李軼輝

（中國人民解放軍第163醫(yī)院普外科，長沙 410003）

癌胚抗原（CEA）和甲胎蛋白（AFP）等多種指標在腫瘤患者的預(yù)后評價中發(fā)揮重要作用［1］，多種腫瘤患者血清中存在CEA增高的現(xiàn)象。近年來，隨著分子生物學的發(fā)展，有學者［2－4］發(fā)現(xiàn)大腸癌患者外周血中有高水平CEA mRNA的表達，較CEA檢測具有更高的敏感性。CK19為上皮細胞角蛋白，由于CK19mRNA在細胞外環(huán)境中的不穩(wěn)定性，患者血中CK19mRNA的檢測有助于腫瘤患者的診斷。本研究旨在探討大腸癌患者血清中CEA、CEA mRNA和CK19 mRNA檢測的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

2008年9月～2011年8月期間本院收治的大腸癌患者48例，其中男30例，女18例，年齡29～78歲，平均（56.9±7.1）歲 。組織學類型：管狀腺癌19例、乳頭狀癌16例、黏液腺癌13例。Dukes分期：A期14例，B期17例，C期12例，D期5例。腫瘤部位：結(jié)腸癌26例，直腸癌22例。

1.2 方法

清晨空腹抽取肘靜脈血3mL，3 000r／min離心5min，分離血清，放射免疫分析法檢測血清中CEA水平；反轉(zhuǎn)錄酶－聚合酶鏈鎖反應(yīng)（RT－PCR）法檢測血清中CEA mRNA和CK19mRNA 水平。CEA＞5ng／mL為陽性；CEA mRNA陽性擴增條帶為199bp；CK19mRNA陽性擴增條帶為200bp。分析血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA水平與大腸癌患者病理因素關(guān)系，比較CEA、CEA mRNA、CK19mRNA單獨及聯(lián)合檢測的陽性率。

1.3 統(tǒng)計學方法

采用SPSS 10.0統(tǒng)計軟件，兩組均數(shù)比較用t檢驗，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA水平與大腸癌患者病理因素關(guān)系

大腸癌患者血清中CEA、CEA mRNA、CK19mRNA水平檢測顯示，上述各指標Duckes C＋D期表達率明顯高于Duckes A＋B期患者（P＜0.05）（見表1）。

表1 血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA水平與大腸癌患者病理因素關(guān)系（n）

2.2 血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA聯(lián)合檢測

CEA＋CEA mRNA＋CK19mRNA聯(lián)合檢測陽性率為87.5%，明顯高于CEA、CEA mRNA、CK19mRNA任何1項檢測的陽性率（P＜0.01），也明顯高于CEA＋CEA mRNA、CEA＋CK19mRNA、CEA mRNA＋CK19mRNA任何2項聯(lián)合檢測的陽性率（P＜0.05）（見表2）。

3 討論

腫瘤原發(fā)灶生長到一定程度時，腫瘤細胞脫落，通過血液循環(huán)侵襲其它組織器官，其中大部分的腫瘤細胞被機體免疫系統(tǒng)清除，少數(shù)腫瘤細胞惡性程度較高，最終形成轉(zhuǎn)移灶，即發(fā)生腫瘤轉(zhuǎn)移［5－7］。血液循環(huán)中的腫瘤細胞數(shù)量較少，PCR技術(shù)具有較高的敏感性和特異性，在腫瘤細胞血清學檢測方面發(fā)揮了重要的作用［8，9］。

表2 血清CEA、CEA mRNA、CK19mRNA聯(lián)合檢測結(jié)果

CEA為特異性較高的腫瘤相關(guān)抗原，正常人體內(nèi)表達極少；CK19為上皮細胞角蛋白，是檢測大腸癌的有效標記物；由于以上兩者表達的不穩(wěn)定性，因此其在血清中的表達水平可有助于對腫瘤的診斷。而對腫瘤早期轉(zhuǎn)移的準確診斷，有助于為是否術(shù)后進行化療、判斷療效等提供一定的指導意義。RT－PCR法檢測外周血中 CEA mRNA、CK19 mRNA具有較高的敏感性，國外學者［10－13］很早以前就利用此法檢測血中CEA mRNA、CK19mRNA水平，也報道了各組織中CEA mRNA、CK19mRNA表達的敏感性和特異性。

本研究用RT－PCR法檢測了大腸癌患者血清中CEA mRNA、CK19mRNA水平，并用放射免疫法測定了CEA的水平。結(jié)果顯示，CEA mRNA、CK19mRNA的陽性率為62.5%，與其他學者［14，15］的研究相近。腫瘤病理學與外周血中CEA、CEA mRNA、CK19mRNA關(guān)系的研究發(fā)現(xiàn)，其與腫瘤大體分型無明顯相關(guān)，但與Dukes分期有明顯相關(guān)性，可見以上三者可反映病情的嚴重程度及預(yù)后情況。外周血CEA、CEA mRNA、CK19mRNA的檢出陽性率分別為45.8%、62.5%、62.5%，聯(lián)合檢測分析時，3項聯(lián)合檢測的陽性率明顯高于雙項及單項檢測的陽性率，可見多指標聯(lián)合檢測能提高陽性率，對預(yù)后判斷具有重要價值。

綜上所述，基因水平的檢測比蛋白水平檢測更為敏感，大腸癌外周血中CEA mRNA、CK19mRNA的檢測有助于疾病的預(yù)后判斷，聯(lián)合檢測大腸癌患者血清中CEA、CEA mRNA、CK19mRNA的陽性率高于單一指標，增大預(yù)后判斷價值。

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