伍婷婷,張瑞杰,王英輝*,冷 冰,薛保銘,劉 向,林衛(wèi)東 (.廣西大學(xué)環(huán)境學(xué)院,廣西 南寧5000；2.廣西師范學(xué)院,北部灣環(huán)境演變與資源利用省部共建教育部重點(diǎn)實驗室,廣西 南寧 5000；.中國科學(xué)院廣州地球化學(xué)研究所,廣東 廣州5060；.廣西環(huán)境保護(hù)科學(xué)研究院,廣西 南寧 50002)

抗生素是一種由微生物自身產(chǎn)生或人工合成、低濃度下能抑制微生物生產(chǎn)或殺滅其他微生物的有機(jī)化學(xué)物質(zhì),在醫(yī)療衛(wèi)生、水產(chǎn)和畜禽養(yǎng)殖等過程中作為藥物或飼料添加劑[1-3].我國是抗生素生產(chǎn)和使用大國,據(jù)統(tǒng)計,2009年,我國抗生素產(chǎn)量合計14.7萬t,約2.5萬t用于出口,其余12.2萬 t在國內(nèi)使用,人均年消費(fèi)量 138g左右,是美國的10倍,濫用現(xiàn)象嚴(yán)重[4].

隨著大量抗生素的使用,越來越多不能被充分吸收利用的抗生素通過人畜糞便直接進(jìn)入土壤或水體,或經(jīng)污水處理廠后進(jìn)入地表水系統(tǒng),部分抗生素易于被顆粒物吸附進(jìn)而沉降進(jìn)入沉積物或直接吸附于沉積物上.近年來抗生素等藥物在水體、土壤等環(huán)境介質(zhì)中被廣泛檢出,并顯示了不同程度的負(fù)面生態(tài)環(huán)境效應(yīng),引起了國際社會的廣泛關(guān)注[5-7],成為一類重要的新型有機(jī)污染物[8].

邕江是南寧市最重要的飲用水源河流,也是主要的納污河流,屬珠江流域西江水系,河道全長 116.4km,市轄區(qū)內(nèi) 15年平均水資源總量約 139.9億 m3.南寧地處中國華南、西南和東南亞經(jīng)濟(jì)圈的結(jié)合部,是環(huán)北部灣沿岸重要經(jīng)濟(jì)中心、大西南出海通道樞紐城市.隨著北部灣開發(fā)的迅猛發(fā)展,南寧城市規(guī)模也在不斷擴(kuò)大,人口持續(xù)增長,居民生活、醫(yī)療廢水和工農(nóng)業(yè)發(fā)展產(chǎn)生的抗生素污染物通過各種渠道進(jìn)入邕江,對南寧市區(qū)飲用水安全造成嚴(yán)重威脅.本研究選取邕江南寧市區(qū)段代表性斷面表層沉積物為研究對象,對其中典型抗生素進(jìn)行分析,旨在掌握邕江沉積物抗生素污染水平與空間分布特征,并探討其來源,服務(wù)于邕江環(huán)境污染防治工作.

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

Agilent1200型高效液相色譜儀,串聯(lián)Agilent 6410 Triple Quad(三重四級桿)質(zhì)譜儀;渦旋震蕩器;超聲波清洗器;低速離心機(jī);Supelco SPE Manifolds 12孔固相萃取裝置;CNWBOND HLB固相萃取小柱(500mg,6 mL)和SAX固相萃取小柱(500mg,6mL);德國Elementar Vario EL III元素分析儀.

磺胺類(Sulfonamides,SAs):磺胺醋酰(SAAM,≥99%)、磺胺嘧啶(SDZ,≥99.5%)、磺胺基異噁唑(SMX,≥99.5%)、磺胺噻唑(STZ,≥99.5%)、磺胺二甲嘧啶(SMZ,≥99.5%);甲氧芐氨嘧啶(TMP,≥98%);大環(huán)內(nèi)酯類(Macrolides, MLs)標(biāo) 準(zhǔn) 品 :紅 霉 素 (ETM,≥99.7%)、 阿 奇 霉 素(AZM,≥95%)、克拉霉素(CTM,≥95%)、羅紅霉素(RTM,≥90%).上述標(biāo)準(zhǔn)品均購自 Sigma-Aldrich公司(美國).甲氧芐氨嘧啶抗菌范圍和磺胺藥相近,為磺胺的增效劑,可增強(qiáng)其療效幾倍到幾十倍,將其與SAs抗生素共同討論.

回收率指示劑:13C3-咖啡因甲醇溶液,濃度為1mg/mL,購自美國劍橋同位素實驗室.

沉積物提取液:含 1mmol/L Na2EDTA的0.1mol/L檸檬酸緩沖液(pH4)與甲醇1∶1混合.

1.2 樣品采集及預(yù)處理

2011年4月采用全球衛(wèi)星定位系統(tǒng)(GPS)定位,利用掘式采集器在邕江南寧市區(qū)河段內(nèi)布點(diǎn),選擇取水口上游約100m及重要支流匯入干流下游約500m處采集11個表層沉積物樣品和1個支流沉積物樣品(TS7,在前階段對邕江支流水體抗生素污染研究時發(fā)現(xiàn)該點(diǎn)位的污染程度很高,故采樣分析,以供參考對比)(圖 1).采樣期間無降雨.每個樣品重約 500g,采樣深度 0～5cm,采集后裝入聚乙烯袋中迅速運(yùn)回實驗室,離心去除水分,冷凍干燥后研磨過 60目篩,裝入聚乙烯密封袋-20℃冷藏保存,待提取.

樣品處理和檢測均采用張瑞杰[9]提出的方法.準(zhǔn)確稱取4.00g樣品于25mL聚丙烯尖底離心管中,加入5mL提取液于樣品中,渦旋混勻1min,常溫下超聲 15min,離心后取上清液,重復(fù)提取 4次,將5次提取的上清液合并至同一燒瓶中,50℃下旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)趕除有機(jī)溶劑;向燒瓶中加入 0.1g Na2EDTA消除金屬離子干擾,加入純凈水稀釋至200mL.

將 SAX柱和 HLB柱串接,預(yù)先用甲醇(2mL/次×3 次)、純凈水(2mL/次×3 次)活化處理,然后加入pH 3的超純水,將稀釋后的提取液以5mL/min流速經(jīng)過上述串聯(lián)好的萃取小柱進(jìn)行固相萃取.萃取完成后,移去SAX小柱,用純凈水沖洗HLB柱,再用甲醇洗脫抗生素,室溫下氮吹至近干,用初始的流動相比例溶液定容至 1mL,用0.2μm針頭式濾膜過濾樣品至1.5mL棕色進(jìn)樣瓶中,4℃冰箱內(nèi)保存,進(jìn)行HPLC- MS/MS分析測樣.

圖1 邕江南寧市區(qū)段采樣點(diǎn)分布Fig.1 The sampling sites in the Yongjiang River, Nanning city

1.3 HPLC-MS/MS分析與質(zhì)量控制

色譜條件:Agilent ZORBAX Eclipse XRDC18Rapid Resolution HT (2.1mm×50mm,1.8μm)液相色譜柱,柱前接 Security GuardTMC18(4.0mm×3.0mm)保護(hù)柱.

流動相:流動相 A為含 5mmol/L醋酸銨和0.1%甲酸的水溶液,流動相 B為甲醇,流速0.3mL/min,進(jìn)樣量 2μL,柱溫 25℃.梯度洗脫進(jìn)行分離,每個梯度完成后平衡時間為8min.

質(zhì)譜條件:選擇電噴霧離子源(ESI),正離子模式;干燥氣溫度 350℃;干燥氣流速 10L/min;毛細(xì)管電壓4500 V;MS1與MS2溫度均為100℃;噴霧針壓力40 Psi;碰撞氣:氮?dú)?多離子反應(yīng)監(jiān)測(MRM)掃描模式.

采用外標(biāo)法對樣品濃度進(jìn)行定量分析,線性方程濃度范圍由 0.5,1.0,2.0,5.0,10.0,20.0,50.0,100.0,200.0μg/L 9個濃度組成,其R2值大于0.99(樣品所測得的濃度均未超過標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍).實驗前測定抗生素回收率:在樣品中加入200ng目標(biāo)化合物(設(shè)置5個平行樣),4℃保存24h后用相同的方法對其進(jìn)行預(yù)處理和提取.測定其濃度后(扣除空白值),計算各種抗生素的回收率.實驗表明抗生素的回收率為57.6%～73.6% (表1).為控制實驗過程中人為誤差和實驗室背景影響,分別設(shè)置一個空白樣和樣品平行樣,并在進(jìn)樣過程中同時測定固定濃度標(biāo)樣進(jìn)行質(zhì)量控制.取10倍信噪比為定量檢出限(0.07～0.22ng/g).

表1 沉積物中抗生素回歸曲線方程、回收率及方法檢出限Table 1 Regression curve equation、recovery and limit of detection of the antibiotics in sediments

2 結(jié)果與討論

2.1 邕江南寧市區(qū)段表層沉積物抗生素含量水平

邕江表層沉積物抗生素含量見表 2.從表 2可見,10種目標(biāo)抗生素共檢出9種,其中4種MLs抗生素檢出率均為100%,SAs類的SMZ和TMP的檢出率亦高達(dá)83%.MLs為邕江的主要污染物,平均含量為1.14ng/g,其中ETM- H2O含量最高,平均含量為 1.90ng/g,RTM 平均含量稍低,為1.56ng/g,CTM與 AZM的平均含量分別為0.58ng/g和0.52ng/g;SAs和TMP中,TMP平均含量稍高,為1.00ng/g,4種SAs類抗生素平均含量＜0.06ng/g.與國際獸用藥品注冊基準(zhǔn)研究委員會(VICH)規(guī)定的環(huán)境閾值(土壤為 100ng/g)相比較[10],含量較低.

沉積物中MLs含量較SAs和TMP含量高,而在水中則相反,SAs和TMP含量高于MLs.為了更好地解析沉積物抗生素含量與水中抗生素含量分布差異,現(xiàn)引用表觀分配系數(shù)(P-PC),該系數(shù)為沉積物中抗生素含量與對應(yīng)水體中抗生素含量的比值,可在一定程度上指征某化合物的吸附性能[10],邕江水體P-PC值見表3.

從表3可知,河流中MLs 的表觀系數(shù)普遍高于SAs及TMP的表觀系數(shù),即MLs抗生素的吸附性優(yōu)于SAs及TMP,同時表明沉積物與水中抗生素濃度分布有所不同.邕江沉積物對 SDZ、RTM的吸附性能明顯低于珠江沉積物對這2種抗生素的吸附性能;而與海河相比,邕江沉積物對TMP、ETM、RTM三種抗生素的吸附性能高于海河沉積物的吸附性能,也優(yōu)于東江沉積物對TMP、SDZ、ETM、RTM四種抗生素的吸附性.綜上所述,不同河流的 P-PC系數(shù)相差較大,吸附性能也差異較大,這可能與河流的水文環(huán)境及化合物的理化性質(zhì)有關(guān).

表2 邕江表層沉積物中10種抗生素含量(ng/g干重)Table 2 Concentrations of 10 antibiotics in surface sediments of Yongjiang River(ng/g dry weight)

表3 國內(nèi)外河流中抗生素的表觀分配系數(shù)(L/kg)Table 3 Pseudo-partitioning coefficients of the selected antibiotics in the different rivers(L/kg)

大量抗生素通過各種途徑不斷進(jìn)入環(huán)境中,國內(nèi)外許多河流沉積物均已檢出不同種類,且含量差異較大的抗生素.如表 4所示,邕江沉積物中 SDZ最大含量為 0.22ng/g,均低于上述有SDZ檢出的河流;TMP除在黃河中未檢出外,在邕江、海河、遼河及廣州河流中均有檢出,邕江處于中等偏下水平;同為枯水期,SMZ在珠江、廣州某河涌以及海河中的最大含量分別是邕江含量的190、21和7倍,而在黃河和遼河中未檢出;SMX除在邕江與美國Cache La Poudre River檢出外,其余 5條河流均未檢出,邕江中SMX的平均含量也僅為美國Cache La Poudre河的1/50; ETM-H2O在以上河流中均有檢出,且含量較高,在邕江中 ETM-H2O最大含量為7.82 ng/g,約為其他河流的1/5～1/9,處于中等偏下水平;廣州某河涌底泥中CTM含量約為邕江的 2.5倍;RTM均有檢出且含量也處中等偏下水平,與 ETM-H2O 分布類似,邕江沉積物中RTM 最大含量為廣州某河涌底泥的 1/105.與其他河流相比,邕江沉積物中8種SAs與MLs抗生素均有檢出,與國內(nèi)外河流相比為最多種類的檢出,但含量總體處于較低水平.

表4 國內(nèi)外河流沉積物中抗生素的含量比較(ng/g)Table 4 Global comparisons antibiotic concentrations in the sediments from rivers(ng/g)

總體來說,與國際獸用藥品注冊基準(zhǔn)研究委員會規(guī)定的環(huán)境閾值[10]以及國內(nèi)外河流沉積物中抗生素含量相比,邕江沉積物中抗生素含量尚處于較低水平,但是邕江沉積物中抗生素檢出種類較多,尤其是MLs抗生素檢出率為100%,抗生素抗性基因的存在需引起重視.抗生素抗性基因(ARGs)被Pruden[17]作為一種新型“環(huán)境污染物”提出,ARGs在環(huán)境中殘留時間較長、在菌群間傳播、遷移和轉(zhuǎn)化,會造成微生物抗性基因的改變,引發(fā)新的污染[18-23].

2.2 邕江南寧市區(qū)段沉積物抗生素含量空間分布特征

邕江南寧市段沉積物抗生素含量分布見圖2.由圖 2可知,支流采樣點(diǎn)(TS7)與邕江干流采樣點(diǎn)抗生素含量相差較大.TS7抗生素總含量為30.84ng/g,明顯高于其他采樣點(diǎn),其中,MLs抗生素為 21.2ng/g,最大值為 RTM(8.50ng/g);SAs和TMP總含量為 9.62ng/g,最大值為 TMP(8.51ng/g).而干流沉積物中,MLs含量為 0.06～2.58ng/g,平均值為0.76ng/g;SAs和TMP含量總量為 n.d.～1.07ng/g,均值 0.09ng/g.抗生素含量的差異與污染源及水流環(huán)境相關(guān),TS7是支流采樣點(diǎn),此支流包含 10條小支流,流經(jīng)大片生活區(qū)及農(nóng)業(yè)區(qū),大量生活污水、農(nóng)業(yè)廢水匯入,造成了水體中大量抗生素富集于沉積物中;其次,由于支流流量較小,抗生素更易于被沉積物吸附,也加劇了沉積物中抗生素的污染.需要說明的是單獨(dú)一個采樣點(diǎn) TS7并不能完全反映支流抗生素污染的總體情況,本研究對TS7的分析側(cè)重于將其污染水平作為參考,并與干流點(diǎn)位作簡單對比.

邕江干流上11個采樣點(diǎn)分布均勻,按照居住人口規(guī)模可分為 3段:上游(S1～S4采樣點(diǎn)),中游(S5～S6,S8 采樣點(diǎn)),下游(S9～S12 采樣點(diǎn)),從上游到下游人口密度(總量)逐漸增加.上游、中游和下游中抗生素總含量均值分別為 2.42,3.45,4.80 ng/g,抗生素含量呈遞增趨勢,總體上與人口變化趨勢一致.

圖2 邕江沉積物抗生素含量分布Fig.2 The concentration of antibiotics in sediments from the Yongjiang River

從圖2可知,MLs在邕江干流上總體呈現(xiàn)從上游至下游遞增趨勢,上游(1.64ng/g)＜中游(3.25ng/g)＜下游(4.29ng/g),下游含量明顯高于上游區(qū)域.SAs和TMP呈現(xiàn)出與MLs不同的空間分布特征:上游(0.78ng/g)＞下游(0.51ng/g)＞中游(0.20ng/g).

MLs與SAs和TMP都為人獸共用的抗生素,但所占比例不同.根據(jù)《英國抗生素應(yīng)用以及若干人畜病原抗藥性的概況:2004》[28]中的統(tǒng)計,英國人體醫(yī)用處方中最常用的抗生素是β-內(nèi)酰胺類抗生素,其次是大環(huán)內(nèi)酯類和四環(huán)素類,這幾種抗生素占所有抗生素處方的 90%.獸醫(yī)處方中最常用的抗生素為四環(huán)素類,其次是磺胺類、磺胺增效劑TMP和β-內(nèi)酰胺類抗生素.這3類抗生素占獸醫(yī)抗生素總銷售量 82%.中國抗生素使用情況有所不同,2006～2008年,在北京、廣州、湖北3個城市的醫(yī)院處方中,頭孢菌素類、大環(huán)內(nèi)酯類、青霉素類和氟喹諾酮類抗生素居于抗生素使用量的前列,SAs所占比例很小[24-27].根據(jù)中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第627號文(水產(chǎn)用獸藥地方標(biāo)準(zhǔn)升國家標(biāo)準(zhǔn)目錄)[29]可見,SDM/SMZ、SMX、SDZ和 TMP為常用的獸藥.根據(jù)我國抗生素使用情況可見,SAs主要作為獸用抗生素使用,MLs主要作為人用抗生素.

由邕江表層沉積物中抗生素空間分布可知,SAs為上游＞下游＞中游,這與上游較為密集的畜禽養(yǎng)殖和淡水養(yǎng)殖業(yè)有關(guān).養(yǎng)殖活動經(jīng)常帶入較為嚴(yán)重的獸用抗生素污染[30-31],尤其是S1號和 S4號點(diǎn)(分別為1.36ng/g和1.21ng/g).研究表明,施用獸用抗生素后,能被生物體吸收利用的僅有 10%～70%,而剩余的抗生素則以原藥或其代謝產(chǎn)物形式進(jìn)入水環(huán)境[32].因此,在畜禽養(yǎng)殖和水產(chǎn)養(yǎng)殖附近的水環(huán)境中,SAs殘留較多[11,33-36].

MLs與SAs的分布特征不同,從上游至下游呈遞增趨勢,這可能是由于邕江下游流經(jīng)南寧市主城區(qū),該區(qū)人口密集,大量生活污水及醫(yī)療廢水經(jīng)支流匯入邕江.同時由于生活污水中含有較多MLs,該類藥物具有較強(qiáng)的吸附性,因此較多的MLs進(jìn)入水體富集于沉積物中.

取 10.0mg沉積物干樣品,用德國 Elementar Vario EL III元素分析儀測定總有機(jī)碳(TOC)含量,將邕江沉積物TOC含量與檢出率大于10%的抗生素,以及各種抗生素之間進(jìn)行因素分析(spearman相關(guān)系數(shù)分析),得出的相關(guān)系數(shù)矩陣如表 5.結(jié)果表明大多數(shù)抗生素之間存在顯著或極顯著的相關(guān)關(guān)系,其中4種MLs之間、SDZ與TMP之間以及SDZ、TMP與4種MLs之間的相關(guān)系數(shù)均大于 0.9,表明它們可能有著共同的復(fù)合污染來源.各種抗生素含量與TOC均無顯著相關(guān)關(guān)系.

表5 邕江沉積物中抗生素、TOC相關(guān)關(guān)系分析Table 5 Relationship between antibiotic concentrations and TOC

2.3 南寧邕江飲用水源取水口上游沉積物抗生素含量

邕江為南寧市的過境河流,是南寧市主要飲用水水源地,也是主要納污河流.14條支流包含大量的生活污水、農(nóng)業(yè)及部分工業(yè)廢水匯入邕江,對邕江水質(zhì)有一定的影響.由表5可見,S8、S9、S10三點(diǎn)為南寧飲用水源取水口上游100m斷面采樣點(diǎn),3個采樣點(diǎn)MLs均值為1.15ng/g,SAs和TMP均值為0.08ng/g,MLs比SAs和TMP含量高,而與此相反,太湖支流南苕溪流域飲用水源底泥[37]中的SAs含量(均值約1.0ng/g)較 MLs(均值約 0.38ng/g)高.苕溪是太湖源頭和重要飲用水水源,其多年平均入湖水量達(dá)27億m3,占太湖流域多年平均水資源總量的 15%,是太湖流域最大的入湖河流[38].苕溪流域流經(jīng)大部分為農(nóng)田,種植業(yè)集約化程度高,養(yǎng)殖業(yè)發(fā)達(dá),綜合水質(zhì)評價結(jié)果為劣Ⅴ類[39].邕江3個取水口流域目前水質(zhì)為II—III類,水源地兩岸排放的生活污水以及工業(yè)排放的污水對邕江水質(zhì)造成一定威脅,再加上網(wǎng)箱養(yǎng)魚,導(dǎo)致水體受到了不同程度的污染[40].

在農(nóng)業(yè)流域與城市河流沉積物中,已發(fā)現(xiàn) SAs的存在;在城市河流沉積物中,MLs被檢出[41-42].常用的獸用抗生素10年間已從最基本的青霉素、氯霉素、土霉素等,變?yōu)榛前奉?、恩諾沙星、頭孢類、喹諾酮類等高端抗生素[43],根據(jù)中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第627號文[29],中規(guī)定的獸用抗生素標(biāo)準(zhǔn),加劇了3種SAs和TMP的使用,大量的SAs和TMP通過各種途徑進(jìn)入到環(huán)境中;Luo等[11]在海河流域中發(fā)現(xiàn)SAs主要來源于畜禽養(yǎng)殖與水產(chǎn)養(yǎng)殖;馬來西亞 3個州的畜牧養(yǎng)殖業(yè)過程中也檢出了多種SAs[34];Zhang等[9]通過相關(guān)分析及因素分析發(fā)現(xiàn),我國東江流域 SAs主要來源于動物用養(yǎng)殖源,而MLs主要來源于人用生活源.

表6 邕江飲用水源取水口上游沉積物抗生素含量(ng/g干重)Table 6 The antibiotics concentrations of sediments from the drinking water sources in the Yongjiang River(ng/g dry weight)

沉積物中抗生素殘留量受藥品用量、化學(xué)結(jié)構(gòu)和環(huán)境條件影響[33].苕溪水源地與邕江水源地的沉積物抗生素分析表明,因苕溪流域流經(jīng)的環(huán)境為農(nóng)田區(qū)域 ,周邊養(yǎng)殖業(yè)發(fā)達(dá),養(yǎng)殖廢水的排入造成了苕溪水源地SAs含量高于MLs[36].然而,邕江水源地流經(jīng)的是南寧市人口密集區(qū),大量生活污水及醫(yī)療廢水進(jìn)入水體,導(dǎo)致MLs含量高于SAs.

3 結(jié)論

3.1 邕江表層沉積物檢測到抗生素污染,檢出種類較多,但含量與國內(nèi)外其他河流相比,尚處于較低水平.邕江沉積物MLs含量明顯高于SAs和TMP,這與MLs具有較強(qiáng)的吸附性能以及抗生素的使用結(jié)構(gòu)有關(guān).

3.2 不同類型的抗生素在邕江沉積物中的空間分布特征不同,MLs含量分布呈現(xiàn)下游＞中游＞上游的趨勢,而SAs和TMP則為上游＞下游＞中游.生活污水及醫(yī)療廢水的排放是邕江下游沉積物MLs較高的主要原因,而畜禽和水產(chǎn)養(yǎng)殖則是上游SAs和TMP的主要來源.

3.3 MLs檢出率為100%,為邕江沉積物中主要的抗生素污染物,高檢出率的發(fā)生可能引發(fā)抗生素抗性基因在菌群內(nèi)傳播、遷移和轉(zhuǎn)化,引發(fā)新的污染.

3.4 邕江飲用水源取水口上游沉積物中MLs含量比SAs和TMP高,與沿岸居民生活污水排放及MLs較強(qiáng)的吸附性相關(guān).

[1]Demain A L. Pharmaceutically active secondary metabolites of microorganisms [J]. APPI. Microbiol Biotechnol, 1999,52:455-463.

[2]汪正范,楊樹民,岳衛(wèi)華.色譜聯(lián)用技術(shù)[J]. 化學(xué)工業(yè)出版社,2001.

[3]Robert E Ardrey. Liquid Chromatography-Mass Spectrometry: An Introduction [M]. Clinical Chemistry, 2003, doi: 10.1373/clinchem. 2003.021808

[4]田 野,中國抗生素人均消費(fèi)量是美國十倍濫用 3大源頭[EB/OL]. http://health.sohu.com/20100205/n270078813.shtml.2010-02-05.

[5]邰義萍,莫測輝,李彥文,等.東莞市蔬菜基地土壤中四環(huán)素類抗生素的含量與分布 [J]. 中國環(huán)境科學(xué), 2011,31(1):90-95.

[6]Thomas Heberer. Tracking Persistent Pharmceutical residues from municipal sewage to drinking water [J]. Journal of Hydrology,2002,266:175-189.

[7]Michael P Schlüsener, Kai Bester. Persistence of antibiotics such as macrolides, tiamulin and salinomycin in soil [J].Environmental Pollution, 2006,143:565-571.

[8]吳小蓮,莫測輝,李彥文,等.蔬菜中喹諾酮類抗生素污染探查與風(fēng)險評價:以廣州市超市蔬菜為例 [J]. 環(huán)境科學(xué), 2011,32(6):1703-1709.

[9]張瑞杰.黃渤海區(qū)域及東江流域環(huán)境中典型抗生素污染研究[D]. 煙臺:中國科學(xué)院煙臺海岸帶研究所, 2011.

[10]Kim S C, Carlson K. Temporal and spatial trends in the occurrence of Human and veterinary antibiotics in aqueous and river sediment matrices [J]. Environmental Science & Technology,2007,41(1):50-57.

[11]Luo Yi, Xu Lin, Rysz Michal, et al. Occurrence and Transport of Tetracycline, Sulfonamide, Quinolone, and Macrolide Antibiotics in the Haihe River Basin, China [J]. Environmental Science and Technology, 2011,45(5):1827–1833.

[12]Yang J F, Ying G G, Zhao J L , et al. Simultaneous determination of four classes of antibiotics in sediments of the Pearl Rivers using RRLC-MS/MS [J]. Science of the Total Environment,2010,408:3424-3432.

[13]Zhang R, Zhang G, Tang J, et al. Levels, spatial distribution and sources of selected antibiotics in the East River (Dongjiang),South China [J]. Aquatic Ecosystem Health and Management Accepted in June 16, 2011.

[14]Kim S C, Carlson K. Quantification of human and veterinary antibiotics in water and sediment using SPE/LC/MS/MS [J].Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2006, 387(4):1301-1315.

[15]Zhou Li-Jun, Ying Guang-Guo, Zhao Jian-Liang, et al. Trends in the occurrence of human and veterinary antibiotics in the sediments of the Yellow River, Hai River and Liao River in northern China [J]. Environmental Pollution, 2011,159(7):1877-1885.

[16]唐才明,黃秋鑫.污泥和沉積物中微量大環(huán)內(nèi)酯類、磺胺類抗生素、甲氧芐胺嘧啶和氯霉素的測定 [J]. 分析化學(xué)研究報告,2009,8(37):1119-1124.

[17]Pruden A, Pei R, Storteboom H, Carlson K H. Antibiotic resistance genes as emerging contaminants: studies in Northern Colorado [J]. Environmental Science and Technology, 2006,40(23):7445-7450.

[18]Bertolla F, Kay E, Simonet P. Potential dissemination of antibiotic resistance genes from transgenic plants to microorganisms [J].Infection Control and Hospital Epidemiology, 2000,21(6):390-393.

[19]Dantas G, Sommer M O,Oluwasegun R D, et al. Bacteria subsisting on antibiotics [J]. Science, 2008,320(5827):100-103.

[20]Davison J. Genetic exchange between bacteria in the environment[J]. Plasmid, 1999,42(2):73-91.

[21]Dieffeabach C W, Dveksler G S (translated by Zhong K, Qu L J).PCR Primer: A Laboratory Manual [M]. Beijing: Science Press 2000 (in Chinese).

[22]蔣培余,潘勁草.細(xì)菌遺傳元件水平轉(zhuǎn)移與抗生素抗性研究進(jìn)展[J]. 微生物學(xué)通報, 2006,33(4):167-171.

[23]鄒世春,徐維海,張 干.北江河水中抗生素抗性基因污染初步研究 [J]. 生態(tài)毒理學(xué)報, 2009,4(5):655-660.

[24]羅朝利,史文慧.2006～2008年我院抗菌藥物用藥分析 [J]. 中國醫(yī)院用藥評價與分析, 2010,02: 146-147.

[25]趙庚昊,王榮樂.2006～2008年我院抗菌藥物使用情況分析[J].中國醫(yī)院用藥評價與分析, 2010, 03: 219-220.

[26]程慧. 2006～2008年我院抗菌藥物應(yīng)用分析[J]. 中國醫(yī)院用藥評價與分析, 2010,03:223-225.

[27]吳雪茹,林新穎. 2006～2008年我院抗菌藥物用藥分析 [J]. 中國中醫(yī)藥現(xiàn)代遠(yuǎn)程教育, 2009,08:75-78.

[28]Communicable Disease Surveillance Centre Northern Ireland,Department for Environment Food and Rural Affairs, Department of Agriculture and Rural Development, Northern Ireland, et al.Overview of antimicrobial usage and bacterial resistance in selected human and animal pathogens in the UK:2004[Z]. 2004.

[29]中華人民共和國農(nóng)業(yè)部.中華人民共和國農(nóng)業(yè)部公告第 627號[Z].2006-03-14.

[30]Matsui Y, Ozu T, Inoue T, et al. Occurrence of a veterinary antibiotic in streams in a small catchment area with livestock farms [J]. Desalination, 2008,226(1/3):215-221.

[31]Le T X, Munekage Y. Residues of selected antibiotics in water and mud from shrimp ponds in mangrove areas in Viet Nam [J].Marine Pollution Bulletin, 2004,49(11-12):922-929.

[32]Sarmah A K, Meyer M T, Boxall A B A. A global perspective on the use, sales, exposure pathways, occurrence, fate and effects of veterinary antibiotics (VAs)in the environment [J]. Chemsphere,2006,65:725-759.

[33]俞 慎,王 敏,洪有為.環(huán)境介質(zhì)中的抗生素及其微生物生態(tài)效應(yīng) [J]. 生態(tài)學(xué)報, 2011,31(15):4437-4446.

[34]Nancy T. Malintan, Mustafa Ali Mohd. Determination of sulfonamides in selected Malaysian swine wastewater by high-performance liquid chromatography [J]. Journal of Chromatography A, 2006,1127(1/2):154–160.

[35]Jiang L, Chen S Y, Yang R, et al. Occurrence of antibiotics in the aquatic environment of the Changjiang delta, China [J].Environmental Chemistry, 2008,27(3):371-374.

[36]Kolpin D W, Furlong E T, Meyer M T, et al. Pharmaceuticals,hormones and other organic waste water contaminants in US streams 1999-2000.A national reconnaissance [J]. Environmental Science and Technology, 2002,36:1202-1211.

[37]陳永山,章海波.苕溪流域典型斷面底泥 14種抗生素污染特征[J]. 環(huán)境科學(xué), 2011,3 (32):667-672.

[38]太湖流域水環(huán)境綜合治理總體方案[EB/OL]. http://www.waterechina.com/Show/A/d31735fb-5990-4da9-a564-1e19dd8df1 68.aspx. 2008-8-23.

[39]徐兵兵.南苕溪青山湖流域水污染特征分析 [D]. 浙江農(nóng)林大學(xué), 2011,6.

[40]銀 波.南寧市飲用水污染現(xiàn)狀分析與保護(hù)對策 [J]. 科技傳播, 2010,(7下):18-19.

[41]Tang C M, Huang Q X, Yu Y Y, et al. Multiresidue determination of sulfonamides,macrolides,trimethoprim,and chloramphenicol in sewage sludge and sediment using ultrasonic extraction coupled with solid phase extraction and liquid chromatography-tandem mass spectrometry [J]. Chinese Journal of Analytical Chemistry,2009,37(8):1119-1124.

[42]Arikan O A, Rice C, Codling E. Occurrence of antibiotics and hormones in a major agricultural watershed [J]. Desalination,2008,226(1-3):121-133.

[43]楊大正.雞豬魚嗑藥百姓吃素:養(yǎng)殖業(yè)濫用抗生素已成公開秘密[EB/OL]. 南方日報. http://news.xinhuanet.com/society/2011-12/21/c_111260063_2.htm. 2011-12-21.