馬宗斌，劉桂珍，嚴(yán)根土 ，鄧士政，黃 群，李伶俐，朱 偉

(1.河南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，鄭州 450002;2.河南省種子管理站，鄭州 450046;3.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所/棉花生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，安陽(yáng) 455000)

根據(jù)國(guó)際農(nóng)業(yè)生物技術(shù)應(yīng)用服務(wù)組織(ISAAA)發(fā)布的最新報(bào)道，2011年，全球轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉花總面積2500×104hm2，占全球棉花播種面積的69.4%;中國(guó)轉(zhuǎn)Bt基因棉花面積達(dá)到390×104hm2，占中國(guó)棉花種植面積的71.5%［1］。轉(zhuǎn)Bt基因棉花已在世界范圍內(nèi)商業(yè)化種植，通過(guò)有效控制棉鈴蟲(chóng)種群數(shù)量，而顯著減少了化學(xué)農(nóng)藥的用量［2-3］。棉田捕食性天敵種群數(shù)量上升，有效抑制了蚜蟲(chóng)的發(fā)生和危害，天敵進(jìn)入大豆、花生、玉米等相鄰作物大田，顯著提升了整個(gè)農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)的生物防治功能［4］。

今年以來(lái)，永濟(jì)市在城市基層黨建工作中，樹(shù)立“全域黨建”“開(kāi)放黨建”工作理念，將城區(qū)新建的4座城市驛站，打造成黨群服務(wù)“微”陣地，整合各領(lǐng)域資源，發(fā)揮“八大”陣地功能，打通黨員聯(lián)系服務(wù)群眾“最后一公里”，引領(lǐng)各領(lǐng)域黨建“大融合”，城市基層治理走向共治共享“大格局”。

施氮可以有效地調(diào)節(jié)棉花氮素生理代謝及生長(zhǎng)發(fā)育［5-6］。對(duì)轉(zhuǎn)Bt基因抗蟲(chóng)棉而言，氮素既是核酸和蛋白質(zhì)等生命物質(zhì)的組成部分，也是殺蟲(chóng)晶體蛋白的主要構(gòu)成物質(zhì)。因此，氮素運(yùn)籌可能是調(diào)節(jié)抗蟲(chóng)棉Bt蛋白代謝的有效途徑。同時(shí)，棉花品種中導(dǎo)入Bt基因?qū)ζ涞x也有重要影響［7-8］。在種植轉(zhuǎn)基因棉花過(guò)程中，如何通過(guò)氮素運(yùn)籌在生育前中期提高器官中Bt蛋白的含量，改善其抗蟲(chóng)性能，在生育后期降低器官的Bt蛋白的含量，減少對(duì)生態(tài)環(huán)境和人畜健康的潛在風(fēng)險(xiǎn)值得進(jìn)一步研究。目前，已有研究表明，施氮量對(duì)棉花器官Bt蛋白的表達(dá)有顯著調(diào)控作用［9-10］，但施氮方式對(duì)抗蟲(chóng)棉Bt蛋白含量的影響鮮見(jiàn)報(bào)道。為此，研究了施氮方式對(duì)抗蟲(chóng)棉Bt蛋白含量的影響，以期為抗蟲(chóng)棉合理施氮提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)主要環(huán)境條件及農(nóng)藝管理措施

試驗(yàn)于2009—2010年在河南農(nóng)業(yè)大學(xué)科教園區(qū)(鄭州)進(jìn)行，試驗(yàn)地為春白地，土壤為沙壤土，肥力中等。土壤有機(jī)質(zhì) 9.26 g/kg，全氮 1.03 g/kg，堿解氮 83.50 mg/kg，速效磷 18.36 mg/kg，速效鉀 96.56 mg/kg。2009年，從棉花播種至7月下旬，光、溫條件較好，雨量適中，棉花出苗較好，生長(zhǎng)發(fā)育較快;進(jìn)入8月后直至9月中上旬，雨量偏多，光、溫條件較差;9月下旬后，天氣正常，雨水較少，陽(yáng)光充足，有利于棉花正常成熟。2010年，在棉花苗期，雨量較多，地溫回升較慢，棉苗發(fā)育略晚;6月中旬至8月中旬，氣溫正常，但陰天較多;8月中旬至9月下旬，雨量偏多，氣溫較常年略低，吐絮期推遲;9月下旬后，降雨較少，日照充足，積溫較常年偏高，對(duì)棉鈴?fù)滦踺^為有利。

老陳雖然當(dāng)過(guò)偵察兵，但他還是被暗算了。如果我不告訴他那輛肇事車的車牌號(hào)，老陳哪會(huì)打電話舉報(bào)那個(gè)家伙，他不舉報(bào)也就不會(huì)被撞傷住院了。我覺(jué)得我應(yīng)該去醫(yī)院看看老陳，不然我內(nèi)心會(huì)感到愧疚的。在去醫(yī)院的路上，我買了一籃雞蛋，一掛香蕉。到了醫(yī)院，老陳見(jiàn)到我后，說(shuō)你看你，破費(fèi)干什么啊。老陳躺在床上，一條腿打了石膏。我問(wèn)他沒(méi)什么事吧。他自我解嘲地笑了笑，說(shuō)想不到這次馬失前蹄了。他們要是明著和我干，還真不是我的對(duì)手呢。

棉田磷肥和鉀肥全部基施，每年整地時(shí)，施入過(guò)磷酸鈣600 kg/hm2和氯化鉀225 kg/hm2。全生育期分別在初花期和盛花期噴施縮節(jié)安化控兩次，用量分別是37.5 g/hm2和60.0 g/hm2。2009年，全生育期未澆水;2010年在6月、7月各澆水1次。除處理措施外，各小區(qū)田間管理完全一致。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

2.4.1 不同施氮方式下棉花幼嫩器官Bt蛋白含量的比較

經(jīng)統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示,研究組冠心病患者的血清總膽紅素、直接膽紅素與間接膽紅素三項(xiàng)指標(biāo)均低于對(duì)照組健康體檢者水平,P<0.05,;研究組的血清尿酸水平高于對(duì)照組,P<0.05,兩組間膽紅素與尿酸水平比較均存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,見(jiàn)表1所示。

1.3 測(cè)定項(xiàng)目與方法

1.3.1 Bt蛋白含量

于2010年7月15日選定棉花當(dāng)天新生的同一節(jié)位主莖葉片掛牌標(biāo)記，在葉齡10、35、60、85 d(脫落為止)時(shí)取樣，分別代表展開(kāi)期、功能期、衰老期和脫落期的棉花葉片;8月1日選定同一果枝和節(jié)位3 mm的蕾掛牌標(biāo)記，在現(xiàn)蕾后5、15、25 d取樣，分別代表幼蕾、中蕾和大蕾;8月1日選定同一果枝和節(jié)位當(dāng)天開(kāi)放的花朵掛牌標(biāo)記，在花后20、40、65 d取樣，分別代表膨大期、充實(shí)期和吐絮期的棉鈴。樣品從田間取樣后，在低溫條件下快速帶回實(shí)驗(yàn)室，立即稱量1.0 g鮮樣，放入自封袋。先用液氮快速冷凍30 min，后轉(zhuǎn)入－40℃的超低溫冰箱凍存，待測(cè)Bt蛋白含量。在葉片取樣時(shí)避開(kāi)葉脈，蕾用整個(gè)測(cè)定，鈴分成鈴殼、棉纖維和種子3部分。

Bt蛋白的測(cè)定采用酶聯(lián)免疫分析法(ELISA)［11］，藥盒由中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)提供。

1.3.2 棉花測(cè)產(chǎn)

每小區(qū)選定中間2行，調(diào)查成鈴數(shù)。收獲10株絮鈴，測(cè)定鈴重和衣分，測(cè)算產(chǎn)量。

1.4 數(shù)據(jù)分析

2.3.2 施氮方式對(duì)棉纖維中Bt蛋白含量的影響

2 結(jié)果與分析

2.1 施氮方式對(duì)抗蟲(chóng)棉葉片中Bt蛋白含量的影響

河南洛陽(yáng)是中國(guó)著名歷史名城，被譽(yù)為“千年帝都、牡丹花城”洛陽(yáng)，不但牡丹文明天下，洛陽(yáng)偃師的葡萄種植也享譽(yù)大江南北。

圖1 施氮方式對(duì)抗蟲(chóng)棉葉片Bt蛋白含量的影響Fig.1 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in leaves of transgenic cotton

2.2 施氮方式對(duì)棉蕾中Bt蛋白含量的影響

幼蕾是棉鈴蟲(chóng)的主要為害對(duì)象之一，且棉蕾有較高的脫落率，其中的Bt蛋白也隨之進(jìn)入土壤環(huán)境。圖2表明，隨著棉蕾的生長(zhǎng)發(fā)育，其Bt蛋白的含量呈快速上升的趨勢(shì)。施氮方式對(duì)棉蕾中Bt蛋白含量有明顯的影響。隨著氮肥前移，棉蕾Bt蛋白含量有升高趨勢(shì)(大蕾期T2除外)。方差分析表明，在幼蕾期和大蕾期，T4處理的Bt蛋白含量與其余3個(gè)處理的差異達(dá)到極顯著水平;在中蕾期，T4處理極顯著高于T2和T1處理。

圖2 施氮方式對(duì)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉棉蕾Bt蛋白含量的影響Fig.2 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in bud of transgenic cotton

2.3 施氮方式對(duì)抗蟲(chóng)棉棉鈴不同器官中Bt蛋白含量的影響

沒(méi)有思想解放就沒(méi)有改革開(kāi)放，一次大的思想解放，將會(huì)達(dá)成進(jìn)一步改革的方向性的共識(shí)，因此思想解放永遠(yuǎn)在路上。

形成期的棉子是棉鈴蟲(chóng)取食的器官之一，其中的Bt蛋白含量代表其抗蟲(chóng)性能;而棉子成熟期的Bt蛋白則成為殘留物。由圖5可以看出，在棉子的形成期，Bt蛋白含量極低，充實(shí)期迅速增加，至成熟期Bt蛋白含量增加更快。例如，T3處理的棉子Bt蛋白含量在充實(shí)期比形成期增加13.08倍，成熟期比形成期提高43.17倍。施氮方式對(duì)棉子中Bt蛋白含量的影響在不同生育階段有所不同，總體表現(xiàn)為在前中期，氮肥施用相對(duì)均衡的T2和T3處理，棉子中Bt蛋白含量較高，氮肥前移或后移的T4和T1處理棉子中Bt蛋白含量則較低;至棉子成熟期，隨著氮肥前移，棉子中Bt蛋白含量呈明顯下降的趨勢(shì)。例如，在成熟期，T2、T3和T4處理比T1處理的棉子Bt蛋白含量分別降低18.14%、27.69%和36.33%。方差分析表明，在棉子形成期和充實(shí)期，T2、T3處理的棉子Bt蛋白含量極顯著高于T4和T1處理;在成熟期，不同處理Bt蛋白含量差異均達(dá)極顯著水平。

棉鈴蟲(chóng)主要取食膨大期棉鈴的鈴殼，此期Bt蛋白的含量對(duì)抗蟲(chóng)較為關(guān)鍵;而棉鈴成熟期，鈴殼也是Bt蛋白殘留的主要器官之一。從圖3可以看出，隨著棉鈴的生長(zhǎng)發(fā)育，鈴殼中Bt蛋白的含量呈先上升后下降的趨勢(shì)。施氮方式對(duì)鈴殼中Bt蛋白含量的影響在不同生育階段有所不同。隨著氮肥前移，膨大期和充實(shí)期鈴殼中Bt蛋白含量呈上升趨勢(shì)(T4處理除外);而到吐絮期，鈴殼中Bt蛋白含量呈下降趨勢(shì)。在膨大期，T2、T3和T4比T1處理的鈴殼Bt蛋白含量分別增加79.73%、156.53%和37.16%。在吐絮期，T1、T2和 T3比T4處理的鈴殼Bt蛋白含量分別增加89.50%、77.01%和76.37%。方差分析表明，在膨大期，T3處理鈴殼中Bt蛋白含量極顯著高于T1和T4處理;在充實(shí)期，T2和T3處理鈴殼中Bt蛋白含量極顯著高于T4和T1處理;至吐絮期，T4處理的Bt蛋白含量極顯著低于其余3個(gè)處理。

圖3 施氮方式對(duì)棉鈴鈴殼Bt蛋白含量的影響Fig.3 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in boll hull of transgenic cotton

2009—2010年試驗(yàn)結(jié)果趨勢(shì)一致，本文采用了2010年數(shù)據(jù)。數(shù)據(jù)采用DPS 6.55進(jìn)行平均值和標(biāo)準(zhǔn)差運(yùn)算，所有數(shù)據(jù)均為3次重復(fù)平均值，并采用最小顯著差異法(LSD)進(jìn)行差異顯著性檢驗(yàn)。

伸長(zhǎng)期的棉纖維是棉鈴蟲(chóng)主要取食對(duì)象，此期Bt蛋白的含量對(duì)抗蟲(chóng)性有一定影響;而成熟期的棉纖維中Bt蛋白成為殘留物。從圖4可以看出，隨著棉纖維的生長(zhǎng)發(fā)育，其中的Bt蛋白含量總體呈下降的趨勢(shì)，至成熟期，Bt蛋白的含量極低。施氮方式對(duì)棉纖維中Bt蛋白含量的影響在不同生育階段有所不同。隨著氮肥前移，棉纖維伸長(zhǎng)期的Bt蛋白含量呈上升趨勢(shì)，至成熟期時(shí)，Bt蛋白含量呈下降的趨勢(shì)。在伸長(zhǎng)期，T2、T3和T4比T1處理的棉纖維Bt蛋白含量分別增加87.53%、96.96%和109.84%;至吐絮期，T2、T3和T4比T1處理的棉纖維Bt蛋白含量分別下降23.94%、26.85%和52.51%。方差分析表明，在伸長(zhǎng)期，T1處理纖維中Bt蛋白表達(dá)量極顯著低于其余3個(gè)處理;在加厚期，T3處理纖維中Bt蛋白含量極顯著高于T4和T1處理;在成熟期，T1處理Bt蛋白的含量極顯著高于T4處理。

幼葉是棉鈴蟲(chóng)主要取食對(duì)象之一，其中的Bt蛋白含量與抗蟲(chóng)性能關(guān)系密切;而脫落老葉是Bt蛋白主要?dú)埩羝鞴僦?。由圖1可見(jiàn)，隨著棉花葉片的生長(zhǎng)發(fā)育，Bt蛋白的含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，在功能期時(shí)達(dá)到高峰，在衰老期和脫落期均呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。施氮方式對(duì)葉片中Bt蛋白含量有明顯的影響。隨著氮肥前移，展開(kāi)期的葉片Bt蛋白含量有升高趨勢(shì)，而衰老期和脫落期葉片Bt蛋白含量有降低的趨勢(shì)。在展開(kāi)期，T2、T3和T4比T1處理的葉片Bt蛋白含量分別增加339.18%、375.71%和651.42%。在脫落期，T2、T3和T4比T1處理的葉片Bt蛋白含量分別減少32.25%、56.14%和58.22%。方差分析表明，在葉片展開(kāi)期，T4處理的Bt蛋白含量與其余3個(gè)處理的差異達(dá)到極顯著水平;在葉片脫落期，T1處理的Bt蛋白殘留量與其余3個(gè)處理的差異達(dá)到極顯著水平。因此說(shuō)，氮肥前移可以達(dá)到增加幼葉中Bt蛋白含量，減少老葉中Bt蛋白含量的目的。

圖4 施氮方式對(duì)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉棉纖維Bt蛋白含量的影響Fig.4 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in fiber of transgenic cotton

2.3.3 施氮方式對(duì)抗蟲(chóng)棉棉子Bt蛋白含量的影響

成本管理是一門(mén)花錢的藝術(shù)，如何將每一分錢花得恰到好處、將企業(yè)每一種資源用到最需要它的地方，是企業(yè)在新的商業(yè)時(shí)代共同面臨的難題。麥肯錫曾這樣評(píng)價(jià)中國(guó)企業(yè)：成本優(yōu)勢(shì)的巨人，卻是成本管理上的侏儒。企業(yè)尚且如此，更何況中國(guó)的公立醫(yī)院，不少院長(zhǎng)甚至連財(cái)務(wù)報(bào)表都看不懂，何談成本管理？

圖5 施氮方式對(duì)轉(zhuǎn)基因抗蟲(chóng)棉棉子Bt蛋白含量的影響Fig.5 Effects of nitrogen fertilizer methods on the content of Bt insecticidal protein in seed of transgenic cotton

2.4 不同施氮方式下棉花Bt蛋白含量的比較

設(shè)置 4 個(gè)施氮方式(基肥:花鈴肥:蓋頂肥)處理，分別是:T1(0∶0.4∶0.6)，T2(0.2∶0.4∶0.4)，T3(0.4∶0.4∶0.2)，T4(0.6∶0.4∶0)。氮肥采用尿素，施氮總量為300 kg/hm2。隨機(jī)區(qū)組設(shè)計(jì)，重復(fù)3次。每小區(qū)為7行，行寬1.2 m，行長(zhǎng)9.0 m，小區(qū)面積為75.6 m2。供試品種為中棉所72，為轉(zhuǎn)Bt+CpTI基因的抗蟲(chóng)雜交棉，由中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所提供。兩年均在4月20日地膜覆蓋直播，密度37500株/hm2。

棉鈴蟲(chóng)主要取食棉花幼嫩器官，這些器官中Bt蛋白含量與抗蟲(chóng)性能關(guān)系密切。從表1可以看出，不同施氮方式對(duì)棉花幼嫩器官中Bt蛋白含量有明顯影響。隨著氮肥前移，幼嫩器官中Bt蛋白含量呈明顯增加的趨勢(shì)(T4處理的鈴殼和棉子除外)。例如，T2比T1處理的葉片、棉蕾和鈴殼、棉纖維、棉子中Bt蛋白含量分別增加 4.49、1.19、1.80、1.88、1.70 倍。不同施氮方式對(duì)葉片 Bt蛋白含量的影響更為明顯，T2、T3、T4 分別比 T1處理增加4.49、4.76和7.51倍。說(shuō)明氮素適度的前移有利于提高抗蟲(chóng)棉各器官的抗蟲(chóng)性能，尤其是葉片。

表1 不同施氮方式下棉花幼嫩器官中Bt蛋白含量的比值Table 1 Ratio of the content of Bt insecticidal protein in young cotton organs under different nitrogen fertilizer methods

2.4.2 不同施氮方式下棉花老熟器官Bt蛋白含量的比較

2.3.1 施氮方式對(duì)棉鈴鈴殼中Bt蛋白含量的影響

創(chuàng)造性叛逆指的是變異文學(xué)的一種變異形式，在文學(xué)作品翻譯中的創(chuàng)造性翻譯，不僅包括不同的語(yǔ)言形式以及句式結(jié)構(gòu)的多重變化，也包括在文化層面的信息量的多樣變化。在文學(xué)作品的翻譯過(guò)程中，創(chuàng)造性叛逆不僅包括減詞法、增詞法、省略等，還包括闡釋法，而翻譯本身就具有闡釋特性，是一種跨文化闡釋的交際行為，既有語(yǔ)言轉(zhuǎn)換功能，也有著跨文化意義上的闡釋功能，這一特點(diǎn)更適合于對(duì)文學(xué)作品與理論著作的翻譯。然而，闡釋法并不是萬(wàn)能的，在運(yùn)用闡釋法所譯出的譯文也會(huì)有不準(zhǔn)確的情況出現(xiàn)。因此，在翻譯《孟子》的過(guò)程中必須要合理使用創(chuàng)造性叛逆闡釋論，保證翻譯文本的準(zhǔn)確性。

Bt蛋白主要?dú)埩粼诿藁ǖ睦鲜炱鞴僦?。從?可以看出，施氮方式對(duì)棉花老熟器官中Bt蛋白含量有明顯影響。隨著氮肥前移，老熟器官中Bt蛋白含量呈明顯降低的趨勢(shì)。例如，T3比T1處理的葉片、鈴殼、棉纖維和棉子中Bt蛋白含量分別減少56%、7%、27%和28%。說(shuō)明氮素適度的前移有利于減少棉花老熟器官的Bt蛋白含量。

表2 不同施氮方式下棉花老熟器官中Bt蛋白含量的比值Table 2 Ratio of the content of Bt insecticidal protein in overripe cotton organs under different nitrogen fertilizer methods

2.5 施氮方式對(duì)棉花產(chǎn)量的影響

從表3可以看出，施氮方式對(duì)棉花產(chǎn)量有明顯影響。隨著施氮前移，棉花總成鈴數(shù)和鈴重以及籽棉和皮棉產(chǎn)量有先增加趨勢(shì)，T3處理達(dá)到最高，至T4處理又有所下降。其中，T2處理比T1處理的總成鈴數(shù)、鈴重和籽棉、皮棉產(chǎn)量分別增加4.72%、1.90%和6.80%、7.99%。T3處理比T1處理的總成鈴數(shù)、鈴重和籽棉、皮棉產(chǎn)量分別增加7.97%、2.94%和11.24%、12.01%。T4處理比 T1處理的總成鈴數(shù)、鈴重和籽棉、皮棉產(chǎn)量分別增加2.90%、2.42%和5.47%、6.02%。方差分析表明，T3處理的總成鈴數(shù)和籽棉產(chǎn)量顯著的高于其它3個(gè)處理，其鈴重顯著高于T1處理，皮棉產(chǎn)量顯著高于T1和T4處理。說(shuō)明從產(chǎn)量上看，氮肥前移或后移均不利于提高產(chǎn)量，底肥∶花鈴肥∶蓋頂肥為 0.4∶0.4∶0.2 有利于棉花高產(chǎn)。

表3 施氮方式對(duì)對(duì)抗蟲(chóng)棉產(chǎn)量及產(chǎn)量構(gòu)成的影響Table 3 Effects of nitrogen fertilizer methods on yield and its components of transgenic cotton

3 結(jié)論與討論

3.1 棉花不同器官Bt蛋白含量的比較

眾多研究表明，抗蟲(chóng)棉不同器官中的Bt毒蛋白含量存在著明顯的差異。王保民等［12］和沈平等［13］報(bào)道，葉片中的Bt毒蛋白含量遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于蕾、花、鈴。張永軍等［14］報(bào)道，不同器官殺蟲(chóng)蛋白表達(dá)量順序?yàn)槿~＞鈴、花心、花萼、蕾＞花瓣＞苞葉。本研究著重比較了抗蟲(chóng)棉幼嫩器官中Bt毒蛋白含量，結(jié)果表明，幼嫩器官的Bt蛋白含量總體表現(xiàn)為棉纖維＞葉片＞棉殼、蕾＞棉子(表4)，與前人研究結(jié)果基本一致。在棉鈴膨大期，纖維的Bt蛋白含量最高，這對(duì)毒殺蛀食棉鈴的棉鈴蟲(chóng)較為有利;幼葉中Bt蛋白含量較高，也有利于棉鈴蟲(chóng)的防治。

他家有一塊地在對(duì)面的山巔之上。那里有著整條溝最深厚的黑土，光照時(shí)間充足，狗娃的父親和兵子之前在那片地里種過(guò)黃豆和芝麻，收成很不錯(cuò)。但是，上山的路崎嶇而陡峭，爬到山巔要耽誤個(gè)把時(shí)辰的工夫。狗娃和兵子每次上山之前，都要帶上一天的干糧和水，一直在地里勞作到太陽(yáng)西下才下山回家。

表4 棉花不同幼嫩器官中Bt蛋白含量的比值Table 4 Ratio of the content of Bt insecticidal protein in different young cotton organs

抗蟲(chóng)棉葉片、脫落的蕾鈴以及收獲的絮鈴是Bt蛋白的主要?dú)埩羝鞴?，它們一部分在生育期間直接掉落土壤，其中殘留的Bt蛋白對(duì)環(huán)境可能形成污染，一部分作為收獲產(chǎn)品，其中殘留的Bt蛋白對(duì)人畜健康可能存在潛在風(fēng)險(xiǎn)。目前，對(duì)抗蟲(chóng)棉老熟器官的Bt蛋白含量研究較少。張順等［7］研究了施氮量對(duì)棉花老熟器官Bt蛋白含量的影響，結(jié)果表明，棉子中Bt蛋白含量最大。本研究表明，棉花老熟器官中Bt蛋白的含量表現(xiàn)為棉子＞葉片＞鈴殼＞棉纖維。不同施氮方式處理下棉花成熟棉子中Bt蛋白含量達(dá)737.67—1158.66 ng/g(圖5)，是老熟葉片的 15.90—22.35 倍，是成熟鈴殼的 30.50—47.48 倍，是成熟棉纖維的 48.49—68.37 倍(表 5)。盡管目前研究表明，棉子中Bt蛋白對(duì)食品生產(chǎn)無(wú)明顯影響［15-17］，但仍缺少長(zhǎng)期研究結(jié)果。因此，應(yīng)進(jìn)一步加強(qiáng)對(duì)抗蟲(chóng)棉棉子用于食品生產(chǎn)的安全性研究，以消除消費(fèi)者的疑慮。本研究還表明，棉纖維中Bt蛋白殘留量?jī)H有10.79—22.72 ng/g(圖 4)，對(duì)人類衣著較為安全。

表5 棉花不同老熟器官中Bt蛋白含量的比值Table 5 Ratio of the content of Bt insecticidal protein in different overripe cotton organs

3.2 施氮方式與棉花器官Bt蛋白含量

目前，施氮方式對(duì)抗蟲(chóng)棉器官Bt蛋白表達(dá)和殘留的影響鮮有報(bào)道。本研究表明，施氮方式對(duì)棉花幼嫩和老熟器官中Bt蛋白含量均有明顯影響?？傮w表現(xiàn)為隨著氮肥前移，幼嫩器官中Bt蛋白含量呈明顯增加的趨勢(shì)，尤其是對(duì)葉片Bt蛋白含量影響更為明顯。隨著氮肥前移，棉花老熟器官中Bt蛋白含量則呈明顯降低的趨勢(shì)。說(shuō)明氮肥適度前移有利于減少棉花老熟器官的Bt蛋白含量。本研究還表明，施氮方式對(duì)幼嫩器官中Bt蛋白含量的影響大于對(duì)老熟器官中Bt蛋白含量的影響。因此說(shuō)，種植抗蟲(chóng)棉時(shí)，可通過(guò)氮肥適度前移，一方面，增加幼嫩器官中Bt蛋白含量，提高棉花的抗蟲(chóng)性能;另一方面，降低老熟器官中的Bt蛋白含量，減少對(duì)生態(tài)環(huán)境和人畜健康的潛在風(fēng)險(xiǎn)，緩解消費(fèi)者對(duì)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品安全性的擔(dān)憂。

3.3 施氮方式與棉花產(chǎn)量

氮素運(yùn)籌是調(diào)控作物生長(zhǎng)發(fā)育的重要途徑［18］。馬宗斌等［19］在黃河流域進(jìn)行棉花盆栽試驗(yàn)，設(shè)3個(gè)氮肥基施和追施比例(分別是2∶1、1∶1和 1∶2)。結(jié)果表明，基追比為 1∶2處理的皮棉產(chǎn)量分別比 1∶1和 2∶1處理增加3.66%和7.33%。Yang等［20］在長(zhǎng)江流域試驗(yàn)將常規(guī)的施氮方法(氮肥300 kg/hm2，基肥∶開(kāi)花期∶盛花期為30%∶40%∶30%)改變?yōu)槭┑?25 kg/hm2，基肥∶開(kāi)花期∶盛花期為0%∶40%∶60%。結(jié)果表明，后者可提高棉花生物量、收獲指數(shù)和產(chǎn)量。本研究表明，棉花施氮量為300 kg/hm2，采用基肥∶花鈴肥∶蓋頂肥為0.4∶0.4∶0.2的施氮方式可獲得最高產(chǎn)量，比其余3種施氮方式的籽棉產(chǎn)量和皮棉產(chǎn)量分別增加4.15%—11.24%和3.73%—12.01%。這一結(jié)果與馬宗斌等［19］在黃河流域的試驗(yàn)結(jié)果接近，但與Yang等［20］在長(zhǎng)江流域的試驗(yàn)結(jié)果不同，可能原因是長(zhǎng)江流域較黃河流域生育期長(zhǎng)，棉花生長(zhǎng)期間溫度高、雨量大，氮肥適當(dāng)后移有利于提高產(chǎn)量，而在黃河流域棉區(qū)，氮肥后移可能會(huì)造成棉花減產(chǎn)，同時(shí)，還有可能減少幼嫩器官中Bt蛋白含量，降低棉花的抗蟲(chóng)性能，另一方面，提高老熟器官中Bt蛋白含量，增加對(duì)生態(tài)環(huán)境和人畜健康的風(fēng)險(xiǎn)。

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