周 艷 (長(zhǎng)江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)部，湖北 荊州434020)

極差法比對(duì)和EP9-A2指南在不同儀器系統(tǒng)間可比性的聯(lián)合應(yīng)用

周 艷 (長(zhǎng)江大學(xué)荊州臨床醫(yī)學(xué)院 荊州市中心醫(yī)院檢驗(yàn)部，湖北 荊州434020)

目的：探討不同儀器系統(tǒng)間檢驗(yàn)結(jié)果的可比性，為確保檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性提供科學(xué)依據(jù)。方法：對(duì)檢驗(yàn)科生化室內(nèi)所有全自動(dòng)生化分析儀的鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)、鈣(Ca)等生化檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行極差法比對(duì)，對(duì)總膽紅素(TB)生化檢驗(yàn)結(jié)果運(yùn)用EP9-A2文件規(guī)定方法——用患者樣本進(jìn)行方法比對(duì)及偏倚評(píng)估。結(jié)果：2種方法均顯示在不同比對(duì)儀器系統(tǒng)間的檢驗(yàn)結(jié)果具有可比性。結(jié)論：2種比對(duì)方法具有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，極差法比對(duì)操作簡(jiǎn)單，樣本準(zhǔn)備個(gè)數(shù)少，可運(yùn)用于最多10臺(tái)儀器的檢驗(yàn)結(jié)果間的可比性驗(yàn)證。但是要求苛刻，室內(nèi)質(zhì)控物同一批號(hào)至少應(yīng)使用6個(gè)月以上，不同儀器系統(tǒng)精密度(CV)的比值應(yīng)小于2，否則不適用?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)也不易確定；EP9-A2比對(duì)方法可隨時(shí)進(jìn)行，可接受標(biāo)準(zhǔn)參照美國(guó)臨床檢驗(yàn)修正法規(guī)CLIA＇88的允許誤差標(biāo)準(zhǔn)，但操作復(fù)雜，計(jì)算煩瑣，樣本收集多，對(duì)于儀器較多的科室成本也高。臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自身情況選擇合適的方法。

極差法； 比對(duì)； EP9-A2

如何判斷不同檢測(cè)系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果的可比性，以及評(píng)估不同檢測(cè)系統(tǒng)結(jié)果的偏差，是目前檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)界關(guān)注和討論的熱點(diǎn)。本文使用極差法比對(duì)以及按照美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)(NCCLS)EP9-A2文件的要求[1],聯(lián)合應(yīng)用對(duì)不同檢測(cè)系統(tǒng)測(cè)定的多個(gè)生化指標(biāo)進(jìn)行比對(duì)分析和偏倚評(píng)估，驗(yàn)證不同檢測(cè)系統(tǒng)檢驗(yàn)結(jié)果的可比性。

1 材料與方法

1.1儀器及試劑

參加比對(duì)系統(tǒng)為4臺(tái)美國(guó)BECKMAN COULTER公司全自動(dòng)生化分析儀，型號(hào)為DXC800及LX20，各自有2臺(tái)，分別編號(hào)為DXC800-1，DXC800-2，LX20A及LX20B。其光路、傳輸系統(tǒng)、清洗、加樣機(jī)構(gòu)、攪拌器均符合要求。使用四川邁克公司試劑及BECKMAN公司原裝試劑。

1.2樣本

樣本為2個(gè)水平的混合血清，滿足所有檢測(cè)分析物穩(wěn)定性要求；沒(méi)有包含干擾被比較檢測(cè)方法的物質(zhì)；有足夠的檢測(cè)量；具有估計(jì)值在計(jì)算的試驗(yàn)樣本靶值的20%之內(nèi)[2]。40份不同總膽紅素(TB)濃度的病人新鮮血清，覆蓋所有醫(yī)學(xué)決定水平。

1.3質(zhì)控品

所有全自動(dòng)系列化分析儀器系統(tǒng)均使用BIO-RAD質(zhì)控品，批號(hào)為：201201，201202。運(yùn)用Westgard多規(guī)則質(zhì)控方法判定所有檢測(cè)項(xiàng)目。

1.4方法

1.4.1 極差法 對(duì)鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)、鈣(Ca)等生化檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行極差法比對(duì)。

2)樣本選擇。使用混合樣本，量應(yīng)足夠。估計(jì)值在計(jì)算的試驗(yàn)樣本靶值的20%之內(nèi)。

3)選擇可應(yīng)用于比對(duì)性檢驗(yàn)可接受標(biāo)準(zhǔn)的適當(dāng)水平。確定的推薦的總誤差或偏倚限，設(shè)定可比性檢驗(yàn)的臨界差值。

4)確定檢測(cè)重復(fù)的次數(shù)。使用合成CV，確定可比性檢驗(yàn)大約的分析物濃度，從極差檢驗(yàn)臨界差值(%)表確定每臺(tái)儀器執(zhí)行重復(fù)分析的次數(shù)。

5)執(zhí)行比對(duì)。計(jì)算極差為最完全不同測(cè)量系統(tǒng)均值的差值除以測(cè)量系統(tǒng)均值的均值，當(dāng)作重復(fù)測(cè)量時(shí)：[(測(cè)量系統(tǒng)最高的均值-測(cè)量系統(tǒng)最低的均值)/所有測(cè)量系統(tǒng)均值的總均]×100%。當(dāng)沒(méi)有重復(fù)測(cè)量時(shí)：[(測(cè)量系統(tǒng)的最高值-測(cè)量系統(tǒng)的最低值)/所有測(cè)量系統(tǒng)的均值]×100%。將計(jì)算的極差與確定的臨界差值進(jìn)行比較，如果計(jì)算的極差小于或等于臨界差值，可得出在評(píng)價(jià)分析物水平上所有測(cè)量系統(tǒng)執(zhí)行具有可比性的結(jié)論。如果計(jì)算的極差大于臨界差值，得出具有最完全不同的均值的測(cè)量系統(tǒng)(或單個(gè)值)執(zhí)行顯著地不同于其他的結(jié)論。

1.4.2 EP9-A2比對(duì)

1)樣本檢測(cè)。每天測(cè)定8個(gè)樣本，每份樣本都用在不同儀器系統(tǒng)，均進(jìn)行雙份測(cè)定總膽紅素(TB)，至少連續(xù)測(cè)定5d，共40份標(biāo)本。測(cè)定時(shí)先對(duì)標(biāo)本排序，再按1至8的順序測(cè)定第1次，8至1的順序測(cè)定第2次，收集數(shù)據(jù)。

2)判斷離群點(diǎn)。Yi1-Yi2> 4×DY；Xi1-Xi2> 4×DX；Yi-Xi>4×E，視為離群點(diǎn)(D為方差，E為期望)。

3)繪圖。Yi對(duì)Xi的均值散點(diǎn)圖，Yi代表參考儀器樣本號(hào)，Xi代表比對(duì)儀器樣本號(hào)。

4)線性回歸。計(jì)算線性方程Y=bX+a及相關(guān)系數(shù)r。一般情況下，若r≥0.975或r2≥0.95，則認(rèn)為X的取值范圍合適，數(shù)據(jù)滿足要求。依據(jù)上述線性方程，可計(jì)算2種方法間的預(yù)期偏差(Bc)及置信區(qū)間范圍。

5)判斷依據(jù)。以美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn)室修正法規(guī)(ClIA′88)對(duì)室間質(zhì)評(píng)容許誤差(TEA)的1/2為判斷依據(jù)——可接受誤差,如下：①可接受誤差落在Bc 95%可信區(qū)間范圍內(nèi)，表示兩系統(tǒng)的偏倚可以接受。②可接受誤差大于Bc95%可信區(qū)間的上限，表示有97.5%的概率兩系統(tǒng)得出的結(jié)果具有一致性，偏倚可以接受。③可接受誤差小于Bc95%可信區(qū)間的下限，表示有97.5%的概率兩系統(tǒng)得出的結(jié)果不具一致性，偏倚不可接受。

2 結(jié) 果

2.1極差法

鉀(K)、鈉(Na)、氯(Cl)、鈣(Ca)這4個(gè)項(xiàng)目在4臺(tái)檢測(cè)系統(tǒng)的比對(duì)結(jié)果：每個(gè)項(xiàng)目選用兩個(gè)濃度水平的樣本，臨界差值均采用1/3 CLIA′88允許總誤差，所有項(xiàng)目的極差均小于臨界差值，即所有生化項(xiàng)目在每臺(tái)儀器上具有可比性。見(jiàn)表1。

表1 極差檢驗(yàn)可比性分析

2.2EP9-A2比對(duì)

1)TB在4臺(tái)儀器系統(tǒng)間的均值散點(diǎn)見(jiàn)圖1至圖3。以DXC800-2儀器系統(tǒng)為參考儀器系統(tǒng)，分別以DXC800-1、LX20A、LX20B儀器系統(tǒng)為比對(duì)儀器系統(tǒng)。r2均大于0.95，數(shù)據(jù)滿足要求。

圖1 DXC800-1比對(duì)儀器與DXC800-2參考儀器均值散點(diǎn)圖 圖2 LX20A比對(duì)儀器與DXC800-2參考儀器均值散點(diǎn)圖

圖3 LX20B比對(duì)儀器與DXC800-2參考儀器均值散點(diǎn)圖

2)TB在4臺(tái)儀器系統(tǒng)間的95%置信區(qū)間見(jiàn)表2。以DXC800-2儀器系統(tǒng)為參考儀器系統(tǒng)，分別以DXC800-1、LX20A、LX20B儀器系統(tǒng)為比對(duì)儀器系統(tǒng)。Xc分別代表3個(gè)濃度的醫(yī)學(xué)決定水平，可接受誤差均落在Bc 95%可信區(qū)間范圍內(nèi)，表示三對(duì)系統(tǒng)間的偏倚可以接受。

表2 TB在4臺(tái)儀器系統(tǒng)間的95%可信區(qū)間

3 討 論

隨著臨床生化檢驗(yàn)工作的日益增加，一個(gè)生化室往往需要多臺(tái)自動(dòng)生化分析儀才能保證檢驗(yàn)結(jié)果按時(shí)發(fā)出。但由于每臺(tái)儀器系統(tǒng)的儀器及試劑的來(lái)源不同，性能不一，會(huì)造成對(duì)同一檢測(cè)項(xiàng)目的檢測(cè)結(jié)果有不同差異。這種同一實(shí)驗(yàn)室不同儀器間所存在的差異，經(jīng)常被人們所忽略，從而導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果的不確定性，會(huì)給臨床帶來(lái)困擾[3]。如何評(píng)估此差異是否滿足臨床需要，有很多文獻(xiàn)都曾探討過(guò)，目前比較認(rèn)可的2種方法即極差法比對(duì)和EP9-A2文件規(guī)定方法——用患者樣本進(jìn)行方法比對(duì)及偏倚評(píng)估。對(duì)不同檢測(cè)系統(tǒng)進(jìn)行同樣生化指標(biāo)結(jié)果比對(duì),可以為實(shí)現(xiàn)檢測(cè)結(jié)果的不同醫(yī)院互認(rèn)提供可行依據(jù)[4]。2種比對(duì)方法具有各自的優(yōu)缺點(diǎn)，極差法比對(duì)操作簡(jiǎn)單，樣本準(zhǔn)備個(gè)數(shù)少，可運(yùn)用于最多10臺(tái)儀器的檢驗(yàn)結(jié)果間的可比性驗(yàn)證。但是要求苛刻，室內(nèi)質(zhì)控物同一批號(hào)至少應(yīng)使用6個(gè)月以上，不同儀器系統(tǒng)精密度(CV)的比值應(yīng)小于2，否則不適用?？山邮軜?biāo)準(zhǔn)也不易確定；EP9-A2比對(duì)方法可隨時(shí)進(jìn)行，可接受標(biāo)準(zhǔn)參照CLIA＇88的允許誤差標(biāo)準(zhǔn)，但操作復(fù)雜，計(jì)算煩瑣，樣本收集多，對(duì)于儀器較多的科室成本也高。臨床實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)自身情況選擇合適的方法。

[1]National Committee for Clinical Laboratory Standards.Method comparison and bias estimation using patient samples[S].Approved Guideline,2nd ed,EP9-A2,2002.

[2] 王治國(guó). 臨床檢驗(yàn)方法確認(rèn)與性能驗(yàn)證[M].北京:人民衛(wèi)生出版社, 2009:333.

[3] 李莉，陳保錦，譚榜云，等.兩臺(tái)全自動(dòng)生化分析儀部分項(xiàng)目檢測(cè)定結(jié)果比對(duì)和偏差評(píng)估[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011, 32(12):1356-1358.

[4] 桑卓琦, 王丹, 郭欣.不同檢測(cè)系統(tǒng)生化指標(biāo)結(jié)果的對(duì)比研究[J].中國(guó)美容醫(yī)學(xué)雜志,2011,20(3)：177.

2013-04-24

周艷(1973-)，女，主管技師，主要從事臨床生化檢驗(yàn)工作。

R446.1

A

1673-1409(2013)24-0087-03

[編輯] 何 勇