龐俊偉

（山西中醫(yī)學(xué)院，山西 太原 030024）

朱砂蓮辛、寒，味苦，為馬兜鈴科馬兜鈴屬植物朱砂蓮的根莖，具有清熱解毒、消腫止痛之功效［1］。朱砂蓮中含有毒性成分是馬兜鈴酸，可以引起腎功能損傷。馬兜鈴酸引起的腎臟損傷主要是由于引起腎小管-間質(zhì)的損傷導(dǎo)致溶菌酶（LYS）、血肌肝（Scr）、β2-微球蛋白（β2-MG）含量明顯增高。啤酒花性平，味苦，為蕁麻目大麻科葎草屬植物啤酒花的花序，具有能健胃消食、利尿安神之功效?！妒澄镏兴幣c便方》中記載飲用啤酒花球果泡制成的茶汁能輔助治療腎臟疾病［2］。本研究通過(guò)中醫(yī)理論指導(dǎo)下的方藥配伍減毒方法，測(cè)定尿中極微量的蛋白和酶的變化，觀察朱砂蓮與啤酒花不同配比對(duì)馬兜鈴酸腎毒性的拮抗作用，以探討其藥理作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 近交系SD 大鼠，雌雄各半，170 g～230 g，由中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所提供，合格證號(hào)：SCXK（京）2011-0002。飼養(yǎng)環(huán)境通風(fēng)良好，飼養(yǎng)溫度25 ℃～28 ℃，濕度為70%，自由飲水、進(jìn)食。

1.1.2 藥物與試劑 朱砂蓮購(gòu)自新疆阿合奇縣人民醫(yī)院藥劑科，由山西藥科職業(yè)技術(shù)學(xué)院通過(guò)薄層鑒別和性狀鑒別確認(rèn)系馬兜鈴科植物朱砂蓮，啤酒花購(gòu)自新疆阿合奇縣人民醫(yī)院藥劑科，經(jīng)鑒定為正品。血清肌酐測(cè)定試劑盒（上海生物制品研究所提供，批號(hào)：20120423），β2-微球蛋白（寧波瑞源生物科技有限公司提供，批號(hào)：20120711），堿性磷酸酶（鄭州蘭森生物技術(shù)有限公司提供，批號(hào)：20120206），溶菌酶（上海西唐生物科技有限公司提供，批號(hào)：20120522）。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器 MS4002SDR 精密天平（梅特勒-托利多儀器公司生產(chǎn)），TDL-5-A 離心機(jī)（深圳市三利化學(xué)儀器生產(chǎn)），7170A 型全自動(dòng)生化分析儀（日本Hitachi 公司）。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 朱砂蓮藥液制備 朱砂蓮加冷水浸泡30 min，初用強(qiáng)火加熱煮沸，沸后用小火保持30 min，過(guò)濾，藥渣復(fù)煎，合并濾液，60 ℃～100 ℃水浴濃縮至1 g/mL，120 ℃濕熱滅菌后裝瓶冷藏備用，使用前適當(dāng)加熱。

1.2.2 朱砂蓮配伍啤酒花藥液制備 制備方法同朱砂蓮藥液的制備，二者按照如下比例配伍后煎熬濃縮至1 g/mL，120 ℃濕熱滅菌后裝瓶冷藏備用，使用前適當(dāng)加熱。干啤酒花與朱砂蓮：高劑量為10∶1，中劑量為5∶1，低劑量為2∶1；鮮啤酒花與朱砂蓮：高劑量為100∶1；中劑量為50∶1；低劑量為20∶1。

1.2.3 分組及給藥 SD 大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)（實(shí)驗(yàn)室）1 w 后，按照體重、雌雄各半隨機(jī)分為朱砂蓮高劑量組（A 組）、朱砂蓮中劑量組（B 組）、朱砂蓮低劑量組（C組）、干啤酒花配朱砂蓮高劑量組（D 組）、干啤酒花配朱砂蓮中劑量組（E 組）、干啤酒花配朱砂蓮低劑量組（F 組）、鮮啤酒花配朱砂蓮高劑量組（G 組）、鮮啤酒花配朱砂蓮中劑量組（H 組）、鮮啤酒花配朱砂蓮低劑量組（I 組）、空白組（J 組）10 組，每組12 只。各組均精飼料喂養(yǎng)、自由飲水。根據(jù)現(xiàn)在藥物的一般用量，以古人用量的1/3 作為現(xiàn)在成人的常用劑量，并根據(jù)成人1 d 用量按大鼠的體重體表面積換算所得劑量，A、B、C 組分別按10 g/（kg·d）、5 g/（kg·d）、1 g/（kg·d）給藥，其余各組均按照10 g/（kg·d）給藥，每天灌胃1 次，每次5 mL，連續(xù)60 d?？瞻捉M以等量生理鹽水灌胃。

1.2.4 標(biāo)本采集與指標(biāo)測(cè)定 實(shí)驗(yàn)開始時(shí)對(duì)各組大鼠稱重，并定期稱定體重。60 d 后，以上10 組大鼠均在空腹時(shí)用代謝籠稱重。取尿液，股動(dòng)脈取血后處死，留取標(biāo)本作血尿檢測(cè)。堿性磷酸酶（AKP）、血肌酐（SCr）、溶菌酶（LYS）、β2微球蛋白（β2-MG）的測(cè)定依照試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

結(jié)果采用SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件分析，數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）來(lái)表示，組間差異采用方差分析檢驗(yàn)，若P<0.05 則認(rèn)為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

與朱砂蓮高劑量組比較，其余各組大鼠體重明顯升高（P<0.05），AKP 含量明顯降低，LSY 和β2-MG 含量均有不同程度的降低（P<0.05），除鮮啤酒花配朱砂蓮中劑量組升高外其余各組均有不同程度的降低。與空白組比較，朱砂蓮高劑量組、朱砂蓮中劑量組Scr、β2-MG 含量顯著升高，LYS 含量雖然升高，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。然而朱砂蓮低劑量組與空白組Scr、β2-MG、LYS 含量比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明朱砂蓮中高劑量組能引起大鼠腎臟損傷。經(jīng)配伍啤酒花后，干啤酒花配伍朱砂蓮各劑量組AKP、Scr、β2-MG、LYS 含量與朱砂蓮高劑量組比較均明顯下降。鮮啤酒花配伍朱砂蓮各劑量組與朱砂蓮高劑量組比較AKP 含量明顯下降。而鮮啤酒花配伍朱砂蓮高、低劑量組Scr 含量較朱砂蓮高劑量組有所降低，鮮啤酒花配伍朱砂蓮中劑量組Scr 含量較朱砂蓮高劑量組有所升高，但差異比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；鮮啤酒花配伍朱砂蓮各劑量組與朱砂蓮高劑量組LSY 含量比較有所下降，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；鮮啤酒花配伍朱砂蓮高、中劑量組與朱砂蓮高劑量組β2-MG 含量比較明顯下降（P<0.05），但鮮啤酒花配伍朱砂蓮低劑量組與朱砂蓮高劑量組β2-MG 含量比較有所下降，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明啤酒花在一定程度上可以緩解馬兜鈴酸腎病導(dǎo)致的津液代謝障礙，達(dá)到預(yù)防和延緩馬兜鈴酸腎病的發(fā)生以及減輕腎臟功能損害的作用。與鮮啤酒花配伍朱砂蓮相應(yīng)的各劑量組比較，干啤酒花配伍朱砂蓮相對(duì)應(yīng)的各劑量組AKP、Scr、β2-MG、LYS 含量均有不同程度的降低。說(shuō)明干啤酒花在一定程度上能夠減輕朱砂蓮所致腎臟的毒性，而且效果優(yōu)于鮮啤酒花。結(jié)果見表1。

表1 各組大鼠體重、生化指標(biāo)比較 （±s）

表1 各組大鼠體重、生化指標(biāo)比較 （±s）

注：與A 組比較，1）P<0.05；與G 組比較，2）P<0.05；與H 組比較，3）P<0.05；與I 組比較，4）P<0.05

3 討論

中醫(yī)學(xué)認(rèn)為，津液在體內(nèi)的代謝主要依靠肺、脾、腎三臟的功能?！端貑柦?jīng)脈別篇》曰：“飲入于胃，游溢精氣，上輸于脾；脾氣散精，上歸于肺，通調(diào)水道，下輸膀胱；水精四布，五經(jīng)并行。”肺、脾、腎相互協(xié)調(diào)，共同維持人體水液的生成、輸布與排泄，對(duì)于津液的清濁升降運(yùn)動(dòng)起著主導(dǎo)作用。肺的宣發(fā)肅降、脾的健運(yùn)，腎的蒸騰氣化之功能協(xié)調(diào)，則津液代謝正常，馬兜鈴酸就能及時(shí)排出體外，不在腎臟蓄積，對(duì)腎臟的損害，對(duì)馬兜鈴酸所致腎病具有一定的防治作用。

［1］謝宗萬(wàn).全國(guó)中草藥匯編（上、下冊(cè)）［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，1996：383-384.

［2］葉桔泉.食物中藥與便方［M］.南京：江蘇科學(xué)出版社，1971：118-119.