王 英

維持性血液透析(maintenance hemodialysis，MHD)患者存在氧化應(yīng)激狀態(tài)。近年來的研究表明氧化應(yīng)激參與了MHD患者的心血管并發(fā)癥、貧血、透析相關(guān)性淀粉樣變、慢性炎癥狀態(tài)的發(fā)生發(fā)展，是一重要的病理生理機制［1］。目前廣泛認為MHD患者應(yīng)實行預防性抗氧化治療。冬蟲夏草是一種名貴中藥，其在腎臟疾病中的應(yīng)用日益廣泛，研究表明冬蟲夏草具有改善細胞代謝，調(diào)節(jié)脂代謝，抗氧化應(yīng)激及抗腎纖維化等作用，但其對MHD患者氧化應(yīng)激的影響目前尚未見報道。我們應(yīng)用冬蟲夏草對MHD患者進行治療，觀察其對氧化應(yīng)激的影響，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。

1.材料與方法

1.1 材料 2008年5月至2009年10月在我院血液凈化中心進行維持性血液透析患者20例(男性12例，女性8例)，年齡26～75年，平均年齡56.12±20.41歲;其中原發(fā)疾病為慢性腎小球腎炎12例，糖尿病腎病3例，多囊腎1例，馬兜鈴酸腎病2例，高血壓腎損害1例，梗阻性腎病1例。入選者在實驗前1個月內(nèi)無急慢性感染、輸血、手術(shù)、惡性腫瘤、活動性自身免疫性疾病史，未應(yīng)用靜脈鐵制劑，未應(yīng)用維生素C、維生素E等抗氧化藥物。所有患者常規(guī)血液透析3個月以上，平均透析時間20±9.21個月，每周透析2～3次，每次4小時，采用碳酸氫鹽透析液，透析液流量500ml/min，血流量200～280ml/min，透析器(F6，聚砜膜，膜面積 1.4m2，F(xiàn)resenius，德國)，均一次性使用，水處理過程包括軟化、活性炭吸附、反滲透等步驟。選擇年齡、性別匹配的20名健康志愿者(男性12名，女性8名)，平均年齡56.05±23.45歲，作為對照組。

1.2 研究方法 20例MHD患者口服冬蟲夏草(商品名百令膠囊，每粒含蟲草菌絲粉0.2g)5粒/次，每日3次，連續(xù)8周，用藥前后采血標本。患者在干預期間其他治療藥物和透析方案不變。

1.3 觀察指標 檢測兩組實驗前和MHD組8周氧化應(yīng)激指標血漿丙二醛(MDA)、循環(huán)晚期氧化蛋白產(chǎn)物(AOPP)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的含量。MHD組用藥前后常規(guī)化驗肝功(谷草轉(zhuǎn)氨酶AST、谷丙轉(zhuǎn)氨酶ALT)、腎功(尿素BUN、肌酐Cr)、血常規(guī)(包括白細胞WBC、血小板PLT、血紅蛋白Hb)。

1.4 檢測方法 MDA采用硫代巴比妥酸反應(yīng)法，SOD采用比色法，GSH-Px活性檢測采用5'，5'－二硫代雙2－硝基苯甲酸比色法，使用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒。AOPP按文獻［3］進行。谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、尿素、肌酐采用日立7600全自動生化分析儀檢測。血常規(guī)采用血細胞計數(shù)儀。

2.結(jié)果

2.1 MHD患者氧化應(yīng)激狀態(tài) 與對照組比較，MHD組血漿SOD和GSH-Px含量顯著降低(P＜0.05)，MDA和AOPP含量增高(P＜0.05)，見表1。

2.2 冬蟲夏草對MHD患者氧化應(yīng)激的影響 MHD組用藥前后比較，口服冬蟲夏草8周后患者血漿SOD和GSH-Px含量明顯升高(P＜0.05)，MDA和 AOPP含量降低(P＜0.05)，見表1。

2.3 冬蟲夏草的安全性 服藥期間患者無不適主訴，肝功、腎功、血象無明顯變化，見表1。

表1 兩組氧化應(yīng)激狀態(tài)及普羅布考干預結(jié)果比較(n=12，±s)

表1 兩組氧化應(yīng)激狀態(tài)及普羅布考干預結(jié)果比較(n=12，±s)

注:與對照組比較，*P＜0.05;治療前后比較，#P＜0.05。

MHD組治療前 治療后SOD(μU/L)128.34±19.66 81.76±14.67* 116.24±19.85#GSH-Px(μmol/L)136.53±20.78 82.34±22.53* 109.58±11.66#MDA(μmol/L)4.89±0.92 9.39±2.46* 5.78±1.57#AOPP(μmol/L)97.14±21.50 197.86±29.90* 110.43±20.71#ALT(U/L)— 25.52±3.87 26.64±3.96 AST(U/L)— 29.23±3.32 26.34±4.29 BUN(mmol/L)— 4.83±2.11 4.25±1.96 Cr(μmol/L)— 63.42±9.07 71.34±7.66 WBC(×109/L)— 5.87±2.48 5.97±3.01 PLT(×109/L)— 18.33±6.92 17.54±5.57 Hb(g/L)—指標 對照組102.76±10.78 106.88±11.54

3.討論

氧化應(yīng)激(oxidative stress，OS)狀態(tài)是指機體活性氧的生成增加或/和機體清除活性氧的能力降低，導致活性氧的生成和清除失衡，過量的活性氧引起機體分子、細胞的損害［2］。由于尿毒癥自身代謝紊亂、透析膜的生物不相容性、透析液的微生物污染、抗氧化物質(zhì)從透析液中丟失以及靜脈鐵劑的應(yīng)用使維持性血液透析患者體內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)明顯增強，表現(xiàn)為丙二醛(MDA)等脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物和晚期氧化蛋白產(chǎn)物(advanced oxidation protein products，AOPP)等氧化物質(zhì)水平升高，谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)等抗氧化物水平降低［3］。本研究結(jié)果表明，MHD組血漿SOD和GSH-Px含量顯著降低，抗氧化酶活性明顯低于正常人，MDA和AOPP含量增高，氧化產(chǎn)物水平明顯增高，再次證實維持性血液透析患者存在明顯的氧化應(yīng)激。

心腦血管并發(fā)癥已成為維持性血液透析患者死亡的主要原因。動脈粥樣硬化是心腦血管疾病的共同基礎(chǔ)，氧化應(yīng)激在動脈粥樣硬化的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。由于維持性血液透析使患者氧化應(yīng)激反應(yīng)明顯增強，加速了動脈粥樣硬化的發(fā)生。同時氧化應(yīng)激參與了慢性炎癥、貧血、淀粉樣變性等其他透析并發(fā)癥的發(fā)生［4］。因此眾多學者紛紛提出血液透析患者應(yīng)實行預防性抗氧化治療，以其減少MHD患者心腦血管事件的發(fā)生。

冬蟲夏草是一種富含多糖、氨基酸、脂肪酸、甘露糖及多種微量元素的名貴中藥，具有滋陰壯陽之功效，應(yīng)用于慢性腎臟病的治療已逾千年的歷史。冬蟲夏草制劑具有穩(wěn)定溶酶體膜，保護Na-K-ATP酶活性，減少脂質(zhì)過氧化損傷等作用，通過抑制低密度脂蛋白的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)發(fā)揮強大的抗氧化及抗動脈粥樣硬化作用［5］。研究表明，冬蟲夏草制劑能改善自發(fā)性高血壓大鼠腎臟氧化應(yīng)激狀態(tài)。冬蟲夏草制劑能否改善維持性血液透析患者的氧化應(yīng)激狀態(tài)目前尚未見報道。百令膠囊是采用人工培養(yǎng)真菌菌種發(fā)酵而得得人工蟲草，與天然蟲草具有相似的化學成分與藥理作用。我們的研究結(jié)果表明，MHD組口服百令膠囊8周后，血漿SOD和GSH-Px含量顯著升高，說明冬蟲夏草制劑能增強MHD患者的抗氧化能力，同時血漿MDA和AOPP含量降低，說明冬蟲夏草制劑能改善MHD患者的氧化應(yīng)激水平。我們同時監(jiān)測了用藥期間患者肝腎功能及血象變化，無一例出現(xiàn)異常，所有患者無不適主訴，說明應(yīng)用冬蟲夏草制劑是安全的。

綜上所述，維持性血液透析患者存在明顯的氧化應(yīng)激，短期口服冬蟲夏草制劑能改善氧化應(yīng)激狀態(tài)，無明顯不良反應(yīng)，可能成為維持性血液透析患者抗氧化治療的理想選擇，進一步減少心腦血管事件的發(fā)生。由于本研究例數(shù)偏少，時間較短，尚需進行較大規(guī)模隨機對照試驗觀察，且需要長期隨訪觀察心腦血管疾病發(fā)病率、病死率等一些終點目標。

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2 陳瑗，周玫，侯凡凡，等.氧化應(yīng)激與慢性腎功能衰竭透析患者動脈粥樣硬化的發(fā)生［J］．中華腎臟病雜志，2002，18(5):377.

3 Witko-Sarsat V，F(xiàn)riedlander M，Capeillere-Blandin C，et al.Advanced oxidation protein products as a novel marker of oxidative stress in uremia［J］．Kidney Int，1996，49(5):1304.

4 Oka Y，Miyazaki M，Takatsu S，et al.Lowering of oxidative stress in hemodialysis patients by dialysate cleaning:in relation to arteriosclerosis［J］．Ther Apher Dial，2006，8:313 －319.

5 O'Leary VJ，Tilling L，F(xiàn)leetwwod G，et al.The resistance of low density lipoprotein to oxidation promoted by coper and its use as an index of antioxidant therapy［J］．Atherosclerosis，2007，119:169 －173.

6 唐榮，周巧玲.冬蟲夏草對自發(fā)性高血壓大鼠klotho表達及氧化應(yīng)激的影響［J］．腎臟病與透析腎移植雜志，2010，19(4):338－343.