劉春威，萬京梅，玄春艷

（佳木斯大學附屬第一醫(yī)院，黑龍江 佳木斯154003）

過敏反應即I型變態(tài)反應，發(fā)生速度快，可在接觸抗原后數(shù)分鐘內(nèi)出現(xiàn)反應，亦稱速發(fā)型變態(tài)反應。其主要特點：①發(fā)生快，幾秒鐘至幾十分鐘內(nèi)出現(xiàn)癥狀，消退亦快，為可逆性反應；②由IgE抗體所介導；③主要表現(xiàn)為血管擴張、通透性增加及平滑肌收縮；④有明顯個體差異和遺傳背景；⑤過敏反應的免疫學機制復雜，涉及過敏原、IgE抗體[1]、因此明確過敏原是診斷與治療變應性疾病的首要問題，過敏性疾病的診斷流程是從一般檢查到過敏反應學特殊檢查。一般檢查包括病史、體格檢查、實驗室檢查、輔助檢查。特殊檢查包括體內(nèi)試驗、體外試驗。體內(nèi)試驗包括皮膚試驗和激發(fā)試驗，是傳統(tǒng)的診斷方法。所謂體外特異性診斷法是指從受試者體內(nèi)采集血液或其他體液，在實驗室里進行實驗檢測的方法，患者只需提供檢測樣本，其他試驗過程均在患者體外進行。體外特異性診斷的目的是：明確患者是否是I型過敏體質(zhì)或I型變態(tài)反應病，并找出患者的過敏原。本文主要介紹我科室新引進德國Mediwiss公司敏篩定量過敏原檢測系統(tǒng)與傳統(tǒng)的皮試方法對常見過敏原作比較分析。

1 資料與方法

1.1 病例選擇

為我科2012年5～9月210例有較典型的病史及臨床表現(xiàn)的患者，（支氣管哮喘、變應性鼻炎、蕁麻疹、濕疹、過敏性紫癜、食物過敏等）。其中男100例，女110例，年齡7～68歲。

1.2 檢測方法

1.2.1 先進行皮膚皮內(nèi)試驗：消毒皮膚后，1mL注射用26或27號針頭將變應原提取液分別注入皮內(nèi)，注入量為0.01～0.02mL或注入變應原液使形成直徑約2～3mm的皮丘。兩種皮試間距為2.5～5cm，皮試后15～20min看結果，有無風團和紅暈反應。

1.2.2 敏篩過敏原檢測系統(tǒng)檢測：用促凝管靜脈采血2～3mL放置試管架上30min，然后上4000轉(zhuǎn)的離心機進行離心15min。

1）試劑盒恢復到室溫（20～22℃）。2）用蒸餾水以1：25比例稀釋洗脫液。3）用清洗液濕潤硝酸纖維素膜，在檢測板上加入200～250μL的血清標本，在混勻器（120振／分）上室溫孵育45min。4）沖洗，手持反應槽上下翻轉(zhuǎn)讓清洗液充分流過，輕晃增加效果。5）加入250μL抗抗體，在混勻器上室溫孵育45min。6）沖洗（同4）。7）加250μL鏈霉親和素標記物，在混勻器上室溫孵育20min。8）沖洗（同4）。9）加入250μL底物，在混勻器上室溫孵育20min。10）流水沖洗終止底物酶反應。11）完全干燥后，敏篩過敏原檢測儀讀數(shù)。

2 結果

皮試以其中一種過敏原風團直徑≥5mm，紅暈直徑≥10mm即為陽性；敏篩法以結果≥0.35KU／L為陽性。

在檢測的210例過敏性疾病的患者中，皮試陽性186例，陽性率為88.6%，與敏篩法進行對比分析結果見表1。

表1 敏篩定量過敏原檢測與皮膚皮內(nèi)試驗診斷變應性疾病患者的比較

敏篩定量過敏原檢測系統(tǒng)的各項診斷指標較高，與確診標準和皮試的符合程度較好。

3 討論

在本研究中，以陽性病史、癥狀、體征聯(lián)合皮內(nèi)試驗結果作為過敏性疾病診斷的參考標準，將敏篩試驗與皮試進行對比研究發(fā)現(xiàn)，兩種不同方法之間有著一定的符合性，它們之間各有優(yōu)缺點，皮膚試驗是目前常見應用的方法，優(yōu)點是易于操作，15min出結果，臨床相關性較好，而且成本較低，適合對可疑過敏原的檢測，對于藥物過敏，皮膚試驗是首選的快速診斷方法。其缺點是每種過敏原都須做一個點刺，有疼痛感，有些患者尤其是兒童不愿接受。應用組胺受體拮抗藥等藥物后可能掩蓋陽性結果，因此試驗前1周應停用可能抑制皮膚試驗反應的藥物，如腎上腺糖皮質(zhì)激素和抗組胺藥物。

敏篩系統(tǒng)是指采集患者血液進行體外實驗檢測，主要是檢測血清中的特異性IgE（sIgE），特異性IgE是機體專一對某一種特定的變應原發(fā)生反應的抗體，是檢查變態(tài)反應疾病體外試驗最重要的方法。環(huán)境中能引起I型變態(tài)反應的物質(zhì)即過敏原有很多種，每種過敏原都能使對其過敏者體內(nèi)產(chǎn)生過敏原特異性IgE。血清中特異性IgE的水平可反映個體對何種過敏原過敏及過敏的嚴重程度。由于血清特異性IgE水平比血清總IgE水平更低，需要應用敏感性更高的專門儀器設備進行檢測，而我科室引進的敏篩定量過敏原檢測系統(tǒng)可以進行極微量的抗原檢測，靈敏快速，各項診斷指標較高，與確診標準和皮試的符合程度較好。針對患者安全，特異性好，即來即查，無需停藥，且無任何危險性，實驗結果表明敏篩系統(tǒng)與皮膚皮內(nèi)實驗結果相比較，性能良好，具有很好的應用前景，由于所需標本量少，在低IgE水平范圍時檢測性能好，對兒童尤為適用。皮膚試驗是體內(nèi)試驗，屬于生物測定的范疇，若體內(nèi)有致敏的肥大細胞，變應原與細胞膜上的免疫球蛋白IgE結合后，激活肥大細胞釋放血管活性物質(zhì)，使皮膚出現(xiàn)風團和紅斑[2]皮膚試驗的結果判定具有一定的主觀性，與施行者的經(jīng)驗有關，介于陽性和陰性之間的皮膚反應難以判斷為弱陽性還是陰性，某些嚴重過敏者還可能出現(xiàn)強烈過敏反應甚至過敏性休克，具有一定風險，故皮膚試驗應在具備急救復蘇條件的醫(yī)療單位進行。體外試驗屬于免疫化學測定，是對SigE的直接測定。檢測過敏原特異性IgE只需要少量血清即可進行多種過敏原檢查，結果準確，不受患者服用藥物的影響，對患者幾乎沒有皮肉痛苦，患者樂于接受，尤其適合于兒童、有彌漫性皮疹和嚴重過敏反應而藥物治療不能中斷者。因此敏篩系統(tǒng)不受藥物的影響，患者可在進行正常治療的同時接受檢查，敏篩系統(tǒng)作為一種操作簡單的方法，可對眾多變應原進行篩查檢測，消耗成本低，與皮內(nèi)試驗有較好的一致性，特異度高，在過敏性疾病的診斷中，其作為一種較好的臨床血清學特異性IgE半定量篩查試驗，能夠與皮膚皮內(nèi)試驗互為補充，應用于變應原特異性IgE的血清學檢查中。針對脫敏患者，要結合體內(nèi)、體外試驗共同評價、判定。

[1]魏慶宇，黃建林.過敏反應門診手冊[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2009

[2]葉世泰.變態(tài)反應學[M].北京：科學出版社，1998