郭愛民，曹建民，周海濤

(1.中國石油大學(xué)，北京102249;2.北京體育大學(xué)，北京100084;3.北京聯(lián)合大學(xué) 生物化學(xué)工程學(xué)院，北京100023)

中醫(yī)認(rèn)為，運(yùn)動過度則元?dú)夂膿p，氣損則力竭。極限負(fù)荷訓(xùn)練產(chǎn)生的疲勞，初則傷脾，久則傷腎。腎為先天之本，主骨骼生精髓。機(jī)體在穩(wěn)定狀態(tài)下，腎血流量可以通過自身調(diào)節(jié)機(jī)制來維持相對恒定。但在劇烈運(yùn)動時(shí)，腎血流在神經(jīng)和體液因素的影響下發(fā)生改變。由于各器官血流量重新分配，使得活動器官特別是肌肉的血流量增多，腎血流量急劇下降，并伴隨運(yùn)動過程的持續(xù)和強(qiáng)度遞增表現(xiàn)的更加明顯［1］。腎臟的這種不完全缺血狀態(tài)形成了“運(yùn)動性腎缺血”。運(yùn)動停止后，腎血供應(yīng)恢復(fù)形成運(yùn)動性腎缺血后的“再灌注”［2］。腎臟缺血再灌注目前是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn).目前研究認(rèn)為腎臟缺血再灌注發(fā)生的機(jī)制與腎臟自由基代謝紊亂、能量代謝障礙、炎癥損傷、鈣代謝紊亂、細(xì)胞凋亡、內(nèi)皮功能紊亂等有關(guān)，而細(xì)胞因子的變化與腎臟缺血再灌注損傷更是密切相關(guān)［3］，是當(dāng)前的研究熱點(diǎn)。隨著現(xiàn)代中醫(yī)藥理論的發(fā)展、現(xiàn)代藥理學(xué)理論及現(xiàn)代生物技術(shù)的更新，更多的單劑或配伍組方應(yīng)用于體育實(shí)踐。中藥以其多靶點(diǎn)、多途徑作用且?guī)缀醪缓`禁成分的特點(diǎn)，日益在提高運(yùn)動員身體機(jī)能及緩解疲勞方面顯示出獨(dú)特的優(yōu)勢。目前運(yùn)動性腎缺血再灌注損傷中腎臟細(xì)胞因子及相關(guān)基因的表達(dá)尚未見有直接的研究報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)選用紅景天，結(jié)合前期研究，觀察其對過度訓(xùn)練大鼠腎臟炎性細(xì)胞因子IL－1β、TNF－α、IL－6、IL－18蛋白及基因表達(dá)的抑制作用，探討其對大鼠運(yùn)動性腎臟缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1 動物和分組

清潔級75只雄性Wistar大鼠，49天齡，體重(196.95±11.36)g，由北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)部提供，動物生產(chǎn)合格證編號SCXK(京)2006－0008。實(shí)驗(yàn)中，實(shí)驗(yàn)室溫度保持在(22±2)℃，相對濕度55% ～75%，光照時(shí)間隨自然變化。大鼠以基礎(chǔ)飼料(北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部實(shí)驗(yàn)動物科學(xué)部提供)和蒸餾水常規(guī)飼養(yǎng)，自由飲食。實(shí)驗(yàn)時(shí)間63天，正式訓(xùn)練56天。動物實(shí)驗(yàn)于北京體育大學(xué)運(yùn)動營養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室完成。

大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)4天后，以20 min·d－1的運(yùn)動量對其進(jìn)行為期3天的篩選，淘汰個(gè)別不適應(yīng)的游泳者，剔除不符合實(shí)驗(yàn)要求的大鼠，剩余大鼠以數(shù)字隨機(jī)分組法分為4組:對照組(C組，12只)、一般訓(xùn)練組(M組，12只)、過度訓(xùn)練組(OM組，24只)和紅景天+過度訓(xùn)練組(ROM組，24只)。采用專業(yè)灌胃器每天灌胃一次，ROM組劑量為4.48 g·kg－1，灌胃體積為5 mL·kg－1，其他各組灌胃等量生理鹽水。

1.2 實(shí)驗(yàn)用藥

紅景天(Rhodiola)產(chǎn)自河北，北京同仁堂購得，批號:130413537，并經(jīng)天津中瑞藥業(yè)有限公司高占友高級工程師鑒定。稱取紅景天干品50g加水500mL，浸泡30min后煎30min，將所得水煎液過濾，再將過濾出的紅景天加水500mL煎30min，將所得水煎液過濾。將2次過濾出的水煎液混合，濃縮至生藥濃度1g(生藥)/mL，4℃存放備用。

1.3 訓(xùn)練及測試方案

C組常規(guī)飼養(yǎng)，不運(yùn)動，無任何干預(yù)。M組進(jìn)行正式中等強(qiáng)度游泳訓(xùn)練8周，每周6天，每天1次，第1次下水游20分鐘，此后逐漸增加，至第1周末每天游60min，第2周末加至每天游90min，第3周末加至每天游120min，此后5周均保持此運(yùn)動量。OM組和ROM組前3周訓(xùn)練同M組，第4周起開始安排高強(qiáng)度訓(xùn)練。大鼠進(jìn)行負(fù)重游泳，每次訓(xùn)練至力竭。力竭標(biāo)準(zhǔn)以大鼠下沉后10s不露出水面為準(zhǔn)。第1～3周負(fù)0.5%體重，第4周負(fù)1%體重，第5周負(fù)2%體重，每天訓(xùn)練1次。第6周每天上、下午各訓(xùn)練1次，第7～8周，每天上午、下午、夜間各訓(xùn)練1次，均負(fù)5%體重［4］。

C組大鼠均正常生長，無意外死亡，第8周末仍為12只。隨機(jī)剔除2只，10只用于實(shí)驗(yàn)取材。M組大鼠均正常生長，無意外死亡發(fā)生，第8周末仍為12只。隨機(jī)剔除2只，10只用于實(shí)驗(yàn)取材。OM組和ROM組大鼠因尾部負(fù)重，疲勞、力竭不能恢復(fù)及訓(xùn)練意外死亡等原因，死亡率較高。至第8周末時(shí)，OM組24只僅剩11只，隨機(jī)剔除1只，10只用于實(shí)驗(yàn)取材;ROM組24只僅剩14只，剔除4只，10只用于實(shí)驗(yàn)取材。

1.4 指標(biāo)測定

末次游泳訓(xùn)練24小時(shí)后，各組大鼠乙醚適度麻醉，頸總動脈取血，加入檸檬酸鈉溶液抗凝，37℃水浴30 min后，4℃、3000 r/min離心10 min，分離制備血清，置－20℃冰箱中保存待查。迅速取雙腎，剔除筋膜，置于預(yù)冷的生理鹽水中洗凈血污，觀察腎臟大小、色澤、質(zhì)地，切取腎組織，分別用消毒鋁箔包好，迅速投入液氮暫存，隨后保存于－70℃冰箱凍存待測。

取部分腎組織，10%甲醛固定，石蠟包埋，制成4 μm厚切片，進(jìn)行HE染色和組織病理學(xué)及免疫組化分析。另取部分皮質(zhì)，4%戊二醛固定，超薄切片機(jī)制成50 nm的超薄切片，用日本產(chǎn)JEM－1200EX透射電鏡觀察超薄切片(×8 000倍)腎小球基底膜的厚度，每張電鏡切片隨機(jī)選擇8個(gè)包含腎小球基底膜的視野，觀察基底膜厚度、系膜基質(zhì)及足突變化情況，并攝像。電子染色進(jìn)行超微結(jié)構(gòu)分析。

采用Jaffe苦味酸法測定血清肌酐，采用二乙酰－肟法測定血尿素氮，采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測試血清IL－1β、IL－6、TNF－α、IL－18蛋白表達(dá)，采用免疫組織化學(xué)法測定檢測腎組織 IL－1β、IL－6、TNF－α、IL－18蛋白表達(dá)，采用RT－PCR法測定腎組織IL－1β、IL－6、TNF－α、IL－18基因表達(dá)。以上試劑盒均由上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供(批號:130403237)。

1.5 腎臟病理變化評價(jià)

參照Pallers標(biāo)準(zhǔn)［5］，400倍光鏡下隨機(jī)選5個(gè)視野，每個(gè)視野選10個(gè)腎小管評分。腎小管明顯擴(kuò)張，細(xì)胞扁平為1分;刷狀緣損傷為1分;脫落為2分;細(xì)胞膜大泡為1分;細(xì)胞漿空泡為1分;間質(zhì)水腫1分;腎小管腔內(nèi)有脫落的壞死細(xì)胞未形成管型或碎片為1分;形成管型或碎片為2分。腎小管評分由兩名技術(shù)員雙盲計(jì)算，取平均值。

1.6 數(shù)理統(tǒng)計(jì)法

采用SPSS 12.0軟件對所有數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，數(shù)據(jù)用平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示，組間差異采用方差分析，等級計(jì)數(shù)資料采用秩和檢驗(yàn)分析，相關(guān)關(guān)系采用Pearson相關(guān)分析。顯著性水平為P＜0.05，非常顯著性水平為P＜0.01。

2 結(jié)果

2.1 腎組織病理改變

2.1.1 光鏡觀察(圖1)C組和M組大鼠腎組織結(jié)構(gòu)正常，無淤血、變性和水腫，腎小管管腔內(nèi)無管型。OM組大鼠腎小球有淤血，小管上皮細(xì)胞水腫、空泡變性、管腔擴(kuò)張，管腔有少量脫落絨毛和上皮細(xì)胞，以及各種管型。ROM組大鼠組織學(xué)改變較OM組輕，小管上皮細(xì)胞有輕微水腫、空泡變性，管腔擴(kuò)張現(xiàn)象，無蛋白管型和細(xì)胞管型。C組大鼠腎小管Paller評分與M組比較無顯著差異(P＞0.05)，OM組和ROM組顯著高于C組(P＜0.01)，ROM組顯著低于OM組(P＜0.05)。

表1 各組大鼠腎小管損害評分比較

圖1 4組大鼠腎組織病理(HE，×400)

2.1.2 電鏡觀察(圖2)C組大鼠腎小球基底膜均勻，無增厚，系膜區(qū)不擴(kuò)大，系膜細(xì)胞無明顯增多，上皮足突排列整齊，結(jié)構(gòu)正常。M組大鼠基底膜偶見輕微增厚，系膜區(qū)不擴(kuò)大，系膜細(xì)胞不增多，濾過膜結(jié)構(gòu)正常，上皮足突無融合。OM組大鼠部分基底膜呈不規(guī)則節(jié)段性增厚，系膜基質(zhì)明顯增多，系膜細(xì)胞增生，上皮細(xì)胞足突廣泛融合。ROM組大鼠仍有較輕系膜區(qū)擴(kuò)大和基底膜呈不規(guī)則節(jié)段性增厚，上皮細(xì)胞足突融合不明顯，病變程度明顯減輕。

圖2 4組大鼠腎組織超微結(jié)構(gòu)的影響(×8 000)

2.2 血尿素氮和血清肌酐

表2顯示:C組血清尿素氮和肌酐水平與M組比較無顯著性差異(P＞0.05)。ROM組和OM組顯著高于C組(P＜0.01);ROM組顯著低于OM組(P＜0.05)。

表2 各組大鼠血尿素氮和血清肌酐水平比較

2.3 血清 IL－1β、IL－6、TNF－α、IL－18蛋白表達(dá)

表3顯示:血清 IL－1β、L－6、TNF－α、IL－18蛋白水平，均為C組與M組無顯著性差異(P＞0.05)。ROM組、OM組(P＜0.01)高于C組;ROM組(P＜0.05)低于OM組。

表3 各組大鼠血清IL－1β、IL－6、TNF－α、IL－18蛋白表達(dá)比較

2.4 腎組織IL－1β、IL－6、TNF－α、IL－18蛋白水平

2.4.1 IL－1β蛋白水平 表4顯示:C組和M組大鼠腎臟組織IL－1β水平僅輕度表達(dá)，且兩組比較無顯著性差異(P＞0.05)。OM組陽性表達(dá)較強(qiáng)，ROM組表達(dá)減輕，兩組比較有顯著性差異(P＜0.05)。ROM組、OM組與C組比較有顯著性差異(P＜0.01)。

表4 各組腎組織IL－1β蛋白水平比較

2.4.2 IL－6蛋白水平 表5顯示:C組和M組大鼠腎臟組織IL－6蛋白水平僅輕度表達(dá)且無顯著性差異(P＞0.05)。OM組陽性表達(dá)較強(qiáng)，ROM組表達(dá)減輕，兩組比較具有顯著性差異(P＜0.05)。ROM組、OM組和C組比較有顯著性差異(P＜0.01，P＜0.05)。

表5 各組腎組織IL－6蛋白水平比較

2.4.3 TNF－α蛋白水平 表6顯示:C組和M組大鼠腎臟組織TNF－α蛋白水平僅輕度表達(dá)且無顯著性差異(P＞0.05)。OM組陽性表達(dá)較強(qiáng)，ROM組表達(dá)減輕，兩組比較有顯著性差異(P＜0.05)。ROM組與OM組和C組比較有顯著性差異(P＜0.05)。

表6 各組腎組織TNF－α蛋白水平比較

2.4.4 IL－18蛋白水平 表7顯示:C組和M組大鼠腎臟組織IL－18蛋白水平僅輕度表達(dá)且無顯著性差異(P＞0.05)。OM組陽性表達(dá)較強(qiáng)，ROM組表達(dá)減輕，兩組比較具有顯著性差異(P＜0.05)。ROM組與OM組和C組比較具有顯著性差異(P＜0.05)。

表7 各組腎組織IL－18蛋白水平比較

2.5 腎組織IL－1β mRNA、IL－6 mRNA、TNF－α mRNA、IL－18 mRNA相對表達(dá)量

表8顯示:C組腎臟組織 IL－1β mRNA、L－6 mRNA、TNF－α mRNA、IL－18 mRNA表達(dá)水平與M組比較均無顯著性差異(P＞0.05)，ROM組和OM組顯著高于C組(P＜0.01)，ROM組顯著低于OM組(P＜0.05)。

表8 各組腎臟組織IL－1β mRNA、IL－6 mRNA、TNF－α mRNA、IL－18 mRNA相對表達(dá)量比較

3 討論

紅景天(Rhodiola)是景天科(Crassulaceae)紅景天屬(Rhodiola.L)多年生草本或亞灌木植物，生長在海拔800～2 500m高寒無污染地帶?！侗静菥V目》記載“紅景天，本經(jīng)上品，祛邪惡氣，補(bǔ)諸不足”，是“已知補(bǔ)益藥中所罕見”。由于生長環(huán)境惡劣，使其從遺傳上具備了特殊的適應(yīng)性物質(zhì)，與人參、刺五加、絞股藍(lán)并稱為植物性滋補(bǔ)強(qiáng)壯劑，具有適應(yīng)原樣(Adoptogen)作用?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，紅景天具有顯著的抗衰老、抗缺氧、抗不良刺激、抗病毒及腫瘤、抗疲勞和對機(jī)體雙向調(diào)節(jié)等藥理機(jī)制［6］。缺血再灌注損傷是一個(gè)十分復(fù)雜而又普遍存在的過程。腎臟是高灌注器官，對缺血再灌注十分敏感，當(dāng)缺血持續(xù)一定時(shí)間再重新恢復(fù)血流灌注后，有時(shí)不僅不能使組織結(jié)構(gòu)和功能恢復(fù)，反而加重腎臟功能障礙和結(jié)構(gòu)損傷，這被稱為腎臟缺血再灌注損傷［5］。機(jī)體在穩(wěn)定狀態(tài)下，腎血流量通過自身調(diào)節(jié)機(jī)制維持相對恒定。劇烈運(yùn)動時(shí)，腎血流在神經(jīng)和體液因素的影響下發(fā)生改變。由于血流量重新分配，肌肉血流量增多，腎血流量急劇下降，并伴隨運(yùn)動持續(xù)和強(qiáng)度遞增更加明顯。這種腎臟不完全缺血狀態(tài)形成運(yùn)動性腎缺血。運(yùn)動停止后，腎血供恢復(fù)。運(yùn)動及恢復(fù)期腎血流量兩個(gè)時(shí)相的改變導(dǎo)致運(yùn)動性腎缺血后再灌注［2］。近年來，隨著對細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)認(rèn)識的迅速提高，有關(guān)器官缺血再灌注(I/R)時(shí)細(xì)胞因子的作用日益受到重視。腫瘤壞死因子 α(tumor necrosis factorα，TNF－ α)、白細(xì)胞介素－1β (interleukin－1β，IL－1β)，IL－6和 IL－18等在腎缺血再灌注損傷過程中起重要作用。已有研究表明腎缺血時(shí)，腎組織局部可產(chǎn)生多種炎癥介質(zhì)，其中包括TNF－α。TNF－α是創(chuàng)傷或感染后機(jī)體最早產(chǎn)生的多功能細(xì)胞因子之一，它可刺激單核巨噬細(xì)胞合成和分泌IL－18，IL－1等炎癥介質(zhì)，并能協(xié)同擴(kuò)大其生物學(xué)效應(yīng)。TNF－α可通過增強(qiáng)中性粒細(xì)胞(PMN)上CD11/CD18的表達(dá)，誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞選擇素的表達(dá)，增強(qiáng)缺血時(shí)PMN與血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)的載附，促進(jìn)PMN的激活、外滲與浸潤，導(dǎo)致組織的損傷。還可促進(jìn)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和腎小管上皮細(xì)胞大量產(chǎn)生IL－18。α不僅可介導(dǎo)中性粒細(xì)胞的聚集和激活，而且還增強(qiáng)PMN表面CD11/CD18(MCA－1)分子的結(jié)合性，增強(qiáng)與VEC的載附和遷移，使大量PMN在腎組織內(nèi)聚集和浸潤，加劇腎缺血再灌注損傷。IL－6作為一個(gè)重要的急性期反應(yīng)因子，在創(chuàng)傷、炎癥等病理情況下多表現(xiàn)為增加。TNF－a可以刺激IL－6的產(chǎn)生，二者又往往協(xié)同刺激急性期反應(yīng)［7］。IL－1β是一種在炎癥反應(yīng)中最早出現(xiàn)的起著前炎癥因子作用的反應(yīng)強(qiáng)烈的細(xì)胞因子。大量的研究表明，缺血再灌注性損傷早期產(chǎn)生的粘附因子和細(xì)胞因子是構(gòu)成缺血性損傷向炎癥性損傷轉(zhuǎn)變的基礎(chǔ)。目前已證明IL－1β在各種缺血再灌注損傷中起著重要的作用［8］。IL－18是炎細(xì)胞因子和IFN－γ誘生因子，主要由活化的單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生。正常僅腎臟有微量的IL－18表達(dá)。肌酐和尿素氮分別是肌肉和蛋白質(zhì)的分解代謝產(chǎn)物，主要經(jīng)血循環(huán)經(jīng)腎臟排除體外。血肌酐和尿素氮濃度取決于腎小球?yàn)V過能力，當(dāng)腎實(shí)質(zhì)受到損傷，腎小球?yàn)V過率降到臨界點(diǎn)后，二者濃度明顯上升。運(yùn)動訓(xùn)練導(dǎo)致大鼠腎缺血再灌注損傷時(shí)，血清IL－1β、TNF－α、IL－6、IL－18水平可作為反映運(yùn)動性腎缺血再灌注損傷嚴(yán)重程度的指標(biāo)，且與肌酐和尿素氮成正相關(guān)［4］。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，8周的過度訓(xùn)練通過顯著提高腎臟組織的IL－1β mRNA、TNF－α mRNA、IL－6 mRNA、IL－18 mRNA 表達(dá)，進(jìn)而使得過度訓(xùn)練大鼠血清和腎臟組織IL－1β、TNF－α、IL－6、IL－18蛋白表達(dá)上調(diào)，這些細(xì)胞因子明顯地促進(jìn)了腎臟組織的炎性作用，導(dǎo)致了過度訓(xùn)練大鼠腎組織超微結(jié)構(gòu)嚴(yán)重破壞、組織發(fā)生明顯的病理學(xué)改變，腎臟功能受到嚴(yán)重?fù)p傷［9］;過度訓(xùn)練組大鼠血清尿素氮和肌酐水平顯著升高，也證實(shí)了過度訓(xùn)練組大鼠腎臟功能的降低［10］。一般訓(xùn)練組大鼠腎組織IL－1β mRNA、TNF－α mRNA、IL－6 mRNA、IL－18 mRNA表達(dá)與對照組比較變化不大，其血清和腎組織IL－1β、TNF－α、IL－6、IL－18蛋白表達(dá)同樣變化不大，表明一般訓(xùn)練沒有引起這些致炎性細(xì)胞因子在基因水平和蛋白水平的變化，并且在腎臟組織的超微結(jié)構(gòu)和病理學(xué)水平同樣沒有引起明顯的改變，腎臟功能正常。紅景天+過度訓(xùn)練組大鼠腎臟組織IL－1β mRNA、TNF－α mRNA、IL－6 mRNA、IL－18 mRNA表達(dá)與過度訓(xùn)練組比較顯著降低，血清和腎組織IL－1β、TNF－α、IL－6、IL－18蛋白表達(dá)顯著下調(diào)，血尿素氮和肌酐水平顯著降低，表明紅景天補(bǔ)充通過抑制腎臟組織這些炎性細(xì)胞因子的基因表達(dá)，進(jìn)而降低這些炎性細(xì)胞因子在腎臟組織和血清中的蛋白水平的表達(dá)，進(jìn)而從基因到蛋白質(zhì)水平抑制由于過度訓(xùn)練對腎臟缺血再灌注誘導(dǎo)的腎臟組織炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，減緩了過度訓(xùn)練對腎臟缺血再灌注的損傷影響，有效地減輕腎功能障礙、腎臟組織超微結(jié)構(gòu)破壞程度及組織病理學(xué)改變。其機(jī)制可能為:一是通過提高腎缺血再灌注損傷組織中超氧化物歧化酶(SOD)活性，維持腎臟組織細(xì)胞膜的完整性與穩(wěn)定性，從而阻止炎性細(xì)胞因子的過度生成。目前已知氧自由基介導(dǎo)的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)是腎缺血再灌注損傷的重要環(huán)節(jié)。SOD具有清除超氧陰離子自由基，保護(hù)細(xì)胞免受損傷的作用。①紅景天的主要成分紅景天苷和苷元酪醇，都具有酚羥基。酚羥基作為清除自由基的主要功能基團(tuán)，可通過清除體內(nèi)過量生成的自由基對機(jī)體細(xì)胞的損傷，激活抗老化酶(SOD)的活性，降低脂質(zhì)過氧化物(LPO)的濃度，抑制脂褐素在組織細(xì)胞中的堆積［11］。紅景天中含有的多元酚類化合物、黃酮類化合物和超氧化歧化酶等也具有抗氧化作用，可以提高大鼠運(yùn)動時(shí)自由基的消除;②紅景天多糖自動氧化，產(chǎn)生新的有機(jī)自由基，使多糖本身產(chǎn)生自由基與它清除的自由基達(dá)到或超過平衡，從而提高大鼠運(yùn)動時(shí)自由基的消除。③紅景天內(nèi)含Cu－Zn－SOD與Mn－SOD，是重要的超氧自由基清除劑，直接提供并增加SOD水平［12］。二是免疫雙向調(diào)節(jié)作用，即紅景天能夠維持體內(nèi)免疫系統(tǒng)處于平衡狀態(tài)，既能提高機(jī)體免疫功能，又能防止免疫系統(tǒng)的矯枉過正，從而阻止炎性細(xì)胞因子的過度生成［13］。三是轉(zhuǎn)化生長因子－β1(TGF－β1)可以促進(jìn)腎臟細(xì)胞肥大，增加腎臟細(xì)胞外基質(zhì)的產(chǎn)生，減少腎臟細(xì)胞外基質(zhì)的降解以及刺激合成腎臟細(xì)胞外基質(zhì)受體、觸發(fā)細(xì)胞與細(xì)胞、細(xì)胞與外基質(zhì)的相互作用。腎臟在缺血再灌注時(shí)，TGF－β1表達(dá)增加，從而造成腎臟細(xì)胞外基質(zhì)增加，導(dǎo)致缺血再灌注腎臟損害。紅景天可以抑制腎皮質(zhì)TGF－β1的過度表達(dá)，因此有利于維持腎臟細(xì)胞外基質(zhì)的正常代謝，保護(hù)了腎臟功能和結(jié)構(gòu)［14］。四是紅景天能增加CD4+T細(xì)胞，而CD4+T細(xì)胞能分泌IFN，紅景天可通過促進(jìn)IFN活性，減少循環(huán)免疫復(fù)合物形成、TNF－α和IL－6水平降低，從而減輕腎臟缺血再灌注免疫炎性損害和改善腎功能［15］。五是紅景天可以促進(jìn)抗凋亡基因Bcl－2表達(dá)，抑制促凋亡基因Bax表達(dá)，使Bax/Bcl－2表達(dá)趨向平衡，從而抑制 Caspase3的激活［16］。六是巨噬細(xì)胞能合成分泌TNF、白介素等多種細(xì)胞因子。紅景天的主要成分紅景天苷能抑制巨噬細(xì)胞釋放IL－1、IL－6與TNF，從而減輕腎臟缺血再灌注免疫炎性損害，保護(hù)了腎臟功能和結(jié)構(gòu)［18］。但實(shí)驗(yàn)結(jié)果也表明紅景天+過度訓(xùn)練組血尿素氮、血清肌酐、蛋白表達(dá)和基因表達(dá)與對照組比較有顯著性差異，提示紅景天對大鼠運(yùn)動性腎缺血再灌注損傷有保護(hù)作用，但仍未達(dá)到無損傷程度。

4 結(jié)論

紅景天明顯減輕運(yùn)動性腎缺血再灌注引起的腎功能障礙和腎臟組織超微結(jié)構(gòu)破壞程度及組織病理學(xué)改變，通過抑制炎性細(xì)胞因子 IL－1β、TNF－α、IL－6、IL－18表達(dá)，提高機(jī)體免疫和耐受各種應(yīng)激刺激能力，減輕過度訓(xùn)練導(dǎo)致的運(yùn)動性缺血再灌注對腎臟的損害。

［1］ Barclar WF.Review of Medical Physiology［M］.California:lange Medical Publication，1995:577－580.

［2］ Heifets M，Davis T A，Tegtmeyer E，et al.Exercise training ameliorates progressive renal disease in rats with subtotal nephrectomy［J］.Kidney Int，1987，32(6):815－ 820.

［3］ Snoeijs MG，van Heurn LW，Buurman WA.Biological modulation of renal ischemia－ reperfusion injury［J］.Curr Opin Organ Transplant，2010，15(2):190－199.

［4］ 郭 林.大負(fù)荷訓(xùn)練導(dǎo)致大鼠腎組織微細(xì)結(jié)構(gòu)變化和分子調(diào)控機(jī)理的探討［D］.北京:北京體育大學(xué)，2005:68－79.

［5］ Paller MS，Hoidal JR，F(xiàn)erris TF.Oxygen free radicals in ischemic acute renal failure in the rat［J］.J Clin Invest，1984，74(4):1156－1164.

［6］ XU F，CHEN X，HAN LL，et al.Study on Mechanism of Anti－ fatigue Rhodiola［J］.Food Science，2004，25(10):366－ 370.

［7］ 劉 鳳，石增立，于小玲，等.腎缺血再灌注損傷時(shí)血清及腎組織中促炎癥細(xì)胞因子的變化與意義)［J］.中國臨床醫(yī)學(xué)，2005，12(1):174－176.

［8］ 馮振偉，江黎明，陳孝文，等.IL－13對大鼠急性腎缺血再灌注時(shí)IL－1β表達(dá)的影響［J］.中國病理生理學(xué)雜志，2003，19(3):930－934.

［9］ 孫 星.血清轉(zhuǎn)化生長因子－β1在腎缺血再灌注損傷患者中的表達(dá)規(guī)律及臨床意義)［M］.大連:大連醫(yī)科大學(xué)，2008:30.

［10］ Frangogiannis N G，Mendoza L H，Lindsey ML，et al.IL－10 is induced in the reperfused myocardium and may modulate the reaction to injury［J］.J Immunol，2000，165(5):2798－2808.

［11］ ZHANG Y，GAO Y，F(xiàn)U R ，et al.Study on the Antioxidant Activity of the Chinese Herb Rhodiola Sachalinensis A［J］.Food Science，2004，25(10):315－318.

［12］ ZHANG S M.Study on the Extraction of Polysaccharide from Rhodiola crenulata by Alkali Method and Its Antioxidation［J］.Journal of Anhui Agri.Sci，2008，36(18):7741－ 7742.

［13］ JIANG H Y.Protect Effects of Salidroside on renal Ischemia－Reperfusion Injury in Rat［M］.Dalian:Dalian Medical University，MSc，2005.

［14］ 李 萍，張 艷，黃驍燕.圣地紅景天對糖尿病大鼠尿微白蛋白排泄率及腎臟TGF－β1表達(dá)的影響［J］.中國中西醫(yī)結(jié)合腎病雜志，2008，9(10):871－874.

［15］ 朱云鴻，姚文虎，魏洪霞.Salidroside HIV－infected peripheral blood CD4+T cell apoptosis(紅景天甙對HIV感染者外周血CD4+T細(xì)胞凋亡的影響)［G］.中華中醫(yī)藥學(xué)會防治艾滋病分會第八次年會論文集，2011:279－282.

［16］ 楊發(fā)明，董聯(lián)玲，曹 娟，等.紅景天對血管性癡呆大鼠行為學(xué)及海馬CA1區(qū)Bcl－2及Bax表達(dá)的影響)［J］.中國中醫(yī)藥信息雜志，2008，15(6):39－41.

［17］ 葉莎莎，曾耀英，尹樂樂.紅景天苷對小鼠腹腔巨噬細(xì)胞體外增殖、凋亡、吞噬、ROS和NO產(chǎn)生的影響［J］.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2011，27(3):239－241.