葡萄糖氧化酶在快速檢測(cè)的領(lǐng)域也有多項(xiàng)研究。本部分主要針對(duì)固定化葡萄糖氧化酶在食品，醫(yī)藥等領(lǐng)域的快速檢測(cè)行業(yè)應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行綜述。

2.1 固定化葡萄糖氧化酶在葡萄糖含量檢測(cè)中的應(yīng)用

隨著固定化酶技術(shù)的不斷發(fā)展，生物傳感器應(yīng)運(yùn)而生，科學(xué)工作者將固定后的葡萄糖氧化酶制成生物傳感器應(yīng)用在食品、醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域。生物傳感器在食品方面主要用于食品中葡萄糖含量的控制與分析檢測(cè)，如在釀酒過(guò)程中對(duì)葡萄糖濃度進(jìn)行連續(xù)檢測(cè)，更好地控制發(fā)酵過(guò)程；葡萄糖可被葡萄糖氧化酶氧化成葡萄糖酸和過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫與辣根過(guò)氧化物酶發(fā)生顏色反應(yīng)，其反應(yīng)產(chǎn)物在530nm下的吸收峰度值會(huì)隨葡萄糖濃度的增加而增加，利用這一原理可以測(cè)定葡萄糖含量[28-30]，因此，在醫(yī)學(xué)上，該種生物傳感器多用于糖尿病人血糖含量的檢測(cè)。固定化葡萄糖氧化酶檢測(cè)葡萄糖含量具有反應(yīng)時(shí)間短、保存期較長(zhǎng)、靈敏度高、反應(yīng)快捷等優(yōu)點(diǎn)[31]。

2.2 固定化葡萄糖氧化酶在葡萄糖酸制備中的應(yīng)用

葡萄糖氧化酶可以催化葡萄糖生產(chǎn)葡萄糖酸和過(guò)氧化氫。工業(yè)上將葡萄糖氧化酶固定化后生產(chǎn)葡萄糖酸可以提高葡萄糖氧化酶的使用率，節(jié)約生產(chǎn)成本[32]。

2.3 固定化葡萄糖氧化酶在蛋白純化中的應(yīng)用

在蛋白生產(chǎn)工業(yè)中，固定化葡萄糖氧化酶主要用于蛋白的純化，通過(guò)消除蛋白中的葡萄糖，提高蛋白純度。Sisak等[33]通過(guò)實(shí)驗(yàn)用戊二醛做交聯(lián)劑固定葡萄糖氧化酶來(lái)消除蛋白中的葡萄糖，從而使蛋白質(zhì)量顯著提高。

2.4 固定化葡萄糖氧化酶在藥物殘留檢測(cè)中的應(yīng)用

在藥物殘留檢測(cè)中，固定化葡萄糖氧化酶作為偶聯(lián)劑的免疫傳感器可用于磺胺類(lèi)藥物的檢測(cè)。葡萄糖氧化酶偶聯(lián)SMD后形成葡萄糖-SMD，利用抗原與抗體結(jié)合產(chǎn)生電信號(hào)，通過(guò)氧化峰電流的增值來(lái)測(cè)定SMD含量[34]。在制成的葡萄糖氧化酶-克倫特羅免疫傳感器中，可對(duì)克倫特羅（瘦肉精）進(jìn)行快速檢測(cè)，靈敏度高、重現(xiàn)性好、檢測(cè)限低[35]。

3 展望

固定化葡萄糖氧化酶的諸多優(yōu)點(diǎn)，使得科研工作者們持之以恒地對(duì)固定化技術(shù)進(jìn)行改善，雖然目前固定化葡萄糖氧化酶仍有缺點(diǎn)，但我們相信隨著固定化氧化酶研究的不斷深入，葡萄糖氧化酶的固定化技術(shù)會(huì)更加成熟，固定化葡萄糖氧化酶的應(yīng)用會(huì)更加廣泛。

[1]李曄.酶的固定化及其應(yīng)用[J].分子催化，2008，22（1）：86-95.

[2]韓志萍，葉劍芝，羅榮瓊.固定化酶的方法及其在食品中的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].保鮮與加工，2012，12（5）：48-53.

[3]毛跟年，李麗維，齊鳳.固定化酶應(yīng)用研究進(jìn)展[J].中國(guó)釀造，2009（8）：17-20.

[4]Yancai Li，F(xiàn)ei Wang，F(xiàn)uying Huang，et al.Direct electrochemistry of glucose oxidase and its biosensing to glucose based on the Chit-MWCNTs-AuNRs modified gold electrode[J]. Journal of Electroanalytical Chemistry，2012，685：86-90.

[5]Cliciane Guadalupe de Jesus，Dhésmon Lima，Vagner dos Santos，et al.Glucose biosensor based on the highly efficient immobilization of glucoseoxidase on layer-by-layer films of silsesquioxane polyelectrolyte[J].Sensorsand ActuatorsB：Chemical，2013，186：44-51.

[6]Bin Fang，Cuihong Zhang，Guangfeng Wang，et al.A glucose oxidase immobilization platform for glucose biosensor using ZnO hollow nanospheres[J].Sensors and Actuators B：Chemical，2011（155）：304-310.

[7]任廣智，李振華，何炳林.磁性高分子微球用于固定化酶的研究進(jìn)展[J].離子交換與吸附，2000，16（1）：83-87.

[8]F J Xu，Q J Cai，Y L Li，et al.Covalent Immobilization of Glucose Oxidase on Well-Defined Poly（glycidyl methacrylate）-Si（111）Hybrids from Surface-Initiated Atom-Transfer Radical Polymerization[J].Biomacromolecules，2005（6）：1012-1020.

[9]陳建龍，祁建城，曹儀植，等.固定化酶研究進(jìn)展[J].化學(xué)與生物工程，2006，23（2）：7-9.

[10]張?jiān)绖?，王騰飛，王瑞明.羥基磷灰石固定化葡萄糖氧化酶的研究[J].山東食品發(fā)酵，2010（4）：14-17.

[11]肖志方，伍林，易德蓮，等.海藻酸鈣凝膠固定葡萄糖氧化酶的研究[J].化學(xué)與生物工程，2008，25（2）：42-44.

[12]S Rauf，A Ihsan，K Akhtar，et al.Glucose oxidase immobilization on novel cellulose acetate-polymethylmethacrylate membrane[J].Journal of Biotechnology，2006，121：351-360.

[13]周濤，朱雄軍，蘇建華，等.葡萄糖氧化酶的有機(jī)相共價(jià)固定化[J].生物工程學(xué)報(bào)，2012，28（4）：476-487.

[14]錢(qián)軍民，張興，呂飛.酶固定化載體材料研究新進(jìn)展[J].化工新型材料，2002，30（10）：21-24.

[15]Guo L H，Yang S K.Study on gallic acid preparation by using immobilized tannase from Aspergillus niger[J].Chinese Journal of Bictechnology，2000，16（5）：614-617.

[16]周健芹，陳邵華，王劍文.定向固定化葡萄糖氧化酶及其酶學(xué)性質(zhì)的研究[J].食品科學(xué)，2009，30（1）：186-189.

[17]Heru Susanto，A M Samsudin，Nur Rokhati I N Widiasa. Immobilization of Glucose Oxidase on Chitosan-Based Porous Composite Membranes and Their Potential Use in Biosensors[J]. Enzyme and Microbial Technology，2013（52）：386-392.

[18]蘇霞麗.賴(lài)氨酸修飾的交聯(lián)殼聚糖微球共固定化GOD/ CAT的研究[D].重慶：重慶大學(xué)，2009.

[19]肖燕.賴(lài)氨酸修飾殼聚糖固定化[D].重慶：重慶大學(xué)，2008.

[20]姜德生，龍勝亞，肖海燕，等.磁性殼聚糖微球的制備及其用作漆酶固定化載體[J].應(yīng)用化學(xué)，2005，22（10）：1122-1126.

[21]楊勇，李彥鋒，拜永孝，等.酶固定化技術(shù)用載體材料的研究進(jìn)展[J].化學(xué)通報(bào)，2007（4）：257-263.

[22]HeeUkLee，ChulhwanPark，SeungWookKim. Immobilization of glucose oxidase onto cobalt based on silica core/shell nanoparticles as carrier[J].Process Biochemistry，2012（42）：1282-1286.

[23]程娟.CuTAPP-Fe3SO4納米復(fù)合粒子固定化GOD及其應(yīng)用[D].武漢：武漢理工大學(xué)，2008.

[24]Defne Kayrak-Talay，Ugur Akman，Oner Hortacsu. Supercritical carbon dioxide immobilization of glucose oxidase on polyurethane/polypyrrole composite[DB].Science direct，2008（44）：457-465.

[25]吳國(guó)權(quán)，劉仲明，李忠彥.碳納米管和納米金自組裝固定GOD的葡萄糖傳感器的研究[J].醫(yī)療衛(wèi)生裝備，2009，30（4）：4-7.

[26]馬清河，胡常英，劉麗娜，等.葡萄糖氧化酶在果汁保鮮中的應(yīng)用[J].中國(guó)食品添加劑.2005（3）：83-85.

[27]邢良英，王遠(yuǎn)山，鄭裕國(guó).葡萄糖氧化酶的生產(chǎn)及應(yīng)用[J].食品科技，2007（6）：24-26.

[28]張志倫，吳杰紅，劉萍，等.基于納米金檢測(cè)葡萄糖實(shí)驗(yàn)方法的探討[J].國(guó)際醫(yī)學(xué)監(jiān)測(cè)雜志，2011，32（17）：1923-1926.

[29]占達(dá)東，王周平，呂家根.熒光素-GOD-HRP熒光淬滅法測(cè)定植物果實(shí)組織中的葡萄糖含量[J].海南大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2004，22（1）：57-59.

[30]吳杰紅，張偉，吳淼，等.xMAG異硫氰酸根磁微粒偶聯(lián)GOD和HRP測(cè)定葡萄糖的研究[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2012，33（20）：2465-2467.

[31]Ester Junko Tomotani，Michele Vitolo.Immobilized glucose oxidase as a catalyst to the conversion of glucose into gluconic acid usingamembranereactor[J].Enzymeand Microbial Technology，2007（40）：1020-1025.

[32]Baozhan Zheng，Shunping Xie，Martin M F Choi.Gold nanoparticles-coated eggshell membrane with immobilized glucose oxidase for fabrication of glucose biosensor[J].Sensors and Actuators，2011，152：49-55.

[33]C Sisak，Z Csan’adi，E R’onay，et al.Elimination of glucose in egg white using immobilized glucose oxidase[J].Enzyme and Microbial Technology，2006，39：1002-1007.

[34]陳彥勇.檢測(cè)SMD殘留的免疫傳感器的研制[D].揚(yáng)州：揚(yáng)州大學(xué)，2008.

[35]肖飛.新型電化學(xué)免疫傳感器的制備及其在食品安全檢測(cè)中的應(yīng)用研究[D].上海：華東師范大學(xué)，2012.

Immobilization of glucose oxidase and its application in rapid detection

ZHU Yun-ping1，2，LIU Wen-qing1，LI Xiu-ting1，3，*，XIAO Lin4，WANG Ya-zhen1，WU Shao-ming1
（1.School of Food and Chemical Engineering，Beijing Technology and Business University，Beijing 100048，China；2.Beijing Higher Institution Engineering Research Center of Food Additives and Ingredients，Beijing Technology&Business University，Beijing 100048，China；3.Beijing Key Laboratory of Flavor Chemistry，Beijing 100048，China；4.Shandong Longlive Bio-technology Public Limited Company，Yucheng 251022，China）

Drawbacks of free glucose oxidase in application of production encourage people to study on the immobilization of glucose oxidase.The well stability，high reproducibility and other virtues of immobilized glucose oxidase have a significant advantage.Meanwhile，the immobilized enzyme plays an important role in food，medicine，residue detection of drugs.All of these make glucose oxidase enzyme immobilization technology be one of the most important frontier areas of biological technology.This article mainly summarized these various methods and fixed carriers of the immobilization of glucose oxidase，and the application of immobilized glucose oxidase in rapid detection were also stated.

glucose oxidase；immobilization；method；rapid detection

TS201.1

A

1002-0306（2014）04-0337-04

2013－05－23 *通訊聯(lián)系人

朱運(yùn)平（1980-），女，博士，副教授，研究方向：功能性食品。

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（31101332）；北京市屬高等學(xué)校人才強(qiáng)教計(jì)劃資助項(xiàng)目（PHR 20110872）；國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展（863）計(jì)劃項(xiàng)目（2012AA021502）；國(guó)家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目（2011BAD24B01）。