延安大學(xué)附屬醫(yī)院兒科（延安716000） 張慧平 李元霞 龐隨軍 馮 娜 王春芬

支氣管哮喘是由多種細(xì)胞和細(xì)胞因子共同參與的氣道慢性炎癥性疾病。近年來，國內(nèi)外對Leptin、Eotaxin及TIgE與哮喘關(guān)系的研究不斷深入，但大量臨床研究多限于成年人及年長兒童，上述因子對嬰幼兒哮喘的確切機(jī)制及其相互關(guān)系并不完全清楚。本組旨在通過測定嬰幼兒哮喘患兒外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表達(dá)，并分析其相互關(guān)系，為嬰幼兒哮喘的防治提供新的思路。

資料與方法

1 臨床資料 觀察組選擇2010年1月至2011年5月延安大學(xué)附屬醫(yī)院兒科門診就診或住院的急性發(fā)作期嬰幼兒哮喘患兒53例，其中男34例，女19例，年齡6～36月，平均24.38±8.38月。均符合2008年中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘學(xué)會修訂的支氣管哮喘防治指南中的兒童哮喘診斷標(biāo)準(zhǔn)［1］。哮喘急性發(fā)作期患兒給予吸氧、糖皮質(zhì)激素吸人、支氣管舒張劑等對癥支持治療。同時(shí)除外并發(fā)有呼吸衰竭、心力衰竭的極重度患兒、先天性心臟病、結(jié)核感染、支氣管異物、全身使用糖皮質(zhì)激素者及肥胖癥者。經(jīng)正規(guī)治療達(dá)臨床緩解出院。癥狀緩解后按GINA方案進(jìn)行分級治療，并于我院兒科門診隨診觀察或電話聯(lián)系?；純憾ㄆ陔S診，癥狀、體征消失，并維持3個(gè)月以上者為臨床緩解期。對照組選擇健康兒童42例，其中男28例，女14例，年齡6～36月，平均26.63±2.38月，無個(gè)人及家族過敏性疾病，無寄生蟲感染史，近3個(gè)月無糖皮質(zhì)激素用藥史。

2 標(biāo)本留取及保存 哮喘組于急性發(fā)作期、臨床緩解期及健康對照組分別留取空腹靜脈血3ml，室溫下30min后，用離心機(jī)以3000r／min離心5min，取其血清，分裝在3個(gè)0.5ml經(jīng)高溫消毒的無熱原、無內(nèi)毒素EP管，暫時(shí)保存于-200C冰箱，2個(gè)月內(nèi)轉(zhuǎn)移至-700C超低溫冰箱保存。

3 標(biāo)本檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附法檢驗(yàn)Eotaxin，試劑盒由美國ADL公司生產(chǎn)，上海銳聰實(shí)驗(yàn)室設(shè)備有限公司提供Eotaxin測定值范圍：0～240pg／ml，敏感度：0.1pg／ml。熒光酶聯(lián)免疫法測定TIgE，試劑盒購自天津新傳生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)。用放射免疫分析法測定Leptin，用λ放射免疫計(jì)數(shù)儀測量標(biāo)本的放射性，由專人負(fù)責(zé)檢測，檢測儀器為FJ2008-G放射免疫計(jì)數(shù)儀，Leptin試劑盒購于晶美生物技術(shù)有限公司。均按試劑盒說明規(guī)范操作，標(biāo)本采用同一批測定。

結(jié) 果

1 嬰幼兒哮喘患兒外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表達(dá) 見附表。嬰幼兒哮喘患兒急性發(fā)作期與臨床緩解期及健康對照組血清Leptin、Eotaxin及總IgE水平比較均有顯著性差異（P＜0.05）；臨床緩解期血清Leptin、Eotaxin及TIgE水平與對照組比較均有顯著性差異（P＜0.05）。

附表 嬰幼兒哮喘患兒外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表達(dá)（±s）

附表 嬰幼兒哮喘患兒外周血中Leptin、Eotaxin及TIgE的表達(dá)（±s）

組 別 n Leptin（ng／ml） Eotaxin（pg／ml） TIgE（U／L）哮喘組 急性期 53 13.19±3.85 50.32±15.98 498.88±69.93緩解期 53 6.51±2.24 19.56±6.08 208.19±56.84對照組 42 3.96±2.02 6.72±2.49 49.66±10.51

2 相關(guān)性分析 嬰幼兒哮喘患兒急性發(fā)作期Eotaxin與TIgE成正相關(guān)（r＝0.686，P＜0.05）；嬰幼兒哮喘患兒臨床緩解期Eotaxin與TIgE成正相關(guān)（r＝0.770，P＜0.05）；嬰幼兒哮喘患兒急性發(fā)作期Leptin與Eotaxin（r＝0.125，P＞0.05）、Leptin與TIgE（r＝0.102，P＞0.05）均不相關(guān)；嬰幼兒哮喘患兒臨床緩解期Leptin與Eotaxin（r＝0.127，P＞0.05）、Leptin與TIgE（r＝0.261，P ＞0.05），均不相關(guān)。

討 論

嗜酸細(xì)胞（Eosinophil，EOS）是哮喘炎癥反應(yīng)中造成組織損傷和肺功能異常的主要效應(yīng)細(xì)胞，EOS浸潤是哮喘的基本病理特征。嗜酸粒細(xì)胞趨化因子（Eotaxin）是一種選擇性嗜酸性粒細(xì)胞（EOS）趨化因子和強(qiáng)有力的激活劑，通過結(jié)合EOS表面的受體，趨化EOS招募回氣管導(dǎo)致一系列級聯(lián)反應(yīng)，引起過敏性炎癥損傷的各種呼吸道表現(xiàn)。Eotaxin在氣管內(nèi)皮細(xì)胞和上皮細(xì)胞上表達(dá)［2］，參與哮喘氣管的炎癥反應(yīng)。本組結(jié)果顯示：嬰幼兒哮喘患兒急性發(fā)作期血清Eotaxin水平明顯高于臨床緩解期及健康對照組，且臨床緩解期血清Eotaxin水平也明顯高于健康對照組，與國外文獻(xiàn)報(bào)道相似［3］，提示血清Eotaxin可能作為炎性因子參與嬰幼兒哮喘發(fā)病，并且哮喘患兒在臨床緩解期氣道炎癥仍持續(xù)存在。Eotaxin對EOS具有特異趨化活性，故從抑制EOS募集的角度探討哮喘治療可能成為新的方向。

IgE介導(dǎo)的速發(fā)型哮喘及炎癥誘導(dǎo)的遲發(fā)型哮喘均引起支氣管痙攣、氣流受阻，而氣流受阻是哮喘病理生理改變的核心。近年來雖然哮喘的發(fā)病機(jī)制有新的發(fā)現(xiàn)，但I(xiàn)gE仍是參與哮喘變態(tài)反應(yīng)的主要抗體，哮喘及變態(tài)反應(yīng)性疾病患者多數(shù)IgE升高。本組結(jié)果顯示：哮喘患兒急性發(fā)作期血清TIgE水平明顯于臨床緩解期，急性發(fā)作期及臨床緩解期血清IgE水平顯著高于健康對照組，與國內(nèi)外研究結(jié)果一致［4］。因此，哮喘患兒血清IgE水平的變化與哮喘的病情變化有密切關(guān)系，嬰幼兒哮喘患兒血IgE的檢測可作為觀察哮喘的指標(biāo)之一。

近來研究表明：瘦素（Leptin）可能是哮喘發(fā)生的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，可能通過BCL-2（Bcell lymphoma／leu-kemia-2，B細(xì)胞淋巴瘤／白血病-2）通路，抑制炎癥細(xì)胞的凋亡，而嗜酸性粒細(xì)胞的凋亡障礙亦是近年來提出的支氣管哮喘的發(fā)病機(jī)制之一，喘息兒童中具有高嗜酸性粒細(xì)胞血癥者是反復(fù)喘息發(fā)作的危險(xiǎn)因素之一［1］。同樣是可能發(fā)展為支氣管哮喘的危險(xiǎn)因素，故瘦素是否通過抑制炎癥細(xì)胞的凋亡參與嗜酸性粒細(xì)胞的上調(diào)值得關(guān)注，但目前未有直接證據(jù)表明此點(diǎn)。還有研究指出：瘦素可以通過抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的功能而導(dǎo)致哮喘的發(fā)生。瘦素除影響炎癥細(xì)胞外，也與炎癥介質(zhì)的釋放密切相關(guān)：瘦素可增加白三烯的合成，增加血清特異性IgE，這些炎癥因子及炎癥介質(zhì)的上調(diào)可能促進(jìn)炎癥細(xì)胞的趨化及引起炎癥因子瀑布式釋放，從而在兒童喘息的氣管炎癥反應(yīng)中起到作用。雖然并非所有的喘息兒童都有氣管高反應(yīng)性，但氣管的高反應(yīng)性與持續(xù)反復(fù)的兒童喘息密切相關(guān)［5］。瘦素在哮喘氣管炎癥發(fā)生中起重要作用，氣管炎癥的發(fā)生反過來又引起瘦素產(chǎn)生的增加，從而形成一個(gè)惡性循環(huán)。而實(shí)驗(yàn)表明［6］：給予外源性瘦素可以增強(qiáng)野生型小鼠的氣管炎癥反應(yīng)及小鼠氣管對乙酰膽堿的反應(yīng)性，推測瘦素可能參與了氣管反應(yīng)性的調(diào)控。本研究結(jié)果顯示：哮喘患兒急性期血清Leptin水平高于緩解期及對照組，哮喘臨床緩解期Leptin水平與對照組比較有顯著性差異，與Jang等研究結(jié)果相似［7］。表明Leptin可能影響氣管功能，增加哮喘發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)，在哮喘細(xì)胞因子的精細(xì)網(wǎng)絡(luò)調(diào)節(jié)中可能起一定的作用。結(jié)合本實(shí)驗(yàn)結(jié)果考慮哮喘患兒血清Leptin水平的變化是哮喘發(fā)作的結(jié)果。

哮喘的病因和發(fā)病機(jī)制相當(dāng)復(fù)雜，細(xì)胞因子失衡是導(dǎo)致哮喘患者體內(nèi)IgE增高的關(guān)鍵。本組結(jié)果表明：血清Eotaxin與IgE水平在哮喘急性發(fā)作期及臨床緩解期均呈正相關(guān)關(guān)系，與國外研究結(jié)論一致［8］。提示哮喘是由多細(xì)胞和細(xì)胞因子參與的呼吸道慢性炎癥性疾病，細(xì)胞因子失衡是哮喘的重要表現(xiàn)，Eotaxin與TIgE在哮喘發(fā)病中可能彼此之間相互影響，共同參與哮喘的病理生理改變。哮喘的診斷相對更重視癥狀、體征的價(jià)值，本組結(jié)果表明：動(dòng)態(tài)觀察哮喘患兒血清Eotaxin與TIgE水平，可更全面評價(jià)細(xì)胞因子在哮喘發(fā)病中的作用及相互關(guān)系。了解Eotaxin與TIgE之間的關(guān)系，有助于探討哮喘的病理生理機(jī)制，對于哮喘的診斷和病情評估有指導(dǎo)性意義，為通過阻斷Eotaxin及IgE產(chǎn)生途徑治療哮喘的新思路提供理論依據(jù)。

本組結(jié)果提示：不論是嬰幼兒哮喘患兒急性發(fā)作期還是臨床緩解期，Leptin與Eotaxin及總IgE無相關(guān)性，與目前報(bào)道不太一致，研究發(fā)現(xiàn)［9］：血清Leptin水平在哮喘兒童中比健康兒童顯著升高，哮喘兒童血中IgE與Leptin回歸分析僅存在微弱的相關(guān)性；Parameswaran等［10］認(rèn)為 Leptin抑制IL-13誘導(dǎo)的Eotaxin的產(chǎn)生，參與哮喘的發(fā)生機(jī)制，提示Leptin對Thl／Th2細(xì)胞之間平衡的調(diào)節(jié)尚無一致的結(jié)論。但本研究僅對Leptin在嬰幼兒哮喘發(fā)病中作用做初步探討，且患兒年齡段在＜3歲，樣本含量相對較少，Leptin在嬰幼兒哮喘發(fā)病中的作用需進(jìn)一步研究。

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