廖秀芳 林宇靜 曹婉維

CyclinD1、Cdk6在子宮內膜腺癌中的表達與臨床意義

廖秀芳 林宇靜 曹婉維

目的探討CyclinD1、Cdk6在子宮內膜腺癌中的表達與臨床意義。方法應用免疫組織化學，檢測30例正常子宮內膜及30例不典型增生子宮內膜和45例子宮內膜腺癌中的CyclinD1與Cdk 6蛋白的表達情況。結果CyclinD1與Cdk 6在不典型增生子宮內膜和子宮內膜腺癌中的表達率與正常子宮內膜組相比有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，與子宮內膜腺癌的分化程度，Dukes分期及淋巴結轉移呈正相關關系 (P<0.05)。結論CyclinD1與Cdk 6蛋白的過度表達可能在子宮內膜癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤中起重要作用，對判斷子宮內膜腺癌的預后有一定的臨床意義。

子宮內膜腺癌；CyclinD1；Cdk6；免疫組織化學

子宮內膜腺癌起源于子宮內膜腺體的惡性腫瘤，是最常見的女性生殖系統(tǒng)腫瘤之一，其發(fā)病率有逐年升高的趨勢。人體腫瘤是一種細胞周期性疾病，其中細胞周期素D1(cyclinD1)和細胞周期依賴激酶6(cyclindependent kinase 6，Cdk 6)被認為是重要的細胞周期因子。CyclinD1可以和CDK6結合形成CyclinD1/ Cdk 6復合物，作為細胞周期的正向調節(jié)因子，二者表達異常可導致細胞惡性轉化。本研究擬檢測cyclinD1和Cdk 6蛋白在子宮內膜腺癌的表達變化，以探討兩者在子宮內膜腺癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤中的作用。

1 材料與方法

1.1組織標本

選取2009年6月至2012年6月中山大學附屬第五醫(yī)院及遵義五院病理科保存的資料完整的均經手術切除和常規(guī)病理證實的45例子宮內膜腺癌為實驗組，30例正常子宮內膜及30例不典型增生子宮內膜作為對照組。

1.2方法 免疫組織化學染色采用SP法，CyclinD1單抗、Cdk6單抗、SP試劑盒及DAB顯色試劑盒均購武漢博士德公司，以PBS代替一抗作空白對照,以已知的結腸癌作陽性對照。

1.3判斷標準 Cdk6、CyclinD1陽性著色定位于細胞核，為細胞核出現棕黃色顆粒為陽性細胞，兩名病理醫(yī)生隨機抽取20個高倍視野，計數≥500個腫瘤細胞，按陽性細胞所占百分比并參考著色強度分級如下：陰性：陽性細胞數<1O%；陽性：陽性細胞數≥10%。

1.4統(tǒng)計學方法 實驗數據采用χ2檢驗,應用SPSS l3.0軟件包,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

CyclinD1在正常子宮內膜組、不典型增生子宮內膜組、子宮內膜腺癌組中陽性表達率呈逐漸升高的趨勢(依次為10.0%、36.7%、71.1%)，子宮內膜腺癌組與不典型增生子宮內膜組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)子宮內膜腺癌組與正常子宮內膜組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。Cdk6在正常子宮內膜組、不典型增生子宮內膜組、子宮內膜腺癌組中陽性表達率呈逐漸升高的趨勢(依次為6.7%、36.7%、66.7%)，子宮內膜腺癌組與不典型增生子宮內膜組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)子宮內膜腺癌組與正常子宮內膜組相比差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)(見表1)。

CyclinD1、Cdk6陽性表達與子宮內膜腺癌分化程度低，Dukes分期晚及淋巴結轉移顯著相關(P<0.05)。見表2。

表1 cyclinD1和Cdk6蛋白在不同的子宮內膜中的表達情況

表2 CyclinD1、Cdk6的表達與臨床病理學特征的關系

3 討論

腫瘤是一種細胞周期性疾病，細胞增殖周期由不同CyclinD和CDK在G1/ S 期和G2/ M 期兩個關鍵的調節(jié)位點進行自控性調節(jié)，當G1/ S 期和G2/ M 期兩個調節(jié)位失控，有可能導致細胞不斷增殖而導致惡性轉化。CyclinD是一種原癌基因，分為D1、D2、D3，是G1期的主要調控蛋白，CyclinD1合成并與相應的cdk4/6相結合所產生的蛋白激酶活性是G1期所必需的。當CyclinD1過表達會導致G1期縮短。有研究表明，CyclinD1在甲狀腺癌、乳腺癌、肝細胞癌、骨肉瘤等組織中有過表達[1]，提示CyclinD1基因和蛋白的表達異常與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有相關性。cdk6 是G1期的重要調控分子一，它能夠特異性地與周期蛋白D 結合形成復合物。有學者認為，cdk6 對細胞分化的抑制作用[2]。在前列腺癌、骨髓瘤、肝癌、卵巢癌、黑色素瘤、Kaposi肉瘤等腫瘤中有過表達，于江等[3]研究表明，細胞周期正性調控因子CDK6蛋白過表達導致的G1期調控異常涉及了與子宮內膜樣腺癌的發(fā)生、發(fā)展。表明DK6參與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展。有研究表明，CyclinD1、cdk6的異常高表達有可能在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用[4]。

本研究Cdk6、CyclinD1在正常子宮內膜組、不典型增生子宮內膜組、子宮內膜腺癌組中陽性表達率呈逐漸升高的趨勢，且差異有統(tǒng)計學意義，這與正常子宮內膜-內膜不典型增生-子宮內膜腺癌疾病的自然進展演變過程相一致，表明Cdk6、CyclinD1蛋白可能參與子宮內膜由良性演變?yōu)閻盒缘倪^程。Cdk6、CyclinD1陽性表達與子宮內膜癌分化程度，Dukes分期、與淋巴結轉移呈正相關關系，表明Cdk6、CyclinD1的過度表達導致的細胞異常增殖不僅涉及子宮內膜腺癌的起始階段，在使子宮內膜腺癌組織具有侵襲和轉移的能力過程中同樣起著重要的作用，在子宮內膜腺癌前病變和癌組中檢測Cdk6和CyclinD1蛋白，可作為臨床早期診斷和科學評價腫瘤預后、指導臨床治療的指標，可能為子宮內膜腺癌基因治療的研究提供新途徑。

[1] GoodgerNM,GannonJ,HuntT,Mor ganPR. Cellc yclere gulatory proteins: anoverviewwithrelevancetooralcancer. Oral Oncol,1997,33 (2)：61，273.

[2] 朱紅琴.周期蛋白依賴性激酶6與腫瘤和細胞分化.生命的化學,2009,28(1):52-54.

[3] 于江，王炎.子宮內膜樣腺癌中PTEN、CDK6蛋白的表達及臨床意義.華南國防醫(yī)學雜志,2009,23(5):44-46.

[4] 姜可偉,王杉.胃癌組織中細胞周期素D1和細胞周期蛋白質依賴激酶6的表達與預后的關系.中華普通外科雜志,2005,20(12)：800-802.

CyclinD1andCdk6ProteinsExpressioninEndometrioilCarcinomaanditsclinicalsignificancen

LIAOXiu-fang,LINYu-jing,CAOWan-wei.

ThefifthHospitalAffiliatedtoZhongshanUniversity,Guangdong519000,China

ObjectiveTo study the expression of CyclinD1and Cdk6 proteins in endometrioil carcinoma and its clinical significance.MethodsThe expression of CyclinD1and Cdk6 proteins were tested by S-P immunohistochemist ry on tissues of normal endometrium (30 cases),atypical endometrioil hyperplasia (30 cases) and endometrioil carcinoma (45 cases).ResultsBoth the CyclinD1and Cdk6 positive rates in atypical hyperplasia of endometrium and in cancer were significantly higher than that in normal endometrium (P<0.05).And the differentiation of endometrioil carcinoma,Dukes staging and lymph node metastasis are positively related(P<0.05).ConclusionCyclinD1 and Cdk6 protein excessive expression may be in endometrioil cancer occurrence,development,and play an important role in the invasion,to judge the prognosis of endometrioil carcinoma has a certain clinical significance,but also may be as a valuable tumor markers.

Endometrioil cancer； CyclinD1； Cdk6； Immunohitochemistry

519000 珠海市中山大學附屬第五醫(yī)院婦產科(廖秀芳),病理科(林宇靜 曹婉維)