蔣 莉 陳春華 王永忠
自身免疫性肝?。╝utoimmune liver diseases,ALD)是一組由于機體自身抗體存在而引起以肝組織持續(xù)性損傷為特征的慢性肝病,主要包括自身免疫性肝炎(autoimmune hepatits,AIH)、原發(fā)性膽汁性肝硬化(primary bililary cirrhsis,PBC)原發(fā)性硬化性膽管炎(primary sclgrosing cholangitis,PSC)[1]。自身抗體的檢測對此類疾病的診斷有重要意義。我們在60例肝病患者檢測了自身抗體情況,以探討其臨床診斷價值。
一、研究對象 我院2010年1月~2012年5月診治的PBC患者30例,女性25例,男性5例,年齡52~76歲,平均年齡為60.1歲;AIH患者30例,均為女性,年齡45~76歲,平均年齡為58歲。PBC診斷參考美國肝病協(xié)會2000年制訂的PBC診斷標準[2]。AIH診斷參考國際AIH小組2002年修訂的AIH診斷標準及評分標準[3]。所有患者甲、乙、丙、丁、戊型肝炎病毒血清標志物均陰性。另選20例健康體檢者,男15例,女5例,平均年齡為57歲。
二、方法 采用間接免疫熒光法(IIF)(德國歐蒙醫(yī)學實驗診斷股份公司)檢測ANA基質(zhì),即選用HEP-2細胞,抽取患者空腹外周血,取lOμL血清(1:100稀釋)滴加在抗原基質(zhì)片上,置 25℃孵育 30min,PBS(PH 7.2)洗片,滴加異硫氰酸熒光素標記的抗體30ml,洗片,在熒光顯微鏡下觀察。在血清稀釋度>1:100時,對組織或細胞內(nèi)出現(xiàn)特異性熒光者判為陽性;采用免疫印跡法(德國歐蒙醫(yī)學實驗診斷股份公司)檢測肝抗原自身抗體,如抗線粒體(AMA)-M2亞型抗體、抗sp100抗體、抗gp210抗體、抗肝腎微粒體-1(LKM-I)抗體、抗肝特異性胞質(zhì)1型(LC-1)抗體、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原(SLA/LP)抗體、抗R 0-52抗體。
三、統(tǒng)計學處理 運用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)處理,采用x2檢驗,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
本組在20例健康體檢者檢測自身抗體均陰性。PBC和AIH患者自身抗體檢測情況見表1。在PBC患者未檢測出抗LKM-1抗體,而在AIH其陽性率為10.0%。AMA-M2對PBC診斷的重要性很大。抗g p 210在PBC患者的陽性率也較高。
表1 PBC和AIH患者自身抗體檢測情況
自身免疫性肝病發(fā)病機制與免疫功能異常密切相關(guān),自身抗體的產(chǎn)生在發(fā)病機制中起重要作用。提高AIH和PBC早期診斷水平可使患者得到及時和適當?shù)闹委?,明顯改善其生存質(zhì)量和預(yù)后[4]。每種自身免疫性肝病都具有特征性自身抗體,因此,自身抗體檢測對自身免疫性肝病的診斷、分型及鑒別具有重要意義。肝病相關(guān)自身抗體譜檢測也已逐步成為自身免疫性肝病實驗室診斷的常用指標[5]。在AIH患者,ANA陽性率達到90%,提示高滴度的ANA對于自身免疫性肝病有診斷價值[6]。AMA-M2是一種以線粒體為靶抗原、無種屬和器官特異性的自身抗體,在PBC患者其陽性率高達90%[7]。抗Sp100在PBC患者陽性率為13.3%,在AIH為10.0%,與文獻報道一致[8]??筭p210被認為是PBC的高度特異性抗體,報道其診斷PBC的特異性高達96%~99%。本研究其陽性率為46.1%。本研究表明抗gp210抗體在PBC患者陽性率較高,可以作為診斷PBC的粗篩檢測[9]??垢?胰抗體(抗LP抗體)被許多學者證明為AIH高度特異性自身抗體。目前認為SLP/LP是同一抗原,SLA/LP抗原是分子量為50kd的細胞溶質(zhì)分子,抗SLA/LP抗體可能與AIH的發(fā)病機制有關(guān)[10]??筍LA/LP抗體為公認的少數(shù)AIH高度特異性自身抗體,因而最具診斷價值。
[1]王綺夏,馬雄.自身免疫性肝病自身抗體研究進展.肝臟,2008,13(6):507-510.
[2]Alvare F,Berg PA,Bianchi FB,et al. Ⅰnternational Autoimmnune Hepatitis Group:Report,review of criteria for diagnosis of autoimmune Hepatitis.J Hepatol,1999,31,(5):929.
[3]Heatheote EJ.Management of primary bililary cirrhosis.The American association for the study of liver disease:practice guidelines.Hepatology,2000,31(4):1005-1013.
[4]黃曉玲,徐杰,布海里木耳.自身免疫性肝病42例臨床分析.山東醫(yī)藥,2009,49(50):86.
[5]李永哲.自身抗體檢測技術(shù)臨床推廣應(yīng)用和質(zhì)量保證工作中應(yīng)重視的問題.中華檢驗醫(yī)學雜志,2006,29(9):769-770.
[6]王作梅,李亞明.自身免疫性肝病43例分析.山東醫(yī)藥,2010,50(40):68-69.
[7]Muratori P,Granito A,Pappas G,et al.Autoimmune liver disease 2007.Moi Aspects,2008,29(1-2):96-102.
[8]Milkiewicz P,Buwaneswaran H,Coltescu C,et al.Value of autoantibody analysis of chronic cholestatic liver diseases.Clin Gastroenterol Hepatol,2009,7(12):1355-1360.
[9]O’Brien C,Joshi S,F(xiàn)eld JJ,et al.Long-term follow-up of antimitochdrial antibody-positive autoimmune hepatitis.Hepatology,2008(48):550-556.
[10]Eyraud V,Chazouilleres O,Ballot E,et al.Significance of antibodies to soluble liver antigen/liver pancreas:a large French study.Liver Ⅰnt,2009,29(6):857-864.